Mucin 1 (MUC1) 종양단백질은 대부분 인간의 암 조직에서 높게 발현된다. 따라서 MUC1은 새로운 항암제, 백신, 항체, 소분자 치료제 개발의 타겟으로 관심 받고 있다. 그러나, 아직까지 MUC1을 타겟으로 하는 치료제는 임상 연구에서 중요한 결과가 도출되지 못하였다. 따라서 본 연구는 MUC1을 표적으로 하는 단일클론 항체를 생산하기 위해 수행되었다. MUC1의 ...
Mucin 1 (MUC1) 종양단백질은 대부분 인간의 암 조직에서 높게 발현된다. 따라서 MUC1은 새로운 항암제, 백신, 항체, 소분자 치료제 개발의 타겟으로 관심 받고 있다. 그러나, 아직까지 MUC1을 타겟으로 하는 치료제는 임상 연구에서 중요한 결과가 도출되지 못하였다. 따라서 본 연구는 MUC1을 표적으로 하는 단일클론 항체를 생산하기 위해 수행되었다. MUC1의 SEA domain 단백질을 CpG-DNA와 함께 리포좀으로 캡슐화한 복합체를 BALB/c 마우스에 면역하여 항체 생산을 확인하였다. 면역한 마우스의 비장세포와 SP2/0 세포를 융합하여, MUC1-SEA domain을 인식하는 단일클론 항체를 생산하는 2G4-1H7 융합세포 클론을 확보하였다. hMUC1-SEA 항체는 유방암 세포주의 MCF-7 세포에서 면역침강 분석을 통해 MUC1-C 단백질을 인식 할 수 있었다. 또한, hMUC1-SEA을 인식하는 단일클론 항체는 면역형광 분석에 나타난 바와 같이 MCF-7 세포의 세포 표면에 발현된 것 뿐만 아니라 세포 내 위치한 MUC1을 염색 할 수 있었다. 따라서 본 연구에서 확보한 MUC1을 인식하는 단일클론 항체가 MUC1의 기능을 조절하여 치료제로 활용 될 수 있는지를 확인하는 연구가 앞으로 수행되어야 할 것이다.
Mucin 1 (MUC1) 종양단백질은 대부분 인간의 암 조직에서 높게 발현된다. 따라서 MUC1은 새로운 항암제, 백신, 항체, 소분자 치료제 개발의 타겟으로 관심 받고 있다. 그러나, 아직까지 MUC1을 타겟으로 하는 치료제는 임상 연구에서 중요한 결과가 도출되지 못하였다. 따라서 본 연구는 MUC1을 표적으로 하는 단일클론 항체를 생산하기 위해 수행되었다. MUC1의 SEA domain 단백질을 CpG-DNA와 함께 리포좀으로 캡슐화한 복합체를 BALB/c 마우스에 면역하여 항체 생산을 확인하였다. 면역한 마우스의 비장세포와 SP2/0 세포를 융합하여, MUC1-SEA domain을 인식하는 단일클론 항체를 생산하는 2G4-1H7 융합세포 클론을 확보하였다. hMUC1-SEA 항체는 유방암 세포주의 MCF-7 세포에서 면역침강 분석을 통해 MUC1-C 단백질을 인식 할 수 있었다. 또한, hMUC1-SEA을 인식하는 단일클론 항체는 면역형광 분석에 나타난 바와 같이 MCF-7 세포의 세포 표면에 발현된 것 뿐만 아니라 세포 내 위치한 MUC1을 염색 할 수 있었다. 따라서 본 연구에서 확보한 MUC1을 인식하는 단일클론 항체가 MUC1의 기능을 조절하여 치료제로 활용 될 수 있는지를 확인하는 연구가 앞으로 수행되어야 할 것이다.
Mucin 1 (MUC1) oncoprotein is highly expressed in most human cancer tissues. Therefore, MUC1 is a target for the development of new anticancer drugs, vaccines, antibodies and small molecule drugs. However, therapeutic agents that targets of MUC1 haven't produced significant results in clinical r...
Mucin 1 (MUC1) oncoprotein is highly expressed in most human cancer tissues. Therefore, MUC1 is a target for the development of new anticancer drugs, vaccines, antibodies and small molecule drugs. However, therapeutic agents that targets of MUC1 haven't produced significant results in clinical research. Therefore, this study was undertaken to produce monoclonal antibody that targets MUC1. BALB/c mice were immunized with the complex of hMUC1-SEA domain protein with CpG-DNA encapsulated in liposome and identified the antibody production. The splenocytes from immunized mice were fused with SP2/0 cells and 2G4-1H7 hybridoma cell clone was obtained that produced the monoclonal antibody recognizing the MUC1-SEA domain. The hMUC1-SEA monoclonal antibody could able to recognize MUC1-C protein by immunoprecipitation analysis in MCF-7 cells of breast cancer cell line. Moreover, the hMUC1-SEA antibody was able to stain the MUC1 expressed on the cell surface as well as in the intracellular location of MCF-7 cells, as shown by the immunofluorescence analysis. Therefore, the anti-MUC1 monoclonal antibody obtained in this study recognizes of MUC1 and will perform whether it can be used as the therapeutic agents in future.
Mucin 1 (MUC1) oncoprotein is highly expressed in most human cancer tissues. Therefore, MUC1 is a target for the development of new anticancer drugs, vaccines, antibodies and small molecule drugs. However, therapeutic agents that targets of MUC1 haven't produced significant results in clinical research. Therefore, this study was undertaken to produce monoclonal antibody that targets MUC1. BALB/c mice were immunized with the complex of hMUC1-SEA domain protein with CpG-DNA encapsulated in liposome and identified the antibody production. The splenocytes from immunized mice were fused with SP2/0 cells and 2G4-1H7 hybridoma cell clone was obtained that produced the monoclonal antibody recognizing the MUC1-SEA domain. The hMUC1-SEA monoclonal antibody could able to recognize MUC1-C protein by immunoprecipitation analysis in MCF-7 cells of breast cancer cell line. Moreover, the hMUC1-SEA antibody was able to stain the MUC1 expressed on the cell surface as well as in the intracellular location of MCF-7 cells, as shown by the immunofluorescence analysis. Therefore, the anti-MUC1 monoclonal antibody obtained in this study recognizes of MUC1 and will perform whether it can be used as the therapeutic agents in future.
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