본 연구에서는 천년초 줄기 물추출물의 전처치가 사염화탄소로 유발한 흰쥐의 간 손상에 대해 보호효과를 나타내는지 알아보고자 하였다. 천년초 추출액은 건조 고형분량을 측정하고 1g/kg 및 0.5g/kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일동안 경구투여 하였다. $CCl_4$는 올리브유로 희석하여(1:4) 0.5ml/kg체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사하였다. 사염화탄소 처치에 의해 혈청 AST, ALT 및 ALP 활성이 대조군과 비교하여 각각 4.3, 4.7 및 1.2배 증가하였다. 반면, 천년초 줄기 추출물을 1g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 $CCl_4$군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다. 사염화탄소에 의해 간의 지질과산화 반응이 증가하였으며 SOD 및 GST활성이 감소하였다. 1g/kg의 천년초 줄기 추출물의 투여는 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시키는 결과를 보였다. 또한, 천년초 줄기 추출물은 $132.2{\mu}mol$ vit. C eq/g의 OH 라디칼 소거활성을 나타내었으며 페놀화합물의 함량이 6.52mg/g이다. 이러한 결과는 천년초 줄기 추출물의 항산화 활성 및 사염화탄소로 부터 간손상을 예방하는 효과가 있음을 보여주고 있다.
본 연구에서는 천년초 줄기 물추출물의 전처치가 사염화탄소로 유발한 흰쥐의 간 손상에 대해 보호효과를 나타내는지 알아보고자 하였다. 천년초 추출액은 건조 고형분량을 측정하고 1g/kg 및 0.5g/kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일동안 경구투여 하였다. $CCl_4$는 올리브유로 희석하여(1:4) 0.5ml/kg체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사하였다. 사염화탄소 처치에 의해 혈청 AST, ALT 및 ALP 활성이 대조군과 비교하여 각각 4.3, 4.7 및 1.2배 증가하였다. 반면, 천년초 줄기 추출물을 1g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 $CCl_4$군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다. 사염화탄소에 의해 간의 지질과산화 반응이 증가하였으며 SOD 및 GST활성이 감소하였다. 1g/kg의 천년초 줄기 추출물의 투여는 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시키는 결과를 보였다. 또한, 천년초 줄기 추출물은 $132.2{\mu}mol$ vit. C eq/g의 OH 라디칼 소거활성을 나타내었으며 페놀화합물의 함량이 6.52mg/g이다. 이러한 결과는 천년초 줄기 추출물의 항산화 활성 및 사염화탄소로 부터 간손상을 예방하는 효과가 있음을 보여주고 있다.
Effect of Cheonnyuncho extract on the liver injury of rats treated carbon tetrachloride $(CCl_4)$ was studied. Cheonnyuncho extract was administerd at dose of 0.5 and 1 g/kg/day, p.o. for 2 weeks. $CCl_4$ was treated at dose of $0.5\;mL/kg$, i.p. 3 hours later from t...
Effect of Cheonnyuncho extract on the liver injury of rats treated carbon tetrachloride $(CCl_4)$ was studied. Cheonnyuncho extract was administerd at dose of 0.5 and 1 g/kg/day, p.o. for 2 weeks. $CCl_4$ was treated at dose of $0.5\;mL/kg$, i.p. 3 hours later from the last pretreatment of Cheonnyuncho extract. Administration of Cheonnyuncho extract at a dose of 1 g/kg decreased serum AST, ALT and ALP activities by 36, 41, and 22% respectively compared to $CCl_4$ treatment group. Increased lipid peroxidation and decreased SOD and GST activities were also recovered by pretreatment of Chonnyuncho extract in liver of rats. These results suggest that Cheonnyuncho extract has hepatoprotective effect against liver injury.
Effect of Cheonnyuncho extract on the liver injury of rats treated carbon tetrachloride $(CCl_4)$ was studied. Cheonnyuncho extract was administerd at dose of 0.5 and 1 g/kg/day, p.o. for 2 weeks. $CCl_4$ was treated at dose of $0.5\;mL/kg$, i.p. 3 hours later from the last pretreatment of Cheonnyuncho extract. Administration of Cheonnyuncho extract at a dose of 1 g/kg decreased serum AST, ALT and ALP activities by 36, 41, and 22% respectively compared to $CCl_4$ treatment group. Increased lipid peroxidation and decreased SOD and GST activities were also recovered by pretreatment of Chonnyuncho extract in liver of rats. These results suggest that Cheonnyuncho extract has hepatoprotective effect against liver injury.
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문제 정의
본 연구에서는 천년초 줄기 물주줄물의 전처치가 사염화탄소로 유발한 흰쥐의 간 손상에 대해 보호효과를 나타내는지 알아보고자 하였다. 천년초 추출액은 건조 고형분량을 측정하고 Igkg 및 0.
여름에는 물을 가까이하여 성장 번식하고 휴면기인 겨울에는 비닐하우스가 없는 노지에서도 생존하며 병충해에 강한 특징을 지니고 있다. 본 연구에서는, 천년초의 생리활성을 밝히기 위한 일환으로 천년초 줄기 추출물의 전처치가 사염화탄소(CC.) 로 유발된 간 손상에 미치는 영향을 알아보고자 하였다.
제안 방법
AST(aspartate aminotransferase), ALT(alanine aminotransferase) 및 ALP(alkaline phosphatase) 활성은 혈액을 상온에서 15분간 방치한 뒤 3, 000 rpm, 10분간 원심분리하여 혈청을 분리 하고kit((Daiichi Pure Chemicals Co., Ltd, Tokyo, Japan)를 사용하여 혈액자동분석기(Hitachi 700-110, Tokyo, Japan)로 측정하였다.
5g/kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일 동안 경구투여하였다. CC1,는 올리브유로 희석하여(1 :4) 0.5 ml/kg 체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사하였다. 사염화탄소 처치에 의해 혈청 AST, ALT 및 ALP 활성이 대조군과 비교하여 각각4.
5mL/kg 체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사 하였다. CCL, 투여 24시간 후 ether로 마취시키고 개복하여 복부 대동맥에서 혈액을 체취하였으며 간은 적출하여 생리식염수로 세척한 뒤 -70℃에 보관하며 분석에 사용하였다.
이때 각 군에서 투여 용량이 일정하도록 증류수를 이용하여 추출액의 농도를 조절하였으며 대조군과 CC14 군은 14일 동안 증류수를 경구투여하였다. CCk는 올리브유로 희석하여(1:4) 0.5mL/kg 체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사 하였다. CCL, 투여 24시간 후 ether로 마취시키고 개복하여 복부 대동맥에서 혈액을 체취하였으며 간은 적출하여 생리식염수로 세척한 뒤 -70℃에 보관하며 분석에 사용하였다.
Fenton 반응(FeSQ/HQ)에 의해 OH 라디칼을 발생시키고 OH 라디칼에 특이적으로 반응하는 indoxyl-B-D-gkicuronide를 발광제로 사용하여 화학발광기(Microtiterplate Luminometer, EG&G BertholdLB96R Germany)로 측정하였다(15). 활성정도는 vitamin C 의 활성 능력과 비교하여 mole vit.
5 g/Kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일 동안 경구투 여 하였다(Table 1).이때 각 군에서 투여 용량이 일정하도록 증류수를 이용하여 추출액의 농도를 조절하였으며 대조군과 CC14 군은 14일 동안 증류수를 경구투여하였다. CCk는 올리브유로 희석하여(1:4) 0.
본 연구에서는 천년초 줄기 물주줄물의 전처치가 사염화탄소로 유발한 흰쥐의 간 손상에 대해 보호효과를 나타내는지 알아보고자 하였다. 천년초 추출액은 건조 고형분량을 측정하고 Igkg 및 0.5g/kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일 동안 경구투여하였다. CC1,는 올리브유로 희석하여(1 :4) 0.
사료는 (주)퓨리나코리아의 흰쥐사 료를 사용하였으며 음용수는 자외선 살균한 물을 자유섭취 시 켰다. 천년초 추출액은 건조고형분량을 측정하고 1 g/kg 및 0.5 g/Kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일 동안 경구투 여 하였다(Table 1).이때 각 군에서 투여 용량이 일정하도록 증류수를 이용하여 추출액의 농도를 조절하였으며 대조군과 CC14 군은 14일 동안 증류수를 경구투여하였다.
총 페놀 화합물의 함량 측정은 folin-ciocalteu 시약으로 페놀 화합물을 발색시키고 분광광도계로 측정하였다(16). 결과는 표 준물질로 gallic acid를 사용하여 mg/g으로 표시하였다.
대상 데이터
Thiobarbituric acid, 1, 1, 3, 3-tetraethoxypropane, epinephrine, hydrogenperoxide, glutathion(GSH), GSH-reductase, NADPH, t- butylhydroperoxide, 1 -chloro-2, 4-dinitrobenzene, indoxyl-B-D-glu- curonide(IBG), vitamin C, fblin-ciocalteu reagent, gallic acid는 Sigma(St. Louis, USA) 제품을 사용하였다. 단백질 시약은 Bio- Rad(Hercules, CA, US A)제품을 기타 시약은 일반 특급시약을 사용하였다.
실험동물은 무게 120 g 전후의 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐를 (주)오리엔트(가평, 경기도)로부터 구입하여 일주일간 온도20±3℃, 상대습도 50+ 10%, 12시간 명암주기의 실험실 환경에 순화시킨 후 사용하였다. 사료는 (주)퓨리나코리아의 흰쥐사 료를 사용하였으며 음용수는 자외선 살균한 물을 자유섭취 시 켰다. 천년초 추출액은 건조고형분량을 측정하고 1 g/kg 및 0.
실험동물은 무게 120 g 전후의 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐를 (주)오리엔트(가평, 경기도)로부터 구입하여 일주일간 온도20±3℃, 상대습도 50+ 10%, 12시간 명암주기의 실험실 환경에 순화시킨 후 사용하였다. 사료는 (주)퓨리나코리아의 흰쥐사 료를 사용하였으며 음용수는 자외선 살균한 물을 자유섭취 시 켰다.
단백질 시약은 Bio- Rad(Hercules, CA, US A)제품을 기타 시약은 일반 특급시약을 사용하였다. 천년초는 (주)천년초(아산, 충청남도)에서 재배한 것을 사용하였다.
데이터처리
결과는 평균±SD로 나타내었으며, 통계적 유의성은 ANOVA 와 Tucky test로 검증하였다.
이론/모형
결과는 epinephrine의 자가산화율을 50% 억제하는 효소 활성도를 1단위로 하여 unit/mg protein으로 나타내었다. Catalase(CAT) 활성은 Claibom(12)의 방법에 따라 240nm에서 HQ?의 소모율을 측정하고 μmol/min/mg protein으 로 계산하였3. GSH-Peroxidase(GSH-Px) 활성은 340nm에서 NADPH의 감소를 측정하여 nm이/mni/mg proteine로 표시하였다(13).
25 M-sucrose 용액으로 균질화하고 600Xg에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 효소원으로 사용하였다. Superoxide dismutase(SOD) 활성은 epinephrine의 자동산화를 이용한 방법으로 측정하였다(11). 결과는 epinephrine의 자가산화율을 50% 억제하는 효소 활성도를 1단위로 하여 unit/mg protein으로 나타내었다.
간 조직을 0.15 M-KC1 용액을 이용하여 10%-균질액을 만들고 Mihara 등(10)의 방법으로 Thiobarbituric acid reactive sub- stances(TBARS)를 측정하였다.
성능/효과
사염화탄소에 의해 간의 지질과산화 반응이 증가하였으며 SOD 및 GST 활성이 감소하였다. 1 g/kg의 천년초 줄기 추출물의 투여는 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시키는 결과를 보였다. 또한, 천년초 줄기 추출물은 132.
4). GST의 경우 Fig. 5에서처럼 사염화탄소에 의해 활성이 유의적으로 감소하였으며 1 g/kg의 천년초 추출물의 전처치에 의해 회복되는 결과를 보였다.
5g/kg으로 투여한 군에서도 CC1, 군과 비교하여 TBARS가 감소하였으나 통계적 유의성은 없었다. 간세포의 항산화 효소활성을 측정한 결과, Fig. 2에서 보는 것과 같이 사염화탄소에 의해 SOD가 유의적으로 감소하였으며 1 g/kg의 천년초 추출물의 전처치로 감소된 SOD가 회복되는 결과를 보였다. 그러나 CAT의 활성은 사염화탄소에 의해 변화를 보이지 않았다(Fig.
Superoxide dismutase(SOD) 활성은 epinephrine의 자동산화를 이용한 방법으로 측정하였다(11). 결과는 epinephrine의 자가산화율을 50% 억제하는 효소 활성도를 1단위로 하여 unit/mg protein으로 나타내었다. Catalase(CAT) 활성은 Claibom(12)의 방법에 따라 240nm에서 HQ?의 소모율을 측정하고 μmol/min/mg protein으 로 계산하였3.
결론적으로, lg/kg의 천년초 줄기 추출물의 투여는 CC14 (0.5mL/kg)에 의한 혈청 AST, ALT 및 ALP 증가를 효과적으로 억제하였으며, 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시켰다. 이러한 결과는 천년초 줄기 추출물이 사염화탄소로 부터 간손상을 예방하는 효과가 있음을 보여 주고 있다.
2배 증가하였다. 반면, 천년초 줄기 추출물을 1 g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 CC14 군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다. 천년초 줄기 추출물을 0.
5 ml/kg 체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사하였다. 사염화탄소 처치에 의해 혈청 AST, ALT 및 ALP 활성이 대조군과 비교하여 각각4.3, 4.7 및 1.2배 증가하였다. 반면, 천년초 줄기 추출물을 1 g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 CC14 군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다.
반면, 천년초 줄기 추출물을 1 g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 CC14 군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다. 사염화탄소에 의해 간의 지질과산화 반응이 증가하였으며 SOD 및 GST 활성이 감소하였다. 1 g/kg의 천년초 줄기 추출물의 투여는 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시키는 결과를 보였다.
사염화탄소의 투여에 의해 지질 과산화반응 산물인 TBARS 가 유의적으로 증가하였으며 천년초 추출물을 1 g/kg으로 전처치한 군에서는 CC14 군과 비교하여 약 42%의 감소를 보였다 (Fig. 1).천년초 추출물을 0.
52mg/g이다. 이러한 결과는 천년초 줄기 추출물의 항산화 활성 및 사염화탄소로 부터 간손상을 예방하는 효과가 있음을 보여주고 있다.
5mL/kg)에 의한 혈청 AST, ALT 및 ALP 증가를 효과적으로 억제하였으며, 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시켰다. 이러한 결과는 천년초 줄기 추출물이 사염화탄소로 부터 간손상을 예방하는 효과가 있음을 보여 주고 있다.
5 g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성도 CC14 군과 비교하여 감소하는 경향을 보이나 통계적 유의성은 없는 것으로 나타났디. 즉, 사염화탄소에 의해 간 손상의 지표로 사용되는 효소의 횔성이 증가되었으며 천년초 줄기추출물의 전처치에 의해 활성 증가가 억제되는 결과를 보였다. 사염화탄소는 cytochrome K502E1에 의해 활성화되어 trichloromethyl radical(CCI3 라디칼)로 대사된다.
반면, 천년초 줄기 추출물을 1 g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 CC14 군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다. 천년초 줄기 추출물을 0.5 g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성도 CC14 군과 비교하여 감소하는 경향을 보이나 통계적 유의성은 없는 것으로 나타났디. 즉, 사염화탄소에 의해 간 손상의 지표로 사용되는 효소의 횔성이 증가되었으며 천년초 줄기추출물의 전처치에 의해 활성 증가가 억제되는 결과를 보였다.
후속연구
항산화 효소는 활성산소의 과다 생성에 의해 고갈될 수 있는 한편 화학물질에 의해 합성이 유도되기도 하므로(28, 29) 독성물질의 처치량, 기간 및 기타의 실험조건에 의해 다양한 결괴를 보일 수 있다. 따라서 항산화 효소활성의 증감은 세포의 homeostasis의 차원에서 비효소 형태의 항산화제를 포함한 총체적인 방어시스템의 변화와 함께 비교 해석되어야 할 것이다.
이상에서 보고된 다양한 효능, 효과를 고려할 때 손바닥선인 장은 건강증진을 위한 기능성 식품 및 약품 소재로 연구, 개발할 가치가 높은 것으로 사료된다. 멕시코와 미국 등지에서는 요리 재료로 사용하거나 젬, 젤리, 쥬스, 기타 가공품으로 식용하고 있으며 건강기능식품으로도 개발하였다.
즉, 사염화탄소로부터 간손상을 예방하는 물질은 대사 활성화 효소를 억제하거나 항산화 활성을 통해 간세포를 보호하는 것으로 알려지고 있다. 천년초 추출물이 어떠한 기전을 통해 사염화탄소로 유도된 간독성을 예방하는가에 대하여는 향후 연구가 요구되나 페놀성 물질에 의한 OH 라디칼 소거 활성이 사염화탄소에 의한 항산화 효소 활성감소 및 지질과산화 반응 증가를 억제하므로 간세포 손상을 감소시키는 한 요인으로 작용하였을 것으로 추정 된다.
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