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문제 정의
- 그리고 이들 병원성 선충의 활용성을 증대시키기 위해서는 병원성 이 우수한 선충의 발굴이 지속적으로 수행되 어야 한다. 따라서 본 연구는 우리나라에서 분리된 곤충병원성 선충들의 등얼룩풍뎅이 유 충에 대한 병원성 정도를 알아보고, 생물적 방 제인자로서의 활용가능성을 조사하고자 수행하였다.
제안 방법
- longicaudum 논산, Steinemema sp. 7, 24, 52, 55, 60, 64, 206, 207, 209, 210, 219, 227 계통은 꿀벌부채명나방(Galleria mellonella) 노숙유충을 미끼로 이용하여 토양에서 분리한 것을 이용하였다. 분리한 선충은 꿀벌부채명나방 노숙 유충에 재접종하여 Dutky 등(1964)의 방법으로 증식시켰으며, 증식된 선충은 White trap을 이용하여 수확하였다.
- 곤충병원성 선충의 등얼룩풍뎅이 3령충에 대한 실내 병원성 검정을 위하여 동래베네스트 골프장의 티에서 채취한 토양을 4mm체로 친 다음, 120℃, 1.5kgf/cnf에서 살균하여 건조 시켰다. 건조시킨 토양을 살균수로 수분을 13%(w/v) 로 맞춘 다음 sweet heart cup에 20g씩 넣었다.
- 선충 접종 후 발아시킨 벤트그라스 종자를 4-6립 뿌려주었다. 대조구에는 살균수만 0.5 mm씩 처리하였다. 접종 후 25 ± 3℃의 실내에 보관하면 서 2주후에 선충에 의한 치사유무를 현미경 하에서 조사하였다.
- 실험은 10개의 sweet heart cup을 한 반복으로 각 처리별로 4반복으로 수행하였다. 등얼룩풍뎅이 3령충 내에서 증식된 선충의 수는 치사율 조사가 끝난 뒤 유중을 해부하여 현미경 하에서 선충의 수를 조사하였다.
- 접종 후 25 ± 3℃의 실내에 보관하면 서 2주후에 선충에 의한 치사유무를 현미경 하에서 조사하였다. 실험은 10개의 sweet heart cup을 한 반복으로 각 처리별로 4반복으로 수행하였다. 등얼룩풍뎅이 3령충 내에서 증식된 선충의 수는 치사율 조사가 끝난 뒤 유중을 해부하여 현미경 하에서 선충의 수를 조사하였다.
- 건조시킨 토양을 살균수로 수분을 13%(w/v) 로 맞춘 다음 sweet heart cup에 20g씩 넣었다. 여기에 건강한 3령충을 1마리씩 넣고, 토양 속으로 완전히 들어간 것을 확인한 다음, 10℃ 냉장고에 보관 중이던 곤충 병원성 선충을 200마리/0.5 농도로 0.5 ml 씩 피펫을 이용하여 고루 접종하였다. 선충 접종 후 발아시킨 벤트그라스 종자를 4-6립 뿌려주었다.
- 5 mm씩 처리하였다. 접종 후 25 ± 3℃의 실내에 보관하면 서 2주후에 선충에 의한 치사유무를 현미경 하에서 조사하였다. 실험은 10개의 sweet heart cup을 한 반복으로 각 처리별로 4반복으로 수행하였다.
대상 데이터
- longicaudum 논산, Steinernema sp. 7, 24, 52, 55, 60, 64, 206, 207, 209, 210, 219, 227 계통}을 이용하여 실험을 수행하였다. 등얼룩풍뎅이 유충 한 마리 당 200마리의 선충을 처리하였을 때, 14일 후 치사율은 Heterorhabditis sp.
- 곤충병원성 선충은 우리나라에서 분리한 22 계 통을 이용하였다. Steinemema glaseri 동래 계통과 Heterorhabditis sp.
- 등얼룩풍뎅이 유충은 4월 중순에 부산 동래 베네스트 골프장의 티에서 채집하였다. 채집한 유충은 실험실로 가져 와 직경 10.
- 6 cm, 높이 6 cm의 플라스틱 통에 골프장 토양과 함께 30마리씩 나누어 실내에 보관하였다. 실험은 채 집 10일 후에 수행하였는데, 건강한 굼벵이만을 선발하여 이용하였다.
- 등얼룩풍뎅이 유충은 4월 중순에 부산 동래 베네스트 골프장의 티에서 채집하였다. 채집한 유충은 실험실로 가져 와 직경 10.6 cm, 높이 6 cm의 플라스틱 통에 골프장 토양과 함께 30마리씩 나누어 실내에 보관하였다. 실험은 채 집 10일 후에 수행하였는데, 건강한 굼벵이만을 선발하여 이용하였다.
데이터처리
- 등얼룩풍뎅이 유충에 대한 한국산 곤충병원 성선 충의 치사율은 arcsin 변환시켜 Student- Newman-Keul test로 처리평균간 차이를 분 산분석 하였는데 (PROC ANOVA)(조, 1996), 결과는 변환전의 평균 土 표준편차로 표기하였다. 등얼룩풍뎅이 충체 내에서 증식된 선충의 수는 log(X+l) 로 대수변환하여 Student- Newman-Keul test로 처리평균간 차이를 분 산분석 하였는데(PROC ANOVA)(조, 1996), 결과는 변환전의 평균 土 표준오차로 표기하였다.
- 등얼룩풍뎅이 유충에 대한 한국산 곤충병원 성선 충의 치사율은 arcsin 변환시켜 Student- Newman-Keul test로 처리평균간 차이를 분 산분석 하였는데 (PROC ANOVA)(조, 1996), 결과는 변환전의 평균 土 표준편차로 표기하였다. 등얼룩풍뎅이 충체 내에서 증식된 선충의 수는 log(X+l) 로 대수변환하여 Student- Newman-Keul test로 처리평균간 차이를 분 산분석 하였는데(PROC ANOVA)(조, 1996), 결과는 변환전의 평균 土 표준오차로 표기하였다. 실험결과의 유의성 정도는 P<0.
이론/모형
- 7, 24, 52, 55, 60, 64, 206, 207, 209, 210, 219, 227 계통은 꿀벌부채명나방(Galleria mellonella) 노숙유충을 미끼로 이용하여 토양에서 분리한 것을 이용하였다. 분리한 선충은 꿀벌부채명나방 노숙 유충에 재접종하여 Dutky 등(1964)의 방법으로 증식시켰으며, 증식된 선충은 White trap을 이용하여 수확하였다. 그리고 10 ℃ 냉장고에 보관하면서 수확 후 3주 이내의 것을 실험에 사용하였다(Woodring and Kaya 1988).
성능/효과
- 202 계통이 55%, Heterorhabditis sp. 205 계통과 H. bacteriophora 함양 계통이 각각 50%의 치사율을 나타내어 Heterorhabditis속 선충들의 병원성이 32.5%이하의 치사율을 나타낸 Steinerruema속 선충에 비하여 높았다. 등얼룩 풍뎅이 3령충 내에서 증식된 선충수는 Heterorhabditis sp.
- 5%, Heterorhabditis sp. 217 계통이 45%의 치사율을 나타내어 Heterorhabditis속 선충들의 병원성이 32.5%이 하의 병원성을 나타낸 SMmwnema속 선충보다 높았다.
- heterorhabditis속 선충들은 등얼룩풍뎅이 3 령충에 대하여 45% 이상의 치사율을 보인 반면 Steinernema속 선충들은 S. longicaudum 공 주 계통의 32.5%를 제외하고는 20% 내외의 낮은 병원성을 보였다. Lee et al(2002)이 등얼룩 풍뎅이 3령충을 이용하여 실험한 결과에서도 본 실험의 결과와 동일한 경향을 보여주고 있는데, 굼벵이의 종류와 선충의 종 및 계통에 따라 Heterorhabditis속 선충의 병원성이 높은 경우 도 있고(Villani and Wright, 1988; Forschler and Gardner, 1991), 반대의 경우도 있다.
- 등얼룩풍뎅이 3령충에서 증식된 선충의 수도 선 충의 종과 계통에 따라 다양하게 나타났는데 병 원성과 유사하게 Heterorhabditis속 선충들에서 증식수가 대체적으로 많게 나타났다. Heterorhabditis sp.
- 9%의 치사율을 보였다. 본 연구에서는47.5%의 치사율을 보여 무처리구의 치사율을 감 안하더라도 본 선층의 병원성이 다소 높은 것으로 나타났다. Converse 와 Grewal(1998)은 실 험실 내에서 곤충병원성 선충을 오랫동안 누대사 육 할 경우 병원성의 저하를 보고하고 있는데, 본 실험에 이용한 HG계통은 1997년 이후 계속하여 실험실에서 꿀벌부채명나방 유충에서 증식시켜 이용하고 있는데도 불구하고(Lee et al.
- 202 계통은 등얼룩풍뎅이 3령충 내에서 증식량 도 다른 선충들에 비하여 높게 나타나 토양 내에서 장기간 생존하는데 유리할 것으로 생각된다. 실제 이 선충은 최초 검출지역에서 2년 후에도 토양 내의 선충이 확인되어(unpublished data) 토양 지속성 이 높은 것으로 확인되었다.
후속연구
- , 2002)에 비하여 병원성 이 우수하였다. 따라서 포장실험을 보완하여 실용화 할 수 있을 것으로 생각된다. 특히, Heterorhabditis sp.
- 본 연구의 결과는 실내 실험의 결과로서 실제 골프장에서의 방제 효과를 예측기는 어렵지만 하지만, 실내 생물검정을 통해 기존에 상품화되어 골프장 굼벵이 방제에 이용되고 있는 곤충병원성 선충보다 우수한 병원성을 가지는 새로운 계통의 발굴에 의의가 있으며, 추후 본 자료를 토대로 야외생물 검정과 생태실험의 보완이 이루어지면 매우 유용하게 활용될 것으로 생각된다.
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