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제안 방법
- 또한 농일 한 컬 럼 에서 0.2% TFA 를 포함한 60% acetonitrile 수용액 을 이 농상으로 하는 억 상(reversed phase)에서의 광학분할 결과를 0.1% TFA을 포함하는 5% 2-propanol/hexane을 이농상으로 하는 순상 (normal phase) 에서의 광학분리 결과와 비교하였다." 동일한 키 랄컬럼을 사용했을 때 일반적으로 순상에서의 광학분리가 역상에서의 광학분리에 비해 우수한 결과를 보여주는 것처럼, 본 연구에서도 MFMOC glutamine, methionine, threonine, tyrosine 등 몇 개의 분석물질을 제외하고 대부분의 분석물질의 순상에서의 광학분리가 역상에서의 광학분리에 비해 우수한 결과를 보여주었다(a=1.
- 본 연구에서는 최근 개발된 다당류 유도체를 공유결합으로 고정시킨 키랄컬럼인 Chiralpak IB를 이용하여 MFMOC a-amino acid의 광학분리를 최초로 역상 크로마토그래피에서 시도하였으며 순상에서의 실험 결과와 비교하였다. 여러 역상에서의 이동상 중에서 TFA를 포함한 acetonitrile 수용액을 이동상으로 사용하는 광학분리가 가장 좋은 결과를 보였지만 TFA를 포함하는 2-propanol/hexane을 이동상으로 하는 순상에서의 결과보다는 좋지않게 나타났다.
- 그러나 이들 키랄 컬럼들의 광학분리 연구결과들은 모두순상 크로마토그래피에서의 결과이었고 아직까지 다당류 유도체를 공유결합으로 고정시킨 컬럼을 이용한역상(reversed phase) 크로마토그래피에서의 연구는 보고되지 않았다. 본 연구에서는 최근 다당류 유도체를 공유결합으로 고정시킨 키랄컬럼인 Chiralpak IB에서 키 랄 물질의 선구물질이나 키 랄 중간체로서 매우 유용하게 사용되고 있는 jV-fluorenylmethoxycarbonyl (FMOC) a-amino acid의 광학분리를 처음으로 역상 크로마토그래피에서 시도하였다 .
- 액체 크로마토그래피 실험은 다음의 기기들로 구성된 HPLC를 사용하여 상온에서 수행 하였다. HPLC 구성 기기로 Waters model 1525 binary pump, 20 JJ.
- 산성 첨 가물로 사용한 TFA 농도가 증가하는 수용액을 이동상으로 사용할 때에도 phosphate 완충 농도가 증가할 때와 동일한 경향을 보여주고 있다. 전체적으로_ 75 mM phosphate의 60% acetonitrile buffer 용액과 0.2% TFA 를 포함한 60% acetonitrile 수용액의 이동상이 좋은 광학분할을 보여주었기 때문에 Table 2에서 보여주는 것처럼 두 개의 역상 이동상에서 18개의 MFMOC a-amino acid의 광학분리를 수행하였다. 누 억 상 이농상 중에서 0.
대상 데이터
- , 일본 Daicel Chemical 회사) 컬럼을사용하였다. 6 HPLC 용매로 사용하는 acetonitrile (ACN)은 J. T Baker (Phillipsburg, NJ)로부터 trifluoroacetic acid (TFA) 등은 모두 Aldrich (Milwaukee, Wl)혹은 Sigma (St. Louis, Missouri)회사로부터 구입 하였고 분석물질은 앞선 실험에서 합성한 물질을 사용하였다. 이동상 용매로 acetonitrile과 phosphate buffer 를 사용하여 IM NaOH나 HC1 을 사용하여 pH 2를 맞준 후 membrane filter (0.
- 보여주고 있다. 역상 크로마토그래피 실험에서 이동상 용매로 많이 쓰이는 acetonitrile (ACN)의 pH 2 phosphate buffer 용액과 산성 첨가물로 많이 쓰이는 TFA를 첨가한 수용액들을 사용하였다. 본 연구에서 사용한 완충용액이나 첨가물 그리고 그 농도에 따라 광학 분할에 영향을 미치는데 이러한 변수들이 머무름 시간과 분리인자(Rs)에는 상당한 영향을 주나 광학 분할 선택성(a)에는 그리 큰 영향을 주고 있지 않음을 보여주고 있다.
- L loop를 가진 Rheodyne model 7125 주입기, a dual absorbance detector (Waters 2487 detector) < 사용하였다. 키 랄 컬럼으로는 Chiralpak IB (250 mm Lx4.6 mm I.D., 일본 Daicel Chemical 회사) 컬럼을사용하였다. 6 HPLC 용매로 사용하는 acetonitrile (ACN)은 J.
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