선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
제안 방법
- 1). 3 종류의 시료들을 사용하여 E. coli D31에 대한 항균 활성을 측정하였다 (Fig. 2).
- 1 N HC1 이 되도록 HC1을 첨가하고, 원심분리 (15,000Xg, 4℃, 30분)하여 침전물을 제거한 후 Sep-Pak C]8 cartridge에 시료를 주입하였다. Column으로부터 10% MeOH (RM 10), 60% MeOH (RM 60) 및 100% MeOH (RM 100)의 물질들을 각각 용출시켰다 (Fig. 1). 3 종류의 시료들을 사용하여 E.
- E. coli D31에 항균 활성을 나타낸 RM 60은 6단계의 HPLC과정을 통하여 항균활성 펩타이드를 분리 정제하였다 (Fig. 3). 첫 단계로 동결 건조한 추출물 RM 6。을 Wdac C18 (10X250cm, Waters, USA) column에 주입하여 정제하였고 분리조건은 다음과 같다: 유속; 2.
- 2). 그 중에서 RM 60을 사용하여 항균성 물질을 정제하였다. RM 60은 역상 column과 size exclusion column등을 순차적고로 사용하여 정제하였다.
- 식용 달팽이 (Achatina 力我w)의 추출물 RM 60을 사용하여 E. coli D31 을 대상으로 순수한 항균성 물질을 분리 정제하였다. 정제한 항균성 물질은 MALDI-TOF Mass spectrometra-j- 사용하여 분자량을 측정한 결과, 1392.
- RM 60은 역상 column과 size exclusion column등을 순차적고로 사용하여 정제하였다. 최종 단계로는 Zorbox SB-phenyl column (4.6 X 150 mm, Aglient, USA) 을 사용하여 유속을 0.5 mL/min으로 하여 0.1% TFA을 포함한 28% CI%CN의 등용매 조건으로 순수하게 정제하였다 (Fig. 5).
- 다음 단계는 size exclusion column인 superdex peptide HR 10/30 (10X300 mm, Pharmacia, Sweden)을 사용하였다. 최종적으로 Zorbox SB-phenyl C|8 (A이ient, USA) column을 사용하여 유속; 0.5 mL/min, 28% 등 용매 조건으로 정제하였다 (Fig. 4). 모든 역상 HPLC 정제단계에서 A 용매로는 0.
- 홍합 (Mytilus coruscus) 주줄물인 RM 10, RM 60 및 RM 100을 사용하여 E. coll D31에 대해 항균활성을 측정하였다 (Fig. 2). 그 중에서 RM 60을 사용하여 항균성 물질을 정제하였다.
- 4). 활성이 있는 분획을 Vydac C18 (4.6X 150 cm, Waters, USA) column에 주입 하였고 유속; 1.0 mL/min, B 용매의 농도; 20 50% (60분)의 조건으로 정제하였고 세 번째 단계는 전 단계와 동일한 column을 사용하였고 B 용매의 농도만 20 t 30%를 사용하였다. 다음 단계는 size exclusion column인 superdex peptide HR 10/30 (10X300 mm, Pharmacia, Sweden)을 사용하였다.
대상 데이터
- Tryptic soy brolh (TSB)와 Lactose- Boullion (LB) 및 Muller-Hinton Broth (MHB)는 Merck 사 (Darmstadt, Germany)에서 구입하여 실험에 사용하였다. HPLGgrade의 water (H2O) 및 acetonitrile (CH3CN)은 TEDIA 사 (Ohio, US A)와 Merck사 (Darmstadt, Germany)에서 구입하였고, Trifluroacetic acid (TFA)는 Sigma사 (St. Louis, MO, USA)로부터 구입하였고, 그 이외의 모든 시약은 특급을 사용하였다.
- Sep-Pak Vac C18 cartridge는 Waters사 (Miliford, MA, USA)에서 구입하였다. Tryptic soy brolh (TSB)와 Lactose- Boullion (LB) 및 Muller-Hinton Broth (MHB)는 Merck 사 (Darmstadt, Germany)에서 구입하여 실험에 사용하였다.
- 구입하였다. Tryptic soy brolh (TSB)와 Lactose- Boullion (LB) 및 Muller-Hinton Broth (MHB)는 Merck 사 (Darmstadt, Germany)에서 구입하여 실험에 사용하였다. HPLGgrade의 water (H2O) 및 acetonitrile (CH3CN)은 TEDIA 사 (Ohio, US A)와 Merck사 (Darmstadt, Germany)에서 구입하였고, Trifluroacetic acid (TFA)는 Sigma사 (St.
- 그러나 식용으로만 사용되어온 식용 달팽이 (Achatina fulicdfe 연구는 보고 된 바가 없다. 본 연구는 식 용 달팽 이 인 (Achatina 邳ca)를 대상으로 분자량이 1392.64 Da인 항균성 물질을 분리하였다.
- 실험에 사용한 달팽 이는 {Achatina 血lica)는 2005년 1월에 경기도 용인에서 구입하였다. 살아있는 상태의 달팽이를 껍질과 분리 한 후, 액체질소로 급속 동결시켜서 실험에 사용하기 전 까지 -7UC에 보관하였다.
이론/모형
-
항균활성 측정
정제과정 중에 얻은 각 분획에 대한 항균활성의 측정은 Radial diffusion assay법을 이용하여 E. coli D31에 대한 성장 억제를 관찰하였고 활성 측정법은 다음과 같다 (Lehrer et al., 1991). E.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.