초록

명태 (Alask pollack, Theragia chalcogramma) 고기풀 수세액 중의 단백질 활용방안으로 기능성 peptide생산을 위해 고정화 protease를 이용한 생물반응기에서 가수분해하여 gel 여과후 정제 peptide의 특성 및 아미노산 존재 여부를 파악하기 위해 실험한 결과는 다음과 같다. 1. $0.5\%$ 농도의 고기를 수세액을 반응온도 $50^{\circ}C$에서 24시간 가수분해 하였을 때 분해율은 $50\%$ (OPA법)였다. 2. Sephadex G-50 column chromatography에 의한 고기풀 수세 액과 조peptide의 분자량은 각각 $10,000\~50,000Da$과, $600\~12,000Da$의 광범위한 분포를 나타내었다. 3. SP-Sephadex C-25 $(H^+)$ column chromatography에서 식염농도 $0\~3\%$의 농도구배에서 $0.6\~0.9\%\;NaCl$, pH 2 범위에서 염기성이 약한 아미노산을 함유하였고, $1.2\~2.0\%$에서는 염기성이 강한 아미노산을 함유하는 peptide가 용출되었다. 4. SP-Sephadex C-25 ($(H^+)$ column chromatography에서 분획한 SP-분획을 Sephadex G-50 colum chromatography에서 peptide의 분자량 측정 결과는 대게 저분자로 분자량 1,000Da에서 3,000Da 범위였고, SP-4>SP-3>SP-2>SP-1의 순으로 분자량 분포를 나타내었다. 5. 정제 peptide의 아미노산 조성은 수세 peptide에서 glycine, arginine이 가장 많이 함유하였으며 그외 glutamic acid, alanine, aspartic aicd 등이였고, SP-분획 peptide는 수세 peptide와 대동소이하였으나 SP-2에서 glycine이 $33\%$로 가장 높았다.

Abstract

Peptides separated from fish paste washing liquid of an Alaska pollak (Theragria chalcogramma) were purified and characterized. The fish paste washing liquid (supernatant) was separated by centrifugation of fish paste homogenate. The fish paste washing liquid of $0.5\%$ concentration was hydrolyzed for 24 hour at $50^{\circ}C$ by immobilized protease in bioreactor and decomposing liquid of protein having $50\%$ decomposing rate (OPA method) was obtained. The crude peptide fractions were obtained from this liquid by Dowex 50w $(H^+)$ column chromatograpy. Purified peptides (SP-fraction peptides) were fractionated by using SP-Sepadex C-25 $(H^+)$ column chromatography. Molecular weights and amino acid compositions of these peptides were estimated by Sephadex G-50 column chromatography and HPLC, respectively. when the washed peptides was eluated with $0.6\~0.9\%\;and\;1.2\~2.0\%$ of NaCl, peptides composed of weakly basic amino acids and strongly basic amino acid were respectively eluted. Molecular weights of each peptide fractions showed the broad distribution from 1,000 Da to 3,000 Da in the order of SP-4>SP-3>SP-2>SP-1. Peptides contained a large quantity of glycine, arginine, glutamic acid, and alanine in the washed peptide and its SP-tractions, respectively.

주제어

#fish paste   #immobilized protease   #bioreactor   #crude and purified peptides  

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