[논문]In vitro Interaction of Recombinantly Expressed Kringle 5 (rK5) with Ras Guanine Nucleotide Dissociation Stimulator-like Factor (Rgl2)

Lee, Jung-Whoi; Kim, Sun-Hee; Park, Yong-Sung; Woo, Je-Wan; Lim, Dong-Yeol; Lee, Kyung-Hee

doi:10.5012/bkcs.2004.25.12.1863

In vitro Interaction of Recombinantly Expressed Kringle 5 (rK5) with Ras Guanine Nucleotide Dissociation Stimulator-like Factor (Rgl2) 원문보기

Bulletin of the Korean chemical society, v.25 no.12, 2004년, pp.1863 - 1868

Lee, Jung-Whoi (Department of Applied Chemistry, Sejong University) , Kim, Sun-Hee (Department of Applied Chemistry, Sejong University) , Park, Yong-Sung (Department of Industrial Chemistry, Sangmyung University) , Woo, Je-Wan (Department of Industrial Chemistry, Sangmyung University) , Lim, Dong-Yeol (Department of Applied Chemistry, Sejong University) , Lee, Kyung-Hee (Department of Applied Chemistry, Sejong University)

Abstract ▼ AI-Helper

Kringle 5 (K5), located outside of angiostain (K1-4) in human plasminogen, displays more potent antiangiogenic activity on endothelial cell proliferation than angiostatin itself. Using a yeast two-hybrid system in vivo, we have recently identified Rgl2 (guanine nucleotide dissociation stimulator (RalGDS)-like factor 2) as a binding protein of human K5. In order to confirm in vitro protein interaction between K5 and Rgl2, we developed bacterial recombinant expression systems for them. K5 and Rgl2 proteins were expressed in high yields and purified into pure forms with His tags and GST fusion, respectively. GST-pull down experiments clearly demonstrated that K5 interacts specifically with Rgl2 in vitro. These results indicate that Rgl2 functions as a receptor protein for K5 in vitro as well as in vivo, leading to anti-angiogenesis through regulating Ras signaling pathways.

주제어

AI 본문요약
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제안 방법

¹² Even though in vivo binding between K5 and Rgl2 was confirmed by yeast two-hybrid, it has not been demonstrated yet that they interact with each other in vitro as well. In this study we have therefore developed recombinant expression systems using bacteria for both K5 and Rgl2 with some modifications and examined their binding phenomena using GST-pull down experiments. Our result constitutes evidence that K5 is directly involved in anti-angiogenesis by specific interaction with Rgl2, which is a distinct effector of Ras signaling pathways leading to angiogenesis.

대상 데이터

Silver staining kit was from Amersham. Rabbit anti-6His antibody (BETHYL, USA) and Goat anti-rabbit conjugated antibody (KPL, USA) were used. All other reagents were of the highest pure grade.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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