Food irradiation has been steadily increasing in many countries in line with increasing international trade and concerns about naturally occurring harmful contaminants in food. Although irradiation provides an excellent safeguard for the consumer by destroying almost 100% of harmful bacteria, it is ...
Food irradiation has been steadily increasing in many countries in line with increasing international trade and concerns about naturally occurring harmful contaminants in food. Although irradiation provides an excellent safeguard for the consumer by destroying almost 100% of harmful bacteria, it is necessary to ensure the safety of irradiated foods. This study was performed to investigate the effect of an irradiated diet on lipid peroxidation in the plasma, liver, small intestinal mucosa, and lymphocyte DNA damage in mice. Eight-week old ICR mice were assigned to two groups to receive either non-irradiated or irradiated (10 kGy) diets containing 20.38% fish powder and 6.06% sesame seeds for 4 weeks. The resulting changes in the degrees of lipid peroxidation were evaluated based on the level of plasma and liver thiobarbituric acid reactive substance (TBARS), transmission electron micrograph of jejunal mucosa, and free radical-induced oxidative DNA damage in lymphocytes, as measured by alkaline comet assay (single cell gel electrophoresis). The peroxide values of the gamma irradiated diet were measured every week, and the sample for comet assay was taken at the end of the four week experimental period. There was no significant difference in food efficiency ratio between the two groups. The peroxide values of the diet were immediately increased to 35.5% after gamma irradiation and kept on increasing during storage. After 4 weeks, no differences in tissue or plasma TBARS value were observed between the two groups, but epithelial cells of jejumum showed osmiophillic laminated membranous structures, considered as myelin figures,. The oxidative DNA damage expressed as tail moment (TM) increased 30% in the blood lymphocytes of the mice fed the irradiated diet. In conclusion, the comet assay sensitively detected differences in lymphocyte DNA damage after feeding with the irradiated diet for 4 weeks. However, in order to ensure the safety of irradiated foods, it would be more useful to conduct a long-term feeding regimen using an irradiated diet and examine the level of lipid peroxidation and the state of oxidative stress in a greater range of organs.
Food irradiation has been steadily increasing in many countries in line with increasing international trade and concerns about naturally occurring harmful contaminants in food. Although irradiation provides an excellent safeguard for the consumer by destroying almost 100% of harmful bacteria, it is necessary to ensure the safety of irradiated foods. This study was performed to investigate the effect of an irradiated diet on lipid peroxidation in the plasma, liver, small intestinal mucosa, and lymphocyte DNA damage in mice. Eight-week old ICR mice were assigned to two groups to receive either non-irradiated or irradiated (10 kGy) diets containing 20.38% fish powder and 6.06% sesame seeds for 4 weeks. The resulting changes in the degrees of lipid peroxidation were evaluated based on the level of plasma and liver thiobarbituric acid reactive substance (TBARS), transmission electron micrograph of jejunal mucosa, and free radical-induced oxidative DNA damage in lymphocytes, as measured by alkaline comet assay (single cell gel electrophoresis). The peroxide values of the gamma irradiated diet were measured every week, and the sample for comet assay was taken at the end of the four week experimental period. There was no significant difference in food efficiency ratio between the two groups. The peroxide values of the diet were immediately increased to 35.5% after gamma irradiation and kept on increasing during storage. After 4 weeks, no differences in tissue or plasma TBARS value were observed between the two groups, but epithelial cells of jejumum showed osmiophillic laminated membranous structures, considered as myelin figures,. The oxidative DNA damage expressed as tail moment (TM) increased 30% in the blood lymphocytes of the mice fed the irradiated diet. In conclusion, the comet assay sensitively detected differences in lymphocyte DNA damage after feeding with the irradiated diet for 4 weeks. However, in order to ensure the safety of irradiated foods, it would be more useful to conduct a long-term feeding regimen using an irradiated diet and examine the level of lipid peroxidation and the state of oxidative stress in a greater range of organs.
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문제 정의
화적 스트레스의 영향을 논하기는 어려우며 기존의 산화적 스트레스 측정 방법인 SOD, catalase, glutathione peroxidase 등의 효소 활성 측정법은 실험여건에 따른 다양한 요인에 의해 실험 결과의 재현성이 떨어지며, interpretation에 다분히 큰 문제를 안고 있으므로 이 외의 좀더 확실한 측정 방법이 요구된다. DNA Comet assay는 생체의 유해물질 노출정도를 평가하는 민감한 방법으로 많이 이용되어 왔으므로 본 연구에서는 방사선 조사 사료에 노출된 mouse의 임파구에서 DNA 손상정도를 측정하였 고 역시 산화적 스트레스에 의한 소장 조직의 변화를 관찰 하기 위해 조직검사를 실시하였다.
본 연구는 방사선 조사 식품의 섭취시 영양학적 안전성 검토를 위해 방사선 조사된 사료를 섭취한 mouse의 혈 청 및 조직에서 지질과산화 정도를 측정하고 DNA손상 정도 및 소장점막 조직을 검사하여 방사선 조사된 사료가 mouse의 산화적 스트레스에 미치는 영향에 대해 검토하 였으며 결과는 다음과 같다.
본 연구에서는 위에 기술한 바와 같이 여러가지 이유 로 in vivo 실험을 통해 방사선조사 사료 섭취에 따른 산 화적 스트레스를 알아보고자 하여 생체내 지질과산화물 농도를 측정하고 alkaline comet assay를 이용한 DNA손 상과 소장점막의 조직학적 검사를 통하여 방사선조사 식 품의 안전성을 검토하고자 하였다.
제안 방법
장 점막세포는 본연의 지질과산화가 잘 일어나지 않아"'', TEA값이 매우 낮으므로 미리 1시간 동안 37C 공기 중에서 배양하여 산화를 유도한 후에 배양이 끝난 소장점막 균질액 200 “1를 사용하여 간 조직액과 동일한 방법으로 TBARS를 측정하였다.
4) 에 10분씩 3회 세척하고 slide를 건조시켰다. Ethidium bromide로 핵을 형광 염색하고 cover glass로 덮은 뒤 형광현미경 (Leica, Germany) 상에서 관찰하였다. 세포 핵 image는 Komet 4.
5 M NaCl, 100 mM Na2EDTA, 10 mM Tris) 와 1% Triton X-100, 10% DMSO 혼합액에 slide를 담가 저온, 암실에서 1시간 동안 침지시켜 DNA의 이중나선 구조를 풀어주 었다. Lysis가 끝난 slide를 전기영동 탱크에 배열하고 실 험직전에 제조하여 냉장 보관하였던 전기영동 buffer (300 mM NaOH, 10 mM Na2EDTA, pH)">를 채워 40분 동안 unwinding시켜 DNA의 alkali labile sites가 드러나게 한 후 25 V/ 300 ± 3 mA의 전압을 걸어 20분간 전기영동을 실시하였다. 전기영동이 끝난 후 0.
4) 용액과 2% osmic tetraoxide (OsO4) 용액에 각각 고정시킨 후 고정된 소장조직은 50-100% ethyl alcohol 로 농도순으로 탈수하고 propylene oxide로 치환한 뒤 propylene oxide 와 epon혼합액에 침투시켰다. 그 후 epon 혼합액으로 포매 (Embod曲g) 하고 35℃, 45℃, 60℃의 항 온조에서 각각 24시간씩 방치시켜 중합을 완료하였다. 포 매된 소장조직은 초박절편기 (Ultramicrotome, LKB)를 이용하여 1 〃이의 준초박절편 (Semi-thin section) 을 만 들어 1% toluidine blue로 염색하여 광학 현미경으로 검경 부위를 결정하였다.
체중이 31-35 g인 8주령 ICR mouse 20마리를 대한실 험동물센터로부터 구입하여 온도 23 ± 2℃, 습도 50 ± 5%의 항온항습 조건을 유지하고 12시간 광주기를 유지 한 사육실에서 1주간 환경과 사료에 적응시켰다. 두 군의 평균 체중이 비슷하게 임의로 10마리씩 나누어 물과 사 료는 무제한 급여하였으며 4주 동안 사육하였다. 실험 식 이는 AIN93M diet를 기본으로 하여 참깨와 고등어분을 포함시켜 분말 사료로 제조하였다(Table 1).
비조사 사료와 방사선 조사된 사료의 POV값은 Lea법e 에 따라 측정하였다. 방사선 조사하기 직전과 조사 직후에 POV값을 측정하였고, 저장 기간별 사료의 POV값은 방사 선 조사된 사료를 진공밀봉 포장 후 냉동보관하면서 조사 후 1주일, 2주일 3주일, 4주일에 각각 측정하였다.
Ethidium bromide로 핵을 형광 염색하고 cover glass로 덮은 뒤 형광현미경 (Leica, Germany) 상에서 관찰하였다. 세포 핵 image는 Komet 4.0 image analyzing system (Kinetic Imaging, UK) 을 이용하여 분석하였다. 임파구의 DNA 손상정도는 핵으로부터 이동한 DNA 파편의 거리 (tail length, TL) 또는 tail length에 tail내 함유된 DNA비율 을 곱해준 tail moment (TM) 값을 측정하여 나타내었으며 각 시료당 2개의 slide를 만들어 각각 50개씩 총 100개의 임파구에서 DNA 손상정도를 측정하였다.
0 image analyzing system (Kinetic Imaging, UK) 을 이용하여 분석하였다. 임파구의 DNA 손상정도는 핵으로부터 이동한 DNA 파편의 거리 (tail length, TL) 또는 tail length에 tail내 함유된 DNA비율 을 곱해준 tail moment (TM) 값을 측정하여 나타내었으며 각 시료당 2개의 slide를 만들어 각각 50개씩 총 100개의 임파구에서 DNA 손상정도를 측정하였다.
따라서 생체내에서 세포의 산화 .적 스트레스를 감지할 수 있는 좀 더 유용하고 민감한 측 정방법으로 본 연구에서는 comet assay 또는 single cell gel electrophoresis (SCGE) 로 불리는 측정방법을 도입하 게 되었다. 이 방법은 이제까지 사용되었던 방법들보다 쉽게 유해자극에 대한 DNA손상을 정량적으로 측정할 수 있는 방법으로 Singh 등S 에 의해 보다 민감하게 DNA손 상을 감지해 낼 수 있는 방법으로 발전되어 그동안 많은 연구자들에 의해 암 유발원이나 독성물질에 대한 유전독 성실험에 다양하게 적용되어져 왔다.
어분은 내장을 제거한 고등어를 1 cm 두께로 통 으로 잘라 5일간 냉동건조하고 이를 분말화하여 사용하였 으며 참깨는 냉동건조된 것을 믹서에 가볍게 갈아 분말화 하여 사용하였다. 제조한 사료의 반은 대조군 식이로 하고 다른 반은 함기포장하여 10 kGy 선량에서 방사선 조 사하여 실험군 식이로 사용하였다. 체중은 1주일에 한 번 씩 측정하였으며 사료 섭취량은 매일 측정하였다.
7% LMA 용액 75 “1를 slide 위에 떨어뜨린 후 cover 읺ass를 덮어 gel이 굳을 때까지 냉장 보관하였다. 차가운 alkali lysis buffer (2.5 M NaCl, 100 mM Na2EDTA, 10 mM Tris) 와 1% Triton X-100, 10% DMSO 혼합액에 slide를 담가 저온, 암실에서 1시간 동안 침지시켜 DNA의 이중나선 구조를 풀어주 었다. Lysis가 끝난 slide를 전기영동 탱크에 배열하고 실 험직전에 제조하여 냉장 보관하였던 전기영동 buffer (300 mM NaOH, 10 mM Na2EDTA, pH)">를 채워 40분 동안 unwinding시켜 DNA의 alkali labile sites가 드러나게 한 후 25 V/ 300 ± 3 mA의 전압을 걸어 20분간 전기영동을 실시하였다.
제조한 사료의 반은 대조군 식이로 하고 다른 반은 함기포장하여 10 kGy 선량에서 방사선 조 사하여 실험군 식이로 사용하였다. 체중은 1주일에 한 번 씩 측정하였으며 사료 섭취량은 매일 측정하였다.
그 후 epon 혼합액으로 포매 (Embod曲g) 하고 35℃, 45℃, 60℃의 항 온조에서 각각 24시간씩 방치시켜 중합을 완료하였다. 포 매된 소장조직은 초박절편기 (Ultramicrotome, LKB)를 이용하여 1 〃이의 준초박절편 (Semi-thin section) 을 만 들어 1% toluidine blue로 염색하여 광학 현미경으로 검경 부위를 결정하였다. 결정된 시료는 다시 60-90 nm 두께 로 초박절편을 만들어 uranyl acetate 와 lead citrate로 이 중 전자 염색한 후 전자 현미경 (Hitachi H-600)으로 관 찰하였다w
혈청에서의 TBARS 측정은 간 조직에서의 측정법과 동 일하였으며 혈청 50 “1에 대하여 실시하였고 TBA 반응시 간은 30분이었다.
흰쥐의 희생직후 절취한 소장조직을 1 mm3 크기로 세절 한 후 3% glutaraldehyde (in 0.1 M phosphate buffer, pH 7.4) 용액과 2% osmic tetraoxide (OsO4) 용액에 각각 고정시킨 후 고정된 소장조직은 50-100% ethyl alcohol 로 농도순으로 탈수하고 propylene oxide로 치환한 뒤 propylene oxide 와 epon혼합액에 침투시켰다. 그 후 epon 혼합액으로 포매 (Embod曲g) 하고 35℃, 45℃, 60℃의 항 온조에서 각각 24시간씩 방치시켜 중합을 완료하였다.
대상 데이터
즉 간 조직액을 1/12N HzSO, 와 10% phosphotungstic acid로 2회 단백질 침전시키고 얻어진 침전물을 균질화한 후 1% TBA용액 1 ml, acetic acid, FeCl;, 를 넣고 15분간 TBA반응을 일으켰다. 반응 후 바로 얼음물에서 냉각시켜 상층액에서 533 nm의 흡광 도를 읽었으며 blank는 증류수로, 표준물질로는 1, 1, 3, 3-tetraethoxypropane용액을 사용하였다. TBARS의 최 종 결과는 일부의 간조직 균질액을 취해 Bradford의 방 법(2)에 따라 단백질 함량을 측정하여 조직 단백질 단위중 량에 대한 TBARS의 농도로 산출하였다.
두 군의 평균 체중이 비슷하게 임의로 10마리씩 나누어 물과 사 료는 무제한 급여하였으며 4주 동안 사육하였다. 실험 식 이는 AIN93M diet를 기본으로 하여 참깨와 고등어분을 포함시켜 분말 사료로 제조하였다(Table 1). 참깨와 고등 어는 한국인의 다소비 식품들이며 중국 등 인근 지역에서 다량 수입되는 식품으로 방사선 조사 가능성이 크며 또한 방사선 조사시 그 영향이 크게 나타날 수 있는 불포화지 방산 함량이 높은 식품이므로 본 연구에 실험재료로 사용하였다.
실험 식 이는 AIN93M diet를 기본으로 하여 참깨와 고등어분을 포함시켜 분말 사료로 제조하였다(Table 1). 참깨와 고등 어는 한국인의 다소비 식품들이며 중국 등 인근 지역에서 다량 수입되는 식품으로 방사선 조사 가능성이 크며 또한 방사선 조사시 그 영향이 크게 나타날 수 있는 불포화지 방산 함량이 높은 식품이므로 본 연구에 실험재료로 사용하였다. 어분은 내장을 제거한 고등어를 1 cm 두께로 통 으로 잘라 5일간 냉동건조하고 이를 분말화하여 사용하였 으며 참깨는 냉동건조된 것을 믹서에 가볍게 갈아 분말화 하여 사용하였다.
체중이 31-35 g인 8주령 ICR mouse 20마리를 대한실 험동물센터로부터 구입하여 온도 23 ± 2℃, 습도 50 ± 5%의 항온항습 조건을 유지하고 12시간 광주기를 유지 한 사육실에서 1주간 환경과 사료에 적응시켰다. 두 군의 평균 체중이 비슷하게 임의로 10마리씩 나누어 물과 사 료는 무제한 급여하였으며 4주 동안 사육하였다.
데이터처리
실험결과는 백분율과 평균 土 표준편차로 나타내었다. 두 그룹간 평균치의 차이에 대한 유의성은 PC-SPSS (version 10.0 for windows) 의 Student's t-test를 이용하여 유의 수준 5%이내에서 검증하였다.
실험결과는 백분율과 평균 土 표준편차로 나타내었다. 두 그룹간 평균치의 차이에 대한 유의성은 PC-SPSS (version 10.
이론/모형
Singh의 방법"을 기초로 하여 alkaline comet assay를 다음과 같이 실시하였다.
각각의 조직에서 Yagi의 방법9’을 수정보완한 이""의 방 법인 TBA법에 의하여 측정하였다.
반응 후 바로 얼음물에서 냉각시켜 상층액에서 533 nm의 흡광 도를 읽었으며 blank는 증류수로, 표준물질로는 1, 1, 3, 3-tetraethoxypropane용액을 사용하였다. TBARS의 최 종 결과는 일부의 간조직 균질액을 취해 Bradford의 방 법(2)에 따라 단백질 함량을 측정하여 조직 단백질 단위중 량에 대한 TBARS의 농도로 산출하였다.
비조사 사료와 방사선 조사된 사료의 POV값은 Lea법e 에 따라 측정하였다. 방사선 조사하기 직전과 조사 직후에 POV값을 측정하였고, 저장 기간별 사료의 POV값은 방사 선 조사된 사료를 진공밀봉 포장 후 냉동보관하면서 조사 후 1주일, 2주일 3주일, 4주일에 각각 측정하였다.
성능/효과
07 nmole/ml로 실험군의 T3ARS 농도가 높은 경향을 보였으나 두 군간에 유의적인 차이는 볼 수 없었다. 간 조직에서는 대조군의 TBARS 농도가 2.02 nmole/mg protein, 실험군에서는 2.10 nmole/ mg protein으로 차이가 없는 것으로 나타났으며, 소장점막 균질액어서는 대조군의 TBARS 농도가 0.404 nmole/mg protein, 실험군의 TEARS 농도가 0.372 nmole/mg pro- tein으로 두 군간에 유의 적인 차이를 보이지 않았다.
조 등'"'은 방사선 조사 된 사료 섭취시 생체막의 지질과 산화물 생성에 의한 세포손상의 영향을 규명하기 위해 시판 고형 사료를 10 kGy로 방사선 조사한 후 7주간 흰쥐에게 섭취시킨 후 혈청 과산화물가와 조직 lipofuscin pigment의 변화를 조사하였다. 그 결과 방사선 조사가 사료의 멸균에 의한 안정성을 개선시켜서 심장지질 lipofuscin pigment는 대조군에 비해 평균 87.1% 감소하고 혈청의 TBARS 농도 는 대조근에 비해 평균 91.7% 감소하였다고 한다.
5%증가하였다. 대조군 사료의 POV값은 저장 1주일 째 52 meq/kg diet 에서 저장 4주일 째 85 meq/kg diet로 소폭 증가하는 것으로 나타났으나 실험군 사료의 POV값은 방사선 조사 후 부터 3주일까지 큰 폭으로 상승하여 3주 째 POV값이 대 조군의 190.7%까지 증가하였으며 저장 4주 째에는 상승 추세가 둔화되어 소폭 감소한 것으로 나타났다. 이와 같이 방사선 조사를 하지 않은 사료의 과산화물가에 비해 조사 된 사료의 과산화물가는 저장기간 동안 매우 높게 나타났 고 3~4주간 지속적으로 증가하는 것으로 나타나 불포화 지방산의 함량이 높은 식품의 방사선 조사는 지질과산화물 형성에 크게 기여한다는 것을 알 수 있었다.
소장은 장막 외부의 지방을 제거하고 전장을 취하여 0℃ 생리적 식염수와 phosphate buffer에서 2회 세척하고 조 직검사용 시료를 채취한 후 나머지는 길이로 갈라 수분을 제거하고 점막을 취하여 phosphate buffer에서 균질화하였다. 모든 작업은 냉장온도에서 시행하여 시료의 온도가 상승하는 것을 방지하였다. 조직균질 시료는 4000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상층액을 취하여 최종 조직균질 액으로 사용하였다.
7% 까지 증가하였으며 그 이후 감소하기 시작하였다. 방사선 조사된 사료를 4주 동안 섭취한 대조군과 실험군의 혈청 및 조직에서 TBARS 농도는 두 군간에 유의적인 차이가 없었으나 혈청에서는 실험군의 TBARS 농도가 대조군의 TBARS 농도 보다 높은 경향을 보였다. 투과 전자현미경 을 이용한 소장점막 조직검사 결과 세포손상의 초기 단계 에 발견되는 myelin figure가 관찰되었다.
Table 4는 방사선 조사 된 사료를 섭취한 mouse의 임 파구에서 현미경으로 DNA fragmentation의 양상을 관찰 한 후 mouse 한 마리 당 100개의 세포를 무작위로 선택 하여 검사한 결과이다. 방사선 조사된 사료를 섭취한 군이 비조사 사료를 섭취한 군 보다 tail-DNA%와 tail length, 그리고 tail moment값이 유의적으로 증가하였다. 즉 tail- DNA%는 대조군이 208 ± 2.
대조군과 실험군간 식이 섭취량과 체중 증가량, 식이 섭취 효율은 Table 2와 같다. 방사선 조사한 사료는 개봉 후에 산패취가 있었으나 사료효율은 대조군 6.97, 실험군 6.42 로 유의적인 차이를 보이지 않았으며 체중 증가량, 식이 섭취량 역시 방사선조사 사료 섭취 여부에 따라 큰 영향을 받지 않았음을 알 수 있었다. 현재까지 보고된 흰쥐에 대한 방사선 조사사료의 섭취 효율에 대한 연구들에서는 대 체로 정상적인 성장율의 유지 또는 상승을 보인다고 하였다.
그리고 합성 사료의 P0V값은 지방이 단독으로 있을 때 보다 전분과 같은 분산매개체 내에 있을 경우 더 높다고 하였다. 본 실험식이 역시 불포화지방산을 많이 함유한 등 푸른 생선의 분말과 참깨 분말이 들어간 합성사료로서 방 사선 조사 후 진공밀봉 포장하여 산소를 제거하고 냉동저장 하였음에도 저장기 간에 따라 P0V값이 큰 폭으로 증가하는 것으로 보아 방사선 조사에 의해 생성된 free radical 은 식품의 성분에 따라 상당한 산화적 변화의 요인이 될 수 있음을 알 수 있었다.
식이 섭취량, 체중 증가량, 식이 섭취효율에서 두 군간에 유의적인 차이가 없었다. 실험 사료의 POV값은 조사 전에 비해 조사 직후 35.5% 증가하였으며 3주 째에는 190.7% 까지 증가하였으며 그 이후 감소하기 시작하였다. 방사선 조사된 사료를 4주 동안 섭취한 대조군과 실험군의 혈청 및 조직에서 TBARS 농도는 두 군간에 유의적인 차이가 없었으나 혈청에서는 실험군의 TBARS 농도가 대조군의 TBARS 농도 보다 높은 경향을 보였다.
7%까지 증가하였으며 저장 4주 째에는 상승 추세가 둔화되어 소폭 감소한 것으로 나타났다. 이와 같이 방사선 조사를 하지 않은 사료의 과산화물가에 비해 조사 된 사료의 과산화물가는 저장기간 동안 매우 높게 나타났 고 3~4주간 지속적으로 증가하는 것으로 나타나 불포화 지방산의 함량이 높은 식품의 방사선 조사는 지질과산화물 형성에 크게 기여한다는 것을 알 수 있었다.
방사선 조사된 사료를 섭취한 군이 비조사 사료를 섭취한 군 보다 tail-DNA%와 tail length, 그리고 tail moment값이 유의적으로 증가하였다. 즉 tail- DNA%는 대조군이 208 ± 2.35이고 실험군이 24.11 ± 2.65로 대조군에 비해 실험군이 15.9%증가하였다. Tail length는 대조군이 58.
방사선 조사된 사료를 4주 동안 섭취한 대조군과 실험군의 혈청 및 조직에서 TBARS 농도는 두 군간에 유의적인 차이가 없었으나 혈청에서는 실험군의 TBARS 농도가 대조군의 TBARS 농도 보다 높은 경향을 보였다. 투과 전자현미경 을 이용한 소장점막 조직검사 결과 세포손상의 초기 단계 에 발견되는 myelin figure가 관찰되었다. 흰쥐의 DNA손 상 정도를 측정한 결과 실험군이 대조군에 비해 tail-DNA% 와 tail length가 유의적으로 증가하였고 tail moment값은 30% 증가하였다.
투과 전자현미경 을 이용한 소장점막 조직검사 결과 세포손상의 초기 단계 에 발견되는 myelin figure가 관찰되었다. 흰쥐의 DNA손 상 정도를 측정한 결과 실험군이 대조군에 비해 tail-DNA% 와 tail length가 유의적으로 증가하였고 tail moment값은 30% 증가하였다. 결론적으로 comet assay는 방사선 조 사 사료를 섭취한 생쥐의 산화적 스트레스를 민감하게 감 지할 수 있는 방법으로 사료되며 방사선 조사 식품의 안전 성 여부를 입증하기 위해서는 장기간의 조사식품 섭취 실 험과 혈청 외 조직에서의 유해성 검토가 이루어져야 할 것으로 보인다.
후속연구
흰쥐의 DNA손 상 정도를 측정한 결과 실험군이 대조군에 비해 tail-DNA% 와 tail length가 유의적으로 증가하였고 tail moment값은 30% 증가하였다. 결론적으로 comet assay는 방사선 조 사 사료를 섭취한 생쥐의 산화적 스트레스를 민감하게 감 지할 수 있는 방법으로 사료되며 방사선 조사 식품의 안전 성 여부를 입증하기 위해서는 장기간의 조사식품 섭취 실 험과 혈청 외 조직에서의 유해성 검토가 이루어져야 할 것으로 보인다.
본 연구의 결과로 미 루어 보아 방사선 조사로 인하여 free radical을 다량 함유 하게되는 식품을 지속적으로 섭취하게 되면 인체의 산화체 계에 무리를 가져올 것으로 사료된다. 따라서 이러한 식품 들이 수입되어 들어 올 경우는 방사선 조사여부 뿐 아니라 조사선량, 재조사 가능성에 대한 정확한 정보를 함께 입수 하여 소비자에게 전달하고 특히 조사 후의 유통기간동안 저장방법을 연구하여 영양소의 파괴와 과산화물의 생성을 최소화할 수 있는 방안을 마련해야 할 것이다. 또한 더 많은 조사 가능성이 있는 식품들에 대해 방사선 조사 식품 섭취의 영향에 대해 다양한 관점에서의 연구가 필요하다고 사료된다.
따라서 이러한 식품 들이 수입되어 들어 올 경우는 방사선 조사여부 뿐 아니라 조사선량, 재조사 가능성에 대한 정확한 정보를 함께 입수 하여 소비자에게 전달하고 특히 조사 후의 유통기간동안 저장방법을 연구하여 영양소의 파괴와 과산화물의 생성을 최소화할 수 있는 방안을 마련해야 할 것이다. 또한 더 많은 조사 가능성이 있는 식품들에 대해 방사선 조사 식품 섭취의 영향에 대해 다양한 관점에서의 연구가 필요하다고 사료된다.
방사선 조사한 사료내에 과산화물의 생성량이 유의적으 로 많았음에도 불구하고 혈청이나 간조직의 TEARS 농도 는 큰 차이를 보이지 못한 반면, DNA 손상을 측정하는 방법은 비교적 간편하고 민감한 검지 방법으로 본 연구의 결 과에서 나타난 바와 같이 방사선 조사에 의한 조직의 산화 적 스트레스와 유전 독성학적인 위해성을 검지하는데 적합한 방법으로 사료되었다따라서 이러한 측정기술의 도 입은 그동안 방사선 조사 식품의 위해성에 대해 발표되어 온 여러 연구 결과들을 보완, 수정할 수 있는 새로운 결과를 도출할 수 있는 계기가 될 것이다. 본 연구의 결과로 미 루어 보아 방사선 조사로 인하여 free radical을 다량 함유 하게되는 식품을 지속적으로 섭취하게 되면 인체의 산화체 계에 무리를 가져올 것으로 사료된다.
방사선 조사한 사료내에 과산화물의 생성량이 유의적으 로 많았음에도 불구하고 혈청이나 간조직의 TEARS 농도 는 큰 차이를 보이지 못한 반면, DNA 손상을 측정하는 방법은 비교적 간편하고 민감한 검지 방법으로 본 연구의 결 과에서 나타난 바와 같이 방사선 조사에 의한 조직의 산화 적 스트레스와 유전 독성학적인 위해성을 검지하는데 적합한 방법으로 사료되었다따라서 이러한 측정기술의 도 입은 그동안 방사선 조사 식품의 위해성에 대해 발표되어 온 여러 연구 결과들을 보완, 수정할 수 있는 새로운 결과를 도출할 수 있는 계기가 될 것이다. 본 연구의 결과로 미 루어 보아 방사선 조사로 인하여 free radical을 다량 함유 하게되는 식품을 지속적으로 섭취하게 되면 인체의 산화체 계에 무리를 가져올 것으로 사료된다. 따라서 이러한 식품 들이 수입되어 들어 올 경우는 방사선 조사여부 뿐 아니라 조사선량, 재조사 가능성에 대한 정확한 정보를 함께 입수 하여 소비자에게 전달하고 특히 조사 후의 유통기간동안 저장방법을 연구하여 영양소의 파괴와 과산화물의 생성을 최소화할 수 있는 방안을 마련해야 할 것이다.
참고문헌 (21)
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