In vitro에서 단감나무 둥근갈색무늬병 방제를 위한 살균제 선발 In vitro selection of fungicides for control of leaf blight of sweet persimmon tree caused by Pestalotiopsis theae원문보기
국내에 등록된 살균제를 대상으로 Pestalotiopsis theae (SP-3)에 의해 발생되는 단감나무 둥근갈색무늬병 방제약제 선발을 위하여 in vitro에서 병원균의 생장에 미치는 영향을 조사하였다. 대상 약제 중 prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, iminoctadine-triacetate 등은 $10{\mu}g/m{\ell}$에서 85% 이상, dichlofluanid과 chlorothalonil은 각각 10%, 33%의 균사생장 억제율을 나타내었으나, benomyl은 전혀 억제시키지 못하였다. 이들의 균사생장 최소억제농도 (MIC)는 iminictadine-triacetate가 P. theae SP-3 균수에 대해서는 $10{\mu}g/m{\ell}$인 반면, 대조균인 P. theae $\underline{MAFF}$ 752002와 P. longiseta $\underline{MAFF}$ 752001에 대해서는 $1{\mu}g/m{\ell}$ 미만으로 나타났다. fludioxonil, fluazinam, tebuconazole의 MIC는 $10{\mu}g/m{\ell}$이었고, Benomyl, chlorothalonil 및 dichlorofluanid의 MIC는 $1,000{\mu}g/m{\ell}$ 로 나타났다. 분생포자의 발아는 $1{\mu}g/m{\ell}$의 prochloraz, tebuconazole, fluarinam, fludoxonil, iminoctadine-triacetate가 함유된 배지에서 80% 이상 억제되었고, benomyl, chlorothalonil, dichlofluanid이 함유된 배지에서는 각각 40%, 60%, 30% 억제되었다. 단감나무 잎 절편과 공시균의 포자현탁액을 이용한 약효 검정에서 $10{\mu}g/m{\ell}$ iminoctadine-triacetate는 93% 이상 발병 억제력을 보였으나 동일 농도의 benomyl과 dichlofluanid는 발병을 억제하지 못하였다. 예방 및 치료 효과는 Fludoxonil, tebuconazole, fluazinam 및 iminoctadine-triacetate이 94% 이상을 보인 반면, benomyl과 dichlofluanid은 예방과 치료효과가 나타나지 않았다.
국내에 등록된 살균제를 대상으로 Pestalotiopsis theae (SP-3)에 의해 발생되는 단감나무 둥근갈색무늬병 방제약제 선발을 위하여 in vitro에서 병원균의 생장에 미치는 영향을 조사하였다. 대상 약제 중 prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, iminoctadine-triacetate 등은 $10{\mu}g/m{\ell}$에서 85% 이상, dichlofluanid과 chlorothalonil은 각각 10%, 33%의 균사생장 억제율을 나타내었으나, benomyl은 전혀 억제시키지 못하였다. 이들의 균사생장 최소억제농도 (MIC)는 iminictadine-triacetate가 P. theae SP-3 균수에 대해서는 $10{\mu}g/m{\ell}$인 반면, 대조균인 P. theae $\underline{MAFF}$ 752002와 P. longiseta $\underline{MAFF}$ 752001에 대해서는 $1{\mu}g/m{\ell}$ 미만으로 나타났다. fludioxonil, fluazinam, tebuconazole의 MIC는 $10{\mu}g/m{\ell}$이었고, Benomyl, chlorothalonil 및 dichlorofluanid의 MIC는 $1,000{\mu}g/m{\ell}$ 로 나타났다. 분생포자의 발아는 $1{\mu}g/m{\ell}$의 prochloraz, tebuconazole, fluarinam, fludoxonil, iminoctadine-triacetate가 함유된 배지에서 80% 이상 억제되었고, benomyl, chlorothalonil, dichlofluanid이 함유된 배지에서는 각각 40%, 60%, 30% 억제되었다. 단감나무 잎 절편과 공시균의 포자현탁액을 이용한 약효 검정에서 $10{\mu}g/m{\ell}$ iminoctadine-triacetate는 93% 이상 발병 억제력을 보였으나 동일 농도의 benomyl과 dichlofluanid는 발병을 억제하지 못하였다. 예방 및 치료 효과는 Fludoxonil, tebuconazole, fluazinam 및 iminoctadine-triacetate이 94% 이상을 보인 반면, benomyl과 dichlofluanid은 예방과 치료효과가 나타나지 않았다.
In vitro experiments, several fungicides including prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 85% inhibition of mycelial growth of Pestalotiopsis theae (SP-3). Dichlofluanid and chlorothalonil inhibited mycelial growth at the rate of 10 and 33%, ho...
In vitro experiments, several fungicides including prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 85% inhibition of mycelial growth of Pestalotiopsis theae (SP-3). Dichlofluanid and chlorothalonil inhibited mycelial growth at the rate of 10 and 33%, however benomyl did not inhibit mycelial growth of the fungus. Minimum inhibitory concentration(MICs) of iminictadine-triacetate on the mycelial growth of SP-3 isolate was $10{\mu}g/m{\ell}$, but that of P. theae $\underline{MAFF}$ 752002 and P. longiseta $\underline{MAFF}$ 752001 was $1{\mu}g/m{\ell}$. MIC of benomyl, chlorothalonil, dichlorofluanid was $1,000{\mu}g/m{\ell}$, and that of fludioxonil, fluazinam, tebuconazole was $10{\mu}g/m{\ell}$. Conidial germination was inhibited more than 80% in tile medium which contained $1{\mu}g/m{\ell}$ of prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and minoctadine-triacetate. Control values of benomyl, chlorothalonil and dichlofluanid were 40, 60 and 30%, respectively. The controlling effect of iminoctadine-triacetate ($10{\mu}g/m{\ell}$) aganist P. theae (SP-3) in leaf disc test was more than 93%, but benomyl and dichlofluanid could not control leaf blight disease caused by P. theae (SP-3). Tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 94% of protective and curative effect of leaf blight of sweet persimmon, while, benomyl and dichlofluanid did not show any control effect of the disease.
In vitro experiments, several fungicides including prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 85% inhibition of mycelial growth of Pestalotiopsis theae (SP-3). Dichlofluanid and chlorothalonil inhibited mycelial growth at the rate of 10 and 33%, however benomyl did not inhibit mycelial growth of the fungus. Minimum inhibitory concentration(MICs) of iminictadine-triacetate on the mycelial growth of SP-3 isolate was $10{\mu}g/m{\ell}$, but that of P. theae $\underline{MAFF}$ 752002 and P. longiseta $\underline{MAFF}$ 752001 was $1{\mu}g/m{\ell}$. MIC of benomyl, chlorothalonil, dichlorofluanid was $1,000{\mu}g/m{\ell}$, and that of fludioxonil, fluazinam, tebuconazole was $10{\mu}g/m{\ell}$. Conidial germination was inhibited more than 80% in tile medium which contained $1{\mu}g/m{\ell}$ of prochloraz, tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and minoctadine-triacetate. Control values of benomyl, chlorothalonil and dichlofluanid were 40, 60 and 30%, respectively. The controlling effect of iminoctadine-triacetate ($10{\mu}g/m{\ell}$) aganist P. theae (SP-3) in leaf disc test was more than 93%, but benomyl and dichlofluanid could not control leaf blight disease caused by P. theae (SP-3). Tebuconazole, fluazinam, fludioxonil, and iminoctadine-triacetate showed more than 94% of protective and curative effect of leaf blight of sweet persimmon, while, benomyl and dichlofluanid did not show any control effect of the disease.
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문제 정의
본 연구는 국내에 등록된 살균제를 대상으로 단감나무 둥근 갈색무늬병 방제약제를 선발하기 위하여 in uitro에서 병원균의 생장에 미치는 영향을 조사하였고, 단감나무 잎 절편을 이용한 방제효과 시험을 수행하여 실제 단감 재배 농가에서 본 병을 방제하는데 필요한 기초자료를 얻고자 하였다.
제안 방법
시험약제가 p. theae SP-3, P. theae MAFF 752002와 P. longiseta MAFF 752001의 분생포자 발아에 미치는 영향을 조사하기 위하여 각 균주를 26±1℃에서 27일간 배양하여 포자를 형성시켰다. 형성된 포자는 0.
공시한 8약제의 농도를 각각 0, 0.1, 0.5, 1, 5, 10 μg/ml로 조절한 potato dextrose brothfPDB)배지에서 P. theae SP-3와 대조 균주의 분생 포자 발아 억제 효과를 검정한 결과는 다음과 같다(표 4). SP-3 균주에 대해 포자 발아 억제가 우수한 약제로는 fludioxonil, fluazinam, prochloraz, tebuconazole 및 iminoctadine-triacetate으로 1.
국내에 등록된 약제 중 benomyl외 31종의 살균제를 대상으로 둥근갈색무늬병균인 P. theae SP-3 와 대조균인 P. theae MAFF 752002, P. longiseta MAFF 752001의 1차 약제 효과 검정을 실시하여 약효가 인정된 8종의 약제를 선발하였다. 선발된 약제 8종은 각각 10μg/ml씩 첨가된 약제 배지에서 균사 생장율을 조사한 결과는 표 2와 같다
theae SP-3균주를 potato dextrose agar (PDA) 배지에 접종하여 26 ± 1℃ 에서 1 주일 배양한 것을 사용하였다. 균사생장 억제시험을 위하여 약제를 첨가하여 만든 배지(약제배지)는 멸균된 PDA를 50~60℃까지 식힌 후 시험약제의 최종 농도가 10μg/ml이 되도록 각 약제를 첨가한 다음 잘 혼합하여 일회용 Petri dish(직경 9 cm)에 15ml이씩 분주하여 굳힌 후 사용하였다. 병원균의 접종은 접종원의 균총 가장자리로부터 균사 절편(직경 5 mm)을 분리하여 약제배지의 중앙에 올려놓았다.
약제배지는 병원균을 접종한 후 26±1℃ 에서 1주일 배양하였다. 균사생장 억제율(%)은 1주일간 배양한 균총의 직경을 측정한 후 아래의 계산식으로 구하였다.
균사의 생육을 완전히 억제하는 최저농도 (minimum inhibitory concentration: MIC)를 조사하기 위하여 시험 약제의 농도가 0.1, 1, 10, 100, 500, 1000 μg/ml인 약제 배지를 만들어 병원균을 접종하고 26±1℃에서 1주일 배양한 후 병원균의 생장 유무를 조사하였다.
방법을 변형하여 실시하였다. 단감나무 잎 절편을 1%의 차아염소산나트륨(NaOp과 70% 에틸 알코올에 침지하여 표면 소독 후 음건 후 5 mm의 상처를 유발시켰다. 약제의 예방효과는 잎 절편의 상처 부위에 포자 현탁액(lxl05 conidia ml-4) 50 μl를 떨어뜨린 후 paper disk를 올려놓고, 그 위에 공시 약제 희석액을 50 μl을 주입하여 항온항습실(26 土 1℃, RH>90%)에서 7일간 발병을 유도하였다.
잎 절편은 1%의 차아염소산나트륨(NaOCI)과 70% 에틸 알코올에 침지하여 표면 소독하고 음건 후 1, 5, 10, 100 μg/ml의 약액에 30분간 침지하여 건조시켜 사용하였다. 발병은 항온 항습실(26±1℃, RH >90%)에서 7일간 유도하였고, 형성된 병반의 직경을 측정하여 아래 식으로 방제가를 구하였으며, 각 처리는 3반복으로 실시하였다.
균사생장 억제시험을 위하여 약제를 첨가하여 만든 배지(약제배지)는 멸균된 PDA를 50~60℃까지 식힌 후 시험약제의 최종 농도가 10μg/ml이 되도록 각 약제를 첨가한 다음 잘 혼합하여 일회용 Petri dish(직경 9 cm)에 15ml이씩 분주하여 굳힌 후 사용하였다. 병원균의 접종은 접종원의 균총 가장자리로부터 균사 절편(직경 5 mm)을 분리하여 약제배지의 중앙에 올려놓았다. 약제배지는 병원균을 접종한 후 26±1℃ 에서 1주일 배양하였다.
살균제의 약효는 단감나무 잎 절편(직경 5 cm)을 사용하여 조사하였다. 시험에 사용한 균주는 26C 의 PDA 배지에서 1주일 배양한 것을 접종원으로 사용하였다.
01 %의 Tween-20이함유된 멸균수 50 ml으로 포자를 수확한 후, 포자의 농도를 2~3X104 conidia/ml이 되도록 조절하였다. 시험 약제의 주성분 농도는 0.2, 1, 2, 10, 20 μg/ml이 되도록 멸균수로 희석 조제한 후 포자 현탁액 5ml과 약액 5ml을혼합하여 0.1, 0.5, 1, 5, 10 μg/ml 이 되도록 하였다. 포자 발아를 위해 26±1℃ 배양기에서 15시간 배양 한 후 발아한 포자 수를 현미경하에서 조사하였다.
단감나무 잎 절편을 1%의 차아염소산나트륨(NaOp과 70% 에틸 알코올에 침지하여 표면 소독 후 음건 후 5 mm의 상처를 유발시켰다. 약제의 예방효과는 잎 절편의 상처 부위에 포자 현탁액(lxl05 conidia ml-4) 50 μl를 떨어뜨린 후 paper disk를 올려놓고, 그 위에 공시 약제 희석액을 50 μl을 주입하여 항온항습실(26 土 1℃, RH>90%)에서 7일간 발병을 유도하였다. 치료효과는 먼저 병원균을 위의 방법으로 접종하고 paper disk을 올려놓고 1일간 26±1℃, RH>90% 이상의 항온항습실에서 감염을 유도한 후 paper disk에 약제를 50 μl 을 주입하고 7일간 발병을 유도하였다.
접종원은 균사 선단에서 직경 5 mm의 절편을 분리하여 시험약제를 처리한 잎 절편의 중앙에 접종하였다. 잎 절편은 1%의 차아염소산나트륨(NaOCI)과 70% 에틸 알코올에 침지하여 표면 소독하고 음건 후 1, 5, 10, 100 μg/ml의 약액에 30분간 침지하여 건조시켜 사용하였다. 발병은 항온 항습실(26±1℃, RH >90%)에서 7일간 유도하였고, 형성된 병반의 직경을 측정하여 아래 식으로 방제가를 구하였으며, 각 처리는 3반복으로 실시하였다.
포자발아는 발아관이 포자의 폭과 길이보다 긴 것을 발아한 것으로 간주하였고, 100개씩 3반복으로 2회 조사하였다. 조사중 포자가 발아하는 것을 억제하기 위하여 2℃ 의 저장고에 보관하며 조사하였다.
약제의 예방효과는 잎 절편의 상처 부위에 포자 현탁액(lxl05 conidia ml-4) 50 μl를 떨어뜨린 후 paper disk를 올려놓고, 그 위에 공시 약제 희석액을 50 μl을 주입하여 항온항습실(26 土 1℃, RH>90%)에서 7일간 발병을 유도하였다. 치료효과는 먼저 병원균을 위의 방법으로 접종하고 paper disk을 올려놓고 1일간 26±1℃, RH>90% 이상의 항온항습실에서 감염을 유도한 후 paper disk에 약제를 50 μl 을 주입하고 7일간 발병을 유도하였다.
끝으로 dichlofluanid 는 모든 공시 균주에 대해서 예방효과가 나타나지 않았다. 치료효과는 병원균을 먼저 접종 후 발병이 적합한 항온 항습 실에서 1일간 병원균의 감염을 유도한 뒤 paper disk에 약제를 주입 후 7일간 발병을 유도시켜 치료효과를 조사한 결과는 다음과 같다(표 6). 10μg/ml의 처리 농도에서 92.
5, 1, 5, 10 μg/ml 이 되도록 하였다. 포자 발아를 위해 26±1℃ 배양기에서 15시간 배양 한 후 발아한 포자 수를 현미경하에서 조사하였다. 포자발아는 발아관이 포자의 폭과 길이보다 긴 것을 발아한 것으로 간주하였고, 100개씩 3반복으로 2회 조사하였다.
포자 발아를 위해 26±1℃ 배양기에서 15시간 배양 한 후 발아한 포자 수를 현미경하에서 조사하였다. 포자발아는 발아관이 포자의 폭과 길이보다 긴 것을 발아한 것으로 간주하였고, 100개씩 3반복으로 2회 조사하였다. 조사중 포자가 발아하는 것을 억제하기 위하여 2℃ 의 저장고에 보관하며 조사하였다.
대상 데이터
theae SP-3을 4℃에 보관하면서 사용하였다. 또한 대조균은 일본의 단감나무(日野, 1962; 野島 1928; 野島 1929)와 차나무 윤반병의 병원균인 P. theae MAFF 7520022)- P. longiseta MAFF 752001 을 일본 농업생물자원 연구소로부터 분양 받아 사용하였다. 시험에 사용한 약제는 국내에 등록된 살균제 32종을 대상으로 고농도에 의한 1차 약제 선발 시험결과 살균 효과가 인정된 benomyl(50%, WP), chlorothalonil(75%, WP), te- buconazole(25%/ WP), iminoctadine-triacetate(25%, EC), fluazinam(50%, WP), fludioxonil(20%, EC), prochloraz (25%, EC) 및 dichlofluanid(50%, WP) 등 8종의 약제를 대상으로 하였다(표 1).
본 시험에 사용한 접종원은 4℃ 에 보관한 P. theae SP-3균주를 potato dextrose agar (PDA) 배지에 접종하여 26 ± 1℃ 에서 1 주일 배양한 것을 사용하였다. 균사생장 억제시험을 위하여 약제를 첨가하여 만든 배지(약제배지)는 멸균된 PDA를 50~60℃까지 식힌 후 시험약제의 최종 농도가 10μg/ml이 되도록 각 약제를 첨가한 다음 잘 혼합하여 일회용 Petri dish(직경 9 cm)에 15ml이씩 분주하여 굳힌 후 사용하였다.
본 실험에 사용한 균주는 단감나무 둥근갈색무늬병이 발생한 잎의 병반부에서 분리 동정한 P. theae SP-3을 4℃에 보관하면서 사용하였다. 또한 대조균은 일본의 단감나무(日野, 1962; 野島 1928; 野島 1929)와 차나무 윤반병의 병원균인 P.
조사하였다. 시험에 사용한 균주는 26C 의 PDA 배지에서 1주일 배양한 것을 접종원으로 사용하였다. 접종원은 균사 선단에서 직경 5 mm의 절편을 분리하여 시험약제를 처리한 잎 절편의 중앙에 접종하였다.
longiseta MAFF 752001 을 일본 농업생물자원 연구소로부터 분양 받아 사용하였다. 시험에 사용한 약제는 국내에 등록된 살균제 32종을 대상으로 고농도에 의한 1차 약제 선발 시험결과 살균 효과가 인정된 benomyl(50%, WP), chlorothalonil(75%, WP), te- buconazole(25%/ WP), iminoctadine-triacetate(25%, EC), fluazinam(50%, WP), fludioxonil(20%, EC), prochloraz (25%, EC) 및 dichlofluanid(50%, WP) 등 8종의 약제를 대상으로 하였다(표 1).
데이터처리
are the mean of 6 replications. Values with the same letter indicates insignificantly different(P-0.05)according to Duncan's multiple range test.
성능/효과
치료효과는 병원균을 먼저 접종 후 발병이 적합한 항온 항습 실에서 1일간 병원균의 감염을 유도한 뒤 paper disk에 약제를 주입 후 7일간 발병을 유도시켜 치료효과를 조사한 결과는 다음과 같다(표 6). 10μg/ml의 처리 농도에서 92.5% 이상 높은 치료 효과를 보인 약제는 fludioxonil> 비롯하여 fluazinam, prochloraz, tebuconazole 및 iminoctadine - triacetate등 5종이었다. 그 중 SP-3 균주에가장 높은 치료효과인 97.
반면 chlorothalonile MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서 각각 59%와 52%의 방제효과를 보였으나, SP-3에 대해서는 33%의 균사 생장 억제 효과를 보였다. Benomyle MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서 50% 미만, SP-3에 대해서는 균사 생장을 전혀 억제하지 못하였고, dichlofluanide 모든 병원균에 대해서 10% 내외의 저조한 균사생장 억제율을 보였다. 이는 단감재배 시 문제가 되는 탄저병과 흰가루병 방제를 위해서 농가에서 1년에 3~5번을 사용하고 있는 chlorothalonil과 benomyl이 둥근갈색무늬병균에 대한 균사 생장 억제율이 대조 균주로 사용한 MMF 752002와 MAFF 752001보다 낮은 원인으로 추정되므로, 이들 약제에 대한 병원균주의 약제저항성 발현 여부를 조사할 필요가 있다고 판단되었다.
PDA 평판배지에서 P. theae SP-3와 대조 균주에 대한 균사 생장 억제 효과가 좋았던 iminoctadine-triacetate는 단감 잎을 이용한 검정에서도 각 균주에 대한 발병 억제력이 각각 94.0, 93.5, 93.3%로 높게 나타났다(표 4).
2%의 발병 억제력을 보였다. PDA 평판배지에서 균사 생장 억제력이 낮았던 bemomyle SP-3균주에 대해서는 약 7.2%로 발병억제 효과가 없는 반면, 대조균인 MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서는 41.7%와 45.5%의 발병 억제율을 보여 공시 균주 간의 차이를 보였다. Chlorothalonil은 실험한 모든 균주에 대하여 발병억제 효과가 매우 저조하였다.
Sterol 합성 저해제(ster이 demethylation inhibition)이며 종자 소독제인 prochloraz와 fludioxonil, 그리고 tebu- conazole, fluazinam 및 iminoctadine-triacetate-c; 대조 균주에 대한 균사생육억제 효과가 100% 이었고, 둥근 갈색 무늬 병원균 P. theae SP-3에 대해서도 86~100%로 높은균사생장 억제 효과를 나타내었다. 반면 chlorothalonile MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서 각각 59%와 52%의 방제효과를 보였으나, SP-3에 대해서는 33%의 균사 생장 억제 효과를 보였다.
Tebuconazole, fludioxonil 및 fluazinam도 모든 균주에 대하여 90.5~94.7%의 높은 발병 억제력을 보였다. 그러나 procHoraz 경우 SP-3에 대해서 발병억제력이 다소 낮은 86.
5% 이상 높은 치료 효과를 보인 약제는 fludioxonil> 비롯하여 fluazinam, prochloraz, tebuconazole 및 iminoctadine - triacetate등 5종이었다. 그 중 SP-3 균주에가장 높은 치료효과인 97.2%를 보인 약제는 iminoctadine - triacetate이었고, 대조 균주에 가장 높은 치료효과인 97.5%를 보인 약제는 pTOchloraz이었으나 약제간에 유의차는 인정할 수 없었다. 반면 benomyl과 dichlofluanid는 둥근 갈색 무늬 병균인 SP- 3에 대하여 예방효과뿐만 아니라 치료 효과도 없었으며, 대조 균주에 대해서도 10% 미만으로 치료 효과가 없는 것으로 조사되었다.
5%를 보인 약제는 pTOchloraz이었으나 약제간에 유의차는 인정할 수 없었다. 반면 benomyl과 dichlofluanid는 둥근 갈색 무늬 병균인 SP- 3에 대하여 예방효과뿐만 아니라 치료 효과도 없었으며, 대조 균주에 대해서도 10% 미만으로 치료 효과가 없는 것으로 조사되었다. 그러나 현재 일본에서는 Pestalotiopsis속인 P.
theae SP-3에 대해서도 86~100%로 높은균사생장 억제 효과를 나타내었다. 반면 chlorothalonile MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서 각각 59%와 52%의 방제효과를 보였으나, SP-3에 대해서는 33%의 균사 생장 억제 효과를 보였다. Benomyle MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서 50% 미만, SP-3에 대해서는 균사 생장을 전혀 억제하지 못하였고, dichlofluanide 모든 병원균에 대해서 10% 내외의 저조한 균사생장 억제율을 보였다.
후속연구
theae SP-3와 대조 균주의 분생 포자 발아 억제 효과를 검정한 결과는 다음과 같다(표 4). SP-3 균주에 대해 포자 발아 억제가 우수한 약제로는 fludioxonil, fluazinam, prochloraz, tebuconazole 및 iminoctadine-triacetate으로 1.0 μg/ml에서 80%이상의 포자 발아를 억제하는 효과를 나타낸 반면, benomyl의 경우 포자 발아 억제율이 약 40%, chlorothalonil 60%, dichlofluanid는 약 30%로 낮았는데, 이들 약제는 균사 생장 최소 억제 농도도 높게 나타난 것으로 추후 둥근갈색무늬병 방제를 위한 포장시험에서 보다 세밀한 관찰이 있어야 될 것으로 본다.
반면 benomyl과 dichlofluanid는 둥근 갈색 무늬 병균인 SP- 3에 대하여 예방효과뿐만 아니라 치료 효과도 없었으며, 대조 균주에 대해서도 10% 미만으로 치료 효과가 없는 것으로 조사되었다. 그러나 현재 일본에서는 Pestalotiopsis속인 P. theae 와 P. Zcmgisehz의 방제약제로 사용되고 있으므로 추후 포장에서 나타나는 약제 반응을 면밀히 검토해볼 필요는 있을 것으로 생각한다.
Benomyle MAFF 752002와 MAFF 752001에 대해서 50% 미만, SP-3에 대해서는 균사 생장을 전혀 억제하지 못하였고, dichlofluanide 모든 병원균에 대해서 10% 내외의 저조한 균사생장 억제율을 보였다. 이는 단감재배 시 문제가 되는 탄저병과 흰가루병 방제를 위해서 농가에서 1년에 3~5번을 사용하고 있는 chlorothalonil과 benomyl이 둥근갈색무늬병균에 대한 균사 생장 억제율이 대조 균주로 사용한 MMF 752002와 MAFF 752001보다 낮은 원인으로 추정되므로, 이들 약제에 대한 병원균주의 약제저항성 발현 여부를 조사할 필요가 있다고 판단되었다. 이와 유사한 연구결과로서 堀川 (1982)이 P.
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