선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 달생탕을 임신 랫드에 투여한 후 랫드의 임신, 착상, 유산, 임신유지 및 출산에 이르는 변화를 관찰함으로서 임신중 태아의 발생과 그 영향 그리고 임신유지 및 분 만에 대한 영향을 알아보고자 하였다.
- 따라서 본 실험은 임신유지, 태아의 성장 및 분만과 태아발생에 대한 한약재의 영향을 임신한 랫드를 이용하여 간접적으로 확인하기 위해 임신중에 복용하는 한 약처방 중의 하나인 달생탕(達生湯)을 선정하였다. 한 약재 특히, 탕약에 대한 한국의 독성시험기준에 의한 생식독성연구는 현재 전무한 형편이며, 달생탕의 경우 예로부터 임산부에 처방되었던 탕약의 하나로써 인체 투여량을 기준으로 한 생식독성평가로도 매우 귀중한 자료로 활용가능하다.
- 본 실험은 임신중에 임산부와 태아의 건강을 위한 한 약처방인 보생탕의 안전성 평가의 일환으로 이를 임신 랫드에 투여했을 때 랫드의 임신, 착상, 유산, 임신유지 및 출산에 이르는 변화를 관찰함으로서 임신중 태아의 발생과 그 영향 그리고 임신유지 및 분만에 영향을 알아보기 위해 실시하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다.
- 본 연구는 임신유지, 성장 및 분만과 태아발생 및 그 영향과 관련된 한약재의 효능을 임신 랫드를 이용하여 간접적으로 확인하여 그 결과를 보고자 하였다. 모체의 체중변화에서는 달생탕을 투여한 결과 임신 1일부터 20 일까지의 체중의 변화가 대조군과 달생탕 투여군 모두 증가함을 보였다.
제안 방법
- 임신 랫드를 얻기 위하여 교배 1일 전에 수컷 1마리 씩을 케이지에 넣고 적응시킨 후, 오후 7~8시에 암컷 2마리를 합사시키고 익일 오전 8시부터 10시까지 질 도말 표본을 제작하여 임신을 확인하였다.。, 질전(vaginal plug)을 확인하였거나, 질내에 정자가 확인된 암컷을 임 신 0일로 하고, 이 때의 체중을 기준으로 군분리를 하였다. 분리된 각 군에게 한약을 임신 1일부터 임신 20 일까지 경구투여하고 임신 20일에 부검하여 모체의 각 장기를 관찰하고 자궁을 적출하여 태자를 관찰하였다.
- 각 군의 임신 20일째의 모체에서 자궁을 열어 살아 있는 태자의 골격을 관찰하였다. 태반을 제거하고 성 별, 무게와 외형기형을 관찰한 후 장기를 제거하고 증 류수로 수세한 후 약 70。(2의 수조에 담궈 피부를 벗겨 냈다.
- 임신 기간 동안 투여용량을 위한 체중측정은 일주일 에 두 번 측정하였고, 이것을 바탕으로 임신 1일부터 임신 20일까지 경구존데를 사용하여 하루에 한번 한약 5㎎/㎏씩을 경구투여 하였다. 각 실험동물은 부검 전에 최종 체중을 측정하고 경추 탈구하여 안락사 시킨 후에 부검하였으며, 방혈치사하게 한 후 모든 장기에 대하여 육안소견을 관찰하였다. 모체의 장기인 간장, 비 장, 신장과 생식기관인 자궁의 무게를 측정하였다.
- 17시간 후 수산화 칼륨 용액을 제거한 후 알리자린 레드 에스(alizarine red S) 용액을 부어 잘 흔들어서 염색하였다. 그리고 약 4시간 후 알리자린 레드 에스 용액을 제거하고 70% 에탄올 과 글리세린을 5:5로 혼합한 용액에 저장하고 간 후 부터 입체현미경하에서 대조군과 투여군 간의 골격기 형의 차이를 비교하였다.
- 달생탕을 20일간 투여한 모체의 난소에서의 황체수 와 자궁의 착상된 자리와 그 자리에서의 태자 유무를 확인하여 착상율, 임신율, 초기소실율, 후기소실율 등을 조사하고 차산자의 수컷과 암컷의 수를 파악하여 성비 율을 계산하였다.
- 모체를 안락사시킨 후 심장 혹은 하대정맥에서 채 혈하였다. 혈액은 EDTA-Na로 항응고처리하고 자동 혈구계산기 (Technicon 사의 Hl system)를 이용하여 WBC, RBC, HGB, PCV, MCV, MCH, MCHC, PLT, Lymphocyte, Neutrophil, Monocyte, Eosinophil, Basophil 등을 측정하였다.
- 각 실험동물은 부검 전에 최종 체중을 측정하고 경추 탈구하여 안락사 시킨 후에 부검하였으며, 방혈치사하게 한 후 모든 장기에 대하여 육안소견을 관찰하였다. 모체의 장기인 간장, 비 장, 신장과 생식기관인 자궁의 무게를 측정하였다. 장기 중량은 절대치와 상대적 중량비를 천분율(%0)로 표시하였다.
- 。, 질전(vaginal plug)을 확인하였거나, 질내에 정자가 확인된 암컷을 임 신 0일로 하고, 이 때의 체중을 기준으로 군분리를 하였다. 분리된 각 군에게 한약을 임신 1일부터 임신 20 일까지 경구투여하고 임신 20일에 부검하여 모체의 각 장기를 관찰하고 자궁을 적출하여 태자를 관찰하였다.
- 실험동물은 Sprague-Dawley계 랫드 8주령을 한림실 험동물연구소로부터 구입하였으며 , 1주간의 순화기간을 거쳐서 건강한 동물을 실험에 사용하였다. 사육실은 온도 23±2℃, 상대습도 55±7℃ 이내로 조절하였고, 광 주기는 약 12시간 비율로 인공조명(점등: 오전 8시, 소 등: 오후 &시)을 적용하였다. 폴리카보네이트 케이지가 사용되었으며, 실험기간동안 펠렛 사료와 음수는 자유 로이 섭취케 하였다.
- 실험군 배정은 체중을 측정한 후 무작위로 대조군과 달생탕 투여군으로 설정하고 tail-marking법으로 개체를 표시하여 각 군에 11마리씩 총 22마리를 배정하여 실 험하였다尹
- 임신 기간 동안 투여용량을 위한 체중측정은 일주일 에 두 번 측정하였고, 이것을 바탕으로 임신 1일부터 임신 20일까지 경구존데를 사용하여 하루에 한번 한약 5㎎/㎏씩을 경구투여 하였다. 각 실험동물은 부검 전에 최종 체중을 측정하고 경추 탈구하여 안락사 시킨 후에 부검하였으며, 방혈치사하게 한 후 모든 장기에 대하여 육안소견을 관찰하였다.
- 임신 랫드를 얻기 위하여 교배 1일 전에 수컷 1마리 씩을 케이지에 넣고 적응시킨 후, 오후 7~8시에 암컷 2마리를 합사시키고 익일 오전 8시부터 10시까지 질 도말 표본을 제작하여 임신을 확인하였다.。, 질전(vaginal plug)을 확인하였거나, 질내에 정자가 확인된 암컷을 임 신 0일로 하고, 이 때의 체중을 기준으로 군분리를 하였다.
- 혈액을 냉장고에 2시간 정도 방치한 후 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 자동 혈청생화학 분석기(Technicon 사의 RA-XT)를 이용하여 혈청내 Alanine aminotransferase (ALT), Aspartate aminotransferaseAST), Creatinie, Blood Urea Nitrogen(BUN)을 측정하였다.
- 시험물질은 달생탕 처방을 1제 분량을 (15일 복용) 위생적인 1회용 부직포(성분: 폴리프로필렌, 100%, 제 작사: 유한킴벌리)에 담은 후 이것을 탕제를 조제하기 위한 한약 전기약탕기(미광산업, 한국 2001년 제작, 정격전압: 220V, 정격소비전력: 1800W)에 물 5500cc 와 함께 100。。정도로 2시간 가열하였다. 최종 추출된 한약 전탕액 3000cc을 실험원액으로 사용하였으며, 인 체 1일 투여량(60 kg)을 기준으로 실험동물의 체중에 따라 투여하였다.
- 모체를 안락사시킨 후 심장 혹은 하대정맥에서 채 혈하였다. 혈액은 EDTA-Na로 항응고처리하고 자동 혈구계산기 (Technicon 사의 Hl system)를 이용하여 WBC, RBC, HGB, PCV, MCV, MCH, MCHC, PLT, Lymphocyte, Neutrophil, Monocyte, Eosinophil, Basophil 등을 측정하였다.
대상 데이터
- 실험동물은 Sprague-Dawley계 랫드 8주령을 한림실 험동물연구소로부터 구입하였으며 , 1주간의 순화기간을 거쳐서 건강한 동물을 실험에 사용하였다. 사육실은 온도 23±2℃, 상대습도 55±7℃ 이내로 조절하였고, 광 주기는 약 12시간 비율로 인공조명(점등: 오전 8시, 소 등: 오후 &시)을 적용하였다.
- 사육실은 온도 23±2℃, 상대습도 55±7℃ 이내로 조절하였고, 광 주기는 약 12시간 비율로 인공조명(점등: 오전 8시, 소 등: 오후 &시)을 적용하였다. 폴리카보네이트 케이지가 사용되었으며, 실험기간동안 펠렛 사료와 음수는 자유 로이 섭취케 하였다. 실험기간 동안 사용된 사료의 성 분은 Table 1과 같다.
데이터처리
- 수집된 자료들은 엑셀프로그램을 이용하여 모체의 장 기중량, 임신율, 착상율, 초기소실율, 후기소실율 등을 분석하였고, ANOVA, T-Test 그리고 Rank-Sum Test 를 이용하여 그룹간의 유의성을 검정하였다.
성능/효과
- 1. 모체의 체중변화에서는 7일 이후로 대조군이 달생 탕 투여군보다 높은 증가율을 보였으나 전체적으로 모두 증가현상을 보였으며 달생탕 투여로 인한 체중감소 는 없었다.
- 2. 모체의 장기무게에서는 절대중량에서 대조군이 달 생탕 투여군보다 높은 결과를 보였지만 차이는 없었다. 상대중량에서 간과 신장 좌우는 달생탕 투여군이 대조군보다 높은 결과가 나타났고 비장에서는 대조군 이 높은 결과를 보였으나 차이는 없었다.
- 6% 증가하였다. 20일 부검전 체중을 측정한 결과로는 달생 탕 투여군이 17.4%%, 대조군이 23.3% 증가하였다. 7일까지의 체중은 달생탕 투여군이 높았지만 부검전 20 일에는 대조군과 달생탕 투여군의 체중이 거의 동일하였다.
- 3. 혈액분석결과 백혈구, 적혈구, 중성구, 림프구 에서 만 대조군보다 높은 결과를 보였고 나머지 적혈구 관 련지표(MCV, MCH, MCHC), 헤모글로빈, 혈소판, 호 산구, 호염기구, 단핵구등은 대조군보다 낮은 결과가 나타났다. 그리고 AST, ALT, BUN, Creatinine에서는 대조군보다 모두 높은 결과였지만 역시 차이는 없었다.
- 4. 모체의 황체수, 착상수, 착상율, 임신율, 초기소실 율, 후기소실율, 출산자 수, 출산자의 성비를 보면 대조 군보다 달생탕 투여군에서 약간 높은 결과를 보였으나 큰 차이는 없었다.
- 5. 태자에 대한 영향을 살펴본 결과 태자의 체중과 태자 수에서 유의적인 차이는 없었다. 그리고 태자 기 형발생에서는 외형적인 기형은 관찰되지 않았고 골격 검사에서도 관찰되지 않았다.
- 13mg/dZ)에 포함되었다. ALT, AST, BUN, Creatinine 모두 달생탕 투여군이 대조군보다 높은 결과를 보였으나 모두 정상범위 이내 였고 통계적 차이는 나타나지 않았다.
- 5%)에서 보다 많은 태자에서 관찰되었다. 그리고 대 조군에서는 나타나지 않았지만 달생탕 투여군에서 bipartite형이 3.6% 관찰되었다.
- 흉추, 흉골 모두 달생탕 투여 군이 대조군보다 많은 태자에서 관찰되었으나 차이는 없었다. 그리고 천골과 미추에서는 수의 차이가 관찰되 었으나 차이는 없었고 미추에서는 유의성이 나타났다 (P<0.01). 그리고 늑골과 경추, 흉추, 요추는 그 수가 일정했다.
- 그러므로 달생탕은 독성에 있어서 모체와 태자 에 비교적 안전할 것으로 생각되어지나, 달생탕의 생식 독성에 대한 자료가 많지 않아 안전성을 결론짓기 어 려우며, 더 많은 실험과 연구가 수행되어야 할 것으로 생각된다. 그리고 초기소실율에서 대조군 보다 낮은 결과가 나타난 것으로 보아 임신유지에는 좋은 영향을 미치는 것으로 생각된다. 또 성비에서도 대조군과 달리 달생탕 투여군은 암컷의 수가 수컷의 수보다 많았다.
- 그리고 특히 초기소실율에서는 대조군보다 달생탕 투 여군이 높은 결과를 보였다는 점에서 보생탕이 착상이 나 임신유지에 유용한 영향이 있었다는 것을 볼 수 있었다. 성비에서도 대조군과 달리 암컷보다 수컷의 수가 많았다.
- 마지막으로 태자에 대한 영향을 살펴보면 우선 태자 의 체중과 태자수에서 보면 대조군 보다 달생탕 투여 군에서 약간 높았으나 유의한 체중 및 증체량의 변화가 관찰되지 않았다. 태자의 기형발생에서는 육안적인 이상은 발견되지 않았다.
- 모체의 장기 무게를 살펴보면 간, 비장, 신장 좌우 절대중량에서는 차이가 인정되지 않았으며 상대적인 중 량에서도 달생탕 투여군이 비장을 제외하고 대조군보다 약간의 증가현상을 보였지만 큰 차이가 나지 않은 것으로 보아 달생탕 투여와 관련된 변화는 아닌 것으로 생각되며, 부검시 이들 장기들에서 육안적 및 조직 병리학적 변화가 인정되지 않았으므로 달생탕에 의한 장기 무게의 변화는 아닌 것으로 생각된다.
- 본 연구는 임신유지, 성장 및 분만과 태아발생 및 그 영향과 관련된 한약재의 효능을 임신 랫드를 이용하여 간접적으로 확인하여 그 결과를 보고자 하였다. 모체의 체중변화에서는 달생탕을 투여한 결과 임신 1일부터 20 일까지의 체중의 변화가 대조군과 달생탕 투여군 모두 증가함을 보였다. 이 결과를 통해 달생탕이 임신 랫드 와 태아의 체중증가에 유용한 작용을 갖는 것으로 판 단되었다.
- 모체의 황체수, 착상수, 착상율, 임신율, 초기소실율, 후기소실율, 출산자 수, 출산자 성비등은 임신율과 초 기소실율을 제외하고 대체로 대조군보다 보생탕 투여 군에서 약간 높은 결과가 나타났으나 큰 차이는 나지 않았다. 그러므로 달생탕은 독성에 있어서 모체와 태자 에 비교적 안전할 것으로 생각되어지나, 달생탕의 생식 독성에 대한 자료가 많지 않아 안전성을 결론짓기 어 려우며, 더 많은 실험과 연구가 수행되어야 할 것으로 생각된다.
- AST는 간, 심근, 골 격근, 적혈구에 많이 존재하기 때문에 심근경색, 용혈 등을 진단하는데 이용되고 ALT는 주로 간에 분포하기 때문에 간진환의 중요한 지표가 된다. 본 연구에서 ALT는 달생탕 투여군이 높았으며 AST 역시 달생탕 투여군이 대조군보다 높은 결과를 나타냈으나 정상범 위에 속하여 큰 의의는 없었다.
- 요추에서는 dumbell, imbalance, flat형은 나타나지 않았고 달생탕 투여군에서만 butterfly형이 1.8% 나타났 으며 kidney bean형에서는 달생탕 투여군(10.9%)이 대 조군(3.6%)보다 많은 태자에서 관찰되었다.
- 모체의 체중변화에서는 달생탕을 투여한 결과 임신 1일부터 20 일까지의 체중의 변화가 대조군과 달생탕 투여군 모두 증가함을 보였다. 이 결과를 통해 달생탕이 임신 랫드 와 태아의 체중증가에 유용한 작용을 갖는 것으로 판 단되었다.
- 이상에서 달생탕 투여는 임신 모체의 체중 및 증체량 의 증가를 촉진시키는 것으로 관찰되었으나, 기타 다른 모체 기능에 관한 지표, 즉 황체수, 착상수, 착상율, 임 신율, 초기소실율, 후기소실율 등에 영향을 주지 않는 점과 차세대 동물에 대한 검사에서 이상 소견이 관찰 되지 않은 점으로 미루어 달생탕 투여는 랫드의 모체 와 태자에 독성을 나타내지 않는 것으로 생각된다. 본 연구는 이러한 임신중 한약의 안전성을 입증하는 연구이며, 향후에도 이상의 결과와 국제적 연구 경향을 참고하여 임신중 한약의 안정성과 효과의 입증을 위한 지속적인 실험연구와 임상 보고들이 이루어져야 할 것으로 여겨진다.
- 이상의 연구결과를 종합하여 볼 때 달생탕 투여는 임 신 모체와 태자의 체중증가를 촉진시키는 것으로 관찰 되어 달생탕이 체중증가에 도움이 되는 것을 알 수 있 었고, 기타 다른 모체 기능에 관한 지표, 즉 황체수, 착상수, 착상율, 임신율, 초기소실율, 후기소실율 등에 영향을 주지 않는 점과 차세대에 대한 검사에서 골격 변이는 관찰되었으나 대조군과 차이는 없었고 외형 기 형과 골격 기형이 관찰되지 않은 점에서 보생탕이 모 체와 태자에게 부작용이 없는 것을 알 수 있었다.
- 적혈구 및 적혈 구 관련지표, 즉 MCV, MCH, MCHC에서 대조군보다 약간 낮은 결과를 보였지만 정상범위 이내이므로 영향을 미치지는 않았다. 혈소판, 림프구, 단핵구, 호산구, 호염기구에서 중성구와 림프구에서 대조군보다 높은 결과가 나타났고 둘은 제외한 나머지는 낮은 결과가 나 타났지만 여시 대조군과 투여군간의 차이가 없었고 두 군 모두 정상범위에 존재 하였다.
후속연구
- 모체의 황체수, 착상수, 착상율, 임신율, 초기소실율, 후기소실율, 출산자 수, 출산자 성비등은 임신율과 초 기소실율을 제외하고 대체로 대조군보다 보생탕 투여 군에서 약간 높은 결과가 나타났으나 큰 차이는 나지 않았다. 그러므로 달생탕은 독성에 있어서 모체와 태자 에 비교적 안전할 것으로 생각되어지나, 달생탕의 생식 독성에 대한 자료가 많지 않아 안전성을 결론짓기 어 려우며, 더 많은 실험과 연구가 수행되어야 할 것으로 생각된다. 그리고 초기소실율에서 대조군 보다 낮은 결과가 나타난 것으로 보아 임신유지에는 좋은 영향을 미치는 것으로 생각된다.
- 이상에서 달생탕 투여는 임신 모체의 체중 및 증체량 의 증가를 촉진시키는 것으로 관찰되었으나, 기타 다른 모체 기능에 관한 지표, 즉 황체수, 착상수, 착상율, 임 신율, 초기소실율, 후기소실율 등에 영향을 주지 않는 점과 차세대 동물에 대한 검사에서 이상 소견이 관찰 되지 않은 점으로 미루어 달생탕 투여는 랫드의 모체 와 태자에 독성을 나타내지 않는 것으로 생각된다. 본 연구는 이러한 임신중 한약의 안전성을 입증하는 연구이며, 향후에도 이상의 결과와 국제적 연구 경향을 참고하여 임신중 한약의 안정성과 효과의 입증을 위한 지속적인 실험연구와 임상 보고들이 이루어져야 할 것으로 여겨진다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.