피부는 신체의 외부를 둘러싸고 있으며, 물리적, 화학적으로 다양한 외부 환경으로부터 인체를 보호한다. keratinocyte는 표피의 기본 구성 세포이며, 피부 재생에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. keratinocyte의 증식과 이주는 피부재생 및 상처치유에 필수요소이며, collagen 합성 및 상처 회복에 영향을 미친다. keratinocyte는 표피 성장 인자 (Epidermal growth factor, ...
피부는 신체의 외부를 둘러싸고 있으며, 물리적, 화학적으로 다양한 외부 환경으로부터 인체를 보호한다. keratinocyte는 표피의 기본 구성 세포이며, 피부 재생에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. keratinocyte의 증식과 이주는 피부재생 및 상처치유에 필수요소이며, collagen 합성 및 상처 회복에 영향을 미친다. keratinocyte는 표피 성장 인자 (Epidermal growth factor, EGF), 및 천연물에 의하여 자극되어 증식, 이주가 이루어진다. 지난 몇 년 동안 천연물질의 피부재생 및 상처치유에 관련된 연구가 증가하는 추세이다. 천연물질은 기존의약품과 비교하여 독성과 부작용이 적은 것으로 보고되었으며, 따라서, 전통 의학에서 사용되는 식물의 약효에 대한 과학적 검증을 진행 할 필요가 있다. 무궁화는 우리나라의 국화이며, 전 세계적으로 200여 종이 있으며, 한국, 시베리아, 하와이, 북미, 중남미, 인도, 아프리카 등 7지역에 분포하고 있다. 무궁화는 동양의학에서 부위에 따라 질염, 이질, 치질, 구충제, 해열, 습진, 건선에 사용되어 왔으나, 피부재생과 상처치유에 관련된 자료는 미비한 상태이며, keratinocyte를 사용한 연구는 전무한 상태이다. 본 연구는 gas chromatography/mass spectrometry 분석 (GC/MS)을 사용하여 무궁화 앱솔루트의 성분분석을 하였으며, 각질형성세포주인 HaCaT cell을 사용하여 XTT assay, boyden chamber assay, collagen synthesis, sprout out growth assay, western blot을 진행하고 rat tail wound healing 실험을 통하여 무궁화 앱솔루트의 효과를 조사 하였다. 무궁화 앱솔루트에서 palmitic acid (18.94%), linoleic acid (8.57%), stearic acid (5.87%), 9-nonadecene (5.82%), cycloartenol (3.31%), γ-sitosterol (2.22%), lupenyl acetate (1.52%), myristic acid (1.16%), squalene (0.83%), γ-tocopherol (0.81%) 10가지의 성분을 분석하였으며, 무궁화 앱솔루트는 농도 의존적으로 keratinocyte의 증식과 이주를 유도하였으며, 0.1 mg/mL 농도에서 세포증식 (133.05 ± 2.71%), 세포이주 (189.08 ± 4.34%), sprout out growth (458.0 ± 6.38%) 모두 대조군으로 사용된 rhEGF와 유사한 효과를 나타내었다. 또한 Erk 1/2 (334.12 ± 3.31%)와 Akt (403.16 ± 3.66%)의 인산화 및 type I collagen (143.61 ± 1.78%), type IV collagen (150.43 ± 1.82%) 합성은 마찬가지로 무궁화 앱솔루트 0.1 mg/mL에서 높은 효과를 나타내는 것으로 나타났으며, rat tail wound healing 실험에서는 농도 0.1 mg/mL에서 21일차에 75.73 ± 2.05% 쥐꼬리에 상처치유가 유도되는 것으로 확인 되었다. 따라서 본 연구는 무궁화 앱솔루트가 피부재생 및 상처치유 화장품 및 의약품에 구성성분으로 활용 될 수 있음을 시사하고 있다.
피부는 신체의 외부를 둘러싸고 있으며, 물리적, 화학적으로 다양한 외부 환경으로부터 인체를 보호한다. keratinocyte는 표피의 기본 구성 세포이며, 피부 재생에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. keratinocyte의 증식과 이주는 피부재생 및 상처치유에 필수요소이며, collagen 합성 및 상처 회복에 영향을 미친다. keratinocyte는 표피 성장 인자 (Epidermal growth factor, EGF), 및 천연물에 의하여 자극되어 증식, 이주가 이루어진다. 지난 몇 년 동안 천연물질의 피부재생 및 상처치유에 관련된 연구가 증가하는 추세이다. 천연물질은 기존의약품과 비교하여 독성과 부작용이 적은 것으로 보고되었으며, 따라서, 전통 의학에서 사용되는 식물의 약효에 대한 과학적 검증을 진행 할 필요가 있다. 무궁화는 우리나라의 국화이며, 전 세계적으로 200여 종이 있으며, 한국, 시베리아, 하와이, 북미, 중남미, 인도, 아프리카 등 7지역에 분포하고 있다. 무궁화는 동양의학에서 부위에 따라 질염, 이질, 치질, 구충제, 해열, 습진, 건선에 사용되어 왔으나, 피부재생과 상처치유에 관련된 자료는 미비한 상태이며, keratinocyte를 사용한 연구는 전무한 상태이다. 본 연구는 gas chromatography/mass spectrometry 분석 (GC/MS)을 사용하여 무궁화 앱솔루트의 성분분석을 하였으며, 각질형성세포주인 HaCaT cell을 사용하여 XTT assay, boyden chamber assay, collagen synthesis, sprout out growth assay, western blot을 진행하고 rat tail wound healing 실험을 통하여 무궁화 앱솔루트의 효과를 조사 하였다. 무궁화 앱솔루트에서 palmitic acid (18.94%), linoleic acid (8.57%), stearic acid (5.87%), 9-nonadecene (5.82%), cycloartenol (3.31%), γ-sitosterol (2.22%), lupenyl acetate (1.52%), myristic acid (1.16%), squalene (0.83%), γ-tocopherol (0.81%) 10가지의 성분을 분석하였으며, 무궁화 앱솔루트는 농도 의존적으로 keratinocyte의 증식과 이주를 유도하였으며, 0.1 mg/mL 농도에서 세포증식 (133.05 ± 2.71%), 세포이주 (189.08 ± 4.34%), sprout out growth (458.0 ± 6.38%) 모두 대조군으로 사용된 rhEGF와 유사한 효과를 나타내었다. 또한 Erk 1/2 (334.12 ± 3.31%)와 Akt (403.16 ± 3.66%)의 인산화 및 type I collagen (143.61 ± 1.78%), type IV collagen (150.43 ± 1.82%) 합성은 마찬가지로 무궁화 앱솔루트 0.1 mg/mL에서 높은 효과를 나타내는 것으로 나타났으며, rat tail wound healing 실험에서는 농도 0.1 mg/mL에서 21일차에 75.73 ± 2.05% 쥐꼬리에 상처치유가 유도되는 것으로 확인 되었다. 따라서 본 연구는 무궁화 앱솔루트가 피부재생 및 상처치유 화장품 및 의약품에 구성성분으로 활용 될 수 있음을 시사하고 있다.
The human skin is the outer covering of the body and protects human body from various environmental risk factors. The keratinocyte, a main cell of the epidermis, is known to play important roles in skin regeneration. Proliferation and migration of keratinocytes are essential in repair of cutaneous w...
The human skin is the outer covering of the body and protects human body from various environmental risk factors. The keratinocyte, a main cell of the epidermis, is known to play important roles in skin regeneration. Proliferation and migration of keratinocytes are essential in repair of cutaneous wounds. Keratinocyte proliferation and migration affects re-epithelization, while keratinocyte proliferation affects the formation of granulation tissue, collagen synthesis, and wound contraction. The proliferation of the keratinocytes stimulated by epidermal growth factor (EGF), and natural products. In the last few years, the research of natural substances which can improve and stimulate skin regeneration and also exhibit wound healing potential, has increased. Natural substances has been reported to be less toxic and to have less side effects compared conventional medicines. Therefore, it is important to provide a scientific validation for the medicinal effects of plants used in traditional medicine. Hibiscus. syriacus L. which is found in Asia, is an important plant ornamental shrub. It has been widely cultivated as a decorative shrub because its flower is national flower of Korea. Hibiscus syriacus L. has been used to Vaginosis, shigellosis, hemorrhoids, anthelmintic, antipyretic, eczema, psoriasis in Asian traditional medicine. However, research on keratinocytes is inadequate. Hence, we identified the composition of absolute from Hibiscus syriacus L. flower absolute (HSF absolute) using gas chromatography-mass spectrometry analysis. We also examined the effect of HSF absolute in HaCaT cells using XTT assay, Boyden chamber assay, collagen synthesis measurement, ex vivo sprout-out growth assay, western blot, and in vivo rat tail wound healing assay respectively. 10 major active compounds palmitic acid (18.94%), linoleic acid (8.57%), stearic acid (5.87%), 9-nonadecene (5.82%), cycloartenol (3.31%), γ-sitosterol (2.22%), lupenyl acetate (1.52%), myristic acid (1.16%), squalene (0.83%) and γ-tocopherol (0.81%) were identified from HSF absolute. We determined the effect of HSF absolute 0.1 mg/mL to proliferation (133.05 ± 2.71%), migration (189.08 ± 4.34%) and sprout-out growth (458.0 ± 6.38%) rates of keratinocytes. In addition, HSF absolute 0.1 mg/mL also enhanced increase phosphorylation of the Erk 1/2 (334.12 ± 3.31%) and Akt (403.16 ± 3.66%) and induced the synthesis of type I (143.61 ± 1.78%) and IV (150.43 ± 1.82%) collagen in HaCaT cells. Moreover, promoted wound closure in the dorsal side skin of rat tail. As shown by XTT assay, Boyden chamber assay, ex vivo sprout-out growth assay and western blot results HSF absolute exhibited similar effects of EGF on proliferation and migration patterns of HaCaT cells. These results of in vitro, ex vivo and in vivo studies imply that HSF absolute induced the cell proliferation, migration, synthesis of type I, IV collagen and sprout-out growth of HaCaT cells. through Erk 1/2 and Akt phosphorylation and rat tail wound healing. Therefore, this study suggests that HSF absolute may show promise as a good material for use in cosmetics and alternative medicine.
The human skin is the outer covering of the body and protects human body from various environmental risk factors. The keratinocyte, a main cell of the epidermis, is known to play important roles in skin regeneration. Proliferation and migration of keratinocytes are essential in repair of cutaneous wounds. Keratinocyte proliferation and migration affects re-epithelization, while keratinocyte proliferation affects the formation of granulation tissue, collagen synthesis, and wound contraction. The proliferation of the keratinocytes stimulated by epidermal growth factor (EGF), and natural products. In the last few years, the research of natural substances which can improve and stimulate skin regeneration and also exhibit wound healing potential, has increased. Natural substances has been reported to be less toxic and to have less side effects compared conventional medicines. Therefore, it is important to provide a scientific validation for the medicinal effects of plants used in traditional medicine. Hibiscus. syriacus L. which is found in Asia, is an important plant ornamental shrub. It has been widely cultivated as a decorative shrub because its flower is national flower of Korea. Hibiscus syriacus L. has been used to Vaginosis, shigellosis, hemorrhoids, anthelmintic, antipyretic, eczema, psoriasis in Asian traditional medicine. However, research on keratinocytes is inadequate. Hence, we identified the composition of absolute from Hibiscus syriacus L. flower absolute (HSF absolute) using gas chromatography-mass spectrometry analysis. We also examined the effect of HSF absolute in HaCaT cells using XTT assay, Boyden chamber assay, collagen synthesis measurement, ex vivo sprout-out growth assay, western blot, and in vivo rat tail wound healing assay respectively. 10 major active compounds palmitic acid (18.94%), linoleic acid (8.57%), stearic acid (5.87%), 9-nonadecene (5.82%), cycloartenol (3.31%), γ-sitosterol (2.22%), lupenyl acetate (1.52%), myristic acid (1.16%), squalene (0.83%) and γ-tocopherol (0.81%) were identified from HSF absolute. We determined the effect of HSF absolute 0.1 mg/mL to proliferation (133.05 ± 2.71%), migration (189.08 ± 4.34%) and sprout-out growth (458.0 ± 6.38%) rates of keratinocytes. In addition, HSF absolute 0.1 mg/mL also enhanced increase phosphorylation of the Erk 1/2 (334.12 ± 3.31%) and Akt (403.16 ± 3.66%) and induced the synthesis of type I (143.61 ± 1.78%) and IV (150.43 ± 1.82%) collagen in HaCaT cells. Moreover, promoted wound closure in the dorsal side skin of rat tail. As shown by XTT assay, Boyden chamber assay, ex vivo sprout-out growth assay and western blot results HSF absolute exhibited similar effects of EGF on proliferation and migration patterns of HaCaT cells. These results of in vitro, ex vivo and in vivo studies imply that HSF absolute induced the cell proliferation, migration, synthesis of type I, IV collagen and sprout-out growth of HaCaT cells. through Erk 1/2 and Akt phosphorylation and rat tail wound healing. Therefore, this study suggests that HSF absolute may show promise as a good material for use in cosmetics and alternative medicine.
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