[논문]권백(Selaginella involvens) 물 추출물의 혈관 형성억제 및 혈관내피세포 이주 억제 효과

고유진; 박승희; 이용화; 박병철; 허종현; 민용득; 김재기; 김정애

권백(Selaginella involvens) 물 추출물의 혈관 형성억제 및 혈관내피세포 이주 억제 효과
Inhibitory Effects of Water Extract of Selaginella involvens on the Tube Formation and Invasion of Human Umbilical Vein Endothelial Cells 원문보기

약학회지 = Yakhak hoeji, v.51 no.1, 2007년, pp.51 - 55

고유진 (영남대학교 약학대학) , 박승희 (정산생명공학연구소) , 이용화 (정산생명공학연구소) , 박병철 (영남대학교 약학대학) , 허종현 (정산생명공학연구소) , 민용득 (정산생명공학연구소) , 김재기 (정산생명공학연구소) , 김정애 (영남대학교 약학대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Among pteridophytes, Selaginella involvens Spring and Equisetum orvense L. are used in folk medicine in Eastern Asian countries including Korea. The water extracts from Selaginella involvens spring (SW) and from Equistum arvense L (EW) did not affect viability of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). However, SW dose-dependently inhibited tube formation and migration of HUVECs, whereas EW did not. These results suggest that the water extract from Selaginella involvens Spring may have anti-angiogenic activity.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 민간 요법으로 사용되어온 권백(SM电机以a involvens Spring)과 문형 (Ewiset”m arvense L.)의 물 추출물을 대상으로 정상세포인 혈관내피세포(HUVECs)를 이용하여 matrigeF상에서의 혈관 형성과 혈관내피세포의 침윤 실험을 통해 혈관신생 억제 효과를 알아보고자 하였다.
본 연구에서는 한국에서 민간요법으로 사용 되고 있는 고사리과에 속하는 권백(Sda物dla involvens Spring)과 문형(EqzSsetum arvense L.)의 물 추출물을 이용하여 혈관 신생 과정인 혈관내피세포의 증식, 혈관 형성, 침윤에 미치는 효과를 알아보았다. 권 백의 물 추출물은 혈관내피세포에서 농도 의존적으로 혈관의 형성과 이주 및 침윤을 억제하는 것을 볼 수 있었다.

제안 방법

) 물 추출물을 농도별로 처리하고 37℃에서 24시간 배양하였다. Ganswell의 insert막의 아래 표면으로 전이된 세포를 메탄올로고정시키고 hematoxylin과 eosin。-룬 염색한 후 세포가 침윤된 막을 조심스럽게 뜯어낸 후 glass slide위에 올려 놓고 현미경 (TMS, Nikon, Japan)으로 촬영을 하였다.
굳은 matrigel 위에 EBM-2 배지로 혼합한 혈관내피세포를 well당 5 X1()4개의 세포 농도로 계대 배양을 하였다. 권백(Sela爾, 湖a involvens Spring)과 (Equisetum arvense L.) 물 주줄물을 농도별로 처리하여 37℃에서 14시간 동안 배양한 후 관 형성 정도를 현미경(TE2000-U, NiKon, Japan)으로 촬영하였다.
권백과 문형의 물 추출물을 % 농도별로 처리한 후 혈관내피세포의 침윤 정도를 측정해 보았다. 추출물을 처리하지 않은 대조군은 아래 chamber tra湖swell에 첨가한 배지에 함유되어 있는 혈관내피 성장인자, 섬유세포 성장인자 등의 영향으로 상당한 세포의 침윤이 일어나는 것에 비해 권백 물 추출물을 처리한 그룹에서는 세포의 침윤 정도가 현저히 줄어들었다(Fig.
이 추출액을 뜨거울 때 여과하여 여액을 회전 감압농축기에서 45℃로 감압 농축하여 검체 농도를 lOOg/lOOmZ로 하였다. 마찬가지로 문형 전초를 경기도 화성시에서 채집하여 물에 씻어 그늘에서 건조한 후 이 건조된 전초 100 g을 잘게 썰어서 10 배량의 증류수 1000 nV에 넣고 100℃에서 4시간 환류 냉각 추출하였다. 이 추출액을 뜨거울 때 여과하여 여액을 회전 감압농축기에서 45℃로 감압 농축하여 검체 농도를 lOOg/lOOn血로 하였다.
) 제품을구입하여 사용 하였다. 모든 실험에서 제대정맥유래 혈관내피세포는 계대배양 2회에서 &회까지 이용하였다.
물 추출물 처리 48시간 후, 3-(4, 5-Dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyl- 2H-tetrazolium bromide(MTT) 5mg/m/ 용액을 각 well에 처리한 후 37℃에서 4시간 동안 반응시켰다. 배지를 제거한 후 dimethyl sufoxide(DMSO)를 넣어 형성된 formazan 크리스탈을녹여서 540nm에서 흡광도를 측정하였다.
세포 침윤 실험과 동일하게 권백과 문형의 물 추출물을 % 농도별로 처리하여 혈관내피세포의 관 형성 정도를 측정하였다. 물 추출물을 처리하지 않은 대조군 에서는 관 형성이 잘 이루어짐을 볼 수 있으나 권백 물 추출물을 처리한 그룹에서는 농도 의존적으로 관 형성이 억제 되었다(Fig.
세포 침윤 측정은 24 well-plate의 chamber하나당 5>< 1(*개의 세포를 이용^^匸h lranswell(Coming Costai; Cambridge, MA, U.S.A.)의 inserts 윗부분과 아랫부분을 각각 40世의 matrigel (L5mg/ml)과 40 讨의 type I collagen(0.5 mg/mZ)으로 코팅하였다. TYanswell의 chambei에는 여러 가지 성장 인자들과5% 우태혈청이 포함된 EBM-2 배지를 넣은 후 inserts를 각 chamber에 삽입하였다, Matrigel로 코팅된 inserts 위에 세포를 계대하여 권 백(S。她切。及z involvens Sp血g)과 문형 (Equisdum arvense L.

대상 데이터

)으로부터 구입하여 사용하였으며 젤라틴으로 코팅된 T-175 플라스크에 계대하여 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 배양을 하였다. 2% 우태혈청, 섬유이세포 성장인자, 표피성장인자, 아스코르브산, 하이드로코티 손, 혈관내피세포 성장인자, 젠타마이신 , 헤파린 등이 포함된 endothelial cell basal medium-2(EBM-2 medium) 배지는 CAMBREX사(San Diego, CA, U.S.A.) 제품을구입하여 사용 하였다. 모든 실험에서 제대정맥유래 혈관내피세포는 계대배양 2회에서 &회까지 이용하였다.
건조된 권백을 경동시장에서 구입하여 전초 100 建 잘게 썰어서 10배량의 증류수 1000 mJ에 넣고 100℃에서 4시간 환류 냉각 추출하였다. 이 추출액을 뜨거울 때 여과하여 여액을 회전 감압농축기에서 45℃로 감압 농축하여 검체 농도를 lOOg/lOOmZ로 하였다.
제대 정맥유래 혈관내피세포 (Human Umbilical Vein Endothelial Cell)는 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, U.S.A.)으로부터 구입하여 사용하였으며 젤라틴으로 코팅된 T-175 플라스크에 계대하여 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 배양을 하였다. 2% 우태혈청, 섬유이세포 성장인자, 표피성장인자, 아스코르브산, 하이드로코티 손, 혈관내피세포 성장인자, 젠타마이신 , 헤파린 등이 포함된 endothelial cell basal medium-2(EBM-2 medium) 배지는 CAMBREX사(San Diego, CA, U.

성능/효과

)의 물 추출물을 이용하여 혈관 신생 과정인 혈관내피세포의 증식, 혈관 형성, 침윤에 미치는 효과를 알아보았다. 권 백의 물 추출물은 혈관내피세포에서 농도 의존적으로 혈관의 형성과 이주 및 침윤을 억제하는 것을 볼 수 있었다. 반면 문형 물 추출물의 경우 혈관 형성과 침윤에 어떤 영향도 없음을 알 수 있었다.
1A). 반면, 문형 물 추출물의 경우, 0.75%(v/v) 농도까지 세포의 생존율이 증가하는 경향을 보여 문형 물 추출물이 혈관내피세포의 증식을 어느 정도 촉진하는 작용이 있는 것 같았지만, l%(v/v) 농도에서는 세포의 생존율이 물 추출물을 처리하지 않은 대조군과 유의한 차이를 보이지 않았다(Fig. IB).
침윤 정도를 측정해 보았다. 추출물을 처리하지 않은 대조군은 아래 chamber tra湖swell에 첨가한 배지에 함유되어 있는 혈관내피 성장인자, 섬유세포 성장인자 등의 영향으로 상당한 세포의 침윤이 일어나는 것에 비해 권백 물 추출물을 처리한 그룹에서는 세포의 침윤 정도가 현저히 줄어들었다(Fig. 4). 그러나 문형 물 추출물의 경우 대조군과 비교하여 세포의 침윤 정도에 변화가 없었다(Fig.
2). 한편, 문형 물 추출물의 경우 농도 증가에 상관없이 모두 대조군과 유사한 정도로 관이 형성 되어 문형 물 추출물은 관 형성에 큰 영향이 없음을 알 수 있었다(Fig. 3).

참고문헌 (10)

Rosenblatt, M. I. and Azar, D. T. : Anti-angiogenic therapy: Prospects for treatment of ocular tumors. Semin. Ophthalmol. 21, 151 (2006)

상세보기
Mousa, S. A., Mohamed, S., Wexler, E. J. and Kerr, J. S. : Antiangiogenesis and anticancer efficacy of TA138, a novel alphavbeta3 antagonist. Anticancer Res. 25, 197 (2005)
Lin, C. M., Chang, H., Chen, Y. H., Li, S. Y., Wu, I. H. and Chiu, J. H. : Protective role of wogonin against lipopolysaccharideinduced angiogenesis via VEGFR-2, not VEGFR-1. Int. Immunopharmacol. 6, 1690 (2006)

상세보기
Kawaguchi, T., Yamashita, Y., Kanamori, M., Endersby, R., Bankiewicz, K. S., Baker, S. J., Bergers, G. and Pieper, R. O. : The PTEN/Akt pathway dictates the direct alphaVbeta3- dependent growth-inhibitory action of an active fragment of tumstatin in glioma cells in vitro and in vivo. Cancer Res. 66, 11331 (2006)

상세보기
Yamakawa, S., Asai, T., Uchida, T., Matsukawa, M., Akizawa, T. and Oku, N. : (-)-Epigallocatechin gallate inhibits membranetype 1 matrix metalloproteinase, MT1-MMP, and tumor angiogenesis. Cancer Lett. 210, 47 (2004)

상세보기
Ali, N., Yoshizumi, M., Yano, S., Sone, S., Ohnishi, H., Ishizawa, K., Kanematsu, Y., Tsuchiya, K. and Tamaki, T. : The novel Src kinase inhibitor M475271 inhibits VEGF-induced vascular endothelial-cadherin and beta-catenin phosphorylation but increases their association. J. Pharmacol. Sci. 102, 112 (2006)

상세보기
Cao, J. G., Peng, S. P., Sun, L., Li, H., Wang, L. and Deng, H. W. : Vascular basement membrane-derived multifunctional peptide, a novel inhibitor of angiogenesis and tumor growth. Acta Biochim. Biophys. Sin (Shanghai). 38, 514 (2006)

상세보기
허준. 동의보감
Gayathri, V., Asha, V. V. and Subramoniam, A. : Preliminary studies on the immunomodulatory and antioxidant properties of Selaginella species. Indian J. Pharmacol. 37, 381 (2005)

상세보기
Yang, S. F., Chu, S. C., Liu, S. J., Chen, Y. C., Chang, Y. Z. and Hsieh, Y. S. : Antimetastatic activities of Selaginella tamariscina (Beauv.) on lung cancer cells in vitro and in vivo. J. Ethnopharmacol. In Press (2006)

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