차가는 배양균사로부터 위염, 위궤양 및 여러 가지 암에 효력을 나타내는 것으로 알려진 베풍긴(befungin) 약제의 생산을 위하여 사용되고 있다. 차가는 자작나무 줄기에서 주로 생산되는 것으로 알려져 있는데, 우리나라의 경우 자작나무 자생지는 해발고도 1,100m 이상에만 나타난다. 하지만, 우리는 점봉산의 거제수나무에서 차가버섯을 채집할 수 있었으며, 스트렙토마이신을 첨가한 PDA 배지를 이용하여 균주를 분리할 수 있었다. 차가 균은 5개 부위 중 차가 균으로 만연된 나무조직에서 분리될 뿐 다른 부분에서는 분리가 어려웠다. 균핵에서 확인한 포자는 $6.0{\sim}10.0{\times}4.5{\sim}6.0{\mu}m$ 크기를 나타내었고, 균사 굵기는 $2.5{\sim}5.0{\mu}m$ 이었다. 실내 배양에서 균총은 불규칙한 모양을 띄며, 시간이 경과할수록 균총의 중간 중간이 노란색으로 변색되었다. 약 20일이 경과하면 노란색으로 변색된 부분에서 적갈색의 강모(setae)를 확인할 수 있으며, 강모의 크기는 $4{\sim}6{\times}100{\sim}420{\mu}m$ 이었다. 차가의 균사생장에 가장 좋은 배지는 OA(oatmeal agar)이었다. 적합한 온도 범위는 $25{\sim}30^{\circ}C$이었으며, 균사생장에 적합한 pH는 8.0~9.5로 비교적 높은 산도를 좋아하는 것으로 나타났다.
차가는 배양균사로부터 위염, 위궤양 및 여러 가지 암에 효력을 나타내는 것으로 알려진 베풍긴(befungin) 약제의 생산을 위하여 사용되고 있다. 차가는 자작나무 줄기에서 주로 생산되는 것으로 알려져 있는데, 우리나라의 경우 자작나무 자생지는 해발고도 1,100m 이상에만 나타난다. 하지만, 우리는 점봉산의 거제수나무에서 차가버섯을 채집할 수 있었으며, 스트렙토마이신을 첨가한 PDA 배지를 이용하여 균주를 분리할 수 있었다. 차가 균은 5개 부위 중 차가 균으로 만연된 나무조직에서 분리될 뿐 다른 부분에서는 분리가 어려웠다. 균핵에서 확인한 포자는 $6.0{\sim}10.0{\times}4.5{\sim}6.0{\mu}m$ 크기를 나타내었고, 균사 굵기는 $2.5{\sim}5.0{\mu}m$ 이었다. 실내 배양에서 균총은 불규칙한 모양을 띄며, 시간이 경과할수록 균총의 중간 중간이 노란색으로 변색되었다. 약 20일이 경과하면 노란색으로 변색된 부분에서 적갈색의 강모(setae)를 확인할 수 있으며, 강모의 크기는 $4{\sim}6{\times}100{\sim}420{\mu}m$ 이었다. 차가의 균사생장에 가장 좋은 배지는 OA(oatmeal agar)이었다. 적합한 온도 범위는 $25{\sim}30^{\circ}C$이었으며, 균사생장에 적합한 pH는 8.0~9.5로 비교적 높은 산도를 좋아하는 것으로 나타났다.
The sterile form of Inonotus obliquus is used for preparation of the medicine befungin that is effective in the treatment of gastritis, gastric ulcers, and several tumors. The fungus is known to be produced mainly on the stems of Betula platyphylla var. japonica that grows at high altitudinal (above...
The sterile form of Inonotus obliquus is used for preparation of the medicine befungin that is effective in the treatment of gastritis, gastric ulcers, and several tumors. The fungus is known to be produced mainly on the stems of Betula platyphylla var. japonica that grows at high altitudinal (above 1,100 m) region in Korea. But, we found the mushroom on the stem of Betula costata at Mt. Jumbong in Korea. We isolated a pure culture of the fungus from the stem of B. costata by use of potato dextrose agar (PDA) medium with streptomycin. We could isolate the fungus from plant's tissue filled with hyphae, but not from other parts. The spore collected from the sclerotia showed $6.0{\sim}10.0{\times}4.5{\sim}6.0{\mu}m$ in diameter, and the hypha was $2.5{\sim}5.0{\mu}m$ in thickness. The colony showed irregular features and scattered yellow color at the center as the culture ages. We could find brownish setae at the yellow region of colony at 20 days of culture, and the size ranged $4{\sim}6{\times}100{\sim}420{\mu}m$. The oatmeal agar (OA) provided best growth for I. obliquus among five media (CDA, CMA, MA, OA and PDA). Optimum temperature ranged $25{\sim}30^{\circ}C$, and optimum pH was relatively alkaline with the range of pH 8.0~9.5.
The sterile form of Inonotus obliquus is used for preparation of the medicine befungin that is effective in the treatment of gastritis, gastric ulcers, and several tumors. The fungus is known to be produced mainly on the stems of Betula platyphylla var. japonica that grows at high altitudinal (above 1,100 m) region in Korea. But, we found the mushroom on the stem of Betula costata at Mt. Jumbong in Korea. We isolated a pure culture of the fungus from the stem of B. costata by use of potato dextrose agar (PDA) medium with streptomycin. We could isolate the fungus from plant's tissue filled with hyphae, but not from other parts. The spore collected from the sclerotia showed $6.0{\sim}10.0{\times}4.5{\sim}6.0{\mu}m$ in diameter, and the hypha was $2.5{\sim}5.0{\mu}m$ in thickness. The colony showed irregular features and scattered yellow color at the center as the culture ages. We could find brownish setae at the yellow region of colony at 20 days of culture, and the size ranged $4{\sim}6{\times}100{\sim}420{\mu}m$. The oatmeal agar (OA) provided best growth for I. obliquus among five media (CDA, CMA, MA, OA and PDA). Optimum temperature ranged $25{\sim}30^{\circ}C$, and optimum pH was relatively alkaline with the range of pH 8.0~9.5.
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문제 정의
하지만, 우리나라에서는 버섯 채집자들에 의하여 국내에도 자생되고 있는 것으로 알려지고 있을 뿐 학계에 공식적으로 보고된 바가 없었다. 따라서 우리나라 차가 균주를 확보하지 못한 상태에서 외국 균주를 이용한 연구가 추진되고 있었는데, 국내에서 차가 균핵을 발견하여 분리, 동정하고 기본적인 배양특성을 파악하였기에 보고한다.
제안 방법
PDA에서의 배양 약 20일 경과 후 해부현미경과 광학현미경을 이용하여 균총 및 균사의 특성, 강모의 형성 유무와 특성을 확인한 다음 관련된 문헌(Breitenbach and KrFn zlin, 1986.) 및 캄차카반도에서 수집된 균주 등과 비교하여 본 분리 균에 대한 동정을 시도하였다.
5 간격으로 pH를 조절한 다음 온도조사와 동일한 방법으로 균을 이식한 후 25에서 15일간 배양한 후 균총의 지름을 측정하였다. pH 조절에는 1N NaOH와 1N HCl을 사용하였고, 각 처리는 5반복으로 실시하였다.
균 분리에 있어서 적합한 부위를 찾기 위하여 차가 균핵이 붙어있는 상태에서 나무를 절단하여 균핵의 표면(A), 균핵의 중간부위(B), 차가버섯 균이 만연된 나무조직(C), 차가 균이 거의 들어가지 않은 것으로 여겨지는 부분(E), C와 E 사이(D) 등 5부분으로 나누었다(Figure 2). 각 부위에서 떼어낸 조각을 스트렙토마이신 100 ppm이 첨가된 PDA에 올려놓고 25℃, 암조건에서 배양하며 균 분리를 시도하였다.
균은 온도조사와 동일한 방법으로 이식하였고 배양 10일 후 관찰하였으며, 5반복으로 실험을 진행하였다.균사 생장에 적합한 pH 를 확인하기 위해 4.0∼9.5까지 0.5 간격으로 pH를 조절한 다음 온도조사와 동일한 방법으로 균을 이식한 후 25에서 15일간 배양한 후 균총의 지름을 측정하였다. pH 조절에는 1N NaOH와 1N HCl을 사용하였고, 각 처리는 5반복으로 실시하였다.
균사 생장에 적합한 배지를 선발하기 위해 CDA (czapek-dox broth(Difco)+agar), CMA(corn meal agar(BBL)), MA(malt extract agar(Difco)), OA(oatmeal agar(Difco)), PDA(potato dextrose agar(Difco)) 등 5가지 배지를 사용하였다. 균은 온도조사와 동일한 방법으로 이식하였고 배양 10일 후 관찰하였으며, 5반복으로 실험을 진행하였다.균사 생장에 적합한 pH 를 확인하기 위해 4.
분리 균의 균사 생장에 적합한 온도를 확인하기 위해 PDA에서 배양한 균사의 선단부를 직경 5㎜ cork borer로 떼어내어 PDA 배지에 이식하였다. 이식한 PDA는 5∼35까지 5 간격으로 설정된 항온기에 넣고 15일간 배양한 후 균총의 지름을 측정하였으며, 매 처리는 5반복으로 실시하였다.
분리 균의 균사 생장에 적합한 온도를 확인하기 위해 PDA에서 배양한 균사의 선단부를 직경 5㎜ cork borer로 떼어내어 PDA 배지에 이식하였다. 이식한 PDA는 5∼35까지 5 간격으로 설정된 항온기에 넣고 15일간 배양한 후 균총의 지름을 측정하였으며, 매 처리는 5반복으로 실시하였다.
따라서 재배를 목적으로 하는 배양에는 OA 배지가 적합하지만 균의 특성을 확인하는 실내 실험용으로는 적당하지 않았다. 이에 따라 균사의 특성 확인을 위한 실내실험에는 PDA 배지를 사용하였다.
대상 데이터
강원도 인제군 기린면 진동리의 점봉산 자락, 해발고도약 900m 지점의 북동쪽 경사면에 소규모 군락을 형성한 흉고직경 25.5㎝의 거제수나무에서 분지된 직경 8.5㎝의 거제수나무(Betula costata) 차가 균핵을 채집하였다(Figure 1). 점봉산 정상부(해발고 1300m 내외)에 분포하는 사스래나무(Betula ermanii) 군락은 대체로 낮은 수고(7∼8m)를 형성하고 있었으나 차가를 찾기 어려웠다.
균사 생장에 적합한 배지를 선발하기 위해 CDA (czapek-dox broth(Difco)+agar), CMA(corn meal agar(BBL)), MA(malt extract agar(Difco)), OA(oatmeal agar(Difco)), PDA(potato dextrose agar(Difco)) 등 5가지 배지를 사용하였다. 균은 온도조사와 동일한 방법으로 이식하였고 배양 10일 후 관찰하였으며, 5반복으로 실험을 진행하였다.
성능/효과
5∼6㎛ 크기를 나타내었다. 분리 균의 이러한 특성들은 여러 문헌과 비교했을때, Inonotus obliquus와 여러 면에서 일치하기 때문에 본 분리균을 Inonotus obliquus로 동정하였다(Table 1).
생장 온도 : 차가버섯 균은 온도에 따라 생장력의 차이가 크며, 실험결과 균사 생장에 적합한 온도 범위는 25∼30℃이었다. 추운지방에서 나타나는 균임에도 불구하고 5℃에서는 균사 생장이 극히 미약하였다.
적정 pH : 균사 생장에 적합한 pH는 8.0∼9.5로 비교적 높은 산도를 좋아하는 것으로 나타났다(Figure 7). pH 6.
차가의 균사생장에 가장 좋은 배지는 OA(oatmeal agar) 이었다. 적합한 온도 범위는 25∼30℃이었으며, 균사생장에 적합한 pH는 8.0∼9.5로 비교적 높은 산도를 좋아하는 것으로 나타났다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
외국으로부터 도입관 차가(Inonotus obliquus)는 어떤 약리적 효과가 있는가?
, 2002). 우리나라에서도 외국으로부터 도입된 균주에 대한 기초적인 연구나 항돌연변이 활성, 암세포 성장억제, 항산화활성, 유전 독성 억제 등의 약리적 효과가 널리 보고되고 있다(함 등, 2003a; 함 등 2003b; 황 등, 2003). 한편, 차가 균핵에서 추출된 멜라닌과 배양 균사에서 합성된 멜라닌의 화학구조가 다르게 나타나 약리성분의 차이가 발생될 수 있을 것으로 여겨지므로(Kukulyanskaya et al.
차가는 어떤 질병에 효력을 나타내는가?
차가는 배양균사로부터 위염, 위궤양 및 여러 가지 암에 효력을 나타내는 것으로 알려진 베풍긴(befungin) 약제의 생산을 위하여 사용되고 있다. 차가는 자작나무 줄기에서 주로 생산되는 것으로 알려져 있는데, 우리나라의 경우 자작나무 자생지는 해발고도 1,100m 이상에만 나타난다.
우리나라의 경우 자작나무 자생지는 어디인가?
차가는 배양균사로부터 위염, 위궤양 및 여러 가지 암에 효력을 나타내는 것으로 알려진 베풍긴(befungin) 약제의 생산을 위하여 사용되고 있다. 차가는 자작나무 줄기에서 주로 생산되는 것으로 알려져 있는데, 우리나라의 경우 자작나무 자생지는 해발고도 1,100m 이상에만 나타난다. 하지만, 우리는 점봉산의 거제수나무에서 차가버섯을 채집할 수 있었으며, 스트렙토마이신을 첨가한 PDA 배지를 이용하여 균주를 분리할 수 있었다.
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