선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- p data-page="1">파라벤은 파라옥시 안식향산 에스텔이라고도 불리며, 종류로는 에틸 파라벤, 이소프로필 파라벤, 부틸 파라벤, 이소부틸 파라벤 등이 있고, 겨드랑이에 뿌리는 디오드런트, 발한억제제, 냄새제거용 방향제, 스킨크림 등 수많은 화장품에 병" 부제로 첨가되고 있는 화학물질이며 여성 호르몬의 일종d인 에스트로겐과 유사한 작용을 수행할 수 있음이 입증되어 파라벤이 내분비계를 교란하는 내분비 장애물질로 작용할 수 있는 것을 시사한다. 본 연구는 파라벤류 물질의 내분비 장애 물질로서 인체에 미칠 수 있는 영향을 평가하기 위하여 파라벤류 (에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸)를 생후 19일령부터 21일령까지 3일간 투.여하여 일반증상, 체중 및 사료 섭취량을 관찰하였고, 부검하여 간 및 생식기관의 중량 특히, 자궁의 습중량에 대하여 조사하였다.
제안 방법
- 살균된 정제수를 자유 섭취시켰다. 24시간 동안 순화 를 실시한 후 체중을 기초로 하여 군분리하였으며, 군분리시 군평균체중 및 군 표준편차를 계산하여 균등성 여부를 확인하였다. 개체식별은 사육 상자에 시험번호, 군/투여용량, 개체번호, 성별, 투여경로, 투여 기간 및 부검일을 기재한 개체식별카드를 부착하였다.
- 본 연구의 과정은 'The OECD Program to Validate the Rat Uterotrophic Bioassay to Screen Compounds for m vivo Eistrogenic Responses : Phase 1 (August 2001)', 'The OECD Program to Validate the Rat Uterotrophic Bioassay. Phase 2 : Coded Single - Dose Studies (September 2003)'및 4 OECD test strategies and methods for endocrine disruptors (June 2004)'등의 문헌을 참조하여 실시하였으며, 각 연구의 과정에 대하여 GLP 규정을 준수하여 실시하였다.
- 24시간 동안 순화 를 실시한 후 체중을 기초로 하여 군분리하였으며, 군분리시 군평균체중 및 군 표준편차를 계산하여 균등성 여부를 확인하였다. 개체식별은 사육 상자에 시험번호, 군/투여용량, 개체번호, 성별, 투여경로, 투여 기간 및 부검일을 기재한 개체식별카드를 부착하였다. 개체식별은 유성 매직을 이용하여 개체식별법에 따라 꼬리에 표시하였다.
- 난소는 난관팽대부 및 난소 주변의 지방을 제거하고 중량을 측정하였다.
- 5, 250, 1, 000 mg/kg으로 용량단계를 구성하고 각 군당 암컷을 6 마리씩 배정하여 생후 19일부터 21일까지 3일간 1일 1회 피하투여하였다. 대조군은 0 mg/kg으로 부형제인 Com oil을 투여하였고, 음성대조군은 Dibutyl phthalat룰 lOOmg/kg, 양성대조군은 17a-Ethynylestra diol 를 1 mg/kg의 용량으로 투여하였다. 투여액량은 2mL/kg body wt로 하였으며, 개체별 투여액량은 투여 직전의 체중을 기준으로 산출하였다.
- 여하여 일반증상, 체중 및 사료 섭취량을 관찰하였고, 부검하여 간 및 생식기관의 중량 특히, 자궁의 습중량에 대하여 조사하였다. 또한 자궁에 대하여 영상분석 및 조직병리학적 검사를 실시하여 자궁 경관의 변화를 관찰하였다. 본 연구의 과정은 'The OECD Program to Validate the Rat Uterotrophic Bioassay to Screen Compounds for m vivo Eistrogenic Responses : Phase 1 (August 2001)', 'The OECD Program to Validate the Rat Uterotrophic Bioassay.
- 모든 동물에 대하여 자궁을 적출하여 10 % 중성 포르말린 용액 (neutral fbrmalin)에 고정 하고 일정 한 두께 (3 mm) 로삭정한 다음 일반적인 조직처리과정을 거쳐 파라핀 포매하여 4 um의 조직절편을 제작하였다. 이후 일반적인 염색방법인 Hematoxylin & Eosin 염색 (H&E stain)을 하여 광학현미경 (Olympus BX50, Olympus Optical Co.
- 모든 동물의 자궁은 조직절편을 제작한 후 광학현미경하에서 조직을 사진촬영 한 후 Image analyzer (Image - Pro plus, Media Cybernetics. Inc., USA)를 이용하여 자궁 경관의 변화에 대하여 관찰하였다.
- 본 시험의 모든 동물에 대해 투여종료 후 배대동맥 (abdominal aorta)으로부터 혈액을 5 mL 가량 채혈하여 의료법인 삼광의료재단(서울특별시 서초구 양재동 9-60번지) 에의뢰하여 혈중 FSH, LH 및 Estrogen의 농도를 측정하였다.
- 본 시험의 모든 동물은 개체별로 간, 비장, 심장, 뇌 (Brain), 신장, 흉선, 부신 (좌/우), 난소 (좌/우), 자궁, 질을 적출하여 중량을 측정하였다.
- 사료는 자궁 비대에 영향이 없어 알려진 SAM #31 쥐사료 (로트번호: 040702, 신촌사료 주식회사)를 자유섭취시켰으며, 필터와 유수살균기를 이용하여 여과 . 살균된 정제수를 자유 섭취시켰다. 24시간 동안 순화 를 실시한 후 체중을 기초로 하여 군분리하였으며, 군분리시 군평균체중 및 군 표준편차를 계산하여 균등성 여부를 확인하였다.
- 생존동물은 관찰기간 종료 시 ether 로 마취시켜 외관검사를 실시한 후, 배대동맥으로부터 방혈 및 치사시켜 체내 외장기조직을 육안적으로 검사하였다.
- 시험군의 구성은 18개의 군으로 대조군, 음성대조군, 양성대조군을 두고 에틸 파라벤, 프로필 파라벤, 이소프로필 파라벤, 부틸 파라벤 및 이소부틸 파라벤에 대하여 가각 62.5, 250, 1, 000 mg/kg으로 용량단계를 구성하고 각 군당 암컷을 6 마리씩 배정하여 생후 19일부터 21일까지 3일간 1일 1회 피하투여하였다. 대조군은 0 mg/kg으로 부형제인 Com oil을 투여하였고, 음성대조군은 Dibutyl phthalat룰 lOOmg/kg, 양성대조군은 17a-Ethynylestra diol 를 1 mg/kg의 용량으로 투여하였다.
- 본 연구는 파라벤류 물질의 내분비 장애 물질로서 인체에 미칠 수 있는 영향을 평가하기 위하여 파라벤류 (에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸)를 생후 19일령부터 21일령까지 3일간 투.여하여 일반증상, 체중 및 사료 섭취량을 관찰하였고, 부검하여 간 및 생식기관의 중량 특히, 자궁의 습중량에 대하여 조사하였다. 또한 자궁에 대하여 영상분석 및 조직병리학적 검사를 실시하여 자궁 경관의 변화를 관찰하였다.
- 4 um의 조직절편을 제작하였다. 이후 일반적인 염색방법인 Hematoxylin & Eosin 염색 (H&E stain)을 하여 광학현미경 (Olympus BX50, Olympus Optical Co., Japan)으로 관찰하였다.
- 질개구의 유무를 투여개시 일부터 부검 일까지 관찰하였다.
- 질은 개구부부터 자궁경부까지를 포함하여 중량을 측정하였다.
- 투여 1, 2 및3일에 사료 및 음수 공급량을 측정하고 그익일에 잔량을 측정하여 산출하였다.
- 투여기간 및 부검당일에 측정(랫드용 저울, BP3100S, Sartorius, Germany)하였다.
- 투여기간동안 1일 1회 모든 시험동물에 대하여 실시하였으며, 일반상태의 변화, 운동성, 외관, 자율신경 등의 일반증상 및 사망동물의 유무를 관찰하였다.
- 대조군은 0 mg/kg으로 부형제인 Com oil을 투여하였고, 음성대조군은 Dibutyl phthalat룰 lOOmg/kg, 양성대조군은 17a-Ethynylestra diol 를 1 mg/kg의 용량으로 투여하였다. 투여액량은 2mL/kg body wt로 하였으며, 개체별 투여액량은 투여 직전의 체중을 기준으로 산출하였다.
- 특히, 자궁의 경우에는 자궁경부부터 난관의 시작 부위까지를 포함하며 다음의 방법으로 중량을 측정하였다.
대상 데이터
- SD 랫드는 각종 독성평가시험에 가장 널리 사용되고 있으며, 비교할 생리, 해부 및 독성학적인 기초 자료가 많이 축적되어 있으며 자궁비대반응에 추천되어 선택하였다.1)또한, 성숙한 난소절제동물보다 미성숙한 암컷이 자궁비대에 대하여 민감한 반응을 보이는 것으로 보고되어 생후 19일령의 암컷을 사용하였다.2)시험기간 중 사육실 환경조건은 온도 19~25°C, 상대습도 30〜70%, 환기 횟수 10~15 회/hr, 조명주기 12 hr, 점등 / 12 hr 소등, 조도 150-300 Lux로 하였다.
- 음성대 조물질인 Dibutyl phthalate, 양성대 조물질인 17a-Ethynylestradiol은 SIGMA-ALDRICH사의 제품을 사용하였다. 부형제는 Com oil(FLUKA사)을 사용하였으며, 시험물질, 음성대조물질 및 양성대조물질은 투여직전에 부형제에 현탁 하여 조제하였다.
- 사육상자는 스테인레스 철망 사육 상자(260Wx350Lx210H (mm), 대종기기상사)에 10 마리 (검역 및 순화기간) / 3 마리(관찰기간)씩 수용하였다. 사료는 자궁 비대에 영향이 없어 알려진 SAM #31 쥐사료 (로트번호: 040702, 신촌사료 주식회사)를 자유섭취시켰으며, 필터와 유수살균기를 이용하여 여과 . 살균된 정제수를 자유 섭취시켰다.
- 2)시험기간 중 사육실 환경조건은 온도 19~25°C, 상대습도 30〜70%, 환기 횟수 10~15 회/hr, 조명주기 12 hr, 점등 / 12 hr 소등, 조도 150-300 Lux로 하였다. 사육상자는 스테인레스 철망 사육 상자(260Wx350Lx210H (mm), 대종기기상사)에 10 마리 (검역 및 순화기간) / 3 마리(관찰기간)씩 수용하였다. 사료는 자궁 비대에 영향이 없어 알려진 SAM #31 쥐사료 (로트번호: 040702, 신촌사료 주식회사)를 자유섭취시켰으며, 필터와 유수살균기를 이용하여 여과 .
- 시험물질은 에틸 파라벤, 프로필 파라벤, 이소프로필 파라벤, 부틸 파라벤 및 이소부틸 파라벤으로서 에틸파라벤 및 프로필 파라벤은 SIGMA-ALDRICH사에서 생산된 제품을 사용하였고, 부틸파라벤은 WAKO사, 이소부틸 파라벤 및 이소프로필 파라벤은 동경화학주식회사에서 생산된 제품을 사용하였다 . 음성대 조물질인 Dibutyl phthalate, 양성대 조물질인 17a-Ethynylestradiol은 SIGMA-ALDRICH사의 제품을 사용하였다.
- 시험에 사용한 랫드는 18일령의 암컷 SpragueDawley(SD, Sam:TacN(SD), (주}샘타코 바이오 코리아, 경기도 오산시 서랑동 77-1)를 입수하였다. SD 랫드는 각종 독성평가시험에 가장 널리 사용되고 있으며, 비교할 생리, 해부 및 독성학적인 기초 자료가 많이 축적되어 있으며 자궁비대반응에 추천되어 선택하였다.
- . 음성대 조물질인 Dibutyl phthalate, 양성대 조물질인 17a-Ethynylestradiol은 SIGMA-ALDRICH사의 제품을 사용하였다. 부형제는 Com oil(FLUKA사)을 사용하였으며, 시험물질, 음성대조물질 및 양성대조물질은 투여직전에 부형제에 현탁 하여 조제하였다.
데이터처리
- F-test를 실시하였다. Levene's test 결과 분산이 이질적인 경우에는 rank-transformed data를 실시하였고, transformed data에 대한 Levene's test를 재실시하여 분산이 동질 하면 one way ANOVA test를 실시하여 유의성이 관찰되면 Dunnett's /-test를 실시하였으며, 분산이 이질적이면 non-parametric ANOVA test를 실시하였고 그에 합당한 t- test 방법을 선정하여 통계학적 해석을 실시하였다.
- 체중, 호르몬 검사 결과, 장기중량 측정 및 자궁의 영상분석 결과에서 얻어진 모든 자료들에 대해 분산의 동질성을 비교하기 위해 Levene's test를 실시하였고, 분산이 동질하면 one way ANOVA test를 실시하여 유의성이 관찰되면 Dunnett's F-test를 실시하였다. Levene's test 결과 분산이 이질적인 경우에는 rank-transformed data를 실시하였고, transformed data에 대한 Levene's test를 재실시하여 분산이 동질 하면 one way ANOVA test를 실시하여 유의성이 관찰되면 Dunnett's /-test를 실시하였으며, 분산이 이질적이면 non-parametric ANOVA test를 실시하였고 그에 합당한 t- test 방법을 선정하여 통계학적 해석을 실시하였다.
이론/모형
- 개체식별은 사육 상자에 시험번호, 군/투여용량, 개체번호, 성별, 투여경로, 투여 기간 및 부검일을 기재한 개체식별카드를 부착하였다. 개체식별은 유성 매직을 이용하여 개체식별법에 따라 꼬리에 표시하였다.
성능/효과
- ' 생식기계를 제외한 상대장기중량에서 간이 부틸파라벤 62.5 mg/kg 투여군과 부틸파라벤 250 mg/kg 투여군에서 각각 대조군에 비해 유의성있게 감소하였으며 흉선이 이소프로필 1, 000 mg/kg 투여군이 대조군에 비해 유의성있게 감소하였다. 또한 좌측 신장의 상대장기중량에서 부틸 파라벤 62.
- 1)또한, 성숙한 난소절제동물보다 미성숙한 암컷이 자궁비대에 대하여 민감한 반응을 보이는 것으로 보고되어 생후 19일령의 암컷을 사용하였다.2)시험기간 중 사육실 환경조건은 온도 19~25°C, 상대습도 30〜70%, 환기 횟수 10~15 회/hr, 조명주기 12 hr, 점등 / 12 hr 소등, 조도 150-300 Lux로 하였다. 사육상자는 스테인레스 철망 사육 상자(260Wx350Lx210H (mm), 대종기기상사)에 10 마리 (검역 및 순화기간) / 3 마리(관찰기간)씩 수용하였다.
- 관찰 기간 동안 모든 시험 군에서 사망 례는 발생하지 않았고 체중 및 사료와 음수 섭취량에 대하여 대조군 및 시험물질투여군 간의 차이는 관찰되지 않았다 (data not shown).
- 대조군, 음성대조군 및 양성대조군에서는 관찰기간 동안 특이한 일반증상은 관찰되지 않았으나, 모든 파라벤 투여군에서 투여부위의 피하결절이나 부종을 나타냈고, 투여가 진행됨에 따라 용량에 높을수록 투여부우의 가피형성이나 탈모 등을 증상으로 발전하는 경향을 보였다 (Table 1). 관찰 기간 동안 모든 시험 군에서 사망 례는 발생하지 않았고 체중 및 사료와 음수 섭취량에 대하여 대조군 및 시험물질투여군 간의 차이는 관찰되지 않았다 (data not shown).
- 또한 자궁의 blotted weight에서는 양성대조군, 에틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소프로필 파라벤 62.5 mg/kg 투여군, 이소프로필 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소프로필 파라벤 투여군 1, 000 mg/kg 투여군, 부틸 파라벤 투여 250 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 62.5 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군가 대조군에 비해 유의적으로 증가를 보였다.
- 생식기계를 제외한 절대장기중량에서 대조군 및 시험물질투여군 간의 차이는 관찰되지 않았으나, 생식기계의 절대 장기중량에서는, 에틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군의 오른쪽 난소가 대조군에 비해 유의성있게 감소하였고, 자궁의 wet weight에서 양성대조군, 에틸파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 프로필 파라벤 i, ooo mg/kg 투여군-, 이소프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군, 부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 62.5 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군에서 유의적으로 증가하였다.
- 생식기계의 상대장기중량에서 좌측 난소가 에틸파라벤 1, 000 mg/kg 투여군에서 대조군에 비해 유의성있게 증가하였고, 자궁의 wet weight에서 양성대조군, 에틸 파라반 1, 000 mg/kg 투여군, 프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 부틸 파라벤 250 mg^g 투여군, 부틸 파라벤 1, 000 mggkg 투여군, 이소 부틸파라벤 62.5 mg/kg 투여군 이소부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군에서 대조군에 비해 유의성있는 증가를 보였다. 자궁의 blotted weight에서는 양^대조군, 에틸파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 프로필 파라벤 투여군, 이소프로필 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 부틸파라벤 투여군 250 mg/kg 투여군, 부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소 부틸파라벤 62.
- 양성대조군, 에틸 파라벤 1, 000 mg/kg투여군, 프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 62.5 mgkg투여군, 이소부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군에서만 자궁각의 확장소견(dilatation of uterus horn)이 관찰되었으며, 그 외 다른 시험물질 투여군의 경우 육안적으로 대조군과의 차이가 관찰되지 않았다 (Table 5).
- 자궁벽두께(Uterine wall thickness)의 최대치(Maximum)에서 대조군에 대해 양성대조군이 유의성 있는 증가, 에틸 파라벤 250 mg/kg 투여군이 유의성 있는 감소를 보였다.
- 자궁벽두께의 최소치(Minimum)에서는 대조군에 대해 음성대조군 및 양^대조군이 유의성있는 증가를 보였으며, 대조군 및 시험물질 투여군간의 차이는 관찰되지 않았다 (Table 7).
- 5 mg/kg 투여군 이소부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군에서 대조군에 비해 유의성있는 증가를 보였다. 자궁의 blotted weight에서는 양^대조군, 에틸파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 프로필 파라벤 투여군, 이소프로필 파라벤 250 mg/kg 투여군, 이소프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 부틸파라벤 투여군 250 mg/kg 투여군, 부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군, 이소 부틸파라벤 62.5 mg/kg 투여군, 이소부틸 파라벤 250 mg/kg 투여군 및 이소부틸 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군에서 유의성 있는 증가를 보였다 (Table 3-1, 3-2 and 4).
- 자궁의 영상분석에서 자궁직경(uterine diameter)에서 장축 (majors 대조군에 대해 유의성있는 증가, 에틸 파라벤 250 mg&kg 투여군이 유의성 있는 감소, 이소프로필 파라벤 62.5 mg/kg 투여군이 유의성 있는 감소 및 이소부틸 파라벤 1, 000 mg&kg 투여군이 유의성 있는 증가를 보였다.
- 자궁직경의 단축(minor asix)은 대조군에 대해 에틸파라벤 250 mg/kg 투여군이 유의성있는 감소, 이소프로필 파라벤 1, 000 mg/kg 투여군이 유의성있는 증가4, 이소부틸 파라벤 250 및 1, 000 투여군이 유의성있는 증가를 보였다.
- 혈중 에트로겐 농도에서 대조군에 비해 음성대조군, 양^ 대조군, 에틸파라벤 62.5, 1000 mg/kg 투여군이 감소하였으며, 혈중 난포자극호르몬(FSH)농도와 혈중 황체형성호르몬 (LH) 농도에서 대조군 및 시험물질투여군 간의 차이는 관찰되지 않았다 (Table 2).
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.