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VEGF 조절을 통한 육계 추출물의 신생혈관 형성 촉진 작용

Stimulatory Efect of Cinnamomum cassia Extract on Angiogenesis Through Regulation of VEGF

大韓鍼灸學會誌= The journal of Korean Acupuncture & Moxibustion Society, v.26 no.1, 2009년, pp.153 - 162  

고정민 (경희대학교 한의과대학 침구학교실) ,  이상훈 (경희대학교 한의과대학 침구학교실) ,  백용현 (경희대학교 한의과대학 침구학교실) ,  최도영 (경희대학교 한의과대학 침구학교실)

초록
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목적 : 한의학 분야에서 육계(CCE: Cinnamomum cassia)는 혈류 순환이 저하된 상태에 널리 쓰이는 약재이다. 이 연구에서는 CCE와 그 활성 혼합물인 cinnamic acid가 in vitro와 in vivo에서 발휘하는 신생혈관 형성 작용에 대해 알아보고자 한다. 방법 : CCE와 CA의 신생혈관형성 작용을 알아보기 위하여 Human unbilical endothelial cells(HUVECs)와 Bovine arterial endothelial cells(BAECs) 그리고 Matrigel assay를 이용하였다. 결과 : In vitro에서 CCE와 그 활성 혼합물은 HUVEC 증식, 이동, 모세혈관-유사 관 형성을 유도한다. CCE에서의 25-50% 증가(1 또는 10ng/ml 용량에서)는 CA에서 증식과 유사하게 나타났다. HUVEC에서는 증식이 뚜렷하게 나타났으나 BAEC에서는 증식이 뚜렷하게 나타나지 않아 증식 효과는 내피세포의 기원에 따라 다른 것으로 나타났다. BAEC는 CCE와 CA에서 증식은 보이지 않았지만 이동과 모세혈관-유사 관 형성 또는 분화를 보였다. 또한 CCE와 CA는 HUVEC에서 VEGF 발현과 Flk-1/KDR 발현을 각각 2.2배와 2.5배 증가시켰다. 결론 : CCE와 그 활성 혼합물은 in vivo와 in vitro에서 혈관 내피세포의 VEGF 발현을 통하여 신생혈관 형성 작용을 유도하며 이는 앞으로 다른 한약 추출물의 신생혈관형성 촉진 작용 연구에 모델을 제시할 것으로 보인다.

주제어

AI 본문요약
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제안 방법

  • HUVEC, 1x105cells/well, in a final volume of 500㎕ was cultured in M199 basal medium treated with various concentrations of CCE, CAor VEGF were plated on the Matrigel. After 18h of incubation in 5% CO2 at 37℃, the area covered by the tube network was determined by using an optical imaging technique in which pictures of the tubes were scanned by Adobe Photoshop and quantitated using Image-Pro Plus (Media Cybernetics)
  • In this study, we evaluated the distinct effects of CCE and its active compound cinnamic acid (CA) in in vivo and in vitro. We used animal model to study infiltration of endothelial cells in the Matrigel assay.
  • We then evaluated whether CCE and CA increased VEGF, Flk-1/KDR expression, the receptor involved in endothelial cell proliferation, migration and differentiation. As shown in Fig.

대상 데이터

  • CCE was purchased from Medicine stuffs department of Kyung Hee University Medical center (Seoul, Korea), and voucher specimen was deposited at the herbarium at Pharmacy of Oriental medicine of Kyung Hee Medical Center, Kyung Hee University (KH04-20). Material was extracted with 50% ethanol in boiling water under pressure for 8h and filtered and lyophilized for a complete removal of the residual solvent to yield dark-brown powder.
  • Human recombinant VEGF165 were purchased from R&D systems (Minneapolis, MN, USA).

데이터처리

  • Statistical analysis was performed by analysis of mean with the Mann—Whitney rank sum test.

이론/모형

  • All PCRs were performed by real-time fluorescence detection method using LightCycler System with a FirstStart DNA Master SYBR Green Ⅰ kit (Roche Diagnostics).
  • Cell proliferation assays were performed using the BrdU assay (Roche Diagnostic, Germany). HUVEC were seeded into 96-well gelatin-coated plates (1×104/well).
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참고문헌 (26)

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  25. Neufeld G, Cohen T, Gitay-Goren H, Poltorak Z, 

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