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탄저균은 그람양성의 아포형성 간균으로서 사람과 동물에 치사율이 매우 높은 인수공통 감염병인 탄저의 병원균이다. 최근에는 생물학적 무기로서 탄저균이 이용될 가능성이 높아서 탄저균의 신속 정확한 동정이 중요한 문제로 대두되고 있다. 특히 탄저균은 분류학적으로 B. cereus, B. thuringiensis, B. mycoides 와 함께 Bacillus cereus 그룹에 속하여 이들은 서로 형태학적, 유전학적 특성이 매우 유사하여 그 감별 동정이 쉽지 않다. 많은 학자들이 탄저균을 특이항원에 대한 ...

탄저균은 그람양성의 아포형성 간균으로서 사람과 동물에 치사율이 매우 높은 인수공통 감염병인 탄저의 병원균이다. 최근에는 생물학적 무기로서 탄저균이 이용될 가능성이 높아서 탄저균의 신속 정확한 동정이 중요한 문제로 대두되고 있다. 특히 탄저균은 분류학적으로 B. cereus, B. thuringiensis, B. mycoides 와 함께 Bacillus cereus 그룹에 속하여 이들은 서로 형태학적, 유전학적 특성이 매우 유사하여 그 감별 동정이 쉽지 않다. 많은 학자들이 탄저균을 특이항원에 대한 면역혈청을 이용하여 면역학적으로 동정하기 위해 탄저균체 혹은 아포로부터 특이항원을 찾으려고 많은 연구를 했으나 아직 특이성 높은 항원은 현재까지 보고 된 것이 없다. 따라서 본 연구에서는 탄저균을 면역학적 분석으로 신속 정확히 동정할 수 있는 탄저균체 특이 항원을 찾고자 하였다. 탄저균을 1% Triton X100을 처리하여 추출한 조항원에서 웨스턴 블럿 분석에 의하여 탄저 면역 토끼 혈청들에만 반응을 하고 유사 바실러스균주로 면역하여 얻어진 토끼 혈청들에는 반응을 하지 않는 미량의 항원 (약 35 kDa)을한 개 찾았다. 이 항원은 플라즈미드의 존재에 상관없이 사용된 탄저 백신균주에서 모두 추출되므로 염색체상에 존재하는 유전자에 의해 발현되는 것으로 추정되었다. 고형배지를 사용하여 대량 배양된 탄저 백신 사용 균주의 균체로부터 탄저 특이 항원이 FPLC를 이용한 4 단계의 정제과정을 통하여 전기영동상 단일밴드의 높은 순도로 정제되었다. 정제된 탄저 특이 항원은 전기영동상 분자량이 35 kDa 이었다. 웨스턴 블럿 분석에 의하여 정제된 탄저 특이항원은 민감성과 특이성이 매우 높았다. 이 항원을 동물에 면역하여 얻어진 항혈청은 탄저균 11 균주의 균체로부터 추출한 항원들에서만 강력한 반응을 보이는 반면 유사 바실러스 균주 17균주와는 반응이 없었다. 따라서 이 35 kDa 항원에 대한 다클론 항체를 이용한 웨스턴 블럿 법에 의하여 탄저균을 다른 유사 바실러스 균주들로부터 신속하고 정확하게 감별 동정할 수 있었다. 이 항체를 이용한 간접형광형미경에 의한 탄저균의 동정 실험에서는 비협막 탄저균들만이 강하게 염색되었다. 그러나 협막보유균주는 염색이 되지 않았다. 이 결과는 탄저 특이항원이 협막 안쪽에 위치하고 있음을 시사한다. 결론적으로, 이 항체는 탄저균의 신속하고 경제적이고 정확한 동정에 이용될 수 있는 가치가 있을 것으로 시사되었다.

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