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문제 정의
- 이처럼 한약재와 유용미생물은 각각 어류의 사육에 있어 유익한 효과를 거두고 있다. 따라서 본 연구에서는 (주)제우축산연구소에서 개발하여 이미 축산사료에 첨가하여 가축의 질병 예방과 육질개선 등 생산성 향상효과를 거둔바 있는 유용미생물과 함께 생리활성증대에 효과가 있는 한약재를 동시 첨가하여 배양한 사료첨가제를 넙치의 사료에 첨가하여 사료의 질적 개선 및 어체의 항산화효소 등의 생리학적인 변화에 미치는 영향을 조사하여 새로운 사료첨가 제로서의 이용성을 판별하고자 하였다.
- 이 연구에서는 유용미생물과 한방재를 이용하여 새로운 기능성 사료첨가제의 개발을 시도하였다. 우선, 개발된 한방천과 어력천의 혼합 첨가는 제조된 MP사료내의 병원미생물 수를 감소시키는 효과를 나타내었다.
제안 방법
- 그 耳고 효소활성의 1단위는 반응액 중의 pyrogallol의 산화를 50% 넉제하는 효소의 양으로 정하였다. Catalase (CAT)는 50 ml의 i>7 mM phosphate buffer (pH 7.0)에 90μ1의 30% hydrogen peroxide를 혼합하여 효소측정시료를 20 μ1를 넣어 240 nm에서 曹광도를 분광광도계로 측정하여 구하였다.
- 간 중량지수(HSI)는 실험종료 후 간장을 적출하여 체중에 대한 비로 구 斗였다. 혈청은 실험어의 미부동맥으로부터 주사기로 채혈하여 헤파린이 처리되지 않는 원심관에 담아 상온에서 약 30분간 자건 응고시킨 후 원심분리(3, 000 rpm, 20분)하여 상등액인 혈청 告 얻었다.
- 사료첨가제의 공급에 따른 혈액분석 및 항산화효소의 분석은 실험 사육 8개월 후의 장기복용 후에 조사하였다. 간 중량지수(HSI)는 실험종료 후 간장을 적출하여 체중에 대한 비로 구 斗였다.
- 실험에 사용된 어력천 및 한방천의 일반성분과 유리 아미노산 조성은 국가공인검사기관(주, 과학기술분석센타)에 의뢰하여 분석하였으며, 그 결과는 Table 1 및 2에 나타내었다. 사료첨가제의 농도는 생사료와 분말사료를 8:2의 비로 만든 모이스트 펠렛 (MP)에 어 력천과 한방천을 1:2의 비율로 첨가하여 최종농도가 0, 0.3, 0.6 및 0.9%가 되도록 각각 첨가하였다.
- 실험어는 평균전장과 체중이 각각 7.7±0.39 cm 및 3.9±0.7 g 의 넙치 치어로 콘크리트 사각수조(5x5x0.9 m)에 총 4개의 실험 구로 나누어 2반복으로 1,000마리씩 각 수조개체군의 크기에유의차이가 없도록 배치한 후 각각의 실험농도로 첨가한 MP를 1일 3-5회 매일 반복 공급하여 사육하였다. 유수량은 18~22회전/일이 되도록 하였다.
- 어력천은 유용미생물과 한약재만을 첨가한 것으로어력천의 액상에 포함되어 있는 활성을 띤 유용미생물을 이용하여 한방천에 포함되어 있는 성분의 상승작용을 위하여 개발하였다. 실험에 사용된 어력천 및 한방천의 일반성분과 유리 아미노산 조성은 국가공인검사기관(주, 과학기술분석센타)에 의뢰하여 분석하였으며, 그 결과는 Table 1 및 2에 나타내었다.
- 유용 미생물과 한약재가 포함된 새로운 사료첨가제의 다양한 농도(0.3, 0.6 및 0.9%)에 따른 넙치의 간기능의 활성에 미치는 영향 및 사료첨가제의 특성에 대해서도 조사하였다. 첨가제에 포함된 유용미생물(유산균, 바실러스균, 효모 및 광합성균) 의총수는 한방천이 5.
대상 데이터
- 사료첨가제는 유용미생물(유산균, 바실러스균, 효모 및 광합성균)과 당귀(숭엄초), 작약 등 15종의 한약재를 첨가시켜 발효 부숙시켜 제조한 액상 첨가제(어력천)와 어력천을 넙치용 분말 사료인 마린피아(수협)와 혼합 발효시킨 분말 첨가제(한방천)를 사용하였다. 어력천은 유용미생물과 한약재만을 첨가한 것으로어력천의 액상에 포함되어 있는 활성을 띤 유용미생물을 이용하여 한방천에 포함되어 있는 성분의 상승작용을 위하여 개발하였다.
- 어력천은 유용미생물과 한약재만을 첨가한 것으로어력천의 액상에 포함되어 있는 활성을 띤 유용미생물을 이용하여 한방천에 포함되어 있는 성분의 상승작용을 위하여 개발하였다. 실험에 사용된 어력천 및 한방천의 일반성분과 유리 아미노산 조성은 국가공인검사기관(주, 과학기술분석센타)에 의뢰하여 분석하였으며, 그 결과는 Table 1 및 2에 나타내었다. 사료첨가제의 농도는 생사료와 분말사료를 8:2의 비로 만든 모이스트 펠렛 (MP)에 어 력천과 한방천을 1:2의 비율로 첨가하여 최종농도가 0, 0.
- 효소의 활성측정을 위한 시료는 우선 간장을 적출하여 약 g을 0.9% NaCl로 3회 세척하여 준비하였다. 세척 후 100 mM :;odium phosphate buffer (pH 7.
이론/모형
- 원심분리한 상층액을 수거하여 10, 000 g 20분간 4"C 玉건하에서 원심분리하여 상층액을 효소측정시료로 준비하였다. Superoxide dismutase (SOD)의 측정은 효소측정시료에 50 mM phosphate buffer (pH 8.24)를 2.61 ml/g 첨가하여 3 mM pyrogallol 90 pl를 첨가하여 알카리상태에서 pyrogallol의 자동산화율이 억 阿되는 양을 측정하는 Marklung Marklund (1974)의 방법으 此 325 nm에人; 흡광도를 분광광도계로 측정하여 구하였다. 그 耳고 효소활성의 1단위는 반응액 중의 pyrogallol의 산화를 50% 넉제하는 효소의 양으로 정하였다.
- 무균 배양하였다. 분리균은 Mac-Faddin (2000)의 방법에 따라 생물학적, 생화학적 성상시험을 실시한 후, Bergey's manual of systematic bacteriology에 준하여 Edwardsiella tarda, Vibrio anguillum, Streptococcus sp을 각각 동정하였으며 , 각각의 미생물수는 Buck and Cleverdon (I960)의 방법으로 PPES- II 배지에 평판도말법으로 접종하여 나타난 집락을 CFU (colony forming unit)로 계산하였다.
- 혈청은 실험어의 미부동맥으로부터 주사기로 채혈하여 헤파린이 처리되지 않는 원심관에 담아 상온에서 약 30분간 자건 응고시킨 후 원심분리(3, 000 rpm, 20분)하여 상등액인 혈청 告 얻었다. 혈중단백질량은 Lowry et al. (1951)의 방법에 준하 可 측정하였다.
성능/효과
- 2xl03 및 2.3戏。3 CFU/g 으로 1, 13 그리고 39.6% 감소하였으며 0.9% 처리구에서는 5.1xlO3, 2.7xl03 그리고 1.8x1b CFU/g 으로 36.4, 30.3 그리고 31.06% 수준까지 감소하였다(Table 4).
- 05). 간장 중의 단백질량은 대조군에서 가장 높고 사료첨가제의 투여군에서는 대조군에 비하여 전 실험군에서 유의하게 낮은 수치를 나타내었다(Fig. 2, 尸<0.05). 이에 반하여 혈중 단백질량은 대조군에서 가장 낮고 사료첨가 군에서는 대조군에 비해 높은 수치를 나타내었다(Fig.
- 본 실험 기간 중 사료첨가제의 공급에 따른 성장에 대한 차이는 대조군과 큰 차이를 나타내지 않았으나, 체중에 있어서는 모든 투여군에서 높게 나타나는 경향을 보였다(data not shown). 사료첨가제의 첨가에 의한 사육을 통한 넙치의 HSI는 대조군에 비하여 0.
- 생체를 보호하게 된다. 본 연구에서 SOD의 활성은 대조군과 0.3% 및 0.9%에서는 유의한 차이를 나타내지 않았으나, 0.6%에서는 그 활성이 유의하게 증가하는 경향을 나타내었다. 흰쥐의 경우, 카드뮴에 의한 급성 중독이 일어나게 되면 SOD의 활성이 급격히 감소하게 되나, 비타민 E의 투여에 의해 SOD의 활성이 다시 증가하는 결과를 나타내는 것으로 보고 되고 있다(김과 이, 2000).
- 또한 안 등(1998)은 비타민 E의 공급으로 항산화효소의 활성이 증대되며, CAT는 유의한 차이는 없으나 증가하는 경향을 나타내는 것으로 보고하고 있다. 본 연구에서도 새로이 개발된 한약재와 유용미생물 혼합 사료첨가제의 첨가로 인해 0.6%군에서 SOD활성의 증대를 가져왔으며, CAT의 경우는 0.3%, 0.6%첨가군 순으로 나타났으며, 대조군에 비해 유의한 증가를 나타내었다. 이러한 결과는 본 연구에서 사용된 한방천 및 어력천에 포함되어 있는 성분에 의해 어체 내의 항산화효소의 활성이 증대되어 외부 스트레스 작용에 대한 내성을 증대시킴으로서 어체의 활성 증대에 좋은 효과를 가져올 것으로 기대된다.
- shown). 사료첨가제의 첨가에 의한 사육을 통한 넙치의 HSI는 대조군에 비하여 0.3%의 투여군에서 유의하게 높은 수치를 나타내었다(Fig. 1, P<0.05). 간장 중의 단백질량은 대조군에서 가장 높고 사료첨가제의 투여군에서는 대조군에 비하여 전 실험군에서 유의하게 낮은 수치를 나타내었다(Fig.
- 혈중의 단백질량은 모든 첨가군이 유의한 증가를 나타내었으나, 간장내의 단백질량은 대조군이 높은 수치를 나타내었다. 생체방어기작을 하는 catalase 및 superoxide dismutase 는 0.3% 및 0.6% 첨가군에서 각각 높은 활성을 나타내었다. 이상의 결과로 한약재와 유용미생물 혼합 사료첨가제의 사용으로 넙치의 항산화효소의 활성을 증대시켜 어류스트레스의 면역증대를 기대할 수 있을 것으로 여겨진다.
- 사료첨가제의 개발을 시도하였다. 우선, 개발된 한방천과 어력천의 혼합 첨가는 제조된 MP사료내의 병원미생물 수를 감소시키는 효과를 나타내었다. 수중에는 Vibrio anguillarum 및 Streptococcus sp.
- , 1977; Siddiqui, 1977; Harb이 1, 1979; Quentel and Aldrin, 1986; Weber, 1979; McLeay and Brown, 1979). 이 연구에서는 0.6%의 첨가군에서 가장 높은 혈중 단백질량을 나타내었으며, 대조군에서 가장 낮은 수치를 나타내었다. 그러나 간장내의 단백질량을 조사한 결과 이와는 반대의 수치를 나타내었다.
- 3%의 첨가군에서 유의하게 증가하였다. 혈중의 단백질량은 모든 첨가군이 유의한 증가를 나타내었으나, 간장내의 단백질량은 대조군이 높은 수치를 나타내었다. 생체방어기작을 하는 catalase 및 superoxide dismutase 는 0.
후속연구
- 또한 넙치의 항산화 효소의 활성을 증대시킴과 동시에 간장의 활력을 증대 시켜 생리적 활성 증대 및 질병에 대한 내성을 증대시킬 것으로 기대된다. 가장 효과적인 첨가농도는 0.6%의 농도의 첨가가 가장 적합한 농도로 추정되나, 경제적인 측면을 고려한 세부적인 농도의 실험 및 병원성 미생물을 이용한 실질적인 항병성에 대한 검토가 앞으로 이루어져야 할 것으로 여겨진다.
- 효과를 가져 올 것으로 기대된다. 또한 넙치의 항산화 효소의 활성을 증대시킴과 동시에 간장의 활력을 증대 시켜 생리적 활성 증대 및 질병에 대한 내성을 증대시킬 것으로 기대된다. 가장 효과적인 첨가농도는 0.
- , 1992). 본 연구에서는 유산균을 비롯한 광합성균, Bacillus균을 다량으로 포함하고 있어 체내 생리활성증대뿐만이 아니라 수중에 존재하는 병원균과도 경쟁하여 그 성장을 억제함으로서 질병에 대한 내성을 증대시킴과 동시에 사육환경의 개선에 효과가 기대된다고 여겨진다. 또한 본 연구 기간 중에 발생한 림포시스티스의 감염에 따른 사육 실험 어의 생존율은 농도 의존적으로 증가하는 것으로 나타나 질병에 대한 내성의 증대에 대한 가능성을 뒤받침하고 있다(data not shown).
- 6%첨가군 순으로 나타났으며, 대조군에 비해 유의한 증가를 나타내었다. 이러한 결과는 본 연구에서 사용된 한방천 및 어력천에 포함되어 있는 성분에 의해 어체 내의 항산화효소의 활성이 증대되어 외부 스트레스 작용에 대한 내성을 증대시킴으로서 어체의 활성 증대에 좋은 효과를 가져올 것으로 기대된다.
- 이상의 결과로 유용미생물과 한약재를 혼합한 첨가제는 현재 사용 중이 습사료의 질적 개선을 통하여 질병의 원인을 감소시키는 효과를 가져 올 것으로 기대된다. 또한 넙치의 항산화 효소의 활성을 증대시킴과 동시에 간장의 활력을 증대 시켜 생리적 활성 증대 및 질병에 대한 내성을 증대시킬 것으로 기대된다.
- 6% 첨가군에서 각각 높은 활성을 나타내었다. 이상의 결과로 한약재와 유용미생물 혼합 사료첨가제의 사용으로 넙치의 항산화효소의 활성을 증대시켜 어류스트레스의 면역증대를 기대할 수 있을 것으로 여겨진다.
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