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문제 정의
- 효과가 매우 탁월함을 밝힌바 있다(19). 본 연구에서는 생열귀나무(열매, 잎, 줄기, 및 뿌리) 추출물 및 생열귀 뿌리 분획물을 사용하여 LDL 산화에 대한 항산화 효과를 규명하고자 수행하였다.
- 앞선 연구에서 생열귀나무의 카테킨 함량 및 항산화효과에 관한 연구를 통하여 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물의 항산화효과가 탁월함을 밝힌바 있다(19). 본 연구에서는 인간 LDL산화에 대한 생열귀나무 추출물 및 생열귀나무 뿌리 분획물의 항산화효과에 관한 지견을 얻었기에 이에 보고하고자 한다.
제안 방법
- 2 여과지로 여과한 다음, 감압농축하여, 각각의 추출물 시료로 사용하였다. 항산화 활성이 가장 높았던 생열귀 뿌리 메탄올 추출물의 경우에는, 활성성분 특성을 검토하기 위하여, 생열귀 뿌리 메탄올 추출물을 물에 현탁시킨 뒤, 헥산(”-hexane), 클로르포름(chloroform, CHCl3), 에틸아세테이트(ethyl acetate, EtOAc), 부탄올 ("-butanol, ”-BuOH) 순으로 극성차이에 따른 용매분획을 수행한 뒤, 여과한 다음, 감압농축하여, 얻은 각각의 분획물을 시료로 사용하였다.
- 6 mL를 첨가한 뒤, 혼합하였다. 1.8 mL reagent alcoh이과 1.8mL heptane을 첨가하여 섞은후, 3, 000rpm에서 10분간 원심분리 하여 protein pellet을 denaturing buffer 3 mL에 녹인 뒤 , 320-410 nm에서 scan한 뒤, peak absorbance를 사용하여 protein carbonyls(extinction coefficient = 22,000 M-1cm-1) 함량을 계산하였다 (12).
- 1 nmol/mg)의 산화억제율 (MDA값)을 나타내었다. 30 μg/mL 정도의 소량의 분획 물 농도에서도 LDL 산화에 대한 항산화 효과가 강하게 나타나므로 이후의 실험에서는 이 값을 실험농도로 정하여 수행하였다. 시간에 따른 생열귀나무 뿌리 분획물의 MDA값을 Fig.
- Carotenoids함량은 추출물을 0.01 %가 되도록 메탄올에 녹인후, 450nm에서 흡광도를 측정하여 그 함량을 측정하였다(21).
- LDL 산화에 대한 가장 좋은 항산화 효과를 나타낸 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물을 유기용매에 따른 분획을 수행한뒤, 각각의 분획 물을 사용하여, MDA, conjugated diene, apoli poprotein carbonyl가 등을 분석하여, LDL 에 대한 항산화 효과를 측정하였다.
- 소거활성이 나타남을 확인하였다(19). 본 실험에서는 LDL 산화에 대한 생열귀나무(열매, 잎, 줄기, 및 뿌리) 메탄올 추출물의 항산화 효과를 MDA값을 측정하여 검색하였다. 생열귀나무 메탄올 추출물을 20, 40, 60, 80 pg/mL의 농도로 첨가하였 을 때의 MDA값을 Fig.
- 부위별 생열귀나무 추출물 및 뿌리 분획물의 갈색화 반응 생성물질의 농도를 나타내는 갈색도는 490nm에서의 흡광도를 자외선/가시광선 분광광도계 (Hewlett Packard사의 HP 8452A diode array spectrophotometer)를 사용하여 흡광도를 즉정하였다(20).
- 부위별 생열귀나무의 추출물 및 뿌리 분획물에 대하여 항산화성 물질로 알려진 화합물들(protein, aromatic amine, 및 phenol 등)의 용출정도를 Hewlett Packard사(Palo Alto, CA, USA)의 HP 8452A diode array spectrophotometer를 사용하여 285nm에서 흡광도로 측정하였다(20). 이때 시료는 0.
- 비타민℃를 다량 함유하고 있는 생열귀나무의 자원화를 위한 연구로서 페놀성 화합물의 함량 및 사람의 저밀도지방단백질의 산화에 대한 항산화 활성을 측정하였다. 생열귀나무 추출물의 페놀성 화합물 함량을 측정한 결과, 모든 부위에서 100 g 당 8.
- LDL 산화 용액에 chloroform 2mL와 methanol 1 mL를 섞은후, 5분간 1,000rpm에서 원심분리하였다. 상층액을 버리고, 아래층을 질소개스를 이용하여 건조시 킨 시료를 cyclohexane 3 mL에 녹여 분광광도계를 이용하여 234nm에서 conjugated diene의 함량을 측정하였다.
- 그러나, 생열귀열매 및 잎의 메탄올 추출물의 경우에는 MDA 생성을 억제하지 못하였다. 생열귀 뿌리 메탄올 추출물의 경우, LDL 산화에 대하여, 소량의 농도에서도 가장 좋은 항산화 효과를 나타내므로 이후의 실험에서는 생열귀 뿌리 메탄올 추출물로부터 용매 분획물을 제조한 후, 그 분획물을 사용하여 실험하였다.
- 생열귀나무 추출물은 주로 285nm에서 흡수를 나타내는 물질이 다량 함유되어 있으며, 페놀성화합물 함량을 측정한 결과, 클로르포름 분획물을 제외한 모든 추출물에 다량 함유되어 있었다. 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물이 사람의 저밀도지방단백질 산화에 대한 항산화 효과가 가장 강력하게 나타났기 때문에, 뿌리 메탄올 추출물을 보다 더 정제하기 위하여 극성에 따른 용매 분획물을 제조한후, 각각의 분획물을 대상으로 LDL 산화에 대한 항산화 효과를 측정하였다. 생열귀나무 에틸아세테이트분획 물 및 부탄올 분획 물이 MDA, conjugate diene, apolipopro tein carbonyl가 등의 분석결과 LDL 산화에 대한 항산화 효과가 매우 탁월함을 확인하였다.
- 생열귀나무 뿌리 분획물의 항산화물질 용출정도를 흡광도를 측정하여 검토하였다. 그 결과를 Table 2에 요약하였다.
- 생열귀의 열매, 잎, 줄기, 및 뿌리를 잘게 세절한 뒤, 분쇄하여, 환류냉각기를 부착한 플라스크에 시료중량의 20배의 에탄올(ethanol, EtOH), 메탄올(methanol, MeOH), 클로르포름(chloro form, CHCl3), 그리고 물(water)을 가하여 수욕상에서 24시간 가온 추출하였다. 불순물을 제거하기 위하여 Whatman No.
- 추출물 혹은 분획물의 농도변화에 따른 MDA의 함량변화를 측정 하였고, 분획물의 일정 농도(30 μg/mL)에서 시간(0-8 hr)에 따른 TBARS의 함량변화를 측정하여 LDL산화에 미치는 생열귀나무 추출물 혹은 뿌리 분획물의 항산화 효과를 실험하였다. 즉, EDTA첨가로 산화가 중지 된 LDL용액에 TCA-TBA-HCl 정지액(15% trichloroacetic acid: 0.375% thiobarbituric acid: 0.25 N HCl) 3mL를 가한후, 95℃에서 30분간 중탕후, 냉각시킨 뒤, 3,000 rpm에서 10분간 원심분리한 후, 상등액을 취하여 생성된 MDA의 함량을 532nm에서 분광광도계를 이용하여 측정하였다.
- 추출물 혹은 분획물의 농도변화에 따른 MDA의 함량변화를 측정 하였고, 분획물의 일정 농도(30 μg/mL)에서 시간(0-8 hr)에 따른 TBARS의 함량변화를 측정하여 LDL산화에 미치는 생열귀나무 추출물 혹은 뿌리 분획물의 항산화 효과를 실험하였다. 즉, EDTA첨가로 산화가 중지 된 LDL용액에 TCA-TBA-HCl 정지액(15% trichloroacetic acid: 0.
대상 데이터
- Agarose, ascorbate, bromophenol blue, butylated hydroxytolu- ene(BHT), coomassie brilliant blue R-250, cupric sulfate, 1, 1- diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH), 2, 4-dinitrophenyl-hydrazine(DNPH), 1, 1, 3, 3-tetra-ethoxypropane(MDA), ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA), low density lipoprotein(LDL), sodium dodecyl sulfate (SDS), thiobarbituric acid, trichloroacetic acid, a-t℃opherol, 등은 Sigma사 제품(St. Louis, MO, USA)을 구입하여 사용하였다. Disodium hydrogen phosphate, potassium chloride, potassium phos phate, sodium barbital, sodium chloride, sodium phosphate, 은 Wako사 제품을 사용하였고, Ca, Cu, Fe, K, Mg, R Zn 등의 표준품은 일본 Wake사의 제품을 사용하였으며, butanol, chloroform, cyclohexane, ethanol, ethyl acetate, heptane, hexane, hydrogen chloride, methanol 등의 유기용매 및 기타시약은 1급시약 혹은 이에 준하는 것을 구입하여 사용하였다.
- Louis, MO, USA)을 구입하여 사용하였다. Disodium hydrogen phosphate, potassium chloride, potassium phos phate, sodium barbital, sodium chloride, sodium phosphate, 은 Wako사 제품을 사용하였고, Ca, Cu, Fe, K, Mg, R Zn 등의 표준품은 일본 Wake사의 제품을 사용하였으며, butanol, chloroform, cyclohexane, ethanol, ethyl acetate, heptane, hexane, hydrogen chloride, methanol 등의 유기용매 및 기타시약은 1급시약 혹은 이에 준하는 것을 구입하여 사용하였다.
- 강원도 정선군 농업기술센터 및 정선생열귀영농조합법인에서 1999년도 9월에 생열귀나무의 열매, 잎, 줄기, 및 뿌리를 공급받아 잘게 쇄절후, 음건하여 -20℃ 냉동고에 보관하면서 본 실험에 사용하였다.
- 불순물을 제거하기 위하여 Whatman No. 2 여과지로 여과한 다음, 감압농축하여, 각각의 추출물 시료로 사용하였다. 항산화 활성이 가장 높았던 생열귀 뿌리 메탄올 추출물의 경우에는, 활성성분 특성을 검토하기 위하여, 생열귀 뿌리 메탄올 추출물을 물에 현탁시킨 뒤, 헥산(”-hexane), 클로르포름(chloroform, CHCl3), 에틸아세테이트(ethyl acetate, EtOAc), 부탄올 ("-butanol, ”-BuOH) 순으로 극성차이에 따른 용매분획을 수행한 뒤, 여과한 다음, 감압농축하여, 얻은 각각의 분획물을 시료로 사용하였다.
이론/모형
- LDL내의 산화지질량(MDA의 양)은 TBARS방법으로 측정하였다(12). 추출물 혹은 분획물의 농도변화에 따른 MDA의 함량변화를 측정 하였고, 분획물의 일정 농도(30 μg/mL)에서 시간(0-8 hr)에 따른 TBARS의 함량변화를 측정하여 LDL산화에 미치는 생열귀나무 추출물 혹은 뿌리 분획물의 항산화 효과를 실험하였다.
- 지방질 산화물의 측정을 위하여 지질 산화도를 conjugated dienes 방법을 이용하였다(12). LDL 산화 용액에 chloroform 2mL와 methanol 1 mL를 섞은후, 5분간 1,000rpm에서 원심분리하였다.
- 총페놀성 물질 함량은 Folin-Denis 방법에 따라 분석하였다 (22). 즉 추출물 혹은 분획물을 1.
성능/효과
- 5에 나타내었다. BuOH 분획물과 EtOAc 분획물이 5.6배 및 2.2배의 conjugated diene의 생성 감소를 나타내었고, 헥산 분획물은 거의 억제하지 못함을 보여주었다. 분획물 30 pg/mL의 농도 첨가시 apolipoprotein carbonyl 함량 억제정도를 Fig.
- 6에 나타내었다. BuOH 분획물이 3.4배의 감소량을 나타내었으며, EtOAc 분획물과 CHCl3 분획물이 1.5배 정도의 apolipoprotein crabonyl 함량 감소를 나타내었다. 헥산 분획물은 전혀 억제하지 못하였다.
- 또한 CHCl3 분획물, EtOAc 분획물, 그리고 BuOH 분획물은 30 μg/mL 분획물첨가 시 Cu2+에 의한 LDL 산화를 8시간까지 억제함을 확인하였다. Cu2+에 의한 apoB carbonylation과 conjugate diene형성 억제효과 측정시, EtOAc 분획물과 BuOH 분획물이 가장 탁월하게 억제함을 보여주었다. 생열귀나무는 다량의 페놀성 화합물을 함유하고 있으며 항산화 활성이 매우 탁월하므로 새로운 기능성 식품 소재로의 활용이 기대되는 약용식물자원이다.
- 4에 나타내었다. Hexane 분획물과 물 분획물은 contr이과 유사한 변화량을 나타내는 것으로 보아, 시간에 따른 LDL 산화억제능력이 미약한 것으로 나타났고, BuOH 분획물, EtOAc 분획물, 그리고 CHCl3 분획물은 8시간까지 LDL의 산화를 강력하게 억제함을 보여주었다. 이 결과로 미루어 볼 때, BuOH 분획물, EtOAc 분획물, 그리고 CHCl3 분획물의 내부에 천연 항산화제로서의 개발 가능성이 있는 물질이 존재하고 있음을 추측할 수 있었다.
- 또한, 생열귀나무 추출물 및 분획물에 대한 항산화 물질의 함량을 측정한 결과, 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물과 뿌리의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물이 285nm에서 흡수를 나타내는 페놀성 화합물을 다량 함유하고 있음을 확인하였다. TBARS에 의한 LDL산화 억제효과 측정시, 생열귀나무 뿌리의 메탄올 추출물이 가장 좋은 효과를 나타내었다. 생열귀나무 뿌리의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물의 경우, 30 μg/mL 첨가시 85.
- 405로 매우 높게 측정되는 것으로 보아서, 페놀계 화합물이 매우 많이 용출되어져 나오는 것을 확인하였다. 그 다음으로 부탄올분획물에서 페놀성 화합물이 많이 용출되어져 나오는 것을 확인하였으_며, 클로르포름, 헥산 및 물 분획물에서는 소량 용출되는 것을 확인하였다.
- Table 2에서 보는 바와 같이, 카로테노이드계 화합물(A450)과 갈변 물질 (A490) 의 경우에는 흡광도가 거의 나타나지 않는 것으로 미루어 보아서 생열귀나무 뿌리 분획물의 주된 활성물질이 아닌 것으로 판단되어진다. 그러나 페놀계화합물의 용출정도를 나타내는 285nm에서의 흡광도는 에틸아세테이트 분획물이 2.405로 매우 높게 측정되는 것으로 보아서, 페놀계 화합물이 매우 많이 용출되어져 나오는 것을 확인하였다. 그 다음으로 부탄올분획물에서 페놀성 화합물이 많이 용출되어져 나오는 것을 확인하였으_며, 클로르포름, 헥산 및 물 분획물에서는 소량 용출되는 것을 확인하였다.
- 2%까지 LDL 산화를 억제함을 확인하였다. 또한 CHCl3 분획물, EtOAc 분획물, 그리고 BuOH 분획물은 30 μg/mL 분획물첨가 시 Cu2+에 의한 LDL 산화를 8시간까지 억제함을 확인하였다. Cu2+에 의한 apoB carbonylation과 conjugate diene형성 억제효과 측정시, EtOAc 분획물과 BuOH 분획물이 가장 탁월하게 억제함을 보여주었다.
- 부위별로는 뿌리의 메탄올 추출물이 가장 높게 측정되었으며 잎 > 줄기 > 열매 순으로 285 nm에서의 흡광도가 높게 측정되었다. 또한 LDL 산화에 대한 부위별 생열귀나무 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과, 뿌리와 잎 메탄올 추출물에서 강력한 MDA 생성을 억제하였다. 생열귀나무 뿌리 분획물들에 대한 항산화물질에 대한 흡광도 측정결과의 경우에도 주로 285nm에서 흡수되는 페놀계 화합물들의 용출이 가장 높은 것으로 확인되었다.
- 생열귀나무 에틸아세테이트분획 물 및 부탄올 분획 물이 MDA, conjugate diene, apolipopro tein carbonyl가 등의 분석결과 LDL 산화에 대한 항산화 효과가 매우 탁월함을 확인하였다. 또한 생열귀나무 뿌리의 에틸아세테이트 분획물 및 부탄올 분획물은 285nm에서 흡수되는 페놀성 화합물을 다량 함유하고 있음을 확인하였다. 또한 앞선 연구에서 이들 분획물에는 다량의 catechin이 함유되어 있음을 보고한 바 있다(19).
- 6 g으로 매우 높은 양을 함유하고 있었다. 또한, 생열귀나무 추출물 및 분획물에 대한 항산화 물질의 함량을 측정한 결과, 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물과 뿌리의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물이 285nm에서 흡수를 나타내는 페놀성 화합물을 다량 함유하고 있음을 확인하였다. TBARS에 의한 LDL산화 억제효과 측정시, 생열귀나무 뿌리의 메탄올 추출물이 가장 좋은 효과를 나타내었다.
- 부위별 생열귀나무 추출물의 항산화물질에 대한 흡광도를 측정한 결과, 일부 항산화성 물질인 phen이계 화합물 등의 흡수가 일어나는 285nm에서의 흡광도가 가장 높았다. 그러나 카로테노이드계 화합물들의 흡광이 일어나는 450nm에서의 흡광도나 갈변물질의 흡광이 일어나는 490nm에서의 흡광도는 매우 낮게 측정되는 것으로 보아서, 생열귀나무 추출물에서는 주로 285nm에서 흡광을 나타내는 물질들이 항산화 활성을 나타낼 것으로 사료된다.
- 그러나 카로테노이드계 화합물들의 흡광이 일어나는 450nm에서의 흡광도나 갈변물질의 흡광이 일어나는 490nm에서의 흡광도는 매우 낮게 측정되는 것으로 보아서, 생열귀나무 추출물에서는 주로 285nm에서 흡광을 나타내는 물질들이 항산화 활성을 나타낼 것으로 사료된다. 부위별로는 뿌리의 메탄올 추출물이 가장 높게 측정되었으며 잎 > 줄기 > 열매 순으로 285 nm에서의 흡광도가 높게 측정되었다. 또한 LDL 산화에 대한 부위별 생열귀나무 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과, 뿌리와 잎 메탄올 추출물에서 강력한 MDA 생성을 억제하였다.
- 따라서 LDL 산화에 대한 생열귀나무 추출물의 항산화 효과는 이들 페놀계 화합물들에 의한 영향일 것으로 사료된다. 사람의 저밀도지방단백질의 산화에 대한 생열귀나무 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과, 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물이 MDA생성을 가장 강력하게 억제함을 보여주었다. 생열귀나무 추출물은 주로 285nm에서 흡수를 나타내는 물질이 다량 함유되어 있으며, 페놀성화합물 함량을 측정한 결과, 클로르포름 분획물을 제외한 모든 추출물에 다량 함유되어 있었다.
- 2에 나타내었다. 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물의 경우, 66.0, 85.3, 97.1, 100%의 MDA 생성 억제율을 보였고, 생열귀 줄기 메탄올 추출물의 경우에도 농도가 증가함에 따라 MDA생성을 억제함을 나타내었다. 그러나, 생열귀열매 및 잎의 메탄올 추출물의 경우에는 MDA 생성을 억제하지 못하였다.
- 또한 LDL 산화에 대한 부위별 생열귀나무 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과, 뿌리와 잎 메탄올 추출물에서 강력한 MDA 생성을 억제하였다. 생열귀나무 뿌리 분획물들에 대한 항산화물질에 대한 흡광도 측정결과의 경우에도 주로 285nm에서 흡수되는 페놀계 화합물들의 용출이 가장 높은 것으로 확인되었다. 특히 EtOAc 분획물 및 BuOH 분획물에서 높은 흡광을 나타내었으며, 이들 분획물들이 LDL 산화에 대한 강력한 항산화 효과를 나타내었다.
- 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물이 사람의 저밀도지방단백질 산화에 대한 항산화 효과가 가장 강력하게 나타났기 때문에, 뿌리 메탄올 추출물을 보다 더 정제하기 위하여 극성에 따른 용매 분획물을 제조한후, 각각의 분획물을 대상으로 LDL 산화에 대한 항산화 효과를 측정하였다. 생열귀나무 에틸아세테이트분획 물 및 부탄올 분획 물이 MDA, conjugate diene, apolipopro tein carbonyl가 등의 분석결과 LDL 산화에 대한 항산화 효과가 매우 탁월함을 확인하였다. 또한 생열귀나무 뿌리의 에틸아세테이트 분획물 및 부탄올 분획물은 285nm에서 흡수되는 페놀성 화합물을 다량 함유하고 있음을 확인하였다.
- 위의 결과로 미루어 보아서 285nm에서 흡수를 나타내는 물질이 다량 함유되어 있음을 확인할 수 있었다. 생열귀나무 추출물에서는 carotenoids나 갈색화 반응 생성물들이 항산화 활성에 미치는 영향이 적을 것으로 추정되었다.
- 사람의 저밀도지방단백질의 산화에 대한 생열귀나무 추출물의 항산화 효과를 측정한 결과, 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물이 MDA생성을 가장 강력하게 억제함을 보여주었다. 생열귀나무 추출물은 주로 285nm에서 흡수를 나타내는 물질이 다량 함유되어 있으며, 페놀성화합물 함량을 측정한 결과, 클로르포름 분획물을 제외한 모든 추출물에 다량 함유되어 있었다. 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물이 사람의 저밀도지방단백질 산화에 대한 항산화 효과가 가장 강력하게 나타났기 때문에, 뿌리 메탄올 추출물을 보다 더 정제하기 위하여 극성에 따른 용매 분획물을 제조한후, 각각의 분획물을 대상으로 LDL 산화에 대한 항산화 효과를 측정하였다.
- 산화에 대한 항산화 활성을 측정하였다. 생열귀나무 추출물의 페놀성 화합물 함량을 측정한 결과, 모든 부위에서 100 g 당 8.3-10.6 g으로 매우 높은 양을 함유하고 있었다. 또한, 생열귀나무 추출물 및 분획물에 대한 항산화 물질의 함량을 측정한 결과, 생열귀나무 뿌리 메탄올 추출물과 뿌리의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물이 285nm에서 흡수를 나타내는 페놀성 화합물을 다량 함유하고 있음을 확인하였다.
- 188로 매우 낮게 측정되었다. 위의 결과로 미루어 보아서 285nm에서 흡수를 나타내는 물질이 다량 함유되어 있음을 확인할 수 있었다. 생열귀나무 추출물에서는 carotenoids나 갈색화 반응 생성물들이 항산화 활성에 미치는 영향이 적을 것으로 추정되었다.
- 6g/100g으로 가장 높은 함량을 지니고 있었다. 이 결과는 위의 흡광도 결과와 일치하는 결과로서 285 nm 에서 흡수하는 페놀성 화합물이 주된 생리활성물질일 것으로 추정되었다.
- Hexane 분획물과 물 분획물은 contr이과 유사한 변화량을 나타내는 것으로 보아, 시간에 따른 LDL 산화억제능력이 미약한 것으로 나타났고, BuOH 분획물, EtOAc 분획물, 그리고 CHCl3 분획물은 8시간까지 LDL의 산화를 강력하게 억제함을 보여주었다. 이 결과로 미루어 볼 때, BuOH 분획물, EtOAc 분획물, 그리고 CHCl3 분획물의 내부에 천연 항산화제로서의 개발 가능성이 있는 물질이 존재하고 있음을 추측할 수 있었다.
- 헥산 분획물은 전혀 억제하지 못하였다. 이로 미루어 보아서 BuOH 분획물, EtOAc 분획물, 그리로 CHCl3 분획물에 사람의 저밀도 지방단백질의 산화를 억제할 수 있는 천연 항산화제가 다량 존재하고 있음을 확인하였다.
- 특히 EtOAc 분획물 및 BuOH 분획물에서 높은 흡광을 나타내었으며, 이들 분획물들이 LDL 산화에 대한 강력한 항산화 효과를 나타내었다. 이상의 결과로 미루어 보아서, 부위별로는 생열귀나무 뿌리에 285nm에서 흡광되는 페놀계 화합물들이 다량 함유되어 있으며, 이들 물질들이 주로 EtOAc 분획물 및 BuOH 분획물에 존재할 것으로 사료된다. 따라서 LDL 산화에 대한 생열귀나무 추출물의 항산화 효과는 이들 페놀계 화합물들에 의한 영향일 것으로 사료된다.
- 또한 앞선 연구에서 이들 분획물에는 다량의 catechin이 함유되어 있음을 보고한 바 있다(19). 이상의 결과를 종합하면 생열귀나무 뿌리의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물의 주된 활성물질은 catechin 등과 같은 플라보노이드계 화합물과 다량의 페놀성 화합물일 것으로 추정된다.
- 결과를 Table 1에 나타내었다. 클로르포름 추출물을 제외하고 모든 부위의 추출물에서 100 g당 8.3-10.6 g으로 매우 높은 양을 함유하고 있었다. 특히, 생열귀나무 뿌리 및 줄기의 에탄올 추출물이 10.
- 생열귀나무 뿌리 분획물들에 대한 항산화물질에 대한 흡광도 측정결과의 경우에도 주로 285nm에서 흡수되는 페놀계 화합물들의 용출이 가장 높은 것으로 확인되었다. 특히 EtOAc 분획물 및 BuOH 분획물에서 높은 흡광을 나타내었으며, 이들 분획물들이 LDL 산화에 대한 강력한 항산화 효과를 나타내었다. 이상의 결과로 미루어 보아서, 부위별로는 생열귀나무 뿌리에 285nm에서 흡광되는 페놀계 화합물들이 다량 함유되어 있으며, 이들 물질들이 주로 EtOAc 분획물 및 BuOH 분획물에 존재할 것으로 사료된다.
- 1에 나타내었다. 항산화성 물질인 phen이계 화합물 등의 흡수가 일어나는 285 nm에서의 흡광도는 뿌리의 메탄올 및 에탄올 추출물이 가장 높았으며 뿌리 > 잎 > 줄기 > 열매 순으로 흡광도가 높았다. 용매별로는 메탄올 > 에탄올 > 물 > 클로르포름 순으로 흡광도가 높게 측정 되었다.
- 3에 나타내었다. 헥산 분획물과 물 분획물을 제외한 EtOAc 분획물, BuOH 분획물, 그리고 CHCl3 분획물이 농도가 증가함에 따라 MDA 생성에 대한 높은 억제율을 나타내었다. 생열귀나무 뿌리 분획물 30 μg/mL의 농도에서 BuOH분획 물은 93.
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