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문제 정의
- 국내에서는 Azoxystrobin수화제가 가장 효과적이라는 보고도 있다(김과 남, 1999). 본 시험은 딸기탄저병에 효과적인 약제의 선발과 이의 적용방법을 구명하여 농가에서 활용할 수 있는 방제방법을 개발코자 수행하였다.
제안 방법
- 1997-2000년까지 경북 청도, 경주, 고령에서 탄저병 증상을 보이는 포기를 채집하여 표면의 흙을 세척하고 크라운 부위를 세로로 절개한 후 건전조직과 이병조직의 경계부분을 취해 표면살균하고 Penicillin-G와 Streptomycin-S를 각각 500 ppm 첨가한 Potato DextroseAgar(PDA)배지에 치상하여 탄저병균을 분리하였다. 분리된 균은 PDA사면배지에 접종하여 보관하면서 실험에 사용하였다.
- 마지막 조사후 외관상 건전하게 보이는 포기를 모두 뽑아 크라운 부위를 절개하여 감염여부를 조사하였다. 2000년에는 위의 실험에서 선발된 Azoxystrobin 수화제를 1 g/l농도로 희석하여 침지시간 및 약제의 처리농도를 시험하였다. 침지시간은 Azoxystrobin 희석액에 각각 10, 30, 60분씩 침지 후 각 구당 200주씩 3반복으로 정식하여 발병정도를 관찰하였으며 침지농도는 Azoxystrobin수화제를 lg/250ml, 1 g/500 ml, lg/l, 000ml로 희석하여 딸기묘를 10분간씩 침지한 후 구당 600주씩 단구제로 정식후 발병을 관찰하였다.
- 75%, WP)수화제를 각각 1 mg/mZ의 농도로 첨가하여 지름 87 mm의 페트리디쉬에 분주 후 Colletotrichum sp. S7균주를 접종하고 25ºC항온기에서 7일간 배양후 균사의 생장정도를 측정하였다.
- aStrawberry plants were submerged in Azoxystrobin WP for 10, 30 and 60 minutes, respectively, before planting.
- S7균주를 7일간 배양후 형성된 균총의 선단에서 지름 5 mm의 균사조각을 떼어내어 접종에 사용하였다. 각 약제의 예방효과를 검정하기 위해Carbendazim 등 5개의 약제를 각각 1, 000배로 희석한 현탁액에 여홍품종의 딸기 잎을 침지후 풍건하고 위에서 준비한 균사조각을 접종하였다. 접종한 딸기의 잎은 습실처리된 용기에 넣어 실온에 보관하면서 병반의 발현정도를 조사하였다.
- 엽면살포효과는 경주와 고령의 농가에서 Tolclofos-methyl, Benomyl, Propineb 및 Tricyclazole수화제를 1 g/l 농도로 정식 직후부터 10일 간격으로 4회 살포하였으며, 마지막 살포하고 10일 후에 탄저병에 의해 시들거나 고사된 포기의 수를 조사하였다. 관주효과는 경주의 포장에서 정식후 10일 간격으로 주당 약 70mZ씩 4회 토양에 관주하였으며 마지막 처리 10일 후에 발병율을 조사하였다. 침지처리에 의한 효과 검정은 경상북도농업기술원 시험포장에서 수행하였다.
- 1999년의 포장시험에서는 농가시판용 딸기묘를 구입하여 Tricyclazole, Azoxystrobin수화제를 1 g/l의 농도로 희석하여 30분간 침지후 200포기씩 단구제로 하우스에 정식하고 발병율을 조사하였다. 마지막 조사후 외관상 건전하게 보이는 포기를 모두 뽑아 크라운 부위를 절개하여 감염여부를 조사하였다. 2000년에는 위의 실험에서 선발된 Azoxystrobin 수화제를 1 g/l농도로 희석하여 침지시간 및 약제의 처리농도를 시험하였다.
- 포장실험에서는 선발한 약제를 엽면살포, 토양관주, 침지 등의 세가지 방법으로 처리하였다. 엽면살포효과는 경주와 고령의 농가에서 Tolclofos-methyl, Benomyl, Propineb 및 Tricyclazole수화제를 1 g/l 농도로 정식 직후부터 10일 간격으로 4회 살포하였으며, 마지막 살포하고 10일 후에 탄저병에 의해 시들거나 고사된 포기의 수를 조사하였다. 관주효과는 경주의 포장에서 정식후 10일 간격으로 주당 약 70mZ씩 4회 토양에 관주하였으며 마지막 처리 10일 후에 발병율을 조사하였다.
- 각 약제의 예방효과를 검정하기 위해Carbendazim 등 5개의 약제를 각각 1, 000배로 희석한 현탁액에 여홍품종의 딸기 잎을 침지후 풍건하고 위에서 준비한 균사조각을 접종하였다. 접종한 딸기의 잎은 습실처리된 용기에 넣어 실온에 보관하면서 병반의 발현정도를 조사하였다. 치료효과의 검정은 위에서 준비된 균총조각을 딸기잎에 접종하고 습실처리된 용기에 넣어 24시간 실온 보관하여 탄저병의 침입을 유도한 후 균사조각을 제거하고 약제를 처리하여 병징발현정도를 조사하였다.
- 접종한 딸기의 잎은 습실처리된 용기에 넣어 실온에 보관하면서 병반의 발현정도를 조사하였다. 치료효과의 검정은 위에서 준비된 균총조각을 딸기잎에 접종하고 습실처리된 용기에 넣어 24시간 실온 보관하여 탄저병의 침입을 유도한 후 균사조각을 제거하고 약제를 처리하여 병징발현정도를 조사하였다.
- 2000년에는 위의 실험에서 선발된 Azoxystrobin 수화제를 1 g/l농도로 희석하여 침지시간 및 약제의 처리농도를 시험하였다. 침지시간은 Azoxystrobin 희석액에 각각 10, 30, 60분씩 침지 후 각 구당 200주씩 3반복으로 정식하여 발병정도를 관찰하였으며 침지농도는 Azoxystrobin수화제를 lg/250ml, 1 g/500 ml, lg/l, 000ml로 희석하여 딸기묘를 10분간씩 침지한 후 구당 600주씩 단구제로 정식후 발병을 관찰하였다.
- 포장실험에서는 선발한 약제를 엽면살포, 토양관주, 침지 등의 세가지 방법으로 처리하였다. 엽면살포효과는 경주와 고령의 농가에서 Tolclofos-methyl, Benomyl, Propineb 및 Tricyclazole수화제를 1 g/l 농도로 정식 직후부터 10일 간격으로 4회 살포하였으며, 마지막 살포하고 10일 후에 탄저병에 의해 시들거나 고사된 포기의 수를 조사하였다.
대상 데이터
- 경주지역에서 채집한 딸기중 PDA배지에 서 짙은 회색의 균총과 자낭을 형성하는 Glomerella cingulata가 2균주 분리되었다. 분리된 균주 중 병원성이 강한 S7균주를 선발하여 실내약제실험에 사용하였다.
- 관주효과는 경주의 포장에서 정식후 10일 간격으로 주당 약 70mZ씩 4회 토양에 관주하였으며 마지막 처리 10일 후에 발병율을 조사하였다. 침지처리에 의한 효과 검정은 경상북도농업기술원 시험포장에서 수행하였다. 1999년의 포장시험에서는 농가시판용 딸기묘를 구입하여 Tricyclazole, Azoxystrobin수화제를 1 g/l의 농도로 희석하여 30분간 침지후 200포기씩 단구제로 하우스에 정식하고 발병율을 조사하였다.
성능/효과
- 로 동정하였다. 경주지역에서 채집한 딸기중 PDA배지에 서 짙은 회색의 균총과 자낭을 형성하는 Glomerella cingulata가 2균주 분리되었다. 분리된 균주 중 병원성이 강한 S7균주를 선발하여 실내약제실험에 사용하였다.
- 딸기탄저병의 방제방법을 개발하기 위해 버지에서 약제별 균사생장억제정도를 검정한 결과 Tricyclazole 수화제가 가장 좋은 효과를 보여 주었으나 딸기잎에 접종하여 효과를 검정하였을 때는 Azoxystrobin 수화제가 가장 좋은 효과를 보여주었다. 포장에서 방제효과는 관주 및엽면살포는 방제효과가 없었으나 Azoxystrobin수화제 1, 000 배액에 10분간 침지시 우수한 방제효과를 보여 주었고 처리시간과 처리농도간 약효의 차이는 볼 수 없었다.
- 배지에서 검정과는 달리 딸기잎에 병원균을 접종한 후 약효를 검정하였을 때 배지에서 가장 좋은 효과를 보여주었던 Tricyclazole은 예방 및 치료 효과 모두 저조하였으며 배지검정에서 효과가 거의 없었던 Azoxystrobin의 효과가 가장 좋았다(Table 2). Azoxystrobin의 배지검정시 효과가 저조한 이유로는 본 약제는 전자전달계를 저해하는 화합물로(Knight et al.
- 따라서 본 실험에서 사용한 1, 000 ppm이라는 농도는 Tricyclazole의 경우 in vitro의 실험을 수행하기에는 매우 높은 농도라고 판단되며, 더 낮은 농도에서의 실험이 요구된다. 본 실험에서 사용한 균주는 다른 약제들이 첨가된 배지에서는 생장이 가능하였는데 본 실험에서 사용한 Carbendazim, Benomyl, Propineb 등은 현재 탄저병의 방제 약제로 사용되고 있는 살균제이므로 포장에서 분리한 균주의 생육이 억제되지 않았다는 결과로 저항성 균주의 출현을 의심해 볼 수 있을 것이다. 그러나 본 실험에서 살균제의 균사생육 억제 실험에는 대표적인 균주를 가지고서 실험하였기 때문에 포장에서의 저항성 발생을 논의하기는 무리라고 생각된다.
- 경주, 청도, 고령에서 채집한 이병 딸기로부터 Colletotridwm sp를 각각 32균주, 13균주, 10균주 분리하였다. 분리된 균주는 대부분이 무성세대로 미백색에서 연회색의 기중균사가 풍부하고 배지에서 포자증을 거의 형성하지 않아 포자생성량이 매우 적은 특성을 지니고 있었다. 포자를 현미경하에서 관찰하였을 때 격막이 없고 한쪽끝이 약간 뾰족한 원통형으로 Colletotrichum sp.
- Freeman 등(1997)은 딸기탄저병의 주요 병원균인 Colletotrichum 에 대해서 Folpet을 포함한 7개의 살균제를 선발하여 실험실과 온실, 포장에서 방제효과를 실험하였다. 사용한 살균제 중에서 Prochloraz- Zn은 실험실과 온실, 포장시험 모두에서 우수한 효과를 보였다. 국내에서는 Azoxystrobin수화제가 가장 효과적이라는 보고도 있다(김과 남, 1999).
- 약제 침지시간별로는 10분, 30분, 60분 처리간 차이가 없었으며 약제침지농도에 따른 발병율 또한 차이가 없었으나 500배 이상 농도에서 잎끝이 마르는 경미한 약해가 소수 나타났다(Table 5, Table 6). 정식 포장에서 발생한 고사주를 세로로 절개하여 관찰할 경우 대부분 줄기 하부에서부터 병징이 시작된 것을 볼 수가 있으므로 정식 후 엽면살포나 관주로는 초기감염부위인 줄기 하부까지 제도달이 어려워 방제효과가 없는 것으로 생각된다.
후속연구
- 본 실험에서 사용한 균주는 다른 약제들이 첨가된 배지에서는 생장이 가능하였는데 본 실험에서 사용한 Carbendazim, Benomyl, Propineb 등은 현재 탄저병의 방제 약제로 사용되고 있는 살균제이므로 포장에서 분리한 균주의 생육이 억제되지 않았다는 결과로 저항성 균주의 출현을 의심해 볼 수 있을 것이다. 그러나 본 실험에서 살균제의 균사생육 억제 실험에는 대표적인 균주를 가지고서 실험하였기 때문에 포장에서의 저항성 발생을 논의하기는 무리라고 생각된다. 따라서 정확한 저항성 발생 정도는 포장에서 살균제에 대한 저항성 검정 실험이 지속적으로 수행된 후에 논의되어야 한다고 생각한다.
- 의 생육이 완벽하게 억제된 것은 원제의 영향이외에 수화제 안에 첨가된 다른 부제들의 영향일 가능성도 있다고 생각된다. 따라서 본 실험에서 사용한 1, 000 ppm이라는 농도는 Tricyclazole의 경우 in vitro의 실험을 수행하기에는 매우 높은 농도라고 판단되며, 더 낮은 농도에서의 실험이 요구된다. 본 실험에서 사용한 균주는 다른 약제들이 첨가된 배지에서는 생장이 가능하였는데 본 실험에서 사용한 Carbendazim, Benomyl, Propineb 등은 현재 탄저병의 방제 약제로 사용되고 있는 살균제이므로 포장에서 분리한 균주의 생육이 억제되지 않았다는 결과로 저항성 균주의 출현을 의심해 볼 수 있을 것이다.
- 7%로 지극히 낮았다. 이와 같은 무처리구에서의 낮은 발병율 때문에 공시한 살균제의 방제효과를 논하기에는 어려움이 있다고 판단되며, 포장에서 엽면살포 및 관주효과를 정확하게 판단하기 위해서는 추가 시험이 수행되어야 할 것으로 생각한다. 정식전 침지를 하였을 경우 Azoxystrobin 은 초기방제효과는 좋다가 후기로 갈수록 효과가 감소하였지만 전체적으로 비교적 높은 방제효과를 보여 실용화 가능성이 있었다(Table 4).
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