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Expression of Mouse $\\alpha-Amylase$ Gene in Methylotrophic Yeast Pichia pastoris

Biotechnology and bioprocess engineering : Bbe, v.5 no.1, 2000년, pp.7 - 12  

Uehara Hiroyuki (Lab. of Biotechnology, Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University) ,  Choi Du Bok (Institute of Life Science, Chosun University) ,  Park Enoch Y. (Lab. of Biotechnology, Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University) ,  Okabe Mitsuyasu (Lab. of Biotechnology, Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University)

Abstract AI-Helper 아이콘AI-Helper

The expression of the mouse $\alpha-amylase$ gene in the methylotrophic yeast, P pastoris was investigated. The mouse $\alpha-amylase$ gene was inserted into the multi-cloning site of a Pichi a expression vector, pPIC9, yielding a new expression vector pME624. The plasmid pME62...

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제안 방법

  • To confirm whether or not the P. pastoris transformants contained the α-amylase gene; PCR assay was performed (Fig. 3). The α-amylase gene was not detected in the genome of the A2 transformant.

대상 데이터

  • The P. pastoris host strain used in all experiments was GS115 (his4) (Invitrogen Co.; Carlsbad, CA; U.S.A.). Tube and flask cultures were grown in 10 and 50 mL of buffered minimal glycerol-complex (BMGY) medium, respectively.

이론/모형

  • To determine the molecular weights of recombinant protein, SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) was carried out by the method of Laemmli [11] with a 12% separating gel and a 4% stacking gel. A mid-range protein molecular weight marker was purchased from Promega (Madison, WI; U.
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참고문헌 (15)

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