다종의 점안약이 각막염 유발균인 Staphylococcus aureus에 미치는 항균효과에 대한 실험적 연구 The Experimental Study on Anti-bacterial Potency of Various Herbal Eye drops on Staphylococcus aureus induced keratitis원문보기
Objectives : This experimental study was performed to investigate the effect of herbal eye drops(Sean-tang, Jinpi-san, Tangpo-san, Copitdis Rhizoma) on Staphylococcus aureus keratitis. Methods : After administering various herbal eye drops on Staphylococcus aureus, I measured MIC and the size of inh...
Objectives : This experimental study was performed to investigate the effect of herbal eye drops(Sean-tang, Jinpi-san, Tangpo-san, Copitdis Rhizoma) on Staphylococcus aureus keratitis. Methods : After administering various herbal eye drops on Staphylococcus aureus, I measured MIC and the size of inhibition zone. MIC was measured by dropping from 20 to $50{\mu}{\ell}$ according to density. Anti-bacterial potency was measured by the size of inhibition zone with change of volume under 2 days culture condition. Also continuous antibacterial potency of herbal eye drops was measured by the size of inhibition zone according to 2 days and 6 days culture each under the $50{\mu}{\ell}$condition. Results : 1. MIC on Staphylococcus aureus in Sean-tang, Jinpi-san and Tangpo-san was 100%, $20{\mu}{\ell}$. 2. MIC on Staphylococcus aureus in Coptidis rhizoma was 10%, $30{\mu}{\ell}$. 3. MIC on Staphylococcus aureus in Cravit was 0.1%, $50{\mu}{\ell}$. 4. Under the 2 days culture condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus aureus by volume for Sean-tang was 12.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Jinpi-san was 19.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Tangpo-san was 15.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Coptidis rhizoma was 32.7 mm in $50{\mu}{\ell}$ and Cravit was 31mm in $50{\mu}{\ell}$, Coptidis rhizoma showed the highest anti-bacterial potency. 5. Under the $50{\mu}{\ell}$ condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus aureus by 2 and 6 culture days for Sean-tang was 12.0mm, Jinpi-san was 19.0mm, Tangpo-san was 15.0mm, Coptidis rhizoma was 32.7mm and Cravit was 31.0 mm, which showed sameness anti-bacterial potency in 2 days and 6 days. Conclusions : The present author think that the herbal eye drops can be used to cure Staphylococcus aureus keratitis and if further study is performed, the use of the herbal eye drops will be valuable and beneficial in the clinical medicines.
Objectives : This experimental study was performed to investigate the effect of herbal eye drops(Sean-tang, Jinpi-san, Tangpo-san, Copitdis Rhizoma) on Staphylococcus aureus keratitis. Methods : After administering various herbal eye drops on Staphylococcus aureus, I measured MIC and the size of inhibition zone. MIC was measured by dropping from 20 to $50{\mu}{\ell}$ according to density. Anti-bacterial potency was measured by the size of inhibition zone with change of volume under 2 days culture condition. Also continuous antibacterial potency of herbal eye drops was measured by the size of inhibition zone according to 2 days and 6 days culture each under the $50{\mu}{\ell}$condition. Results : 1. MIC on Staphylococcus aureus in Sean-tang, Jinpi-san and Tangpo-san was 100%, $20{\mu}{\ell}$. 2. MIC on Staphylococcus aureus in Coptidis rhizoma was 10%, $30{\mu}{\ell}$. 3. MIC on Staphylococcus aureus in Cravit was 0.1%, $50{\mu}{\ell}$. 4. Under the 2 days culture condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus aureus by volume for Sean-tang was 12.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Jinpi-san was 19.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Tangpo-san was 15.0mm in $50{\mu}{\ell}$, Coptidis rhizoma was 32.7 mm in $50{\mu}{\ell}$ and Cravit was 31mm in $50{\mu}{\ell}$, Coptidis rhizoma showed the highest anti-bacterial potency. 5. Under the $50{\mu}{\ell}$ condition, the size of inhibition zone on Staphylococcus aureus by 2 and 6 culture days for Sean-tang was 12.0mm, Jinpi-san was 19.0mm, Tangpo-san was 15.0mm, Coptidis rhizoma was 32.7mm and Cravit was 31.0 mm, which showed sameness anti-bacterial potency in 2 days and 6 days. Conclusions : The present author think that the herbal eye drops can be used to cure Staphylococcus aureus keratitis and if further study is performed, the use of the herbal eye drops will be valuable and beneficial in the clinical medicines.
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문제 정의
이에 저자는 동의보감에 기재된 점안약 중 염증성 안질환에 사용되는 洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散의 3종의 점안약과 한의학 문헌 중에서 염증성 안질환에 가장 높은 빈도로 사용되는 黃連을 가지고, 각막외상으로 유발될 수 있는 세균성 각막염의 호발균인 Staphylococcus aureus에 대한 항균효과를 측정하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
제안 방법
洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散 및 黃連을 각각 80g으로 하여 증류수 11씩을 가한 후 전탕기(DWP-1800 , Tdaewoong, Korea)를 이용하여 2시간 30분간 전탕하였다. 10분간 원심분리하여 상층액을 취한 후 0.
洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散, 黃連의 각막염 유발균인 Staphylococcus aureus에 미치는 항균효과를 알아보기 위하여 최소 성장 억제 농도와 억제환의 비교를 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
항균력이 나타난 최소희석농도의 검액은 20~ 50까지 양을 조절하여 MIC를 측정하였으며, 같은 방법으로 원액의 검액을 20 ~ 5까지 양을 조절하여 나타난 억제환의 직경(m)을 측정하여 항균력을 비교하였다. 또한 검액의 항균력에 있어서의 지속력을 비교하기 위하여 2일 배양한 것과 6일 배양한 것의 억제환을 측정하였다. 항균제 효과를 대조비교하기 위하여 evofloxacin제제의 점안약 Cravit(제일제약)를 검액과 같은 농도로 실험하였으며 모든 실험은 3회 반복 시 행하였다.
있다. 사용방법은 상기 약물을 세말하여 끓여 찌꺼기를 제거하고 미지근한 온도에서 눈을 자주 씻어 약효과와 온열 효과로 兩 目赤腫疼痛, 流淚, 生靑白 를 치료하는 처방으로 《東醫寶鑑》38) 및《醫宗扌員益》37) 등에 기재되어 비교적 근세까지 사용되었다.
상기 약물을 썰어서 물에 달여 뜨거울 때 훈증한 후 씻고, 식으면 다시 데워서 씻는 방법으로 자주 씻는 것이 매우 좋으며 눈을 녹인 물에 달이 면 더욱 妙하고, 뜨거울 때 씻어야 神效하다 하였다. 이는 肝經風熱이 眼目으로 上壅 하여 발생한 目赤澁, 睛疼, 多淚 및 赤眼疼痛, 花翳多淚를 치료한다하였다.
1%로 희석한 것과 희석액 별로 각각 50, 40, 30, 20씩 준비하여 사용하였다. 피검균을 도말한 배지 위에 paper disc(8 mm)를올려놓고 검액 50를 농도별로 희석하여 적하하고, 37C 에서 2 ~ 6일간 배양한 후 항균력의 유무를 관찰하였다. 항균력이 나타난 최소희석농도의 검액은 20~ 50까지 양을 조절하여 MIC를 측정하였으며, 같은 방법으로 원액의 검액을 20 ~ 5까지 양을 조절하여 나타난 억제환의 직경(m)을 측정하여 항균력을 비교하였다.
준하여 실시하였다. 피검균인 Staphylococcus aureus의 현탁액 100를 적정배지인 Nutrient Agar에도 말하였고, 검액은 원액, 10%, 1%, 0.1%로 희석한 것과 희석액 별로 각각 50, 40, 30, 20씩 준비하여 사용하였다. 피검균을 도말한 배지 위에 paper disc(8 mm)를올려놓고 검액 50를 농도별로 희석하여 적하하고, 37C 에서 2 ~ 6일간 배양한 후 항균력의 유무를 관찰하였다.
피검균을 도말한 배지 위에 paper disc(8 mm)를올려놓고 검액 50를 농도별로 희석하여 적하하고, 37C 에서 2 ~ 6일간 배양한 후 항균력의 유무를 관찰하였다. 항균력이 나타난 최소희석농도의 검액은 20~ 50까지 양을 조절하여 MIC를 측정하였으며, 같은 방법으로 원액의 검액을 20 ~ 5까지 양을 조절하여 나타난 억제환의 직경(m)을 측정하여 항균력을 비교하였다. 또한 검액의 항균력에 있어서의 지속력을 비교하기 위하여 2일 배양한 것과 6일 배양한 것의 억제환을 측정하였다.
또한 검액의 항균력에 있어서의 지속력을 비교하기 위하여 2일 배양한 것과 6일 배양한 것의 억제환을 측정하였다. 항균제 효과를 대조비교하기 위하여 evofloxacin제제의 점안약 Cravit(제일제약)를 검액과 같은 농도로 실험하였으며 모든 실험은 3회 반복 시 행하였다.
대상 데이터
따라서 한의학 문헌 중에서 염증성 안질환에 사용되어온 점안제를 조사해 본 결과, 金露散32), 胡氏 明目定痛藥33), 八寶珍珠散34), 五行湯34, 35), 光明丹34), 洗眼湯 36), 白點膏36), 湯泡散"), 秦皮單味39), 秦皮煎26, 40), 小黃連膏 26, 40), 秦皮散齢2) 등이 있었다. 그 중에서 임상에서 많이 활용되고 있는《東醫寶鑑》에 나온 洗眼藥 중 洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散과 타 약물에 비하여 사용빈도가 가장 높은 黃連을 실험 약재로 선택하였으며, 양방에서 다용되고 있는 항생점안제인 크라비트를 대조군으로 실험을 하였다.
대조군으로 사용한 크라비트(Cravit. 제일제약)는 Quinolone계통의 levofloxacin 제제이다. 최근 항생제의 남용 및 오용으로 내성균주가 증가하는 추세이고 혼합감염인 경우가 적지 않은데, Quinolone계통의 항생제는 감염성 질환에 효과적인 약물중의 하나로 개발되었다.
본 실험에 사용한 Staphylococcus aureus(KCTC 1916)는 한국생명공학연구원(KCTC)에서 분양받아 Nutrient Agar(Beef extract, 3.0 g; Peptone, 5.0 g; Agar, 20.0 g; D.W. 1.0L, pH 6.8±0.2, U.S.A.) 배지에 이식하여 37℃의 환경에서 배양하였다.
실험에 사용한 약재는 한약재 수급 및 유통관리 규정14> 에 의거한 규격품을 사용하였고, 구성 약재와 용량은 Table 1과 깉다.
이론/모형
검액의 MIC 및 억제환 측정은 Disc diffusion method 에 준하여 실시하였다. 피검균인 Staphylococcus aureus의 현탁액 100를 적정배지인 Nutrient Agar에도 말하였고, 검액은 원액, 10%, 1%, 0.
성능/효과
1. Staphylococcus aureus에 대한 洗眼湯, 秦皮散, 湯 泡散의 최소 성장 억제 농도는 100% 농도 20이다.
2. Staphylococcus aureus에 대한 黃連의 최소 성장억제 농도는 10% 농도 30이다.
4. 2일 배양 시, 양에 따른 Staphylococcus aureus에 대한 억제환의 크기는 洗眼湯이 50에서 12.0mm, 秦皮 散이 50에서 19.0mm, 湯泡散이 50에서 15.0mm, 黃 連이 50에서 32.7mm, 크라비트가 50에서 31.0mm 로 黃連이 가장 높은 항균효과를 보였다.
洗眼湯은 2일 배양과 6일 배양 모두 12.0mm의 항균력을 보였으며, 秦皮散은 2일 배양과 6일 배양 모두 19.0mm의 항균력을 나타냈다. 湯泡散은 2일 배양과 6일 배양 모두 15.
0mm의 항균력을 나타냈다. 湯泡散은 2일 배양과 6일 배양 모두 15.0mm의 억제효과를 보였으며, 黃連은 2일 배양과 6일 배 양 모두 같이 32.7mm의 억제효과를 보였으며, 크라비트는 2일 배양과 6일 배양 모두 31.0mm의 항균력을 보였다(Table 8, Fig. 7).
0mm였고, 秦皮散, 湯泡散, 洗眼湯 순으로 억제환이 측정되었다. 약물의 지속력을 살펴보기 위한 원액의 50 양에서 2일 배양한 것과 6일 배양한 것의 억제환의 크기를 측정한 결과 모든 약물이 2일과 6일에 동일한 억제환을 보여 지속적인 항균력이 있음을 알 수 있었다.
원액에서만 억제 효과가 나타났으며, 원액의 50, 40 , 30, 20의 모든 검액에서 억제효과가 나타났다 (Table 3, Fig. 2).
원액에서만 억제 효과가 나타났으며, 원액의 50, 40 , 30, 20의 모든 검액에서 억제효과가 나타났다 (Table 4, Fig. 3).
원액에서만 억제 효과가 나타났으며, 원액의 50, 40 , 30 20의 모든 검액에서 억제효과가 나타났다 (Table 2, Fig. 1).
이상의 실험 결과에서 洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散 및 黃連 전탕액이 각막염 유발균인 Staphylococcus aureus에 항균효과가 있으며, 2일과 6일 배양 시 지속적인 항균효과를 갖추고 있다는 것을 알 수 있었다. 이를 통해서, 한방 점안약이 세균성 각막염 치료에 좀 더 폭 넓게 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
이상의 약물들을 가지고 Staphylococcus aureuse 대한 항균력을 측정한 결과 크라비트는 0.1%농도 50에서, 黃連은 10%농도 30에서 洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散은 100% 농도 20에서 최소 성장 억제 농도를 보여 모든 약물이 최소 성장 억제 농도 이상에서 항균력이 있음을 알 수 있었다. 그러나 저농도에서 항균력을 보이는 크라 비트에 비하여 한약제제들은 고농도에서 항균력을 보이는 것으로 나타나 항균력을 위해서는 고농도를 유지해야 할 것으로 생각된다.
후속연구
증명하는 자료가 됐다고 생각된다. 다만 본 실험은 단순하게 세균의 항균력만을 측정하여 각막의 임상소견을 알 수 없었으므로 앞으로 이에 대한 추가적인 연구가 필요하다고 사료된다. 그리고 한약제제는 고농도에서만 항균력을 보이는 것에 대해서도 고찰해 볼 필요가 있다고 본다.
이 밖에도 다양한 균에 대한 실험과 최적의 항균효과를 나타내는 농도 및 적절한 약물의 선택에 대한 지속적 인 연구가 필요할 것으로 보인다. 또한 인체에 안전한지의 여부와 적은 안자극을 위한 pH조절 및 등장화에 대한 문제, 보편적 인 사용을 위한 제제방법과 손쉬운 보관 방법에 대한 연구도 앞으로 이뤄져야 할 것으로 사료된다.
그리고 한약제제는 고농도에서만 항균력을 보이는 것에 대해서도 고찰해 볼 필요가 있다고 본다. 이 밖에도 다양한 균에 대한 실험과 최적의 항균효과를 나타내는 농도 및 적절한 약물의 선택에 대한 지속적 인 연구가 필요할 것으로 보인다. 또한 인체에 안전한지의 여부와 적은 안자극을 위한 pH조절 및 등장화에 대한 문제, 보편적 인 사용을 위한 제제방법과 손쉬운 보관 방법에 대한 연구도 앞으로 이뤄져야 할 것으로 사료된다.
있다는 것을 알 수 있었다. 이를 통해서, 한방 점안약이 세균성 각막염 치료에 좀 더 폭 넓게 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
이상의 결과를 종합하여 볼 때, 洗眼湯, 秦皮散, 湯泡散, 黃連이 각막염 유발균인 Staphylococcus aureus에 대하여 유의성 있는 항균효과가 나타나 이들 점안제의 효과를 실험적으로 증명하는 자료가 됐다고 생각된다. 다만 본 실험은 단순하게 세균의 항균력만을 측정하여 각막의 임상소견을 알 수 없었으므로 앞으로 이에 대한 추가적인 연구가 필요하다고 사료된다.
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