본 연구의 목적은 염화수은이 간 미세구조에 미치는 독성에 대한 키토산의 억제효과를 연구하는데 있다. 염화수은 단독 투여군(A군)에는 $HgCl_2$ (5.0 mg/kg)만을 구강투여하였다. 그리고 키토산과 염화수은 동시투여군(B군)에는 키토산 (3% solution, 2times/day)과 $HgCl_2$, (5.0mg/kg)을 구강투여하였다. 그러고 각 군은 24, 48, 72, 96 시간대에 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. A군 핵막은 다소 불규칙한 상태를 유지하였고, 사립체는 내외막이 파괴된 채로 관찰되었다. 과립형질내세망은 층판구조가 파괴되었고, 무과립형질내세망은 세포질 전체에 퍼져있는 것이 관찰되었다. 2. B군 핵막은 비교적 원형을 유지하였고, 사립체는 내외 막의 구분이 일부에서 불분명하게 관찰되었지만, 전자밀도가 높게 관찰되었다. 과립형질내세망의 내강 팽대가 앞시간대에서 관찰되었지만 전형적인 층판구조를 형성하였다. 그리고 무과립형질내세망이 세포질주변에서 관찰되었다. 이상의 결과는 키토산이 마우스 간중독을 야기한 염화수은의 독성을 감소시키는 것으로 사료된다.
본 연구의 목적은 염화수은이 간 미세구조에 미치는 독성에 대한 키토산의 억제효과를 연구하는데 있다. 염화수은 단독 투여군(A군)에는 $HgCl_2$ (5.0 mg/kg)만을 구강투여하였다. 그리고 키토산과 염화수은 동시투여군(B군)에는 키토산 (3% solution, 2times/day)과 $HgCl_2$, (5.0mg/kg)을 구강투여하였다. 그러고 각 군은 24, 48, 72, 96 시간대에 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. A군 핵막은 다소 불규칙한 상태를 유지하였고, 사립체는 내외막이 파괴된 채로 관찰되었다. 과립형질내세망은 층판구조가 파괴되었고, 무과립형질내세망은 세포질 전체에 퍼져있는 것이 관찰되었다. 2. B군 핵막은 비교적 원형을 유지하였고, 사립체는 내외 막의 구분이 일부에서 불분명하게 관찰되었지만, 전자밀도가 높게 관찰되었다. 과립형질내세망의 내강 팽대가 앞시간대에서 관찰되었지만 전형적인 층판구조를 형성하였다. 그리고 무과립형질내세망이 세포질주변에서 관찰되었다. 이상의 결과는 키토산이 마우스 간중독을 야기한 염화수은의 독성을 감소시키는 것으로 사료된다.
This study aims demonstrate the effect of chitosan, one of the natural chelator, on the ultrastructural changes in the mouse liver caused by $HgCl_2$. The experimental group was divided in two groups; group A and group B. The group A administrated $HgCl_2$ (5.0 mg/kg) to the or...
This study aims demonstrate the effect of chitosan, one of the natural chelator, on the ultrastructural changes in the mouse liver caused by $HgCl_2$. The experimental group was divided in two groups; group A and group B. The group A administrated $HgCl_2$ (5.0 mg/kg) to the oral. The group B treated with $HgCl_2$ (5.0 mg/kg) and chitosan (3%) solution, 2 times/day). Each group was observed 24, 48, 72 and 96 hours after treated $HgCl_2$ and chitosan. Histological changes of the livers were investigated by electron microscope. 1. Croup A Nuclear membrane was shrinked. The inner and outer membrane of the mitochondria were dilated. Destruction of lamellae of rough endoplasmic reticulum showed. Smooth endoplasmic reticulum showed over cytoplasm. 2. Group B Nuclear membrane was more rounded, The cristae of the mitochondria were almost normal shape and electron-density showed compacted. Dilation of inner cavity of rough endoplasmic reticulum showed at the pre-time but formed typical lamellae at the 48Hrs. Smooth endoplasmic reticulum showed over cytoplasm. Therefore, we concluded that chitosan has significantly protective effects in liver to harmful $HgCl_2$.
This study aims demonstrate the effect of chitosan, one of the natural chelator, on the ultrastructural changes in the mouse liver caused by $HgCl_2$. The experimental group was divided in two groups; group A and group B. The group A administrated $HgCl_2$ (5.0 mg/kg) to the oral. The group B treated with $HgCl_2$ (5.0 mg/kg) and chitosan (3%) solution, 2 times/day). Each group was observed 24, 48, 72 and 96 hours after treated $HgCl_2$ and chitosan. Histological changes of the livers were investigated by electron microscope. 1. Croup A Nuclear membrane was shrinked. The inner and outer membrane of the mitochondria were dilated. Destruction of lamellae of rough endoplasmic reticulum showed. Smooth endoplasmic reticulum showed over cytoplasm. 2. Group B Nuclear membrane was more rounded, The cristae of the mitochondria were almost normal shape and electron-density showed compacted. Dilation of inner cavity of rough endoplasmic reticulum showed at the pre-time but formed typical lamellae at the 48Hrs. Smooth endoplasmic reticulum showed over cytoplasm. Therefore, we concluded that chitosan has significantly protective effects in liver to harmful $HgCl_2$.
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문제 정의
본 실험에서는 염화수은이 흰쥐의 간에 미치는 독성에 대하여 천연착화제인 키토산의 방어 효과를 미 세구조의 변화를 통해 알아보고자 하였다.
제안 방법
1 M cacodylate buffer, 4°C)에서 2시간 전고정하였고, 동일 완충액을 사용하여 15분씩 3회 수세하였다. 1% Osmium tetroxide (OsO4)용액으로 2시간 후 고정한 후, 동일 완충액으로 15분씩 3회 수세하였다. 상승농도순의 ethanol 계열하에서 탈수하고 propylene oxide를 사용하여 치환하였다.
상승농도순의 ethanol 계열하에서 탈수하고 propylene oxide를 사용하여 치환하였다. Epon mixure를 만들어 Propylene oxide와 1:1, 1: 2로 3시간씩 침투시켰으며 Epon mixure 원액에서 overnight 후 oven에 넣어 37°C에서 12시간, 45°C에서 12시간, 60°C에서 48시간 열중합하여 포매하였다. Epon block을 1 pm로 박절하여 1%.
실험군은 수은중독 후 일반 식이만을 공급한 군(A군), 수은중독 후 키토산(3%)을 1일 2회 구강투여한 군(B군)으로 구분하여 각 군당 20마리씩 총 40마리를 사용하였다. HgCl2 투여는 HgCl2를 2차증류수에 희석시켜 5.0mg/kg을 구강투여 하였고, 키토산(3% solution)은 생리 식염수에 희석시켜 구강투여하였다. 각 실험군은 24, 48, 72 그리고 96시간 간격으로 간을 1 mm3크기로 세절하여 2.
Epon block을 1 pm로 박절하여 1%.Toluidine blue로 염색한 후, 광학현미경으로 관찰하여 특정부위를 정하고 삭정한 뒤 Diatome을 부착시킨 Ultramicrotome (MT-7000)으로 60nm의 초박절편을 만들어 Uranyl acetate와 Lead citrate로 이중염색하여 투과전자현미경 (JEOL, JEM-100CXII)으로 가속전압 80 kV 하에서 관찰하였다.
0mg/kg을 구강투여 하였고, 키토산(3% solution)은 생리 식염수에 희석시켜 구강투여하였다. 각 실험군은 24, 48, 72 그리고 96시간 간격으로 간을 1 mm3크기로 세절하여 2.5% glutaraldehyde용액 (pH7.4, 0.1 M cacodylate buffer, 4°C)에서 2시간 전고정하였고, 동일 완충액을 사용하여 15분씩 3회 수세하였다. 1% Osmium tetroxide (OsO4)용액으로 2시간 후 고정한 후, 동일 완충액으로 15분씩 3회 수세하였다.
투여군에서도 24시간의 핵막은 비교적 원형을 유지하였고, 사립체는 내외막의 구분이 일부에서 불분명하게 관찰되었다. 과립형 질내세망의 내강 팽대가 관찰되었지만 층판구조를 형성하였다. 그리고 무과립 형질내세망이 세포질주변에서 관찰되었다(Fig.
1% Osmium tetroxide (OsO4)용액으로 2시간 후 고정한 후, 동일 완충액으로 15분씩 3회 수세하였다. 상승농도순의 ethanol 계열하에서 탈수하고 propylene oxide를 사용하여 치환하였다. Epon mixure를 만들어 Propylene oxide와 1:1, 1: 2로 3시간씩 침투시켰으며 Epon mixure 원액에서 overnight 후 oven에 넣어 37°C에서 12시간, 45°C에서 12시간, 60°C에서 48시간 열중합하여 포매하였다.
대상 데이터
본 실험에 사용한 실험동물은 대한실험동물센터 (8〜10주령, 27 g±2g)에서 분양받은 외관상 건강한 ICR계 웅성 마우스를 사용하였다. Mouse를 Polycar bonate cage (40 x 25 x 17 cm)에 담아 온도 23 ± 2°C, 습도 50±5%의 환경조건을 유지시킨 실험실의 animal cage(HB-404AS)에서 사육하였다. 채광은 12시간 주기로 하였고, 먹이와 음용수는 제한없이 공급하였다.
본 실험에 사용한 실험동물은 대한실험동물센터 (8〜10주령, 27 g±2g)에서 분양받은 외관상 건강한 ICR계 웅성 마우스를 사용하였다. Mouse를 Polycar bonate cage (40 x 25 x 17 cm)에 담아 온도 23 ± 2°C, 습도 50±5%의 환경조건을 유지시킨 실험실의 animal cage(HB-404AS)에서 사육하였다.
실험군은 수은중독 후 일반 식이만을 공급한 군(A군), 수은중독 후 키토산(3%)을 1일 2회 구강투여한 군(B군)으로 구분하여 각 군당 20마리씩 총 40마리를 사용하였다. HgCl2 투여는 HgCl2를 2차증류수에 희석시켜 5.
성능/효과
2). 48시간의 핵막도 비교적 원형을 나타내었고, 사립체는 정상적인 형태를 보였다. 그리고 과립형질내세망의 층판구조가 핵주변에서 관찰되었고, 무과립형질내세망이 세포질의 일부에서 관찰되었다(Fig.
5). 96시간의 핵막은 비교적 원형을 유지하였고, 사립체의 일부는 내외막이 파괴된 것이 관찰되었다. 과립형질내세망은 층판 구조를 형성하였다(Fig.
본 실험의 키토산과 HgCl2 투여군에서도 24시간의 핵막은 비교적 원형을 유지하였고, 사립체는 내외막의 구분이 일부에서 불분명하게 관찰되었다. 과립형 질내세망의 내강 팽대가 관찰되었지만 층판구조를 형성하였다.
이상의 결과로 보아 키토산 투여가 간세포에 독성을 야기하는 염화수은을 착화하여 간에서 다른 기관으로 이동시키거나, 신장을 통해 체외로 배설하는 효과가 있는 것으로 사료된다.
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