The purpose of this study was to investigate the antibiotic resistance pattern of E. coli and Salmonella spp. isolated from chicken feces. One hundred and forty-seven E. coli isolates showed resistance to tetracycline (95.2%), erythromycin (89.2%), ampicillin (70.1%), streptomycin (59.2%), cephaloth...
The purpose of this study was to investigate the antibiotic resistance pattern of E. coli and Salmonella spp. isolated from chicken feces. One hundred and forty-seven E. coli isolates showed resistance to tetracycline (95.2%), erythromycin (89.2%), ampicillin (70.1%), streptomycin (59.2%), cephalothin (56.5%), sulfamethoxazole/trimethoprim (53.7%), ciprofloxacin (57.1%), enrofloxacin (59.2%) and norfloxacin (57.1%). The multiple resistance was seen in 144 isolates (97.9%) and the rate of five, six and seven drugs resistance pattern were 20.4%, 18.4% and 16.3%, respectively. Also, the multiple resistance of E. coli to twelve drugs were seen in 1 isolates (0.7%). Fourteen Salmonella spp. showed resistance to ampicillin (50.0%), streptomycin (57.1%), erythromycin (64.3%) and tetracycline (57.1%) and the rate of two and three drugs resistance pattern were 4 isolates (28.6%), respectively. The prevalence of resistant organisms in Korea probably reflects lack of proper antibiotic policy resulting in prolonged and indiscriminate use of antimicrobial agents.
The purpose of this study was to investigate the antibiotic resistance pattern of E. coli and Salmonella spp. isolated from chicken feces. One hundred and forty-seven E. coli isolates showed resistance to tetracycline (95.2%), erythromycin (89.2%), ampicillin (70.1%), streptomycin (59.2%), cephalothin (56.5%), sulfamethoxazole/trimethoprim (53.7%), ciprofloxacin (57.1%), enrofloxacin (59.2%) and norfloxacin (57.1%). The multiple resistance was seen in 144 isolates (97.9%) and the rate of five, six and seven drugs resistance pattern were 20.4%, 18.4% and 16.3%, respectively. Also, the multiple resistance of E. coli to twelve drugs were seen in 1 isolates (0.7%). Fourteen Salmonella spp. showed resistance to ampicillin (50.0%), streptomycin (57.1%), erythromycin (64.3%) and tetracycline (57.1%) and the rate of two and three drugs resistance pattern were 4 isolates (28.6%), respectively. The prevalence of resistant organisms in Korea probably reflects lack of proper antibiotic policy resulting in prolonged and indiscriminate use of antimicrobial agents.
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제안 방법
coli 53주와 Salmonella spp. 4주를 분리하였으며, 7개 육계농장의 70개 분변시료에서는 각 균주별로 각각 94주 및 10주를 분리하였다. 종계 및 육계의 품종에 따른 분리율의 차이는 확인되지 않았지만 Salmonella의 경우 종계에서는 S.
E. coli는 증균배양없이 분변을 MacConkey agar (Difco, USA)에 직접 도말하여 37oC 에서 18-24시 간 배 양하여, 붉은 벽돌색 집락을 EMB agar (Difco, USA)에 재도말하고 37oC에서 24시간 배양한 후 금속성의 광택집락에 대하여 그람염색, MUG 시험, IMViC 시험, 유당으로부터 가스생성시험을 실시하여 최종 동정하였다. Salmonella의 분리 및 동정을 위해서 는 Bufiered Peptone Water (Difco, USA) 9ml에 분변 1g 을 넣어 균질화한 후, 37oC에서 16-20시간 배양하였다.
5 로 조정하고, 멸균 면봉을 이용하여 두께가 약 4 mm인 Meuller-hinton agar (Difco, USA)에 도포하였다. 균액의 도말 후 15분 이내에 항생제 disc를 dispenser로 접종하였으며, 37℃에서 16-18시간 배양한 후 균 억제대의 크기를 관찰하여 내성여부를 판정하였다. 분리균의 내성 범위는 NCCLS [21]의 기준에 따라 판정하였으며, 내성 패턴의 분석은 중간내성은 제외시키고 완전한 내성을 나타내는 균주만을 대상으로 하였다.
분리균에 대한 항생제내성 시험은 디스크확산법으로 실시하였으며, 사용된 BBL antibiotic disc는 BectonDickinson(USA)에서 판매하는 18종의 항생제로, ampicillin (AM), amoxicillin/clavulanic acid(AmC), cephalothin(CF), cefozolin(CZ), cefoxitin(FOX), cefotaxime(CTX), cefepime (FEP), imipenem(IPM), streptomycin(S), gentamicin(GM), amikacin(AN), ciprofloxacin(CIP), enrofloxacin(ENO), norfloxacin(NOR), trimethoprim/sulfamethoxazole(SXT), erythromycin(E), chloramphenicol(C) 및 tetracycline(TE)이었다. 시험방법으로 분리균주를 Meuller hinton broth (Difco, USA)에 배양한 후 균농도를 McFarland No.
분리균에 대한 항생제내성 시험은 디스크확산법으로 실시하였으며, 사용된 BBL antibiotic disc는 BectonDickinson(USA)에서 판매하는 18종의 항생제로, ampicillin (AM), amoxicillin/clavulanic acid(AmC), cephalothin(CF), cefozolin(CZ), cefoxitin(FOX), cefotaxime(CTX), cefepime (FEP), imipenem(IPM), streptomycin(S), gentamicin(GM), amikacin(AN), ciprofloxacin(CIP), enrofloxacin(ENO), norfloxacin(NOR), trimethoprim/sulfamethoxazole(SXT), erythromycin(E), chloramphenicol(C) 및 tetracycline(TE)이었다. 시험방법으로 분리균주를 Meuller hinton broth (Difco, USA)에 배양한 후 균농도를 McFarland No. 0.5 로 조정하고, 멸균 면봉을 이용하여 두께가 약 4 mm인 Meuller-hinton agar (Difco, USA)에 도포하였다. 균액의 도말 후 15분 이내에 항생제 disc를 dispenser로 접종하였으며, 37℃에서 16-18시간 배양한 후 균 억제대의 크기를 관찰하여 내성여부를 판정하였다.
본균의 최종동정은 Ewing [12] 방법에 따라 균체항원(O) 및 편모항원(H)에 대한 응집반응을 실시하여 확인하였다. 하나의 시료에서 3-5개의 의심되는 집락을 선발하였으며, 그 중 최종 확인된 집락 2개에 대하여 항생제내성 시험을 실시하고 내성경향이 동일한 경우는 동일 균주로 판단하고 하나의 균주로 하였다.
대상 데이터
2003년 3월부터 11월까지 경기도, 충청북도, 전라북도, 전라남도 및 경상북도 5개 지역의 4개 종계농장과 7개 육계농장을 대상으로 균분리를 실시하였다. 각각의 농장별로 바닥에 떨어져 있는 신선분변 약 5 g을 하나의 시료로 하였으며, 각 농장 별로 10개의 시료를 채취하여 냉장 운반하고 이를 대상으로 E.
이론/모형
균분리는「축산물의 가공기준 및 성분규격」[1]의 방법을 참고하여 수행하였다. E.
1 ml을 10 ml의 Rappaport-Vassiliadis R10 Broth (Merck, USA)에 재접종하여 42oC에서 18-24시간 배양한 후, Rambach agar (Merck, USA)에 도말하고 이를 37oC에서 18-24시간 배양하였다. 본균의 최종동정은 Ewing [12] 방법에 따라 균체항원(O) 및 편모항원(H)에 대한 응집반응을 실시하여 확인하였다. 하나의 시료에서 3-5개의 의심되는 집락을 선발하였으며, 그 중 최종 확인된 집락 2개에 대하여 항생제내성 시험을 실시하고 내성경향이 동일한 경우는 동일 균주로 판단하고 하나의 균주로 하였다.
균액의 도말 후 15분 이내에 항생제 disc를 dispenser로 접종하였으며, 37℃에서 16-18시간 배양한 후 균 억제대의 크기를 관찰하여 내성여부를 판정하였다. 분리균의 내성 범위는 NCCLS [21]의 기준에 따라 판정하였으며, 내성 패턴의 분석은 중간내성은 제외시키고 완전한 내성을 나타내는 균주만을 대상으로 하였다.
성능/효과
분리된 Salmonella spp. 14주 중 12주(85.7%)가 1개 이 상의 항생제에 대하여 내성을 보였으며, 2종 및 3종 항 생제에 대한 다제내성균은 각각 4주(28.6%)씩이었고 4종이상의 다제내성균은 확인되지 않았다(Table 5).
분리된 Salmonella spp. 14주에 대한 항생제 내성시험 결과, AM에 50.0%, S에 57.1%, E에 64.3% 및 TE에 57.1%가 내성을 나타내었으며, 2종 및 3종 항생제에 대한 다제내성균이 각각 4주(28.6%) 씩 확인되었다. 본 연구 결과 닭분변유래 세균들의 높은 항생제 내성률 및 다제내성 경향을 확인할 수 있었으며, 향후 항균제의 오남용에 대한 강력한사용규제 및 대책수립이 있어야 할 것으로 판단된다.
1%의 유사한 내성률을 나타내었다. 18종 항생제에 대한 E. coli의 내성패턴을 분석하였을 때, 2종 이상의 항생제에 대한 다제내성균은 144주(97.9%)이었고 그중, 5종, 6종 및 7종의 항생제에 대한 다제내성 균주는 각각 30주(20.4%), 27주(18.4%) 및 24주(16.3%)로 가장 높았으며 10종 및 12종 항생제에 대하여 다제내성을 나타내는 균주도 각각 1주(0.7%)씩 확인되었다. 분리된 Salmonella spp.
9%)이었다. 5종, 6종 및 7종의 항생제에 대한 다제 내성 균주는 각각 30주(20.4%), 27주(18.4%) 및 24주 (16.3%)로 다제내성형중 가장 높게 나타남을 알 수 있 었으며, 10종 및 12종 항생제에 대하여 다제내성을 나타내는 균주도 각각 1주(0.7%) 씩 확인되었다.
14주에 대한 항생제 내성 시험 결과는 Table 4와 같다. AM에 7주(50.0%), S에 8주(57.1%), E에 9주(64.3%) 및 TE에 8주(57.1%)가 내성을 나타냄을 알 수 있었으며, E. coli와는 달리 fluoroquinolone] 항생제인 CIP에서 1주(7.1%)가 내성을 보였다.
1과 같다. CF 및 SXT 약제에 대하여 종계 및 육계유래 분리균의 각각 75.5% 및 45.7%, 62.3% 및 48.9%가 내성을 보여 종계유래 균주의 내성률이 높음을 알 수 있었으며, 반면 fluoroquinolone 계열인 CIP 및 NOR의 경우 종계 및 육계유래 E. coli[ 각각 49.1% 및 61.7%, 52.8% 및 59.6%의 내성률을 보여 육계유래 균주의 내성이 더 높음을 알 수 있었다. 그러나 대부분 시험 항생제에 대하여 닭 품종별 내성율에 큰 차이를 발견할 수는 없었다.
14주를 분리하였다. E. coli 147 주에 대한 항생제 내성시험 결과, TE에 95.2%, E에 89.2%, AM에 70.1%, S에 59.2%, CF에 56.5% 및 SXT 에 53.7%가 내성을 나타내었으며, fluoroquinolone계인 CIP, ENO 및 NOR에 대하여도 각각 57.1%, 59.2% 및 57.1%의 유사한 내성률을 나타내었다. 18종 항생제에 대한 E.
닭분변유래 147주의 E. coli을 대상으로 18종 항생제에 대한 내성시험을 실시한 결과, E. coli의 경우 AM, S, CF, E, TE, SXT와 fluoroquinolone계열인 CIP, ENO 및 NOR에 대하여 높은 내성이 확인되었다. Cephalosporin 항생제의 경우 1세대 cepha계인 CF에 대한 높은 내성률(56.
1%의 유사한 내성률을 보였고 fuoroquinolone계열인 CIP, ENO 및 NOR 성율을 나타내었다. 또한 AmC에 32.0%, CF에 34.7%,S에 28.6% 및 CZ에 18.4%의 높은 중간내성율을 확인할 수 있었다.
본 연구 결과, 닭 품종별 E. coli의 분리주의 약제별 내성률에 차이를 발견할 수 있었으나 품종별 약제사용실태 등의 조사가 이루어지지 않아 뚜렷한 원인을 도출할 수는 없었다. 그러나 국내 전반적인 약제내성 패턴을 고려하면 닭 품종별 내성률의 차이 또한 농장별로 주로 사용되는 약제의 사용량에 기인할 것으로 판단된다.
coli 147주에 대한 항생제 내성시험 결과는 Table 2와 같다. 분리균의 50% 이상이 내성을 나타내는 항생제는 9종(50.0%)으로 그 중 TE에 대하여 140주 (95.2%)가 내성을 보여 가장 높은 내성률을 나타내었으며, E에 131주(89.2%), AM에 107주(70.1%), S에 87주(59.2%), CF에 83주(56.5%) 및 SXT에 79주(53.7%)가 내에 대하여도 각각 57.1%, 59.2% 및 57.1%의 유사한 내성률을 보였고 fuoroquinolone계열인 CIP, ENO 및 NOR 성율을 나타내었다. 또한 AmC에 32.
coli의 18종 항생제에 대한 내성 양상의 분석 결과 는 Table 3과 같다. 시험균주 모두 1개 이상의 항생제에 대하여 내성을 가지고 있음이 확인되었으며, 2종 이상의 항생제에 대하여 다제내성을 나타내는 균은 144주(97.9%)이었다. 5종, 6종 및 7종의 항생제에 대한 다제 내성 균주는 각각 30주(20.
후속연구
이러한 이유로서 미국 FDA에서는 21세기 공공보건에 가장 큰 위협을 끼치는 항생제 내성균 줄현 연구를 위해 1996 년부터 체계화된 연구를 실시하는 등 전 세계가 항생제 내성문제에 적극 대처하고 있다 [22]. 국내에서도 2003년부터 「국가 항생제 내성 안전관리 사업」을 시작하여, 사람, 축산, 어류 및 환경으로부터 다양한 병원성 세균을 분리하여 내성균 분포현황과 패턴을 분석하는 연구가 본격적으로 추진되고 있으며, 이러한 연구는 추후 항생제 내성균의 인체교차 내성 및 위험성 등 국내 항생제 내성균 안전관리를 위한 과학적인 실태파악의 중요한 자료가 될 수 있을 것으로 판단된다.
spp.는 14주만이 분리되었고, E. coli와는 다르게 항생제 내성율 및 내성 양상이 크게 높지는 않았지만 다수의 분리균을 대상으로 하였을 때는 어떠한 내성양상이 도출될 지는 알 수 없으며, 본 균에 대하여는 앞으로 더욱더 조사가 이루어져 야 할 것으로 생각된다.
다제내성균의 출현 또한 항생제 사용실태와 무관하지 않음을 알 수 있으며, 특히 여러 가지 부작용으로 사용이 금지되어온 C에 대하여 분리된 E. coli의 14.3%가 내성을 보였는 바, C의 경우 단독으로 내성을 나타내는 경우는 없었으며 국내 높은 내성을 나타내는 TE 및 SXT 등과 동시에 내성을 나타내는 것으로 보아 동일한 plasmid 내 내성 gene의 존재 여부에 대하여 추가적인 연구가 필요할 것으로 판단된다
6%) 씩 확인되었다. 본 연구 결과 닭분변유래 세균들의 높은 항생제 내성률 및 다제내성 경향을 확인할 수 있었으며, 향후 항균제의 오남용에 대한 강력한사용규제 및 대책수립이 있어야 할 것으로 판단된다.
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