[논문]칠갑산 야생버섯 추출물로부터 혈전용해효소의 활성 검색

김준호; 유관희; 석순자; 김양섭

doi:10.4489/kjm.2005.33.1.018

초록
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칠갑산에 자생하는 야생버섯 67종의 Fibrin 분해활성을 검색한 결과 Marasmius pulcherripes(종이꽃낙엽버섯)는 plasmin 0.75 units의 112%에 해당하는 fibrin 분해활성을 나타냈고, Helvella elastica(긴대안장버섯)는 60%, Psathyrella sp.는 49%, Fomitella fraxinea(장수버섯)은 40%, Leucoagaricus rubrotinctus(돌여우버섯)는 39%, Lepista sordida(자주방망이버섯아재비)와 Oudemansiella sp.는 각각 41%, 26%의 fibrin 분해활성을 나타냈다. 그러나 광대버섯과, 그물버섯과, 끈적버섯과, 난버섯과, 무당버섯과, 귀신그물버섯과, 독청버섯과, 꾀꼬리버섯과, 불로초과, 소나무비늘버섯과, 바구니버섯과, 말뚝버섯과, 어리알버섯과, 붉은목이과 및 술잔버섯과의 버섯은 모두 활성을 나타내지 않았다.

Abstract ▼ AI-Helper

Extracts of 67 wild mushrooms were tested for their fibrinolytic activities. The extract of Marasmius pulcherripes showed 112% higher increased activity as compared with a positive control, plasmin (0.75 U/ml). Helvella elastica and Psathyrella sp. showed 60% and 49% of activities to that of plasmin...

Extracts of 67 wild mushrooms were tested for their fibrinolytic activities. The extract of Marasmius pulcherripes showed 112% higher increased activity as compared with a positive control, plasmin (0.75 U/ml). Helvella elastica and Psathyrella sp. showed 60% and 49% of activities to that of plasmin, respectively. Three mushrooms such as Lepista sordida, Fomitella fraxinea, and Leucoagaricus rubrotinctus showed 40% of plasmin activity. The other 60 mushroom extracts did not show any fibrinolytic activity.

주제어

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문제 정의

, 1997) 로부터혈전용해물질을 만들어내는 균주를 분리하고 그들이 생산한 혈전용해 효소의 분리 점제에 관한보고도 있었다. 본연구에서는 많은 종류의 생리활성 물질을 포함하고 있는 야생 버섯으로부터 혈전용해 물질을 찾고자 하였다.

제안 방법

, 1951) 을 이 용하여 즉정 하였으며, bovine serum albumin을 사용한 표준곡선에 의하여 환산하였다. Fibrin 분해활성의 측정 (Fibrin plate assay)은 Haverkate-Trass의 fibrin plate빕 (Haverkate and Trass, 1974)에 따라 2% gelatin용액에 녹인 0.7%(W/V) fibrinogen 용액 10㎖와 0.05 M Barbital 완충용액 (pH 7, 5)에 녹인 thrombin(100 NIH units) 50㎕ 을 잘 섞은 후 이를 Petri dish에 부어 fibrin 막을 만든 다음 시료로 처리된 용액을 씩 fibrin plate 위에 점적한 후 36%에서 8시간 방치하고 fibrin막이 용해되면 용해 면적을 측정하여 활성를 비교하였다’ 대조구조로는 혈선 용해 효소인 plasmin(0.75 U//wZ>을 사용하였으며, 다음과 같은 방법으로 혈전용해활성을 산출하였다.
김, 1998; Kim and Kim, 1999)과 할미송이버섯(김, 2000)■으로부터 혈전용해 물질의 분리 정제에 관한보고 이외에는 거의 발표되어 있지않아, 많은 야생버섯으로부터 혈전용해물질의 개발에 관한 체계적인 연구가 필요하게 뇌었다. 이에 따라, 혈전 용해 물질을 버섯으로부터 탐색하여 새로운 혈전융해제 개발을 위한 기초 자료로 사용하기 위해 치악산에 자생하는 65종의 야생버섯 추출물로부터 fibrin 분헤 활성을 검색하여 발표한바 있지만(김 둥, 1998), 좀너 많은 야생버섯의 활성을 탐색하기위해 칠갑산에 자생하는 야생버섯 67종으로부터 fibrin 분해활성을 검색하였다,

대상 데이터

실험에 사용한 버섯시료(자실체)는 2001년 7월 II 일에 충청남도 칠갑산에서 채집하여 분류 동정한 디음 시료로 사용하였으며(Table I), 시료 처리 시 모든 작업은 4°C에서 행하였다. 체집한 버섯 약 10 g를 20 mM Tris- HC₁ 왼충용액 (pH 7.

이론/모형

행하였다. 체집한 버섯 약 10 g를 20 mM Tris- HC₁ 왼충용액 (pH 7.0)에 넣고 homogenizer로 잘게 ■ 부순 후 gauze로 걸러낸 용액을 4°C, lOOOQXg에서 60분간 원심분리 한 후 용액의 농도를 22 mg/㎖로 맞추고 시료로 사용하였다- 단백질의 농도는 Lowry법 (Lowry el al., 1951) 을 이 용하여 즉정 하였으며, bovine serum albumin을 사용한 표준곡선에 의하여 환산하였다. Fibrin 분해활성의 측정 (Fibrin plate assay)은 Haverkate-Trass의 fibrin plate빕 (Haverkate and Trass, 1974)에 따라 2% gelatin용액에 녹인 0.

성능/효과

는 각각 41%, 26%의 fibrin 분해횔-성을 나타냈다. 그러나 광대버섯과, 그물버섯과, 끈적 버 섯과, 난버섯과, 무낭버섯과, 귀신그물버 섯고h 독청 버섯과, 꾀꼬리버섯과, 불로초괴-, 소나무비늘버싯과, 바구니버섯고h 말뚝버섯과, 어리알버섯과, 붉은목이과 및 술잔버섯과의 버싯은 모두 활성을 나타내지 않았다.
실험 결과에서 나타낸 바와 같이 많은 종류의 버섯에 활성이 좋은 fibrin 분해 물실이 존재함올 확인 할 수 있었다. 활성이 큰 버섯들이 갖고 있는 fibrin 분해효소가 혈전에 대한 선택성이 크고 또한 이 버섯들의 대량 재배가 가능할 경우 기존의 혈전용해제들이 갖고 있는 단점인 고가의 제품 대신 저가의 새로운 혈선용해제의 개발이 가능할 것으로 기대되며, 또한 이 실해 결과들은 새로운 혈전용해제 개발의 기초 자료로 중요하게 사욤됨 수 있을 것으로 기대된다.
칠갑산에 자생하는 야샘버섯 67종의 Fibrin 분해 활성을 검색한 결과 Marasmius pulcherripes(종이꽃낙엽버섯)는 plasmin 0.75 united】 112%에 해당하는 fibrin 분해횔성을 나타냈고, Helvella elastica(긴대안장버섯)는 60%, Psathyrella sp는 49%, Fomitella, fraxinea(장수버섯)은 40%, Leuca- agaricusruratuoncus돌여우버섯)는 39%, Lepista sordida (자주방망이버섯아재비)와 Oudemanslella sp.는 각각 41%, 26%의 fibrin 분해횔-성을 나타냈다.
활성을 보이는 7종의 버섯 중에서 송이과 버섯이 3종으로 가장 많았고 또한 활성도 가장 커 송이과 버섯이 혈전용해효소 함유비율이 높은 것으로 나타났다. 지금까지 혈전용해 효소와 관련해 발표된 버섯 중 쓴송이버섯, 뽕나무버섯, 할미송이버섯은 야생버섯이었지만, 대부분의 다른 버섯은 주로 재배된 버섯들이었다.

후속연구

활성이 큰 버섯들이 갖고 있는 fibrin 분해효소가 혈전에 대한 선택성이 크고 또한 이 버섯들의 대량 재배가 가능할 경우 기존의 혈전용해제들이 갖고 있는 단점인 고가의 제품 대신 저가의 새로운 혈선용해제의 개발이 가능할 것으로 기대되며, 또한 이 실해 결과들은 새로운 혈전용해제 개발의 기초 자료로 중요하게 사욤됨 수 있을 것으로 기대된다.

참고문헌 (3)

Hyun-Kuk Kim, Gu-Taek Kim, Dae-Kyung Kim, Won-A Choi, Sung-Hoon Park, Yong-Kee Jeong, In-Soo Kong. Purification and characterization of a novel fibrinolytic enzyme from Bacillus sp. KA38 originated from fermented fish. Journal of fermentation and bioengineering, vol.84, no.4, 307-312.

상세보기
KIM, Jun-Ho, KIM, Yang Sun. A Fibrinolytic Metalloprotease from the Fruiting Bodies of an Edible Mushroom, Armillariella mellea. Bioscience, biotechnology, and biochemistry, vol.63, no.12, 2130-2136.

상세보기
Park, Yong-Doo, Kim, Jong-Won, Min, Byong-Goo, Seo, Jeong-Won, Jeong, Jong-Moon. Rapid purification and biochemical characteristics of lumbrokinase III from earthworm for use as a fibrinolytic agent. Biotechnology letters. : a monthly journal for the rapid communication of results and developments in all aspects of biotechnology, vol.20, no.2, 169-172.

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