본 연구에서는 새로운 주름개선 소재로서 phytoestrogen의 일종인 lignans를 각각 함유하는 연교추출물을 추출 분리하여 노화와 관련된 생리활성 효과를 확인하였다. Arctigenin과 matairesinol을 각각 함유하는 연교추출물은 처리농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 DPPH와 superoxide radical에 대한 소거효과를 나타내었다. DPPH radical 소거효과에서 arctigenin-rich와 matairesinol-rich는 각각 $IC_{50}$ 값이 $5.747{\mu}g/ml,\;4.450\;{\mu}g/ml$를 나타내었으며, superoxide radical 소거효과에서는 각각 1.634 mg/m1, 542.428 mg/ml로 양성 대조군으로 사용한 BHT보다 우수한 항산화 효과를 보였다. Type I collagen 합성효과도 arctigenin 및 matairesinol을 각각 함유한 연교추출물 그리고 양성 대조군 vitamin C를 $100\;{\mu}g/ml$을 처리하였을 때 각각 10.5, 26.4, 15.7%의 합성율을 보임으로써 vitamin C와 유사하거나 우수한 효과를 나타내었다. 또한, UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1의 발현저해 효과는 matairesinol을 함유한 연교추출물의 경우 oleanolic acid와 유사한 저해 효과를 보였다. Matairesinol을 함유한 연교추출물을 함유한 크림의 피부 주름개선 효과를 평가하기 위하여, 눈가 주름 부위의 제품 도포 후 피부 주름의 변화와 피부거침 개선 효과를 평가하였다. 연교추출물을 함유한 크림을 약 12주간 도포하였을 경우, 깊은 주름과 총 주름수의 감소효과를 관찰할 수 있었으며, 연교추출물 2%를 적용한 인체 안전성시험에서 무자극으로 판명 되 었다. 본 연구를 통하여 lignans를 각각 함유하는 연교추출물은 항산화 효과와 생체 단백질의 30%를 구성하는 collagen의 합성효과 및 UVA에 의한 MMP-1의 발현저해 효과를 보였다. 인체에 무자극성으로 제품에 적용시 관찰되는 피부 주름개선 효과는 lignans를 각각 함유한 연교추출물을 새로운 주름개선을 위한 천연소재로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구에서는 새로운 주름개선 소재로서 phytoestrogen의 일종인 lignans를 각각 함유하는 연교추출물을 추출 분리하여 노화와 관련된 생리활성 효과를 확인하였다. Arctigenin과 matairesinol을 각각 함유하는 연교추출물은 처리농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 DPPH와 superoxide radical에 대한 소거효과를 나타내었다. DPPH radical 소거효과에서 arctigenin-rich와 matairesinol-rich는 각각 $IC_{50}$ 값이 $5.747{\mu}g/ml,\;4.450\;{\mu}g/ml$를 나타내었으며, superoxide radical 소거효과에서는 각각 1.634 mg/m1, 542.428 mg/ml로 양성 대조군으로 사용한 BHT보다 우수한 항산화 효과를 보였다. Type I collagen 합성효과도 arctigenin 및 matairesinol을 각각 함유한 연교추출물 그리고 양성 대조군 vitamin C를 $100\;{\mu}g/ml$을 처리하였을 때 각각 10.5, 26.4, 15.7%의 합성율을 보임으로써 vitamin C와 유사하거나 우수한 효과를 나타내었다. 또한, UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1의 발현저해 효과는 matairesinol을 함유한 연교추출물의 경우 oleanolic acid와 유사한 저해 효과를 보였다. Matairesinol을 함유한 연교추출물을 함유한 크림의 피부 주름개선 효과를 평가하기 위하여, 눈가 주름 부위의 제품 도포 후 피부 주름의 변화와 피부거침 개선 효과를 평가하였다. 연교추출물을 함유한 크림을 약 12주간 도포하였을 경우, 깊은 주름과 총 주름수의 감소효과를 관찰할 수 있었으며, 연교추출물 2%를 적용한 인체 안전성시험에서 무자극으로 판명 되 었다. 본 연구를 통하여 lignans를 각각 함유하는 연교추출물은 항산화 효과와 생체 단백질의 30%를 구성하는 collagen의 합성효과 및 UVA에 의한 MMP-1의 발현저해 효과를 보였다. 인체에 무자극성으로 제품에 적용시 관찰되는 피부 주름개선 효과는 lignans를 각각 함유한 연교추출물을 새로운 주름개선을 위한 천연소재로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Skin anti-aging effect of Forsythia viridissima L. extract was evaluated by using antioxidant assay, expression of type I procollagen, and UVA-induced matrix metalloproteinase-1 in human dermal fibroblasts. Matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract was showed the scavenging activity of radi...
Skin anti-aging effect of Forsythia viridissima L. extract was evaluated by using antioxidant assay, expression of type I procollagen, and UVA-induced matrix metalloproteinase-1 in human dermal fibroblasts. Matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract was showed the scavenging activity of radicals and reactive oxygen species with the $IC_{50}$ values of $4.50\;{\mu}m/ml$ against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazly radical and $542.43\;{mu}m/ml$ against superoxide radicals in the xanthine/xanthine oxidase system, respectively. The type I procollagen was increased 33.76% by treatment with matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract, and UVA-induced MMP-1 was reduced 35.78% in a dose dependent manner. In the human skin irritation test, 2% matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract did not show any adverse effect. Also, the clinical study indicated that a cream group treated with 0.2% matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract significantly reduced skin wrinkles, as compared with a non-treated cream group (p < 0.05). These results suggest that Forsythia viridissima L. extract may be useful as a potential source of functional anti-aging cosmetics.
Skin anti-aging effect of Forsythia viridissima L. extract was evaluated by using antioxidant assay, expression of type I procollagen, and UVA-induced matrix metalloproteinase-1 in human dermal fibroblasts. Matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract was showed the scavenging activity of radicals and reactive oxygen species with the $IC_{50}$ values of $4.50\;{\mu}m/ml$ against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazly radical and $542.43\;{mu}m/ml$ against superoxide radicals in the xanthine/xanthine oxidase system, respectively. The type I procollagen was increased 33.76% by treatment with matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract, and UVA-induced MMP-1 was reduced 35.78% in a dose dependent manner. In the human skin irritation test, 2% matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract did not show any adverse effect. Also, the clinical study indicated that a cream group treated with 0.2% matairesinol-rich Forsythia viridissima L. extract significantly reduced skin wrinkles, as compared with a non-treated cream group (p < 0.05). These results suggest that Forsythia viridissima L. extract may be useful as a potential source of functional anti-aging cosmetics.
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문제 정의
본 연구에서는 새로운 주름개선 소재로서 phytoestrogen 의 일종인 lignans를 각각 함유하는 연교추출물을 추출 . 분리하여 노화와 관련된 생리활성 효과를 확인하였다.
본 연구에서는 연교 성분들 중에 다양한 생리활성 작용을하는 lignans 인 matairesinol과 arctigenin을 유효성분으로 함유하는 정제된 연교추출물을 제조함과 동시에 그들의 항산화효과, 섬유아세포 내에서 collagen 합성 및 MMP-1 의 합성을저해하는 효과를 기존의 잘 알려진 성분들과의 비교로 효능을 평가하여 기능성화장품 원료로서의 사용 가능성을 검토하였고, 임상시험(25)을 통해 연교추출물 함유 크림의 피부 주름개선 효과를 평가하였다.
제안 방법
측정하는 방법을 활용하였다 (26). 0.2 mM DPPH 메탄올용액에 시료를 각각의 농도로 메탄올에 희석하여 혼합하고, 실온에서 10분간 반응시킨 후 UV-VIS Spectrophotometer (Shimadzu)로 517 nm에서 홉광도를 측정하였다.
DPPH (1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical 소거효과 항산화 활성은 DPPH (Sigma)를 이용하여 시료의 라디칼 소거효과를 측정하는 방법을 활용하였다 (26). 0.
MTT [3-(4, 5-dimethythiazol-2-yl)-2, 5-diphenytetrazolium bromide, Sigma] 정량은 Mosmann(28)의 방법을 변형하여 실시하였다. 사람 섬유아세포를 1 X 104 cells/well 농도로 96-well plate에 분주하여 15시간 정도 배양한 후, 각 well에 적당한농도로 연교추출물을 처리하여 CO 배양기에서 24시간 더배양하였다.
사람 섬유아세포를 1 X 104 cells/well 농도로 96-well plate에 분주하여 15시간 정도 배양한 후, 각 well에 적당한농도로 연교추출물을 처리하여 CO 배양기에서 24시간 더배양하였다. MTT 용액 (5 mg/ml) 10ul를 첨가하고 4시간후 상등액을 제거하고 150 ill dimethyl sulfoxide (DMSO, Sigma)를 첨가한 후 540 nm에서 microplate reader (EL800, BIO-TEK Instruments, USA)로 홉광도를 측정하였다.
Matairesinol과 arctigenin을 각각 함유하는 정제된 연 교 추출물 50 mg에 메탄올 50 ml 을 넣고 초음파로 분산시킨 다음 메탄올을 넣어 정확히 100 祖로 한 후 0.45 firn 여과막을 이용, 여과하여 20 卩1를 고속액체크로마토그래피 (HPLC) 분석을 행하였다.
Matairesinol을 함유한 연교추출물을 함유한 크림의 피부 주름 개선 효과를 평가하기 위하여, 눈가 주름 부위의 제품 도포 후 피부 주름의 변화와 피부거침 개선 효과를 평가하였다. 연교추출물을 함유한 크림을 약 12주간 도포하였을 경우, 깊은 주름과 총 주름수의 감소효과를 관찰할 수 있었으며, 연교추출물 2%를 적용한 인체 안전성 시험에서 무자극으로 판명되었다.
Matairesinol이 함유된 연교추출물을 포함한 제품에서의주름개선 효과를 측정하기 위하여 제품 사용전과 사용 4 주, 8주, 12주 후 시점에서 Skin Visiometer SV600을 이용하여 피부 주름을 측정하였다. 각 시점 별 측정한 R-value 분석을 통해 피부 주름개선 정도를 평가하였다.
Superoxide radical 소거활성 평가는 xanthine/ xanthine oxidase 효소반응에 의한 활성산소 발생계를 이용하여 활성산소에 의한 NBT의 산화에 의한 흡광도 변화를 측정하였다.
UV 조사 전에 원배지를 제거한 후 PBS로 세척하여 배지 내 serum 성분을 제거하고 자외선조사기 (ELC- 500, Lightning Enterprises, USA)를 이용하여 세포에 영향을주지 않는 범위에서 자외선 (UVA)을 조사하였다. UVA 조사 후 FBS를 첨가하지 않은 DMEM 배지에 시료를 희석한후 첨가하여 48시간 더 배양하였다.
대조구는 시료를 처리하지 않은 배양액으로 설정한 후 흡광도를 측정하였다. 세포의 생존능력은 다음의 식 (2) 에따라 계산하였다.
본 실험은 병력조사 및 피부상태 진단을 통해 시험목적에 적합한 30~50대 피험자 24명을 선정하고, 선정된 피험자들을 무작위 (randomization) 방식으로 시험품 (matairesinol- rich 0.2% 함유 크림)과 대조품 (함유하지 않은 크림) 각각을 좌우로 할당하여 12주간 정하여진 부위 (양쪽 눈가) 에사용하게 하였다. 제품 사용 4주, 8주, 12주 후 시점에서 대조군과 시험군 눈꼬리 부근 주름의 육안 평가와 facial stage DM-3을 이용한 사진 촬영 및 Skin Visiometer SV600 (Courage-Khazaka Electronic, Germany)을 이용한 R-value 즉정, 설문에 의한 피험자의 주관적 평가 방법을 실시하여 제품의 주름개선 상태를 평가하였고, 피험자의 설문 작성과 시험자의 관찰, 질의응답을 통해 주관적 피부 자극감과 객관적 피부자극을 평가하였다.
분리하여 노화와 관련된 생리활성 효과를 확인하였다. Arctigei血과 matairesinol을 각각 함유하는 연교추출물은 처리농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 DPPH 와 superoxide radical에 대한 소거효과를 나타내었다.
시험 시료들의 섬유아세포에 미치는 영향 및 세포독성과 더불어 시험에 사용될 농도 범위결정을 위해서 MTT assay를 시행하였다. Phytoestrogen일종인 lignans를 각각 함유하는 연교추출물의 농도 500 姻/血 미만에서는 농도 의존적으로 섬유아세포의 증식 효과를 보였으며 , 500 jtzg/ml 의 농도에서는 급격하게 생존력 저하를 보였다(Fig.
약 60분간 안정을 취하도록 한 후 첫 판독을 시행하였고, 첩포 부착 후 96시간이 경과한 후 2차 판독을 시행하였다. 판정기준은 Table 2에 나타내었다.
항산화 효과를 측정하였다. 양성 대조군으로는 항산화 효과가 알려진 BHT, vitamin C, dl-a-tocopherol (1000 IU/g, Sigma)을 이용하여 lignans를 각각 함유한 연교추출물의 항산화 효과를 비교하였다. 그 결과 free radical을 50% 소거할 수 있는 농도(IC50)가 arctigenin-rich 5.
연교추출물의 항산화 효과를 알아보기 위해 DPPH를 이용하여 항산화 효과를 측정하였다. 양성 대조군으로는 항산화 효과가 알려진 BHT, vitamin C, dl-a-tocopherol (1000 IU/g, Sigma)을 이용하여 lignans를 각각 함유한 연교추출물의 항산화 효과를 비교하였다.
농축하여 연교추출물 (51 g)을 얻어, 이 중 5 g을 10% 메탄올수용액 (100 ml)을 가하여 용해시키고 효소 (pectinex + celluclast, Novozyme, Denmark)# 7} 하여 50~60°C에서 가수분해하였다. 이것을 미리 40% 메탄올수용액으로 평형화시켜 놓은 Diaion HP-20 이온수지 (Mitsubishi Chem. Co., Japan) 칼럼 (2 cm x 30 cm)에 충진시킨 후 40%, 60%, 80%, 100% 메탄올로 각각 용출한 분획물을 rotary vacuum evaporators. 50°C 이하에서 감압 .
있다(29, 30). 이러한 UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1 에 lignans를 각각 함유한 연교추출물이 미치는영향을 알아보고자 사람 섬유아세포에 UVA를 조사하고 연교추출물을 첨가하여 48시간 배양한 후 MMP-1 발현저해효과를 ELISA를 통해 알아보았다. 그 결과 matairesinol-4- 함유한 연교추출물은 oleanolic acid 처리구와 유사하게 MMP-1 발현저해 효과를 보였다(Fig.
2% 함유 크림)과 대조품 (함유하지 않은 크림) 각각을 좌우로 할당하여 12주간 정하여진 부위 (양쪽 눈가) 에사용하게 하였다. 제품 사용 4주, 8주, 12주 후 시점에서 대조군과 시험군 눈꼬리 부근 주름의 육안 평가와 facial stage DM-3을 이용한 사진 촬영 및 Skin Visiometer SV600 (Courage-Khazaka Electronic, Germany)을 이용한 R-value 즉정, 설문에 의한 피험자의 주관적 평가 방법을 실시하여 제품의 주름개선 상태를 평가하였고, 피험자의 설문 작성과 시험자의 관찰, 질의응답을 통해 주관적 피부 자극감과 객관적 피부자극을 평가하였다. R-value의 값이 작아질수록 피부 주름이 개선되어 주름의 깊이가 낮아짐을 의미하며 단위는 임의의 단위 (arbitrary unit)를 나타낸다.
대상 데이터
HPLC 분석 조건으로 Dionex사 Summit HPLC를, 칼럼은 YMC-Pack Pro Cis (5 例, 4.6 mm x 250 mm), 검출기는 자외부흡광광도계로 측정파장은 280 nm로 하였다. 유속은 1.
본 실험에 사용한 연교 (개나리 열매)는 경북 의성에서 재배하고 있는 의성개나리 (Forsythia viridissima Lind ley)를영천 약재시장에서 직접 구입하여 사용하였다.
) 배지에 5% fetal bovine serum (FBS, Sigma)을첨가하여 37°C, 5% CO2 조건 하에서 배양하고 tiypsinization 으로 계대 배양한 뒤 10~15세대 세포를 실험에 이용하였다. 비교 실험 재료로서 vitamin C (Amresco), butylated hydroxy toluene (BHT, Sigma), oleanolic acid (Sigma), a-tocopherol (Sigma) 등을 사용하였다. 실험에 사용한 항체는 rabbit anti-human collagen type I polyclonal antibody, goat anti-rabbit IgG alkaline phosphatase conjugate, rabbit anti-matrix metalloproteinase-1 (anti-MMP-1), 그리고 alkaline phosphatase substrate solution을 Sigma로부터 구입하여 사용하였다.
세포주는 신생아의 포피조직에서 분리한 normal human fibroblast (CoSeedbiopharm Co., Ltd.)를 DMEM (Jeil Biotech services Inc.) 배지에 5% fetal bovine serum (FBS, Sigma)을첨가하여 37°C, 5% CO2 조건 하에서 배양하고 tiypsinization 으로 계대 배양한 뒤 10~15세대 세포를 실험에 이용하였다. 비교 실험 재료로서 vitamin C (Amresco), butylated hydroxy toluene (BHT, Sigma), oleanolic acid (Sigma), a-tocopherol (Sigma) 등을 사용하였다.
비교 실험 재료로서 vitamin C (Amresco), butylated hydroxy toluene (BHT, Sigma), oleanolic acid (Sigma), a-tocopherol (Sigma) 등을 사용하였다. 실험에 사용한 항체는 rabbit anti-human collagen type I polyclonal antibody, goat anti-rabbit IgG alkaline phosphatase conjugate, rabbit anti-matrix metalloproteinase-1 (anti-MMP-1), 그리고 alkaline phosphatase substrate solution을 Sigma로부터 구입하여 사용하였다.
양성 대조군으로 BHT 와 dl-a-tocopherol (1000 IU/g, Sigma)을 이용하였다. 그 결과 superoxide를 50% 소거할 수 있는 농도 (IC%)는 arctigenin-rich 1.
피험자로 20세 이상 50세 이하의 건강한 성인 남, 여 30 명을 선정하였고, 첩포시험은 대상자 상박 내측에 첩포를부착하였으며, 48시간이 지난 후 첩포를 제거하였다. 약 60분간 안정을 취하도록 한 후 첫 판독을 시행하였고, 첩포 부착 후 96시간이 경과한 후 2차 판독을 시행하였다.
데이터처리
피부 주름을 측정하였다. 각 시점 별 측정한 R-value 분석을 통해 피부 주름개선 정도를 평가하였다.
R-value의 값이 작아질수록 피부 주름이 개선되어 주름의 깊이가 낮아짐을 의미하며 단위는 임의의 단위 (arbitrary unit)를 나타낸다. 육안평가 자료 및 기기평가 자료는 SPSS 11.5의 반복측정 분산분석법 (Repeated Measures ANOVA)을 이용하여 통계적 유의성을 검증하였다.
이론/모형
Xanthine/ xanthine oxidase 반응에서 형성된 superoxide radical 소거효과는 nitroblue tetrazolium (NBT, Sigma) 방법에 의해 측정하였다(27). 50 mM Na2CO3 buffer (pH 10.
연교추출물에 대한 피부 안전성, 즉 피부반응의 관찰을 통해서 자극 혹은 알레르기성 반응의 발생 여부를 알아보기 위하여 한국식품의약품안전청 기준 피부안전성 검사법에 따라 인체첩포시험을 실시하였다.
성능/효과
Arctigei血과 matairesinol을 각각 함유하는 연교추출물은 처리농도가 증가함에 따라 농도 의존적으로 DPPH 와 superoxide radical에 대한 소거효과를 나타내었다. DPPH radical 소거효과에서 arctigenin-rich와 matairesinol-rich는 각각 IC50 값이 5.747 飓/虬 4.450 "g/ml를 나타내었으며, superoxide radical 소거효과에서는 각각 1.634 mg/ml, 542.428 mg/ml로 양성 대조군으로 사용한 BHT보다 우수한항산화 효과를 보였다.
Arctigenin, matairesinol과 같은 lignans를 각각 함유한 연 교주 줄 물은 기존 알려진 항산화제보다 유사하거나 우수한 항산화 효과를 보였다. 또한, type I collagen 합성율 증가와 UVA에 의해 발현이 유도되는 MMP-1 의 발현저해에서 우수한 효과를 나타내었으며, 이를 토대로 한 in vivo 시험에서는 인체에 자극이 없으며 주름개선 효과를 보였다.
시행하였다. Phytoestrogen일종인 lignans를 각각 함유하는 연교추출물의 농도 500 姻/血 미만에서는 농도 의존적으로 섬유아세포의 증식 효과를 보였으며 , 500 jtzg/ml 의 농도에서는 급격하게 생존력 저하를 보였다(Fig. 2). C이agen 합성율 증가효과
Type I collagen 합성효과도 arctigenin 및 matairesinol을각각 함유한 연교추출물 그리고 양성 대조군 vitamin C를 100 “g/ml을 처리하였을 때 각각 10.5, 26.4, 15.7%의 합성율을 보임으로써 vitamin C와 유사하거나 우수한 효과를나타내었다. 또한, UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1 의발현저해 효과는 matairesinol을 함유한 연교추출물의 경우 oleanolic acid와 유사한 저해 효과를 보였다.
Type I c이lagen의 합성율 증가효과를 알아보기 위하여섬유아세포에 lignans를 각각 함유하는 연교추출물을 처리하여 24시간 후에 배양액을 취하여 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)를 수행하였다, Arctigenin 및 Matairesin이을 각각 함유한 연교추출물 그리고 양성 대조군으로 vitamin C를 100 飓/ml을 처리하였을 때 각각 10.5, 26.4, 15.7%의 합성율 증가를 보였다(Fig. 3). 즉, arctigenin 을 함유한 연교주출물은 vitamin C와 유사한 정도로 type I collagen의 합성율 증가효과를 보였으며, matairesinol을 함유한 연교추출물은 약 L7배의 합성율 증가효과를 보였다.
222 mg/ml로 측정되었다(Table 4). matairesinol을 함유한연교추출물은 dRi-tocopherol과는 유사한 정도의 효과를 보였으며, BHT보다 약 2배의 효과를 나타내어 DPPH radical 소거활성과 같이 종합해 볼 때, lignans를 각각 함유한 연교 추출 물은 지질 radical과 반응하는 primary 항산화제로서 매우 효과적임을 알 수 있었다.
이러한 UVA에 의해 발현이 증가되는 MMP-1 에 lignans를 각각 함유한 연교추출물이 미치는영향을 알아보고자 사람 섬유아세포에 UVA를 조사하고 연교추출물을 첨가하여 48시간 배양한 후 MMP-1 발현저해효과를 ELISA를 통해 알아보았다. 그 결과 matairesinol-4- 함유한 연교추출물은 oleanolic acid 처리구와 유사하게 MMP-1 발현저해 효과를 보였다(Fig. 4). Matairesinol 함유연교추출물과 oleanolic acid를 0.
이용하였다. 그 결과 superoxide를 50% 소거할 수 있는 농도 (IC%)는 arctigenin-rich 1.634 mg/ml, matairesinol- rich 0.542 mg/ml, BHT 1.0 mg/ml, 그리고 dl-a-tocopherol 0.222 mg/ml로 측정되었다(Table 4). matairesinol을 함유한연교추출물은 dRi-tocopherol과는 유사한 정도의 효과를 보였으며, BHT보다 약 2배의 효과를 나타내어 DPPH radical 소거활성과 같이 종합해 볼 때, lignans를 각각 함유한 연교 추출 물은 지질 radical과 반응하는 primary 항산화제로서 매우 효과적임을 알 수 있었다.
따라서 estrogen을 대신할 수 있는 물질을 찾고자 많은 연구가 이루어졌다. 그 결과, estrogen과 유사한 작용을 하는 물질로써 식물로부터 유래된 phytoestrogen이 발견되었다. Phytoestrogen은 동물사료로써 이를 섭취한 동물이 불임 현상을 나타낸다는 관찰로부터 발견하게 된 물질이며, 이들은 특히 콩과식물에 많이 함유되어 있다고 알려져 있다<6).
보였다. 또한, type I collagen 합성율 증가와 UVA에 의해 발현이 유도되는 MMP-1 의 발현저해에서 우수한 효과를 나타내었으며, 이를 토대로 한 in vivo 시험에서는 인체에 자극이 없으며 주름개선 효과를 보였다. 따라서 lignans를 함유한 연교추출물은 항노화를 위한 새로운 천연소재로 기대된다.
본 연구를 통하여 lignans를 각각 함유하는 연교추출물은항산화 효과와 생체 단백질의 30%를 구성하는 collagen의합성효과 및 UVA에 의한 MMP-1 의 발현저해 효과를 보였다. 인체에 무자극성으로 제품에 적용시 관찰되는 피부 주름개선 효과는 lignans를 각각 함유한 연교추출물을 새로운주름개선을 위한 천연소재로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
연교로부터 추출 . 분리한 lignans를 각각 함유한 추출물들을 분석한 결과, matairesinol 과 arctigenin 을 15.49%, 15.74%를 각각 함유한 추출물을 얻었다. 각각의 추출물들이 함유한 lignans의 HPLC 크로마토그램을 Fig.
연교추출물을 함유한 크림을 약 12주간 도포하였을 경우, 깊은 주름과 총 주름수의 감소효과를 관찰할 수 있었으며, 연교추출물 2%를 적용한 인체 안전성 시험에서 무자극으로 판명되었다.
감소하였고, ZXR2와 八氏?은 제품 사용 4주 후, 8 주 후 및 12주 후 시점에서 시험군이 대조군에 비해 피부 거칠기가 유의하게 감소하였다. 시점별 피부 주름개선 효과 분석 결과 ARI과 八四는 시험 군에서 제품 사용 4주 후, 8주 후, 12주 후 시점에서 유의하게 나타났으며, △!$ 의 경우 두 군 모두 제품 사용 4주 후와 12주 후 시점에서 유의하게 감소하였다.
주름 측정 parameter ARPAR5 측정 결과를 보면, △R1 은 제품 사용 12주 후 시점에서 시험군이 대조군에 비해 유의하게 감소하였고, ZXR2와 八氏?은 제품 사용 4주 후, 8 주 후 및 12주 후 시점에서 시험군이 대조군에 비해 피부 거칠기가 유의하게 감소하였다. 시점별 피부 주름개선 효과 분석 결과 ARI과 八四는 시험 군에서 제품 사용 4주 후, 8주 후, 12주 후 시점에서 유의하게 나타났으며, △!$ 의 경우 두 군 모두 제품 사용 4주 후와 12주 후 시점에서 유의하게 감소하였다.
3). 즉, arctigenin 을 함유한 연교주출물은 vitamin C와 유사한 정도로 type I collagen의 합성율 증가효과를 보였으며, matairesinol을 함유한 연교추출물은 약 L7배의 합성율 증가효과를 보였다.
후속연구
인체에 무자극성으로 제품에 적용시 관찰되는 피부 주름개선 효과는 lignans를 각각 함유한 연교추출물을 새로운주름개선을 위한 천연소재로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
참고문헌 (30)
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