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병원성 장내세균 Salmonella enterica serovar Typhimurium의 대수생장기 산 내성 반응 (Acid Tolerance Response, ATR)은 pH 4.5 이하의 산에서 유도되는 작용으로서 Salmonella가 치사 산성 pH 환경에서 오랫동안 생존하는데 관여하는 작용이다. S. typhimurium 의 genome 자료를 바탕으로 yohD라는 597 bp의 ORF를 소유한 유전자를 분리 확인하였으며LF1075(yohDΩlacZYA)는 allelic-exchange 방법과 형질접합을 이용하여 제작하였다. S.typhimurium의 yohD 돌연변이 균주는 산 적응 및 비적응 환경 모두에서 야생형 UK1과 비교하여 치사 pH 환경에서 높은 산 감수성을 보여주었다. 또한, LF1075(yohDΩlacZYA)의 산내성 실험 결과를 보면 앞서 수행되었던 yohD::MudJ와 유사한 결과를 나타내었다. yohD 유전자를 갖고 있는 재조합 플라스미드 pLL4.2를 소유한 LF1089를 대상으로 산 내성도를 평가한 결과 야생형 UK1과 유사한 산 내성도를 보여주었고, 더욱이 yohD가 pGEM-7Zf(+)에 삽입된 재조합 플라스미드 pLL4.3을 소유한 LF1101 균주는 극도의 산 감수성을 보여 주었다. reverse transcription ...

병원성 장내세균 Salmonella enterica serovar Typhimurium의 대수생장기 산 내성 반응 (Acid Tolerance Response, ATR)은 pH 4.5 이하의 산에서 유도되는 작용으로서 Salmonella가 치사 산성 pH 환경에서 오랫동안 생존하는데 관여하는 작용이다. S. typhimurium 의 genome 자료를 바탕으로 yohD라는 597 bp의 ORF를 소유한 유전자를 분리 확인하였으며LF1075(yohDΩlacZYA)는 allelic-exchange 방법과 형질접합을 이용하여 제작하였다. S.typhimurium의 yohD 돌연변이 균주는 산 적응 및 비적응 환경 모두에서 야생형 UK1과 비교하여 치사 pH 환경에서 높은 산 감수성을 보여주었다. 또한, LF1075(yohDΩlacZYA)의 산내성 실험 결과를 보면 앞서 수행되었던 yohD::MudJ와 유사한 결과를 나타내었다. yohD 유전자를 갖고 있는 재조합 플라스미드 pLL4.2를 소유한 LF1089를 대상으로 산 내성도를 평가한 결과 야생형 UK1과 유사한 산 내성도를 보여주었고, 더욱이 yohD가 pGEM-7Zf(+)에 삽입된 재조합 플라스미드 pLL4.3을 소유한 LF1101 균주는 극도의 산 감수성을 보여 주었다. reverse transcription real-time PCR 기법을 사용하여 yohD의 발현을 조사한 결과 yohD는 산성 pH 환경에서 발현되는 RpoS 의존적으로 산내성 유전자로 학인되었다. 또한, yohDΩ lacZYA 의 β-galactosidase assay결과로 yohD의 발현이 알칼리성 조건보다 산성조건에서 약 2배 더 높았다. 그러므로 S. typhimurium의 yohD는 RpoS에 의해 조절되며 산 내성반응 기작에 관여하는 중요한 유전자이다.

Abstract ▼ AI-Helper

The acid tolerance response (ATR) in log phase of the facultative intracellular pathogen, Salmonella enterica serovar Typhimurium is induced by acid exposures below pH 4.5 and protects bacterial cells against more extreme acid environment. Using the technique of conjugation mediated gene transfer an...

The acid tolerance response (ATR) in log phase of the facultative intracellular pathogen, Salmonella enterica serovar Typhimurium is induced by acid exposures below pH 4.5 and protects bacterial cells against more extreme acid environment. Using the technique of conjugation mediated gene transfer and allelic-exchange method LF1075 yohDΩlacZYA was constructed. Based on the S. typhimurium genome data base, yohD revealed that the complete gene was encoded in an open reading frame (ORF) of 597 bp. The yohD mutant of S. typhimurium was extremely sensitive to low pH condition than wild type in unadapted and adapted condition. The ATR pattern of yohDΩlacZYA was showed similar with previous isolate LF452 yohD::MudJ. Furthermore, LF1011 which contains yohD gene in high copy plasmid, pGEM-7Zf (+) is not able to survive in both condition of adapted and unadapted at low pH compare with wild type. Based on the analysis by real-time reverse transcription PCR, we confirmed yohD is an rpoS dependent acid tolerant gene. This result also can be identified in β-galactosidase assay of yohDΩlacZYA. Therefore yohD is a crucial gene for acid tolerance response (ATR) machinery that is controlled by RpoS in S. typhimurium.

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