[논문]Avian adenovirus 관련 심낭수종-봉입체간염 증후군 진단에 관한 연구

추금숙; 이정원; 송희종

Avian adenovirus 관련 심낭수종-봉입체간염 증후군 진단에 관한 연구
Diagnosis of avian adenovirus-associated hydropericardium hepatitis syndrome 원문보기

韓國家畜衛生學會誌 = Korean journal of veterinary service, v.30 no.3, 2007년, pp.313 - 319

추금숙 (전라북도 축산위생연구소 익산지소) , 이정원 (전라북도 축산위생연구소 정읍지소) , 송희종 (전북대학교 생체안전성연구소)

Abstract ▼ AI-Helper

Avian adenoviruses are diverse group of pathogens and recently hydropericardium hepatitis syndrome (HHS) Is an important, emerged disease of poultry. Particularly 2-3 weeks old age broilers increased mortality ranging from 20-30% and brown native chicken 3-7 weeks sudden onset with mortality 20-50%, typically development secondary infection. The infection chicken shows liver enlarged, pale and straw- colored fluid is present in the sac surrounding the heart. Histopathological positive samples have necrotic foci and basophilic intranuclear inclusion bodies in the hepatocytes and polymerase chain reaction (PCR) was useful for detect the fowl adenovirus (FAV) associated with HHS.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 최근 관내에서 발생한 IBH- HPS 복합감염에 대한 검사방법을 확립하고 신속한 질병 진단을 통하여 양축농가 방역지도의 기초 자료로 활용하고자 실시하였다.

제안 방법

2분간 반응시켰다. PCR이 완료되면 반응액 10 ul와 loading dye 2 ul를 1.5% agarose gel (ethidium bromide 0.5 ug/ml in DW)에 lOObp DNA marker와 함께 lx TAE buffer가 함유된 전기영동 tank에 gel을 침적시킨 후 100 V/cm, 40분간 (Owl Easy-Cast Minigel system) 전기영동을 실시하여 자외선 하에서 특이 band 증폭 유무를 확인하였다.
관내 양계농장에서 관찰된 adenovirus 관련 심낭수종-봉입체간염 증후군에 대한 검사방법을 확립하고 신속한 질병 진단을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
부검 후 실질장기 (간장, 비장, 신장 및 폐)를균질화시킨 후 5% PBS 부유액을 원심분리하여상층액을 -70 ℃ 에 보존하였고, Viral Genespin Viral DNA/RNA Extraction kit (iNt- RON)를 이용하여 DNA를 추출하였다.
의뢰 가검물은 일반적인 부검 술식에 따라 부검을 실시하면서 병변으로 의심되는 조직을 채취하여 냉동 보관하여 PCR 검사에 공시하였고, 조직검사를 위해 병변를 중심으로 절단하여 10% 중성 포르말린에 고정하여 일반적인 방법에 따라 파라핀 포매 후 5㎛의 두께로 조직절편을 제작하여 H&E으로 염색하고 광학 현미 경 으로 관찰하였다.
전북도내 병성감정 의뢰 농가 중 봉입체간염으로 진단된 양계농가의 샘플을 이용하여 육안적인 병변 관찰, 조직검사 및 PCR을이용하였다.

성능/효과

PCR을 이용하여 H₃/H₄ primer 1319 bp 에서 증폭이 확인되어 HHS를 위한 진단에 사용이 적합함을 확인하였다.
감염 개체의 실질장기에서 DNA를 추출하여 동일 샘플에 대해 각각의 primer를 이용한 PCR 항원검사 결과 H₁/H₂는 1219 bp, H₃/H₄는 1319 bp, Fadl/Fad2는 1406 bp 에서 증폭되었으나 MK89/MK90은 증폭이 확인되지 않았고 Fig 3과 4를 보면 동일 샘플에서 H₃/H₄ primer가 가장 많은 증폭이 이루어짐을 확인하였다.
병변이 관찰된 조직을 처리하여 관찰한 결과간세포의 심한 다발성 괴사, 층출혈 소견과 핵내 바이러스에 의한 봉입체, 심외막 지방조직과심근섬유 핵의 종대 및 농축과 근형질에 공포화, 신장 출혈과 사구체내 림프구 침윤, 선위출혈과 림프구의 침윤이 관찰되었다 (Fig 2).

후속연구

최근 전북도내 HHS 발생 농가는 주로 토종닭 및 육계농가에서 감염이 확인되었으며 2-3주에 폐사가 급격히 발생하여 20-30% 의 폐사율을 보이고, 토종닭에서는 3-7주에감염되어 20- 50%의 높은 폐사율을 보이기도하나 이는 토종닭의 사육기간이 70-90일 정도로 육계에 비해 길어 2차적인 세균감염으로 인한 지속적인 폐사로 농가에 커다란 피해를 주고 있는 것으로 사료된다. 이번 연구에서 HHS의 전형적인 육안병변과 조직학적 소견을 관찰 할 수 있었고 PCR을 이용하여 H₁/H₂, H₃/H₄, Fadl/Fad2에서 양성이 확인되었으나 H₃/H₄ primer가 가장 적합함을 알 수 있었으며, 앞으로 PCR를 이용용한 신속한 진단으로 농가의 방역 대책에 일부나마 도움이 되었으면 하는 바램이고, 국내에서도 HHS에 대한피해 상황, 혈청검사를 통한 감염율 및 종계에서 감염으로 인한 수직감염 및 혈청형에 대한 연구가 이루어져야 할 것이다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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