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문제 정의
- 떫은감 탄닌성분의 이화학적 · 기능적 특성을 연구하기 위해서 과실의 숙도에 따라 탄닌성분을 분리하여 단백질반응성, 항산화능, 아질산염 제거능 및 부패성 미생물의 생육에 미치는 영향에 대해 조사하였다. 떫은감 탄닌성분의 단백질 반응성은 온도상승에 따라 증가하는 경향이었으며, 녹숙감과 완숙감에서 분리한 탄닌성분이 연시에서 분리한 탄닌성분에 비해 단백질 반응성이 높았다.
- 이에 본 연구는 떫은감 탄닌성분의 이화학적 · 기능적 특성을 조사하기 위해서 감과실의 숙도에 따라 탄닌성분을 분리하여 단백질 반응성. 항산화능, 아질산염 제거능 및 미생물의 생육에 미치는 영향에 대해 조사하였다.
- 분리하여 단백질 반응성. 항산화능, 아질산염 제거능 및 미생물의 생육에 미치는 영향에 대해 조사하였다.
제안 방법
- 제균된 시 료용액 은 멸 균된 8 mm filter paper disc에 30μl(2mg/disc)씩 흡수시킨 후, 추출용매를 완전히 휘발시킨 다음 시험용 평판배지위에 놓아 밀착시켰다.Paper disc를 밀착시킨 각각의 배지는 3(yC의 incubator에서 36시간 배양하여 저해환의 직경을 측정하였다.이때 V.
- . 대조군으로ascorbic acid와 butylated hydroxytoluene(BHT)을 각각30mg씩 취해 시료와 동일한 과정으로 처리하여 분석하였다.
- 0)를 가한 다음 30℃에서 3시간 반응시킨 후 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한 단백질의 함량에 따른 변화는 0.5 ml탄닌 용액 (30 mg/ml)에 0.5 ml BSA(1 mg, 10 mg, 20 mg, 30 mg/ml)용액 과 3 ml acetate buffer(0.01 M,pH 3.0)를 가해서 동일한 방법으로 분석하였다.
- 0)를 가하여 3시간 반응시 킨 후 vortex mixer로 30초간 혼합하여 660 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 tannin과 BSA의 반응에 의한 탁도 형성 값은 tannin-buffer solution과 BSA-buffer solution에서 형성된 흡광도를 탠 수치로 하였다. 탄닌의 함량에 따른 변화는 0.
- 이때 tannin과 BSA의 반응에 의한 탁도 형성 값은 tannin-buffer solution과 BSA-buffer solution에서 형성된 흡광도를 탠 수치로 하였다. 탄닌의 함량에 따른 변화는 0.5 ml 탄닌용액(1 mg,10 mg, 20 mg, 30 mg/ml)에 0.5 ml BSA용액 (30mg/ml)과 3 ml acetate buffer(0.01 M, pH 3.0)를 가한 다음 30℃에서 3시간 반응시킨 후 660nm에서 흡광도를 측정하였다. 또한 단백질의 함량에 따른 변화는 0.
대상 데이터
- 본 실험에 이용된 감과실은 경북 청도군에서 재배한 반시(Diospyms kaki, T.)품종으로써 개화 105~110일의 녹숙감과, 개화 155~160일의 완숙감 및 완숙감을 알콜농도 50% 이상, 25℃에서 1주일간 탈삽한 연시로 구분하여 실험하였다.
이론/모형
- Yokosuka 둥(9)의 방법을 이용해서, 0.5 ml 탄닌용액 (1 mg/ml)에 0.5 ml BSA(2 mg/ml) 용액 을 넣은 다음 3 ml acetate buJfer(0.01 M, pH 3.0)를 가하여 3시간 반응시 킨 후 vortex mixer로 30초간 혼합하여 660 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 tannin과 BSA의 반응에 의한 탁도 형성 값은 tannin-buffer solution과 BSA-buffer solution에서 형성된 흡광도를 탠 수치로 하였다.
- 아질산염 제거능은 Gray 등의 방법(11)에 따라 1 ml NaNO2용액(1 mM)에 50 μl 탄닌용액(1 mg, 10 mg, 30mg/50μl)을 첨가하고 여기에 0JN HCl(pH 1.2)용액과 0.2 M citrate buffer(pH 4.2를 사용하여 반응용액의 pH를 각각 1.2, 3.0 및 4.2로 조정한 다음 10ml로 정용하였다. 반응액은 37℃ water ba버에서 1시간동안 반응시킨 후 각각 1.
- 항균성 측정은 경북과학대학에서 보관중인 Table 1의 균주를 이용해서 paper disc법(12)으로 행하였다. 즉 먼저 2% agar가 함유된 생육배지를 petridish에 얇게 펴고, 그 위에 균주 20μl를 접종한 0.
성능/효과
- 여 등"3에 따르면 다류에 함유된 catechin류는 높은 항산화작용을 가지며, 이들은 tocopherol이나 BHT와의 상승효과도 있다. Nose와 Fujind's는 아보카도 과피의 높은 항산화능은 탄닌성분인 epicatechin에서 비롯되며 녹숙과에 비해 완숙과의 항산화능이 높은 것은 녹숙과에는epicatechin보다 chlorogenic acid가 주된 구성성분인 것에 기인한다고 하여, 탄닌성분에 따라 항산화능에 차이가 있음을 보여주었다. Matsuzaki와 HarW0도 녹차탄닌성분의 항산화능에 대한 연구에서 epigallocatechin이나 epigallocatechingallatee]- 같은 pyrogallol형 화합물이 epicatechin 이나 epicatshingallate 등의 catechol형 화합물보다 항산화능이 크다고 보고하고, 탄닌성분에 있어서 항산화능은 구조적 형태에 영향을 받는다고 보고하였다.
- 조사한 결과이다. pH가 낮을수록 아질산염 제거능은 높게 나타났으며 녹숙기 탄닌의 경우 pH 1.2에서 30 mg처리시 100%에 가까운 아질산염 제거능을 보였다. 완숙기 탄닌도 비교적 높은 제거능을 나타내었으나, 연시탄닌은 녹숙기, 완숙기 탄닌에 비해서 전반적으로 아질산염 제거작용이 매우 낮았다.
- 떫은감 탄닌성분의 단백질 반응성은 온도상승에 따라 증가하는 경향이었으며, 녹숙감과 완숙감에서 분리한 탄닌성분이 연시에서 분리한 탄닌성분에 비해 단백질 반응성이 높았다. 녹숙감의 탄닌성분은 ascorbic acid와 유사한 항산화능을 나타내었으며 pH 1.2에서 30 mg 탄닌처리시 아질산염제거능이 거의 100%에 달했다. 또한 녹숙기 탄닌은 부패성 미생물에 대해 뚜렷한 저해를 보였으며, 특히 E.
- 시료를 처리하지 않은 무처리군은 시간의 경과에 따라 기질인 linoleic acid ester의 산화로 뚜렷한 POV 증가를 나타내었으며, ascorbic acid를 처리한 경우에는 1주일이 경과할 때까지 POV가 매우 낮게 유지되었다. 녹숙기, 완숙기 탄닌의 경우 첨가후 3일이 경과할 때까지 BHI처리구와 더불어 POV 수치가 낮았으나, 그 이후에는 점차 증가하는 경향을 보였으며 완숙기 탄닌은 녹숙기 탄닌에 비해서 항산화능이 떨어졌다. 연시탄닌은 처리후 무처리구와 함께 POV의 계속적인 중가를 보였다.
- 이용해서 조사한 결과이다. 단백질 반응성은 온도가 높을수록 증가하는 경향을 보였으며, 각 온도에서 녹숙감의 탄닌이 가장 높았고 그 뒤로 완숙감의 탄닌, 연시 탄닌 순이었다. 연시 탄닌은 녹숙기 · 완숙기 탄닌에 비해서 단백질 반응성이 매우 낮았다.
- 떫은감 탄닌성분의 이화학적 · 기능적 특성을 연구하기 위해서 과실의 숙도에 따라 탄닌성분을 분리하여 단백질반응성, 항산화능, 아질산염 제거능 및 부패성 미생물의 생육에 미치는 영향에 대해 조사하였다. 떫은감 탄닌성분의 단백질 반응성은 온도상승에 따라 증가하는 경향이었으며, 녹숙감과 완숙감에서 분리한 탄닌성분이 연시에서 분리한 탄닌성분에 비해 단백질 반응성이 높았다. 녹숙감의 탄닌성분은 ascorbic acid와 유사한 항산화능을 나타내었으며 pH 1.
- typhimuriim에 대해서 항균성을 나타내지 않았다. 또한 균주의 종류에 따라서 탄닌의 항균성에 차이가 있어서, 특히 E. co/와 V. parahaemolyticus 대한저해가 뚜렷하게 나타났다. 탄닌의 항균작용 기전은 탄닌과 단백질의 상호작용에 따른 생육기질내 단백질 성분의 불용화 및 미생물의 생육관련 효소저해에 의한것으로 알려져 있으며, Tagari 등""은 artificial rumen system을 이용한 실험에서 carob의 탄닌성분이 미생물의 proteolytic activity를 저해한다고 보고하였다.
- 2에서 30 mg 탄닌처리시 아질산염제거능이 거의 100%에 달했다. 또한 녹숙기 탄닌은 부패성 미생물에 대해 뚜렷한 저해를 보였으며, 특히 E.coli와 V. parahaemolyticus 대한 저해가 현저하였다. 완숙기 탄닌성분의 경우 BHT 와 유사한 수준의 항산화능과 pH 1.
- parahaemolyticuse 대해서 상당히 높은 항균성을 가진다고 보고하였다. 본 연구 결과 녹숙감과 완숙감에 탄닌성분은 항산화능, 아질산염제거능 및 부패성 미생물 생육저해능이 있으나 연시 탄닌성분은 이러한 기능성이 매우 낮았다. 이는 떫은감의 숙도에 따라 탄닌성분의 불용화 이외에 잔존하는 가용성 탄닌자체의 변화가 동반되기 때문으로 생각된다.
- 4는 탄닌성분의 항산화능를 알아보기 위해서 POV를 측정한 결과이다. 시료를 처리하지 않은 무처리군은 시간의 경과에 따라 기질인 linoleic acid ester의 산화로 뚜렷한 POV 증가를 나타내었으며, ascorbic acid를 처리한 경우에는 1주일이 경과할 때까지 POV가 매우 낮게 유지되었다. 녹숙기, 완숙기 탄닌의 경우 첨가후 3일이 경과할 때까지 BHI처리구와 더불어 POV 수치가 낮았으나, 그 이후에는 점차 증가하는 경향을 보였으며 완숙기 탄닌은 녹숙기 탄닌에 비해서 항산화능이 떨어졌다.
- 것으로 나타났다. 완숙감의 탄닌은 연시 탄닌보다 비교적 큰 저해환을 보였으며, 연시 탄닌은 B. subtilis 와 S. typhimuriim에 대해서 항균성을 나타내지 않았다. 또한 균주의 종류에 따라서 탄닌의 항균성에 차이가 있어서, 특히 E.
- 2에서 30 mg처리시 100%에 가까운 아질산염 제거능을 보였다. 완숙기 탄닌도 비교적 높은 제거능을 나타내었으나, 연시탄닌은 녹숙기, 완숙기 탄닌에 비해서 전반적으로 아질산염 제거작용이 매우 낮았다. Fox와 Ackerman(15)에 따르면 아질산염 제거능은 수소이온 농도에 비례하여 진행되며, Gray 등(11)은 모델계를 만들어 실험한 결과 tannic acid 유도체가 N-nitrosamine 형성저해에 효과적이라고 하였다.
- Matsuzaki와 HarW0도 녹차탄닌성분의 항산화능에 대한 연구에서 epigallocatechin이나 epigallocatechingallatee]- 같은 pyrogallol형 화합물이 epicatechin 이나 epicatshingallate 등의 catechol형 화합물보다 항산화능이 크다고 보고하고, 탄닌성분에 있어서 항산화능은 구조적 형태에 영향을 받는다고 보고하였다. 이상의 보고를 종합할 때 감과실의 숙도에 따라 탄닌의 구성성분이나 구조에 변화가 야기되어 연시 탄닌에서 항산화능에 차이를 나타낸 것으로 생각된다.
- 91%의 아질산염제거능을 나타내었다. 이에 반해 연시 탄닌성분은 항산화능, 아질산염제거능이 매우 낮았으며, 미생물 생육저해능도 미미하여 녹숙기 · 완숙기 탄닌과는 큰 차이를 보였다
- 2와 3은 탄닌과 단백질의 함량에 따른 반웅성을 조사한 결과이다. 탄닌의 함량 증가 및 BSA의 함량 증가로 탄닌과 BSA간 상호작용이 중대되는 것으로 나타났으나, 증가 경향에는 차이가 있었다. 일정량의 BSA 에 탄닌의 함량을 증가시켜 반응한 경우(Fig.
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