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문제 정의
- 본 연구에서는 각종 화학성분 및 flavonoid 화합물 등과 같은 천연 유기화합물이 다량 함유되어 있는 프로폴리스를 이용하여 기능성 제품 및 건강식품 자원으로 이용하고, 우리나라에서 생산되는 프로폴리스의 품질 특성을 조사하여 고부가가치 및 건강지향성 가공식품 개발의 기초자료로 활용하고자 한다.
- 프로폴리스를 이용하여 새로운 기능성 식품을 개발하기 위하여 프로폴리스 원괴와 그 추출물의 화학성분에 대하여 조사하였다. 일반성분은 조지방 86.
제안 방법
- 아미노산 분석은 시료를 일정량 취하여 6 N-HC1 용액을 가하고 진공 밀봉하여 heating block(110±l℃)에서 24시간 동안 가수분해 시 킨 후 glass filter로 여과한 여액을 rotary vacuum evaporator를 이용하여 HC1 을 제거하고 증류수로 3회 세척한 다음 감압 농축하여 sodium citrate buffer(pH 2.2) 2 mL로 용해한 후 0.22 ]im syringe filter로 여과한 여액을 아미노산 자동분석기(Pharmacia, Biochrom 20)를 이용하여 분석하였다.
- lN HC1 용액 1 mL를 넣고 혼합한 후 15분간 방치하였다. 안정제 (氏0 :1% gum arabic : 85% phosphoric acid = 3 : 1 : 1, v/v/v) 5 mL 첨가한 후 700 nm에서 흡광도를 측정하였으며, gallic acid로 작성한 검량곡선으로 함량을 환산하였다(16). 프로폴리스에 함유되어 있는 각종 polyphenol 성분을 분석하기 위하여 분액깔때기에 각 용매 추출물 500 mg에 증류수와 ethyl acetate# 1:1(100 :100 = v/v)로 첨가, 혼합한 후 ethyl acetate 층을 분리, 추출하여 HPLC로 분석하였다.
- 프로폴리스에 함유된 K, Na, Mg, Mn, Fe, Ca, P 및 Zn의 무기 성분애 대하여 분석하였다. 즉, 각 시료 1 g에 분해용액 (HC1Q : H2SO4: 压。2 = 9 : 2 : 5) 25 mL를 가하여 열판(hot plate)에서 무색, 투명하게 변할 때까지 분해한 후 100 mL로 정용하여 여 과(Whatman No. 2)한 후 Inductively coupled plasma spectrometer(Thermo Jarrell Ash AtomScan25, USA)로 분석하였다.
- 프로폴리스는 2001년 10월 경남 거창 일원에서 채취한 것으로 냉동보관하면서 실험에 사용하였으며, 50% ethanol, 70% ethanol, 95% ethanol 및 물 등 4종류의 용매로 환류냉각장치 를 이용하여 90℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출물의 왁스 성분을 제거하기 위하여 -20℃에서 48시간 냉동 보관한 다음 24시간마다 3회 반복여 과(Meatman No. 2)하여 얻은 추줄물을 각종 실험에 사용하였다.
- 프로폴리스의 총 flavonoid를 분석하기 위하여 각 용매별로 추출한 후 추출액 1 mL에 diethylene glycol 10 mL, 1 N NaOH 1 mL를 넣고 진탕한 후 37℃에서 1시간 방치하여 420 run에서 흡광도를 측정하였으며, naringin으로 작성한 검량곡선에 준하여 함량을 환산하였다(14). 프로폴리스에 함유되어 있는 flavonol을 분석하기 각위하여 각 추출물 500 mg에 60% etha- nol(40 mL)과 6 M-HC1 5 mL를 첨가하여 95℃ 수욕상에서 환류 냉각하에 2시간 동안 추출하였다. 이 추출물을 60% ethanole.
- 안정제 (氏0 :1% gum arabic : 85% phosphoric acid = 3 : 1 : 1, v/v/v) 5 mL 첨가한 후 700 nm에서 흡광도를 측정하였으며, gallic acid로 작성한 검량곡선으로 함량을 환산하였다(16). 프로폴리스에 함유되어 있는 각종 polyphenol 성분을 분석하기 위하여 분액깔때기에 각 용매 추출물 500 mg에 증류수와 ethyl acetate# 1:1(100 :100 = v/v)로 첨가, 혼합한 후 ethyl acetate 층을 분리, 추출하여 HPLC로 분석하였다. 분석조건은 HPLC(Hewlett packard 1100 series), columne HP Hypersil ODS(200 x 4.
- 프로폴리스에 함유된 K, Na, Mg, Mn, Fe, Ca, P 및 Zn의 무기 성분애 대하여 분석하였다. 즉, 각 시료 1 g에 분해용액 (HC1Q : H2SO4: 压。2 = 9 : 2 : 5) 25 mL를 가하여 열판(hot plate)에서 무색, 투명하게 변할 때까지 분해한 후 100 mL로 정용하여 여 과(Whatman No.
- 프로폴리스의 총 flavonoid를 분석하기 위하여 각 용매별로 추출한 후 추출액 1 mL에 diethylene glycol 10 mL, 1 N NaOH 1 mL를 넣고 진탕한 후 37℃에서 1시간 방치하여 420 run에서 흡광도를 측정하였으며, naringin으로 작성한 검량곡선에 준하여 함량을 환산하였다(14). 프로폴리스에 함유되어 있는 flavonol을 분석하기 각위하여 각 추출물 500 mg에 60% etha- nol(40 mL)과 6 M-HC1 5 mL를 첨가하여 95℃ 수욕상에서 환류 냉각하에 2시간 동안 추출하였다.
대상 데이터
- 이 추출물을 60% ethanole. 50 mL가 되게 정용한 후 0.45 Jim syringe filter로 여과하여 HPLC(Hewlett Packard 1100 series, USA)로 분석하였으며, 표준품으로는 myricetin, quercetin, apigenin 및 kaem- pferol을 사용하였다(15).
- 프로폴리스는 2001년 10월 경남 거창 일원에서 채취한 것으로 냉동보관하면서 실험에 사용하였으며, 50% ethanol, 70% ethanol, 95% ethanol 및 물 등 4종류의 용매로 환류냉각장치 를 이용하여 90℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출물의 왁스 성분을 제거하기 위하여 -20℃에서 48시간 냉동 보관한 다음 24시간마다 3회 반복여 과(Meatman No.
이론/모형
- 수분은 105℃ 건조 후 항량을 측정하여 산출하였고, 조단백질은 Auto-Kjeldahl법, 조지 방은 Soxhlet 추출장치로 추출하여 측정하였고, 조섬유는 1.25% H2SO4 및 NaOH 분해법, 조회분은 550℃ 직접 회화법으로 측정하였으며, 그 외 나머지 성분들은 가용성무 질소물로로 나타내었다(11).
- 유리당 분석은 Choi 등의 방법(12)으로 유리당 획분을 얻은 다음 0.45 lim syringe filter로 여 과한 후 Sep-pak C18로 색소 및 단백질 성분을 제거한 다음 HPLC(Water 486, USA)로 분석하였다.
- 프로폴리스 2 g을 원통 여지 (Whatman Cat No. 2800260)에 넣고, diethyl ether를 가하여 Soxhlet 추출법으로로 약 10시간 정도 연속 추출하여 조지방을 얻고 이를 Metcalf 등의 방법(13) 에 준하여 지방산 methyl ester를 조제한 후 GLC(5890 Series Ⅱ, Hewlett Packard, USA)로 분석하였다.
성능/효과
- 프로폴리스에 함유되어 있는 polyphenol 성분들은 gallic acid, chlorogenic acid, catechin, epigalloca- techin gallate, epicatechin 및 epicatechin gallate로 나타났다. 50%, 70%, 95%에탄올 및 물추출물의 경우 주된 polyphenol 화합물은 gallic acid, chlorogenic acid 및 epigallocatechin gallate로 나타났으며, 50%, 70% 및 95%에탄올 추출물에서 는 epigallocatechin gallate가 각각 2.86, 1.67, 0.43 mg/g으로 높은 함량을 나타내었고, 물 추출물에서는 gallic acid가 9.76 mg/g으로 가장 많이 함유되어 있었다. Polyphenol 화합물들의 총함량은 물, 50%, 70% 및 95%에탄올 추출물 순으로 그 함량은 각각 16.
- 76 mg/g으로 가장 많이 함유되어 있었다. Polyphenol 화합물들의 총함량은 물, 50%, 70% 및 95%에탄올 추출물 순으로 그 함량은 각각 16.28, 9.31, 4.93 및 1.48 mg/g으로 나타났다.
- 유리당 조성은 sucrose, glucose 및 fructose 가 분리. 동정 되었으며, maltose와 xylose는 함유되어 있지 않은 것으로 나타났고, 그 함량은 각각 sucrose 152 mg%, glucose 114 mg% 및 fructose 6 mg%로 나타났다.
- 10 m蟾%로 가장 낮은 함유량을 나타내었다. 또한 주요 아미노산의 조성에도 다소 차이를 나타내어 50%와 70% 어탄올 추출물의 경우에는 lysine, glutamic acid 및 tyrosine 순으로 나타난 반면 95%에탄올 추출물의 경우 lysine, proline 및 cystine, 물 추출물의 경우에는 cystine, lysine 및 alanine 순으로 높은 함량을 나타났다. 한편 Song과 Gil(21)은 아까시나무와 밤나무 유래 프로폴리스의 아미노산을 분석한 결과 aspartic acid, proline 및 glutamic acid가 주요 아미노산으로 보고하여 본 실험의 결과와는 다소 차이를 나타내었다.
- 99 ppm 순으로 나타났다고 보고하였으며, 이는 채집 지역 에 따라 환경 및 식물분포 차이로 인해 무기물의 구성성분이 다를 수 있다는 보고와 일치하는 것으로 사료된다(20). 또한 추출 용매를 달리한 추출물의 무기 성분함량도 Na, Ca, K 및 P이 높게 나타났다.
- 87 mg%) 순으로 나타났으며, Ca 함량은 알콜 추출물보다 물 추출물에서 높게 나타났다. 유리 당은 총 3종이 분리, 동정되었으며, 그 중 sucrose가 152 mg%로 높게 나타났고, glucose 114 mg% 및 fructose 6 mg% 로 함유되어 있었다. 프로폴리스에 함유되어 있는 주요 아미노산으로는 lysine, cystine 및 glutamic acid로 나타났으며, 그 함량은 삭각 395.
- 프로폴리스를 이용하여 새로운 기능성 식품을 개발하기 위하여 프로폴리스 원괴와 그 추출물의 화학성분에 대하여 조사하였다. 일반성분은 조지방 86.41%, 가용성 무질소물 7.32%, 조단백질 2.71%, 회분 1.05% 및 조섬유 0.20%로 나타났다. 프로폴리스에 함유되어 있는 주요 무기성분은 Na(120.
- 프로폴리스에 함유되어 있는 주요 flavonol 화합물들로는 myricetin, quercetin, apigenin 및 kaempferol로 나타났으며, 추출용매에 따라 그 함량도 차이를 나타내었다. 50%, 70% 및 95%에탄올 추출물의 경우 kaempferol0! 주된 flavonol로 나타났으며, 그 함량은 각각 1.67, 1.04 및 1.04 mg/g으로 함유되어 있었고, apigenin, quercetin 및 myricetin 순으로 나타났다. 반면, 물 추출물의 경우 myricetin과 quercetin이 각각 L17 mg/g으로 높게 나타났으며, kaempferol 및 apigenin 순으로 나타났다.
- 프로폴리스의 일반성분을 분석한 결과는 Table 1과 같다. 즉, 조지 방이 86.41%로 가장 많이 함유되어 있었고, 가용성 무질소 물 7.32%, 조단백질 2.71%, 회분 1.05% 및 조섬유 0.31% 순으로 나타났다. Kim 등(18)은 프로폴리스의 일반성분을 분석한 결과 조지방 90.
- 프로폴리스의 지방산 조성을 분석한 결과는 Table 5와 같다. 지방산은 모두 8종이 확인되었으며 , 전체 지 방산중 포화지 방산은 47.37%, 불포화 지방산은 52.63%를 나타내었다. 포화 지 방산으로는 lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid 및 behenic aicd가 함유되어 있었고, 그 중 myristic acid 가 20.
- 14 mg%로 나타났己. 지방산은 총 8종이 분리되었으며, 주요 지방산으로 는 oleic icid(51.89%), myristic acid(20.86%) 및 palmitic acid (20.28%, 로 나타났다. 프로폴리스의 flavonol 화합물을 분석한 결과 myricetin, quercetin, apigenin 및 kaempferol0] 주요 flavonol 화합물로 나타났으며, 총 flavonoid 함량은 다른 추출물 고다 50% 에탄올 추출물에서 가장 높게 나타났다.
- 14 mg%로 나타났다. 추출물별 아미노산을 분左한 결과 50%, 70% 에탄올 추출물 및 물 추출물에서는 17종의 아미노산이 동정 되었으며, 총 아미노산 함량은 각각 274.80 mg%, 460.28 mg% 및 1, 264.93 mg%로 나타났으나, 95% 어탄올 추출물에서는 15종의 아미노산이 분리, 동정되었 고 함芝 또한 151.10 m蟾%로 가장 낮은 함유량을 나타내었다. 또한 주요 아미노산의 조성에도 다소 차이를 나타내어 50%와 70% 어탄올 추출물의 경우에는 lysine, glutamic acid 및 tyrosine 순으로 나타난 반면 95%에탄올 추출물의 경우 lysine, proline 및 cystine, 물 추출물의 경우에는 cystine, lysine 및 alanine 순으로 높은 함량을 나타났다.
- 63%를 나타내었다. 포화 지 방산으로는 lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid 및 behenic aicd가 함유되어 있었고, 그 중 myristic acid 가 20.86%로 가장 많았으며, 불포화지방산으로는 oleic acid 및 linoleic acid가 함유되어 있었고, 그 중 oleic acid가 51.89%로 가장 높게 나타났다. Lee 등(19)은 5개 지역에서 수집한 프로폴리스의 지방산 조성을 분석한 결과 경북 예천산, 강원도 영월산과 호주산의 경우는 linoleic acid와 linolenic acid만이 검출되었으며, 그 함량은 예천산이 각각 47.
- 프로폴리스 원괴의 아미노산과 추출물별 아미노산 조성과 함량을 아미노산 자동분석기로 분석한 결과는 Table 4와 같다. 프로폴 킈스 원괴에서는 표준물질을 기준으로 하여 총 17종의 아미노산이 확인되었고, 총 아미노산 함량은 2, 546.28 mg%로 나타났으며, 필수아미노산은 1, 036.81 mg%로 나타났다. 프로폴리 스 珂 함유되어 있는 주요 아미노산으로는 lysine, cystine 및 glutamic acid로 나타났으며, 그 함량은 각각 395.
- 20%로 나타났다. 프로폴리스에 함유되어 있는 주요 무기성분은 Na(120.40mg %), Ca(115.40 mg%) 및 K(105.87 mg%) 순으로 나타났으며, Ca 함량은 알콜 추출물보다 물 추출물에서 높게 나타났다. 유리 당은 총 3종이 분리, 동정되었으며, 그 중 sucrose가 152 mg%로 높게 나타났고, glucose 114 mg% 및 fructose 6 mg% 로 함유되어 있었다.
- 28%, 로 나타났다. 프로폴리스의 flavonol 화합물을 분석한 결과 myricetin, quercetin, apigenin 및 kaempferol0] 주요 flavonol 화합물로 나타났으며, 총 flavonoid 함량은 다른 추출물 고다 50% 에탄올 추출물에서 가장 높게 나타났다. 프 로폴리土에 함유되어 있는 polyphenol 성분들은 gallic acid, chlorogenic acid, catechin, epigallocatechin gallate, epicatechin 딫 epicatechin gallate로 확인되었다.
- 프로폴리스 각종 추출물에 함유되어 있는 총 polyphenol 함량을 분석한 결과는 Table 8과 같다. 프로폴리스의 각 용매별 추출물 100 g에 함유되어 있는 총 polyphenol 화합물의 함량은 70% 에탄올 추출물이 3.59%로 가장 많이 함유되어 있었으며, 50% 에탄올 추출물 3.52%, 95% 에탄올 추출물 3.41% 및 물 추출물 1.17% 순으로 나타났다.
- Flovonoid계 성분은 항산화, 항암 등의 기능성을 가진 특유 성분으로 프로폴리스의 각종 추출물에 함유되어 있는 총 flavonoid 함량을 분석한 결과는 Table 6과 같다. 프로폴리스의 각 용매별 추출물에 함유되어 있는 총 flavonoid의 함량은 50% 에탄올 추출물이 6.60%로 가장 많이 함유되어 있었으며, 70% 에탄올 추출물 6.46%, 100% 에탄올 추출물 6.41% 및 물 추출물 0.74% 순으로 나타났다. Lee 등(22)은 각 지역별 프로폴리스 중에 포함되어 있는 총 플라보노이드 함량을 측정한 결과 예천과 영월산 프로폴리스에서는 각각 6.
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