문제 정의

• 귀뚜라미는 지방(오메가-3, 오메가-6 등 다가 불포화지방산을 다수 함유), 단백질과 키틴/키토산을 높은 농도로 함유하였기에⁽²⁾간보호효과 즉 급성간염 유발 시 보호효과, 과산화지질(노화)억제 효과와 지구력테스트를 통한 강정효과를 조사하여 앞으로 건강보조식품으로 개발하고자 한다.
• 또한 계란의 고소한 맛의 증가와 생계란의 비린 맛 감소를 발표한 바 있다. 이와 같은 일련의 연구로 귀뚜라미의 생리활성⁽³⁾을 재고해 보고 새로운 용도를 모색하고자 귀뚜라미 수용성 및 메탄올(알콜) 추출물의 간기능 개선에 관한 실험을 착수하였다.

가설 설정

• 1)Values represent mean + S.D. of 15 mice per each group. CC14 was injected intraperitoneally, and test materials were administered intraperitoneally at 30 min after iiyection of CC1₄.
• 1)Values represent mean±S.D. of 15 mice per each group. CC1₄ was injected intraperitoneally, and test materials were administered intraperitoneally at 30 min after injection of CC1₄.

• 2)Significantly different from negative control(CCl₄ group) at p<0.01 by Student's t-test.
• 2)Significantly different from positive control (silymarine group) at p<0.05 by Student's t-test.
• 분석결과의 통계는 실험군 당 평균치와 표준편차(오차)로 계산하였고 군간의 차이는 Student's t-test를 이용하였다.

이론/모형

• 귀뚜라미 추출물의 항피로 효과의 측정은 Toshitsugu Mori- ura의 급성체중부하 강제 수영법⁽⁸⁾를 실시하여 항피로 능력을 측정하였다. 즉, 시료 100 mg/kg 및 200 mg/kg과 tocopherol(100mg/kg)을 1 일 1회 3일간 연속하여 경구투여하고 최종 시료투여 후 24시간만에 마우스의 꼬리에 체중에 따른 tail factor를 부착시킨 다음 35℃의 항온조에서 강제 수영을 관찰하였다.
• 단백질 양은 bovine serum albumin을 대조로 하여 Brad­ ford 방법으로 595㎚에서 흡광도를 측정하여 결정하였다⁽⁹⁾.
• 15분간 원심분리하여 혈청을 얻었다. 영동제약 GOT, GPT, LDH kit를 사용하여 혈청 중의 GOT, GPT 및 LDH 활성을 Reitman-Frankel의 방법⁽⁵⁾에 의하여 측정하였으며 간보호 효과(protective potency)는 다음과 같이 산출하였다.

성능/효과

• 4(IU/L serum)로 감소되어, 귀뚜라미 메탄올 추출물은 대조구에 비해 74, 50, 101%의 간독성 회복효과를 나타냄을 알 수 있었다. CCL를 복강투여함으로써 증가된 귀뚜라미 물추출물(20 mg/kg)을 복강투여시에도 유의적인 감소수치를 나타내었다. 귀뚜라미 물추출물과 메탄올 추출물의 GOT, GPT, LDH치 저하효과가 silymarin보다 다소 우수하였다(Table 1).
• 96% 감소하였다. 귀뚜라미 메탄올 추출물의 지질과산화 억제효과는 silymarin(2 mg/kg)을 투여한 것보다 다소 좋음을 알수가 있었다. 사염화탄소(CC₁D에 의한 세포막 손상의 주된 결과는 지질과산화로 활성산소종(reactive oxygen species: o₂ H₂O₂,· OH)에 의한 인지질막에 다량 함유되어 있는 불포화지방산{polyunsaturated fatty acid(PUFA)}의 수소원자를 제거함으로써 지질과산화의 연쇄반응이 유발되고 지방산사슬에서 carbon radical이 분자 재배열을 일으켜 conjugated diene을 형성 후 peroxyl radical(ROO·)을 생성, 수소원자와 결합하여 lipid hydroperoxide를 생성되는 데 lipid hydroper-oxide는 분해되어 maliondialdehyde(MDA) 등의 알데히드를 생성한다^(10,11).
• CCL를 복강투여함으로써 증가된 귀뚜라미 물추출물(20 mg/kg)을 복강투여시에도 유의적인 감소수치를 나타내었다. 귀뚜라미 물추출물과 메탄올 추출물의 GOT, GPT, LDH치 저하효과가 silymarin보다 다소 우수하였다(Table 1).
• 귀뚜라미 추출물의 시료를 마우스에 연속 경구투여 후, 강제 수영을 관찰한 결과 대조군의 평균수영시간은 10.6분 분포를 보였다. 물 추출물 및 메탄올 추출물 투여시 항피로 효과를 살펴보면, 물 추출물의 경우는 100mg/kg 투여시 16.
• 4(IU/L serum)으로 증가되었다. 귀뚜라미의 메탄올 추출물(20 mg/kg)을 복강투여한 군에서는 GOT, GPT와 LDH 수치가 각각 74.0, 132.6, 272.4(IU/L serum)로 감소되어, 귀뚜라미 메탄올 추출물은 대조구에 비해 74, 50, 101%의 간독성 회복효과를 나타냄을 알 수 있었다. CCL를 복강투여함으로써 증가된 귀뚜라미 물추출물(20 mg/kg)을 복강투여시에도 유의적인 감소수치를 나타내었다.
• 급성간염에 대한 귀뚜라미의 수용성 및 알콜추출물이 미치는 영향을 조사하고자 사염화탄소 처리로 간세포의 손상으로 혈청으로 유리되는 GOT, GPT와 LDH 수치가 각각 238.3, 260.8과 1062.4(IU/L serum)으로 증가되었다. 귀뚜라미의 메탄올 추출물(20 mg/kg)을 복강투여한 군에서는 GOT, GPT와 LDH 수치가 각각 74.
• 또한 간의 독성물질 투입시 활성화되어 해독에 관여하는 대표적인 효소인 글루타치온 에스 트랜스퍼라제(glutathione S-transferases)⁽¹²⁾의 활성을 사염화탄소 유발 30분 후 귀뚜라미 추출액을 Table 2와 같이 투여했을 때 수용성 추출물에서 63%의 효소활성 증가를 보여주었다. 귀뚜라미의 물 또는 알콜 추출물의 경우 TBARS의 비율이 올리브 투여군을 대조로 한 것보다 더 낮은 비율을 나타내는 데 귀뚜라미는 잡식성으로 사람이 먹다 버린 음식 찌꺼기(상한 음식도 포함)를 먹거나 풀섶에 사는 벌레 및 풀을 먹으면서 생존·번식한 관계로 아마도 귀뚜라미추출물 중에 과산화지질 분해력이 우수한 것이 포함되었을 것으로 사려되어질 수 있다.
• 6분 분포를 보였다. 물 추출물 및 메탄올 추출물 투여시 항피로 효과를 살펴보면, 물 추출물의 경우는 100mg/kg 투여시 16.2 분, 200mg/kg 투여시 255분, 알콜 추출물의 경우에도 100mg/kg 투여시 16.0분, 200mg/kg 투여시 33.6분으로 현저한 수영시간 증가를 보여 매우 유의성 있는 항피로 효과를나타내었다. 특히 메탄올 추출물(200mg/kg) 투여시 대조군에 비하여 3배 이상의 수영시간 연장효과를 보여 강력한 항 피로효과를 보였다(Fig.
• 사염화탄소(CC₁D에 의한 세포막 손상의 주된 결과는 지질과산화로 활성산소종(reactive oxygen species: o₂ H₂O₂,· OH)에 의한 인지질막에 다량 함유되어 있는 불포화지방산{polyunsaturated fatty acid(PUFA)}의 수소원자를 제거함으로써 지질과산화의 연쇄반응이 유발되고 지방산사슬에서 carbon radical이 분자 재배열을 일으켜 conjugated diene을 형성 후 peroxyl radical(ROO·)을 생성, 수소원자와 결합하여 lipid hydroperoxide를 생성되는 데 lipid hydroper-oxide는 분해되어 maliondialdehyde(MDA) 등의 알데히드를 생성한다^(10,11). 본 실험에서 귀뚜라미 수용성 및 메탄올 추출물의 투여에 의해서 TBARS의 생성을 정상군 대비 40%이상 억제함을 보였다.
• 미치는 영향은 Table 2에 나타내었다. 사염화탄소 투여에 의하여 간독성이 유발되어 지질과산화물이 14% 증가됨을 알 수 있었다. 즉 사염화탄소 투여로 증가된 TBARS 함량은 419.
• 6분으로 현저한 수영시간 증가를 보여 매우 유의성 있는 항피로 효과를나타내었다. 특히 메탄올 추출물(200mg/kg) 투여시 대조군에 비하여 3배 이상의 수영시간 연장효과를 보여 강력한 항 피로효과를 보였다(Fig. 3). 대조 단일 약물인 a-tocopherol acetate(100 mg/kg)의 2배 투여량인 귀뚜라미의 조추출물 (200mg/kg)에서 거의 대등한 항피로 효과를 나타낸 것은 토코페롤이 단일물질임을 감안할 때 a-tocopherol acetate에 비해 다소 떨어지지만 상당한 항 피로 효과를 나타내었다고 할수 있다.