한국산 작두콩을 종자, 자엽 및 껍질로 구분하여 항균활성성을 조사하였다. 용매별 추출수율은 껍질이 다른 부위에 비해 물과 메탄올 추출물에서 높게 나타났으며, 메탄올 추출물의 계통분획별 추출수율은 물 분획 층에서 종자 3.3%, 자엽 2.5%, 껍질 0.3%로 높게 나타났다. 작두콩의 부위별 추출물의 항균활성은 용매별 추출물에서는 메탄올 추출물이 높게 나타났으며, 계통 분획 추출물에서는 에칠 아세테이트 분획층에서 종자, 자엽, 껍질 모두 항균활성이 높게 나타났다.
한국산 작두콩을 종자, 자엽 및 껍질로 구분하여 항균활성성을 조사하였다. 용매별 추출수율은 껍질이 다른 부위에 비해 물과 메탄올 추출물에서 높게 나타났으며, 메탄올 추출물의 계통분획별 추출수율은 물 분획 층에서 종자 3.3%, 자엽 2.5%, 껍질 0.3%로 높게 나타났다. 작두콩의 부위별 추출물의 항균활성은 용매별 추출물에서는 메탄올 추출물이 높게 나타났으며, 계통 분획 추출물에서는 에칠 아세테이트 분획층에서 종자, 자엽, 껍질 모두 항균활성이 높게 나타났다.
The antimicrobial activities of three parts of Korean sword bean , such as whole seed, dotyledon and hull were investigated . Yields were higher hull other parts in water and methanol extract. Methanol extract in seed parts was fractionated with different solvents, such as hexane, chloroform, ethyl ...
The antimicrobial activities of three parts of Korean sword bean , such as whole seed, dotyledon and hull were investigated . Yields were higher hull other parts in water and methanol extract. Methanol extract in seed parts was fractionated with different solvents, such as hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water, yields of water fractino showed 3.3% , 2.5% and 0.3% in whole seed, 채쇼ledon and hull, respectively. In solvent extracts using methanol, hexane, chloroform, and water , methanol extract showed the most effective antimicrobial activities. Antimicrobial activities of ethyl acetate fraction of methanol extractwas higher than those of other fractions.
The antimicrobial activities of three parts of Korean sword bean , such as whole seed, dotyledon and hull were investigated . Yields were higher hull other parts in water and methanol extract. Methanol extract in seed parts was fractionated with different solvents, such as hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water, yields of water fractino showed 3.3% , 2.5% and 0.3% in whole seed, 채쇼ledon and hull, respectively. In solvent extracts using methanol, hexane, chloroform, and water , methanol extract showed the most effective antimicrobial activities. Antimicrobial activities of ethyl acetate fraction of methanol extractwas higher than those of other fractions.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 한국산 작두콩을 종자, 자엽 및 낍질로 구분하여 기능성 식품으로서의 활용도를 높이기 위하여 각종 용매에 대한 작두콩의 부위별 항균활성을 연구하여 각종 전통발효식품 및 기능성 식품 개발의 기초자료로서 활용하고자 한다.
제안 방법
본 실험에 사용한 균주는 gram 양^균으로 Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylocoais aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus faecalis 및 Streptococcus mutans 등 6종과 gram 음성균으로는 Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium 및 Vibrio parahaemolylicus 4종을 사용하였다. 균생육 배지는 8종의 균주에 대하여서는 nutrient agar를 사용하였으며, Streplococcus mz의 생육을 위한 배지는 brain heart infusion broth 를 사용하였으며, Vibrio parahaemyticus의 생육을 위한 배지에는 nutrient agar 에 3%의 NaCI을 첨가하여 각가 사용하였다.
시료의 용매별 주출은 각 시료 100 g을 칭량한 후 물, 메탄올, 헥산, 클로로포름 및 에탄올 각 300 로 60C에서 3시간 환류냉각 추출을 3회 반복한 뒤 냉각한 다음 매회 여과한 여액을 혼합하고 rotary vacuum evaporator로 농축하여 시료로 사용하였다. 계통 분획별 시료는 시료 200 g을 메탄올 600 M로 3회 추출하여 Fig.
항균활성 시험은 paper disc( 8 mm)를 이용한 agar diffusion법(5)으로 하였다. 즉각 균주용 agar 배지를 petri dish에 분주하여 평판 고형화시키고, 1일간 배양한 균 10 를 멸균봉으로 도말하여 각 추출물 10 을 흡수시킨 후 추출물의 용매를 증발시킨 disc paper를 평판배지 위에 올려놓고 각 균주의 배양조건에 따라 배양하여 disc주위 dear zone의 직경을 측정, 비교하였다.
대상 데이터
시료의 용매별 주출은 각 시료 100 g을 칭량한 후 물, 메탄올, 헥산, 클로로포름 및 에탄올 각 300 로 60C에서 3시간 환류냉각 추출을 3회 반복한 뒤 냉각한 다음 매회 여과한 여액을 혼합하고 rotary vacuum evaporator로 농축하여 시료로 사용하였다. 계통 분획별 시료는 시료 200 g을 메탄올 600 M로 3회 추출하여 Fig. 1과 같이 분획하여 농축한 후 냉장 '보관하면서 시료 사용하였다.
본 실험에 사용한 균주는 gram 양^균으로 Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Staphylocoais aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus faecalis 및 Streptococcus mutans 등 6종과 gram 음성균으로는 Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium 및 Vibrio parahaemolylicus 4종을 사용하였다. 균생육 배지는 8종의 균주에 대하여서는 nutrient agar를 사용하였으며, Streplococcus mz의 생육을 위한 배지는 brain heart infusion broth 를 사용하였으며, Vibrio parahaemyticus의 생육을 위한 배지에는 nutrient agar 에 3%의 NaCI을 첨가하여 각가 사용하였다.
본 실험에서 사용한 작두콩은 98년 10월에 경남 진주에서 재배되는 것을 채취하여 냉동 보관하면서 실험에 사용하였다.
이론/모형
항균활성 시험은 paper disc( 8 mm)를 이용한 agar diffusion법(5)으로 하였다. 즉각 균주용 agar 배지를 petri dish에 분주하여 평판 고형화시키고, 1일간 배양한 균 10 를 멸균봉으로 도말하여 각 추출물 10 을 흡수시킨 후 추출물의 용매를 증발시킨 disc paper를 평판배지 위에 올려놓고 각 균주의 배양조건에 따라 배양하여 disc주위 dear zone의 직경을 측정, 비교하였다.
성능/효과
추출수율이 물에 비해 적지만 시료처리의 용이성 과 항균활성이 높은 메탄올 추출물을 회전 증발 농축기로 농축한 후 극성 및 비극성 용매를 이용한 순차별 용매 추출법에 의한 추출물의 수율은 Table 2와 같다. 극성용매인 물 분획충에서 종자 3.3%, 자엽 25% 및 껍질 0.3%로 추출수율이 나타난 반면, 비극성 용매인 헥산 분획층에서 각각 1.2%, 1.8% 및 0.8%로 나타났다. 배 듬}은 국산콩을 메탄올로 추 출하여 18.
자연의 경우 각 용매별로 s에서만 활성이 나타났으며, 메탄올 추출물에서 항균활성이 높게 나타났다. 껍질의 경우 대체적으로 메탄올 주출물에서 활성이 높게 나타났으며, Bacillus subtilis, Bacillus cereus 및 Vibrio parahaemolyticuse clear zone 이 각각 19 mm, 19 mm 및 18 mm로 나타났다. 박 등( 8)은 강낭콩 잎에서 정제한 키틴분해효소가 4 mGta의 균사의 성장을 억제한다고 보고하였다
2와 Table 3, 4 및 5와 같다- 즉, 종자의 경우 용매별 항균활성은 메탄올 층에서 그람양성 및 음성 균 모두 항균활성이 높게 나타났으며, 그림중에서 Bacillus &에서 19 mm의 clear zone이 나타난 반면, 헥산, 클로로포름 및 물 추출물은 항균활성이 나타나지 않았다. 자연의 경우 각 용매별로 s에서만 활성이 나타났으며, 메탄올 추출물에서 항균활성이 높게 나타났다. 껍질의 경우 대체적으로 메탄올 주출물에서 활성이 높게 나타났으며, Bacillus subtilis, Bacillus cereus 및 Vibrio parahaemolyticuse clear zone 이 각각 19 mm, 19 mm 및 18 mm로 나타났다.
작두콩의 부위별 추출물 중 항균활성이 가장 높은 메탄올 추출물을 극성 및 비극성 용매를 이용하어 순 차별로 항균활성을 분석한 결과는 Fig. 3과 Table 6, 7 및 8에서 나타난바와 같이 클로로포름, 에칠 아세테이 트 및 부탄올 분획층에서 항균활성이 높게 나타났으며, 에칠아세테이트 분획층에서 항균활성이 가장 높게 나타났다 종자의 경우 균주에 대한 clear zone의 직경을 확인한 결과 Escherichia coh, Pseudomonas aeruginosa1^ 각각 25 mm로 항균활성이 높게 나타났다. 자엽의 경우 Bacillus sis에서 16 mm, Vibrio pasks에서 17 mm로 항균활성이 높게 나타났다.
작두콩의 부위별 항균활성을 확인하기 위하여 각종 용매 추출물의 항균활성을 조사한 결과는 Fig. 2와 Table 3, 4 및 5와 같다- 즉, 종자의 경우 용매별 항균활성은 메탄올 층에서 그람양성 및 음성 균 모두 항균활성이 높게 나타났으며, 그림중에서 Bacillus &에서 19 mm의 clear zone이 나타난 반면, 헥산, 클로로포름 및 물 추출물은 항균활성이 나타나지 않았다. 자연의 경우 각 용매별로 s에서만 활성이 나타났으며, 메탄올 추출물에서 항균활성이 높게 나타났다.
작두콩의 부위별 기능성에 적합한 욤매를 선정하기 위하여 각 용매별로 추출수율을 확인한 겸과는 Table 1과 같다. 추출수율은 전반적으로 극성용매인 메탄올과 물 추출물에서 높게 나타났으며, 종자, 자 엽 및 껍질에서 물 추출물은 각각 17.6%, 21.2% 및 236%로 높게 나타났으며, 에탄올, 헥산 및 클로로포 름의 주출수율은 상대적으로 낮게 나타났다.
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