본 연구는 유산간균 및 유산구균으로 부터 plasmid DNA를 신속하고 간편하게 분리하기 위한 방법에 관한 것이다. Glycine 을 TCM 배지에 0.5\% 첨가했을 때, 그 배지에서 자란 유산균은 세포벽 형성이 상당히 억제되는 것으로 나타났다. 그 결과 mutanolysin 을 처리했을 때 용균효율이 glycine 을 첨가 않고 자란 정상균주 보다 5배나 증가 하였다. Plasmid DNA ...
본 연구는 유산간균 및 유산구균으로 부터 plasmid DNA를 신속하고 간편하게 분리하기 위한 방법에 관한 것이다. Glycine 을 TCM 배지에 0.5\% 첨가했을 때, 그 배지에서 자란 유산균은 세포벽 형성이 상당히 억제되는 것으로 나타났다. 그 결과 mutanolysin 을 처리했을 때 용균효율이 glycine 을 첨가 않고 자란 정상균주 보다 5배나 증가 하였다. Plasmid DNA 분리과정에서, plasmid DNA 분리효율은 mutanolysin 처리 조건에 따라 민감하게 변화되었다. 또한 실험균주에 따라 plasmid DNA 의 효율적인 분리를 위한 그 최적 조건이 조금씩 다르게 나타났다. 즉, 유산간균에서는 mutanolysin을 30 ug/ml에서, $37\,^\circ\!C$, 5-10 분간이였고, 유산구균의 경우는 일반적으로 동일농도에서, $37\,^\circ\!C$, 5분 이하였다. 본 방법을 이용하여, L. casei, L. acidophilus, L. helveticus, S. lactis, S. faecalis, S. faecium 과 S. cremoris 균주로 부터 plasmid DNA 를 신속하고 간편하게 분리할 수 있음이 확인 되었다. 뿐만 아니라, 배양액 ($6 \times 10^8/ml$) 1.5 ml 로 부터 분리된 plasmid DNA로 agarose gel 에서 분명하게 확인이 가능하였다.
본 연구는 유산간균 및 유산구균으로 부터 plasmid DNA를 신속하고 간편하게 분리하기 위한 방법에 관한 것이다. Glycine 을 TCM 배지에 0.5\% 첨가했을 때, 그 배지에서 자란 유산균은 세포벽 형성이 상당히 억제되는 것으로 나타났다. 그 결과 mutanolysin 을 처리했을 때 용균효율이 glycine 을 첨가 않고 자란 정상균주 보다 5배나 증가 하였다. Plasmid DNA 분리과정에서, plasmid DNA 분리효율은 mutanolysin 처리 조건에 따라 민감하게 변화되었다. 또한 실험균주에 따라 plasmid DNA 의 효율적인 분리를 위한 그 최적 조건이 조금씩 다르게 나타났다. 즉, 유산간균에서는 mutanolysin을 30 ug/ml에서, $37\,^\circ\!C$, 5-10 분간이였고, 유산구균의 경우는 일반적으로 동일농도에서, $37\,^\circ\!C$, 5분 이하였다. 본 방법을 이용하여, L. casei, L. acidophilus, L. helveticus, S. lactis, S. faecalis, S. faecium 과 S. cremoris 균주로 부터 plasmid DNA 를 신속하고 간편하게 분리할 수 있음이 확인 되었다. 뿐만 아니라, 배양액 ($6 \times 10^8/ml$) 1.5 ml 로 부터 분리된 plasmid DNA로 agarose gel 에서 분명하게 확인이 가능하였다.
A simple procedure for rapid isolation of plasmid DNA from lactobacillus species and streptococcus species is described. Lactic acid bacteria were cultured in the TCM broth containing 0.5\% glycine and plasmid DNA was isolated from cells treated with mutanolysin by alkaline-detergent lysis method. G...
A simple procedure for rapid isolation of plasmid DNA from lactobacillus species and streptococcus species is described. Lactic acid bacteria were cultured in the TCM broth containing 0.5\% glycine and plasmid DNA was isolated from cells treated with mutanolysin by alkaline-detergent lysis method. Good results for releasing and isolating plasmid DNA from lactobacillus species were obtained by treatment of cells with $30 \mu{g}$ of mutanolysin per ml at $37\,^\circ\!C$ for 5 to 10 min. In the streptococcus species, the optimum conditions were slightly different. The procedure could be used for rapid characterization of plasmid DNA in Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Streptococcus lactis, Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, and Streptococcus cremoris strains. Using this procedure, plasmids isolated from 1.5ml culture could readily be visualized on agarose gel.
A simple procedure for rapid isolation of plasmid DNA from lactobacillus species and streptococcus species is described. Lactic acid bacteria were cultured in the TCM broth containing 0.5\% glycine and plasmid DNA was isolated from cells treated with mutanolysin by alkaline-detergent lysis method. Good results for releasing and isolating plasmid DNA from lactobacillus species were obtained by treatment of cells with $30 \mu{g}$ of mutanolysin per ml at $37\,^\circ\!C$ for 5 to 10 min. In the streptococcus species, the optimum conditions were slightly different. The procedure could be used for rapid characterization of plasmid DNA in Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Streptococcus lactis, Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, and Streptococcus cremoris strains. Using this procedure, plasmids isolated from 1.5ml culture could readily be visualized on agarose gel.
주제어
#Plasmids Genetic vectors Lactobacillus 유산균속 플라스미드 벡터 (유전)
학위논문 정보
저자
Bae, Hyeong-Suk
학위수여기관
한국과학기술원
학위구분
국내석사
학과
생물공학과
발행연도
1986
총페이지
[iii], 43 p.
키워드
Plasmids Genetic vectors Lactobacillus 유산균속 플라스미드 벡터 (유전)
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