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문제 정의
- 본 연구에서는 일반적인 추출 방법인 가열 추출 방법으로 추출을 할 때 오미자 추출액의 추출 특성과 추출액의 항산화 효과를 검토하여 오미자의 추출 조건을 결정함으로써 오미자 유효성분의 식품 소재화를 위한 기초자료를 얻고자 하였다.
- 오미자 추출액의 추출 특성과 추출액의 항산화성을 검토하여 오미자의 추출 조건을 결정함으로써 오미자 유효성분의 식품 소재화를 위한 기초자료를 얻고자 하였다. 용매와의 .
제안 방법
- 색도는 색차계 (Color difference meter. Color QUEST H Sphere System, USA)를 이용하여 water, 50% ethanol, 75% ethanol 추출한 시료의 L(명도),a(적색도), b(황색도)값을 측정하였다. 이때 표준 백색판의 L, a, b값은 99.
- 오미자 일정량에 water, 50% ethanol, 75% ethanol 용액을 각각 적정 비율로 가하여 100℃에서 3시간 동안 추출한 후 Whatman No. 2 여과지로 여과하여 시료로 사용하였다.
- 오미자 일정량에 적정 용매비의 water, 50% ethanol, 75% ethanol을 각각 가하여 100℃ 에서 3시간 동안 추출하면서 가용성 고형분량의 변화를 측정하였다. 가용성 고형분(soluble solid)은 굴절당도계(Hand refrectometer, model Ml, range : 0~35%, Atago, Japan)를 사용하여 상온에서 3회 측정한 후 °Brix로 나타내었다.
- 오미자의 적정추출 용매비를 결정하기 위하여 오미자에 대한 water의 비율을 8배, 10배, 12배, 14배로 달리하고, 환류 냉각 추출 장치를 이용하여 100℃로 3시간 동안 가열 추출하면서 가용성 고형분량을 측정하여 적정 용매 비율을 결정하였다.
- 용매와의 비율을 결정하기 위하여 오미자에 대한 water의 비율을 8배, 10배, 12배, 14배로 달리하여 환류냉각 추출장치로 가열 추출하면서 시간별로 추출되어 나오는 가용성 고형분량을 측정하였으며, 그 결과를<Fig. 1>에 나타내었다.
- 유리당 함량은 HPLC(TCM, Waters, Japan)를 사용하여 측정하였다. 이때 이동상은 78% acetonitrile이었고, flow rate는 1.
- 즉, 희석액 5ml에 Folin reagent 5mZ을 가하고 3분간 정치한 다음 5ml의 10% Na2CC>3용액을 가하였다. 이 혼합액을 1시간 동안 정치한 후 분광광도계를 사용하여 760nm에서 흡광도를 측정하고 (+)catechiri을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 총 폴리페놀 함량을 구하였다.
- 적정 용액으로는 0.1N NaOH용액을 사용하였으며, 적정시 pH 8.3의 종말점까지 소비된 0.1N NaOH 용액의 양을 측정하여 사과산(malic add) 함량으로 환산하였다.
- DPPH0, a-diphenylpcrylhydrazyl)의 전자공여 효과로 각 시료의 환원력을 측정하였다. 즉, 추출물 02mZ에 4X10-4 m DPPH용액(99.9% EtOH에 용해) 0.8ml, .0.1 M phospate twffa:(pH 65) 2m/와 99.9% EtOH 2rW을 가하여 총액의 부피가 5ml가 되도록 하였다. 이 반응액을 약 10초간 혼합하고 실온에 10분 방치한 후 분광광도계 (UV/VIS ^ectranetar, Jasco, Japan)를 사용하여 525 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 2배희석액을 사용하였다. 즉, 희석액 5ml에 Folin reagent 5mZ을 가하고 3분간 정치한 다음 5ml의 10% Na2CC>3용액을 가하였다. 이 혼합액을 1시간 동안 정치한 후 분광광도계를 사용하여 760nm에서 흡광도를 측정하고 (+)catechiri을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 총 폴리페놀 함량을 구하였다.
- 추출물의 전자공여작용(electron donating abilities,EDA)은 강등의 방법16)을 변형하여 각각의 추출물에 대한 DPPH0, a-diphenylpcrylhydrazyl)의 전자공여 효과로 각 시료의 환원력을 측정하였다. 즉, 추출물 02mZ에 4X10-4 m DPPH용액(99.
- 추출액의 산도는 water, 50% ethanul, 75% ethand 추출 시 추출 완료 시점에서 산도를 측정하였다. 적정 용액으로는 0.
대상 데이터
- 본 실험에 사용된 오미자는 경동시장에서 구입하여 4℃에서 보관하면서 실험에 사용하였다.
- 생약재 내의 이러한 작용을 하는 유효물질들을 섭취함으로 인해 산화적 장해를 방어하고 노화를 억제하는 효과4)를 기대할 수 있다는 연구 보고와 같이 우리나라를 비롯한 아시아의 여러나라에서는 민간요법으로 각종 생약재들을 여러 질병을 치료하는데 사용해 왔다5-7). 본 연구에서 사용된 오미자는 목련과에 속한 낙엽 목질등목인 오미자 또는 화중오미자의 성숙한 과실로 맛은 시고 달며 성질은 따뜻하다. 오미자는 오래 전부터 수렴, 자양, 강장, 진해약, 해주독, 목마름, 수렵고삼, 익기생진, 보신염신 등의 약효를 가지고 있어 한방에서 사용해오던 재료이다.
이론/모형
- SOD 유사활성의 측정은 Marklund와 Marklund의 방법을 변형한 Kim 등17)의 방법을 이용하여 실시하였다. 즉, 각 추출물을 감압농축한 Tis-HCl buffer(50mM tris[hydroxy- methyl]amino-methane+l(knM EDTA, pH 8.
- 총 폴리페놀의 함량(trial polyptend amtent)은 분석방법으로 널리 사용되고 있는 Fdins-Denis방법15으로 측정하였으며, 각각의 추출조건에 따라 제조된 추출액의 2배희석액을 사용하였다. 즉, 희석액 5ml에 Folin reagent 5mZ을 가하고 3분간 정치한 다음 5ml의 10% Na2CC>3용액을 가하였다.
성능/효과
- 65%로 가장 높은 활성을 나타냈었으며. 50% ethanol 추출액이 다른 두 용매 보다 우수한 것으로 나타나 총 폴리페놀 함량과 전자공여능 측정 결과와 비숫한 경향을 보여주었다.
- 1>에 나타내었다. 8배, 10배, 12배, 14배의 water를 가했을 때 50분까지 급격하게 상승하다가 90분 이후에는 평형에 도달하였으며, 각 시료의 8배, 10배, 12배, 14배 처리구별 추출 수율은 각각 18.8%, 20.0%, 18.0%, 17.6%, 로 나타나 물과의 비율이 10배일 때 추출 수율이 가장 좋은 것으로 나타났다. 이는 상황버섯 분말의 추출에서 추출시간이 증가할수록 가용성 성분이 증가하다가 추출평형 시점 이후부터는 일정하였다18는 연구 보고와 가수량이 10배수 일 때 가용성 성분의 함량이 가장 높았다19)는 연구 보고와 유사한 결과를 보여 주었다.
- SOD 유사활성 측정 결과는 50% ethanol 추출액에서 33.65%로 가장 높은 활성을 나타냈었으며. 50% ethanol 추출액이 다른 두 용매 보다 우수한 것으로 나타나 총 폴리페놀 함량과 전자공여능 측정 결과와 비숫한 경향을 보여주었다.
- 식물이 함유하고 있는 페놀화합물들의 양은 항산화력의 간접적인 지표가 된다2D. 따라서 오미자 추출액도 항산화 효과를 나타낼 것이라 사료되며, 특히 다른 용매에 비해 50% ethanol 추출액이 높은 효과를 나타낼 것으로 판단된다.
- 6%, 무 241%의 활성에 비해 높은 활성을 나타내었다. 또한 50% ethanol 추출액이 다른 두 용매보다 우수한 것으로 나타나 추출 용매별 SOD 유사활성은 총 폴리페놀 함량과 전자공여능 측정 결과와 비숫한 경향을 보여주었다. 송 등27은 찔레 영지 버섯 추출물의 생리활성 연구에서 폴리페놀 성분과 단백 다당체 등에 의해 SOD 유사활성이 나타난 것으로 보고하였는데, 본 실험의 결과도 이와 같이 폴리페놀 성분이 SOD 유사활성을 나타내는 것으로 사료된다.
- 용매와의 .비율을 결정히기 위해 8배, 10배, 12배, 14배의 water를 가하여 추출 수율을 비교한 결과 water와의 비율이 10배일 때 추출 수율이 가장 좋은 것으로 나타났다. 탁도는 water 추출액에서 가장 높았으며, 추출용매의.
- 적정산도는 추출용매의 50% ethanol에서 가장 높았으나, 전체적으로 산도가 매우 낮았다. 유리당 함량은 fructose 1.24~4.42mg%, glucose 3.65~4.71mg%, sucrose 0.89~1.69mg% 로glucose의 함량이 가장 높았으며, 당질의 대부분을 glucose와 fructose인 것으로 나타났다. 총 폴리페놀 함량을 나타낸 것으로 50% ethanol 추출액은 0.
- 유리당 함량은 fructose 1.24~4_42mg%, glucose 3.65~4.71mg%, sucrose 0.89~1.69mg% 로 glucose의 함량이 가장 높았으며, 당질의 대부분을 glucose와 fmctog인 것으로 나타났다. 추출 용매별 유리당의 함량은 water가 다른 추출 용매에 비해 높게 나타났으며, ethanol 함량이 증가할수록 유리당 함량은 감소하는 것으로 나타났다.
- 적정산도는 water 주줄액이 가장 높았으며, 추줄용매의 ethand 함량이 증가할수록 낮아지는 것으로 나타났다.
- ethanol 농도가 증가할수록 낮아졌다. 적정산도는 추출용매의 50% ethanol에서 가장 높았으나, 전체적으로 산도가 매우 낮았다. 유리당 함량은 fructose 1.
- 전반적으로 다른 두 용매에 비해 water 추출액이 4.6 °Brix로 50% ethanol 추출액의 2.6 °Brix, 75% ethanol 추출액의 3.1 °Brix 보다 높은 가용성 고형분 함량을 나타내었으며, 추출 완료 시점은 90분 이내인 것으로 나타났다.
- 58%로 나타나 50% ethanol 추출액에서 가장 높은 함량을 나타내었으며, water에 비해 유기용매 추출시 높은 함량을 보였다. 전자공여능은 water 추출액60.87%, 50% ethanol 추출액 57.24%, 75% ethanol 추출액 55.61%로 나타나 용매별 전자공여능 효과가 큰 차이는 나타나지 않았으며, water 추출액이 다른 용매에 비해 높은 전자공여 효과를 보여 주었다.
- 69mg% 로glucose의 함량이 가장 높았으며, 당질의 대부분을 glucose와 fructose인 것으로 나타났다. 총 폴리페놀 함량을 나타낸 것으로 50% ethanol 추출액은 0.98%, 75% ethanol 추출액은 0.89%, water 추출액은 0.58%로 나타나 50% ethanol 추출액에서 가장 높은 함량을 나타내었으며, water에 비해 유기용매 추출시 높은 함량을 보였다. 전자공여능은 water 추출액60.
- 69mg% 로 glucose의 함량이 가장 높았으며, 당질의 대부분을 glucose와 fmctog인 것으로 나타났다. 추출 용매별 유리당의 함량은 water가 다른 추출 용매에 비해 높게 나타났으며, ethanol 함량이 증가할수록 유리당 함량은 감소하는 것으로 나타났다.
- 3>에 나타내었다. 탁도는 water 추출액에서 가장 높았으며, 50% ethanol 추출액이 75% ethanol 추출액에 비해 약간 낮았다. <Fig.
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