[논문]게르마늄을 함유한 상추의 단일 경구투여 독성 검사

김종진; 최지나; 조주식; 허종수; 이성태

doi:10.5338/kjea.2009.28.1.059

게르마늄을 함유한 상추의 단일 경구투여 독성 검사
Oral Single-dose Toxicity Studies on Germanium-fortified Lettuce, in Mouse 원문보기

한국환경농학회지 = Korean journal of environmental agriculture, v.28 no.1, 2009년, pp.59 - 68

김종진 (순천대학교 생명산업과학대학 생명과학부 생물학) , 최지나 (순천대학교 생명산업과학대학 생명과학부 생물학) , 조주식 (순천대학교 생명산업과학대학 생명과학부 생물환경학) , 허종수 (경상대학교 농생명학부) , 이성태 (순천대학교 생명산업과학대학 생명과학부 생물학)

초록
AI-Helper

유기게르마늄과 무기게르마늄을 첨가하여 양액 재배한 상추의 안전성을 평가하기 위하여 게르마늄 함유 상추의 생쥐(C57BL/6)에 대한 단회 경구 독성시험을 수행하였다. 실험전 기간 동안 사망한 실험동물은 없었으며, 일반증상과 임상증상도 관찰되지 않았고, 부검 결과 어떠한 육안적 병변도 관찰되지 않았다. 그리고 대조군과 시료 투여군 간의 체중 차이도 관찰되지 않았다. 암컷의 사료 소비량과 물 섭취량은 수컷에 비해 약간 적은 것으로 나타났다. 암컷의 경우에 대조군에 비해 각 실험군의 장기 무게가 모두 약간 감소하는 경우(흉선, 오른쪽 난소)와 악간 증가하는 경우(왼쪽 난소)가 있었고, 수컷의 경우에도 흉선, 심장, 오른쪽 신장, 왼쪽 부고환의 무게가 대조군에 비해 모든 실험군에서 약간 감소하였지만 유의한 차이는 아니었고, 왼쪽 신장과 좌우 고환의 무게가 약간 증가하였지만 역시 유의한 차이는 아니었다. 암수 간의 몸무게에 대한 상대적인 장기 무게의 차이는 모두 정상적인 범위내에 속하였다. 혈액 생화학적 검사 결과, 수컷의 경우에는 GPT와 GOT 측정값이 대조군에 비해 $Ge_{132}$를 함유한 상추를 먹인 실험군에서 유의적으로 감소하였고, LDH 측정값이 대조군에 비해 실험군에서 각각 유의적으로 감소하였다. 혈액학적 검사에서는 수컷의 혈소판(PLT) 수치가 대조군에 비해 각 실험군이 증가한 것으로 나타났지만 유의적인 변화는 아니었다. LPS와 Con A 자극에 대해 비장세포의 증식반응과, 비장세포 내 B세포, 보조 T세포, 세포독성 T세포의 비율은 유의한 파이가 없었다. 이상의 실험 결과로 $$GeO_2와 $Ge_{132}$ (60 mg/kg)출 함유한 상추 분말을 식약청 고시에 명시된 최고농도인 2,000 mg/kg을 단회 결구 투여하였을 때, 시료와 관련된 특기할만한 독성증상이 관찰되지 않았다.

Abstract ▼ AI-Helper

Single-dose toxicity test of germanium-fortified lettuce was investigated in mice. Both sexes of C57BL/6 mice were orally administered once at a dose of 2,000 mg/kg. No death, clinical signs and pathological findings related to the treatment were observed. In addition, no significant changes in feed consumption and body weight gain were obtained during the treatment period, in spite of day-to-day fluctuation of water consumption. There were no considerable changes in hematology and serum biochemistry, except a significant decrease in GPT, GOT and LDH. Several alterations were observed in organ weight and blood biochemistry, including thymus, ovaries, heart, kidney and platelet in male or female mice. The ability of spleen cells proliferation was almost same level as shown in control group. However the population of B cells, helper T cells and cytotoxic T cells was not comparably changed in all groups. Taken together, it is suggested that single oral dose of germanium-fortified lettuce to C57BU6 mice did not cause apparent toxicological change at the dose of 2,000 mg/kg body weight.

주제어

AI 본문요약
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제안 방법

먼저각 실험군의 생쥐 비장을 분리한 다음, 핀셋이나 메쉬를 이용하여 단일세포 부유액을 만들었다. 단일세포 부유액을 RPMI 1640 배양액으로 3회 세척한 다음, 5xl06 cell/ml 농도가 되게 희석한 후 96 well당 100㎕ 씩 첨가하였다.
모든 동물에 대하여 투여 개시 전에 1히, 투여 개시 후에 이틀에 한 번씩 2, 4, 6, 8, 10, 12, 및 14일에 몸무게를 측정하였으며, 총 8회 체중을 측정하였다.
관찰하였다. 무게를 측정한 장기는 노], 흉선, 심장, 폐, 간, 비장, 신장-좌우, 부신-좌우, 난소-좌우(암컷), 고환-좌우(수컷), 부고환-좌우(수컷), 자궁(암컷), 전립선(수컷)이며, 무게는 육안으로 지방을 제거한 다음 측정하였으며, 일부 크기가 작은 장기(부신, 난소, 부고환)는 해부현미경으로 관찰하면서 지방을 제거한 후 무게를 측정하였다.
물 섭취량 역시 사료 섭취량과 같이 생쥐 한 마리 당 섭취량은 측정하지 않고 5마리가 들어있는 사육상자 당 사료 섭취량을 측정하였다. 물 섭취량도 실험 기간 동안 큰 변화가 없는 것으로 나타났으며, 암컷 생쥐의 물 소비량은 2일 동안 약 38~45 ml로 약 38~49 ml인 수컷에 비해 약간 적은 것으로 나타났다(Table 3).
부검 전 20~24시간 절식시킨 생쥐의 꼬리에서 채혈하여 얻은 혈액을 EDTA tube에 넣어 항응고 처리한 후 3시간 이내에 자동 혈액 측정기 HEMAVET 850(CDC Technical, USA)을 이용하여 아래의 항목을 측정하였다. 즉 혈액 중에 포함된 백혈구(White Blood Cell, WBC) 및 호중구(Neutrophil, NE), 림프구(Lymphocyte, LY)Z 단핵구(Monocyte, MO)Z 호산구(Eosinophil, EO), 호염구(Basophil, BA)Z 적혈구(Red Blood Cell, RBC) 의 숫자와, 혈색소량(Hemoglobin, Hb)z 적혈구 용적(Hematocits, Hct)z 평균적혈구용적(Mean Corpuscular Volume, MCV) 평균적혈구색소량 Mean Corpuscular Hemoglobin, MCH)Z 평균적혈구색소농도(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration, MCHC), 혈소판(Platelet, PLT), 평균적혈구색소량(Mean Plasma Volume, MPV) 의 값을 측정하였다.
부검전일 20~24시간 절식시킨 생쥐의 안와에서 채혈한 혈액을 Heparin tube에 담아 원심분리(1, 914g, 5분)하여 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청은 자동생화학분석기(FUJI DRI- CHEM 3500, Japan)를 이용하여 GOT (Glutamate Oxaloacetate Transaminase), GPT(Glutamic Pyruvic Transaminase), BUN(Blood Urea Nitrogen), CRE(Creatinine), TP(Total protein), GLU(Glucose), ALB (Albumin), ALP (Alkaline Phosphatase) GGP(Y-Grutamyltransferase), TG(Triglyceride), T-Chol(Total Cholesterol), IP(Inorganic Phosphorus), LDH(Lactate Dehydrogenase), CKMB (Creatine kinase), Ca2+Z N*, a K+, CP 값을 분석하였다.
분리하였다. 분리한 혈청은 자동생화학분석기(FUJI DRI- CHEM 3500, Japan)를 이용하여 GOT (Glutamate Oxaloacetate Transaminase), GPT(Glutamic Pyruvic Transaminase), BUN(Blood Urea Nitrogen), CRE(Creatinine), TP(Total protein), GLU(Glucose), ALB (Albumin), ALP (Alkaline Phosphatase) GGP(Y-Grutamyltransferase), TG(Triglyceride), T-Chol(Total Cholesterol), IP(Inorganic Phosphorus), LDH(Lactate Dehydrogenase), CKMB (Creatine kinase), Ca2+Z N*, a K+, CP 값을 분석하였다.
비장 내 림프구인 B세포, 보조 T세포, 세포독성 T세포의 비율을 측정하기 위하여, 생쥐의 비장세포(5xl05개)를 anti- CD16/CD32(FcyⅢ/II Receptor) mAb로 4℃ 에서 30분 동안 blocking하고 washing 용액(1% FBS/0.1% NaNa/PBS) 으로 세척하였다. 그리고 PE-conjugated anti-CD8 mAb 또는 FITC-conjugated anti-CD4, CD-19 mAb로 4℃ 에서 30분 동안 염색하였다.
이용하였다. 비장세포 중에서 B세포는 특이적 세포막 단백질인 CD19에 대한 항체를 이용하였고, T세포 중에서 보조 T세포는 특이적 세포막 단백질인 CD4에 대한 항체를 이용하였고, 세포독성 T세포는 특이적 세포막 단백질인 CD8에 대한 항체를 이용하여 그 비율을 측정하였다.
비장세포 중에서 B세포를 특이적으로 자극하는 LPS와, T세포를 특이적으로 자극하는 Con A로 증식반응을 유도한 다음 흡광도로 증식반응을 측정하였다. 서로의 증식반응 정도를 비교하기 위하여 LPS 또는 Con A를 첨가하였을 때 얻은 측정값을 무처리한 대조군의 측정값으로 나누어서 그 비율(stimulation index) 을 비교하였다.
사료 섭취량은 생쥐 한 마리 당 섭취량은 측정하지 않고 5마리가 들어있는 사육상자 당 사료 섭취량을 측정하였다. 사료 섭취량도 실험기간 동안 큰 변화가 없는 것으로 나타났으며, 암컷 생쥐의 사료 소비량은 2일 동안 약 24-32 g으로약 27~36 g인 수컷에 비해 적은 것으로 나타났다{Table 2).
사료와 물 섭취량은 실험기간 동안 2일에 1회씩 측정했으며, 사료는 공급 전 무게와 공급 후 무게의 차이, 물은 공급 전 부피와 공급 후 부피의 차이를 측정하였다.
게르마늄의 함유량은 60 ㎎/㎏이었다. 상추 내 게르마늄 분석은 건조시료 0.2g을 teflon bomb에 넣은 후 분해용액으로 HNOs (Merk, Suprapur) 5 ml을 첨가하여 4 시간 방치한 후 50℃ 로 over night시키고 H₂O₂ 0.5ml (Merk, Suprapur)을 첨가하여 80℃로 2시간 가열하여 유기물을 완전히 분해시켜 3차 증류수를 가하여 50 ml로 정용하여 ICP-MS (Agilent 7500 Series ICP-MS, Agilent Technologies, USA) 또는 ICP (ICPE 9000, Shimadzu, Japan)를 이용하여 분석하였다. 실험군의 구성은 암수 각각 40마리의 생쥐를 실험군간 체중이 고르게 나누어서 증류수를 경구 투여한 대조군, 게르마늄을 함유하지 않는 상추를 경구투여한 실험군, GeO를 함유한 상추를 경구 투여한 실험군, Geg2를 함유한 상추를 경구 투여한 실험군으로 나누고 실험군 당 암수 5마리씩 배치하였다.
비장세포 중에서 B세포를 특이적으로 자극하는 LPS와, T세포를 특이적으로 자극하는 Con A로 증식반응을 유도한 다음 흡광도로 증식반응을 측정하였다. 서로의 증식반응 정도를 비교하기 위하여 LPS 또는 Con A를 첨가하였을 때 얻은 측정값을 무처리한 대조군의 측정값으로 나누어서 그 비율(stimulation index) 을 비교하였다.
비장세포증식 측정은 Promega(Madison, WI, USA) 제품인 Cell Titer 96R Aqueous One Solution Cell proliferation Assay를 사용하였다. 슥세포 배양액 100㎕에 Cell Titer 96R Aqueous One Solution Cell proliferation Assay 시약을 15μ1씩 첨가하여 3시간 동안 반응시킨 다음 Microplate reader(Titertek Multiscan Plus, Finland)로 490 nm에서 O.D.값을 즉정하여 증식 정도를 측정하였다.
실험 기간 중 투여 당일은 8시간까지 매시간, 투여 다음날부터 14일까지 매일 1회씩 동물의 행동, 운동성, 보행 이상 외관 등에 관한 일반증상과 임상증상 및 사망 유무에 관해서 관찰하였다.
실험 종료 후 실험동물을 에테르로 마취하여 희생시키고육안적으로 포]하, 복강장기, 흉강장기 및 뇌를 관찰하였다. 무게를 측정한 장기는 노], 흉선, 심장, 폐, 간, 비장, 신장-좌우, 부신-좌우, 난소-좌우(암컷), 고환-좌우(수컷), 부고환-좌우(수컷), 자궁(암컷), 전립선(수컷)이며, 무게는 육안으로 지방을 제거한 다음 측정하였으며, 일부 크기가 작은 장기(부신, 난소, 부고환)는 해부현미경으로 관찰하면서 지방을 제거한 후 무게를 측정하였다.
5ml (Merk, Suprapur)을 첨가하여 80℃로 2시간 가열하여 유기물을 완전히 분해시켜 3차 증류수를 가하여 50 ml로 정용하여 ICP-MS (Agilent 7500 Series ICP-MS, Agilent Technologies, USA) 또는 ICP (ICPE 9000, Shimadzu, Japan)를 이용하여 분석하였다. 실험군의 구성은 암수 각각 40마리의 생쥐를 실험군간 체중이 고르게 나누어서 증류수를 경구 투여한 대조군, 게르마늄을 함유하지 않는 상추를 경구투여한 실험군, GeO를 함유한 상추를 경구 투여한 실험군, Geg2를 함유한 상추를 경구 투여한 실험군으로 나누고 실험군 당 암수 5마리씩 배치하였다.
파종 후 4주간 키운 육묘를 소액담액경 (L56 X W44 X H₁₅ cm) 에 14x14 cm간격으로 정식하여 3주간 재배한 상추의 지상부와 지하부 모두를 70℃로 건조하여 마이크로분쇄기(HMF-340, GMBH, Germany)로 분말상태로 분쇄하여 사용하였다. 양액 내 게르마늄 처리는 일본원예시험장 표준양액 1/2배액에 유기게르마늄[Ge-132, carboxyethyl germanium sesquioxide 3(GeCH₂COOH)2, Sigma]과 무기게르마늄 [GeO, Sigma] 을 10 mg/L농도가 되도록 각각 처리하였다. 건조 분쇄된 상추 시료 내 게르마늄 함량은 유기게르마늄 상추시료는 60 ㎎/㎏, 무기게르마늄 상추시료는 60 ㎎/㎏ 이었다.
그리고 PE-conjugated anti-CD8 mAb 또는 FITC-conjugated anti-CD4, CD-19 mAb로 4℃ 에서 30분 동안 염색하였다. 염색한 세포를 다시 washing 용액으로 세척한 후, 인산완충용액에 현탁하여 유세포분석기(Epics XL, Coulter, USA)로 분석하였다.
유기 게르마늄을 함유하지 않은 상추와 유기 게르마늄을 함유한 상추의 분말을 식약청 고시에 명시된 최고농도인 2, 000 ㎎/㎏을 투여량으로 산출하였고, 이때 실험 시료에 포함된 게르마늄의 함유량은 60 ㎎/㎏이었다. 상추 내 게르마늄 분석은 건조시료 0.
이용하여 아래의 항목을 측정하였다. 즉 혈액 중에 포함된 백혈구(White Blood Cell, WBC) 및 호중구(Neutrophil, NE), 림프구(Lymphocyte, LY)Z 단핵구(Monocyte, MO)Z 호산구(Eosinophil, EO), 호염구(Basophil, BA)Z 적혈구(Red Blood Cell, RBC) 의 숫자와, 혈색소량(Hemoglobin, Hb)z 적혈구 용적(Hematocits, Hct)z 평균적혈구용적(Mean Corpuscular Volume, MCV) 평균적혈구색소량 Mean Corpuscular Hemoglobin, MCH)Z 평균적혈구색소농도(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration, MCHC), 혈소판(Platelet, PLT), 평균적혈구색소량(Mean Plasma Volume, MPV) 의 값을 측정하였다.
)를 사용하였다. 파종 후 4주간 키운 육묘를 소액담액경 (L56 X W44 X H₁₅ cm) 에 14x14 cm간격으로 정식하여 3주간 재배한 상추의 지상부와 지하부 모두를 70℃로 건조하여 마이크로분쇄기(HMF-340, GMBH, Germany)로 분말상태로 분쇄하여 사용하였다. 양액 내 게르마늄 처리는 일본원예시험장 표준양액 1/2배액에 유기게르마늄[Ge-132, carboxyethyl germanium sesquioxide 3(GeCH₂COOH)2, Sigma]과 무기게르마늄 [GeO, Sigma] 을 10 mg/L농도가 되도록 각각 처리하였다.

대상 데이터

공시게르마늄이 함유된 상추 시료는 흥농종묘의 레드선적죽면상추(Lactuca sativa L.)를 사용하였다. 파종 후 4주간 키운 육묘를 소액담액경 (L56 X W44 X H₁₅ cm) 에 14x14 cm간격으로 정식하여 3주간 재배한 상추의 지상부와 지하부 모두를 70℃로 건조하여 마이크로분쇄기(HMF-340, GMBH, Germany)로 분말상태로 분쇄하여 사용하였다.
시료 투여에 따른 림프구의 비율 변화를 관찰하기 위하여 대조군과 실험군의 생쥐에서 분리한 비장세포를 이용하였다. 비장세포 중에서 B세포는 특이적 세포막 단백질인 CD19에 대한 항체를 이용하였고, T세포 중에서 보조 T세포는 특이적 세포막 단백질인 CD4에 대한 항체를 이용하였고, 세포독성 T세포는 특이적 세포막 단백질인 CD8에 대한 항체를 이용하여 그 비율을 측정하였다.
시료 투여에 따른 림프구의 증식반응 변화를 관찰하기 위하여 대조군과 실험군의 생쥐에서 분리한 비장세포를 이용하였다. 비장세포 중에서 B세포를 특이적으로 자극하는 LPS와, T세포를 특이적으로 자극하는 Con A로 증식반응을 유도한 다음 흡광도로 증식반응을 측정하였다.
실험동물은 (주)샘타코 바이오 코리아(경기도 오산시, 한국)에서 특정병원체부재(specific pathogen free) C₅₇BL/6 생쥐를 공급받아 실험동물 사육실에서 폴리카보네이트 사육 상자(260x410x20 mm)당 5개체의 밀도를 유지하며 사육하였고 사육상자는 시험번호 및 동물번호를 기입한 라벨지를 부착하여 식별하였다. 이들 생쥐는 2주일간 온도 21±2℃, 습도 55±10%의 환경에서 사육하였으며 사료는 (주)샘타코 바이오코리아에서 공급받은 방사선 조사로 멸균된 실험동물용 고형사료를, 물은 여과된 멸균 정제수를 충분히 공급하고, 낮과 밤의 주기를 12시간씩 조절하면서 가능한 스트레스를 받지 않도록 사육하였으며, 생후 8주의 생쥐를 실험에 사용하였다.
유기 게르마늄 투여가 면역세포의 증식반응에 미치는 효과를 측정하기 위하여 생쥐의 비장세포를 이용하였다. 먼저각 실험군의 생쥐 비장을 분리한 다음, 핀셋이나 메쉬를 이용하여 단일세포 부유액을 만들었다.
식별하였다. 이들 생쥐는 2주일간 온도 21±2℃, 습도 55±10%의 환경에서 사육하였으며 사료는 (주)샘타코 바이오코리아에서 공급받은 방사선 조사로 멸균된 실험동물용 고형사료를, 물은 여과된 멸균 정제수를 충분히 공급하고, 낮과 밤의 주기를 12시간씩 조절하면서 가능한 스트레스를 받지 않도록 사육하였으며, 생후 8주의 생쥐를 실험에 사용하였다.

데이터처리

대조군과 실험군 간의 체중변화, 사료와 물 섭취량, 혈액검사, 혈액검사, 혈액생화학검사에 대한 실험결과는 Mean±S.D. 로 나타내었으며 대조군과 유의한 차이가 있는 실험군을 알아보기 위하여 Student t-test를 실시하였으며 유의차가 5% 미만(p<0.05)일 때 통계학적 유의성이 있는 것으로 판정하였다.

이론/모형

본 연구에서는 유기 게르마늄과 무기 게르마늄을 첨 가하여양액 재배한 상추의 안전성 평가의 일환으로, 단회 투여 시 나타날 수 있는 독성을 평가하고자 게르마늄 함유 상추의 생쥐 (C₅₇BL/6)에 대한 단회 경구 독성시험을 독성시험기준(식품의약품안전청고시, 제 1999-61호) 을 참고하여 수행하였다.
이때, LPS (10//g/ml) 또는 Con A(l"g/ml)를 첨가하여 37℃Z 5% CO₂ 배양기에서 72시간 배양하였다. 비장세포증식 측정은 Promega(Madison, WI, USA) 제품인 Cell Titer 96R Aqueous One Solution Cell proliferation Assay를 사용하였다. 슥세포 배양액 100㎕에 Cell Titer 96R Aqueous One Solution Cell proliferation Assay 시약을 15μ1씩 첨가하여 3시간 동안 반응시킨 다음 Microplate reader(Titertek Multiscan Plus, Finland)로 490 nm에서 O.

성능/효과

각 실험군의 절대 장기 무게를 측정한 결과, 암수 각 실험군에서 대조군에 비해 실험군의 장기 무게는 큰 변화가 없는 것으로 나타났다(Table 4).
그러나 수컷의 경우에는 GPT와 GOT 측정값이 대조군에 비해 Gei32를 함유한 상추를 먹인 실험 군에서 유의적으로 감소하였다(p<0.05). 그러나 효모 유기 게르마늄을 장기간 투여한 rat와 개에서는 GPT와 GOT값의 변화는 관찰되지 않는 것으로 나타났다32, 33).
그러나 암수 간의 몸무게에 대한 장기 무게를 비교해보면 뇌, 흉선, 심장, 허파, 간, 비장 등의 상대적 무게가 수컷에 비해 암컷이 무거운 것으로 나타났다. 이것은 같은 장기 무게의 경우에 상대적으로 암컷의 체중이 적기 때문에 생기는 결과라고 생각할 수도 있다.
그러나 효모 유기 게르마늄을 장기간 투여한 rat와 개에서는 GPT와 GOT값의 변화는 관찰되지 않는 것으로 나타났다32, 33). 그리고 ldh 측정값이 대조군에 비해 GeOz와 Gera를 함유한 상추를 먹인 실험군에서 각각 유의적으로 감소하였다(p<0.05). 이러한 LDH 값의 유의한 감소는 효모 유기게르마늄을 장기간 투여한 개에서 수컷(0.
그리고 보조 T세포의 비율도 평균적으로 약 23~25%, 세포독성 T세포의 비율도 평균적으로 약 13~14%로 각 실험군 간의 유의한 차이가 없는 것으로 나타났다. 수컷의 경우에도 비장세포 중에서 B세포의 비율이 대조군과 실험군에서 평균적으로 약 50~51%로 유의한 차이는 관찰되지 않았다(Table 9).
수컷의 경우에도 비장세포 중에서 B세포의 비율이 대조군과 실험군에서 평균적으로 약 50~51%로 유의한 차이는 관찰되지 않았다(Table 9). 그리고 보조 T세포의 비율도 평균적으로 약 23~25%, 세포독성 T세포의 비율도 평균적으로 약 14~15%로 각 실험군 간의 유의한 차이가 없는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 앞에서 관찰한 LPS와 Con A 자극에 대한 B세포와 T세포의 증식반응에서 각 실험군 간의 유의한 차이가 나타나지 않은 결과와 일치한다고 생각된다.
먼저 암컷의 경우에 B세포는 비장세포 중에서 그 비율 이대 조 군과 실험군에서 약 47.8~59.6%로 유의한 차이는 관찰되지 않았다(Table 9).
몸무게에 대한 상대적인 장기 무게를 비교한 결과; 대조군과 비해 실험군 간에 유의한 차이는 관찰되지 않았다(Table 5).
물 섭취량 역시 사료 섭취량과 같이 생쥐 한 마리 당 섭취량은 측정하지 않고 5마리가 들어있는 사육상자 당 사료 섭취량을 측정하였다. 물 섭취량도 실험 기간 동안 큰 변화가 없는 것으로 나타났으며, 암컷 생쥐의 물 소비량은 2일 동안 약 38~45 ml로 약 38~49 ml인 수컷에 비해 약간 적은 것으로 나타났다(Table 3).
측정하였다. 사료 섭취량도 실험기간 동안 큰 변화가 없는 것으로 나타났으며, 암컷 생쥐의 사료 소비량은 2일 동안 약 24-32 g으로약 27~36 g인 수컷에 비해 적은 것으로 나타났다{Table 2).
수컷의 경우에도 비장세포 중에서 B세포의 비율이 대조군과 실험군에서 평균적으로 약 50~51%로 유의한 차이는 관찰되지 않았다(Table 9). 그리고 보조 T세포의 비율도 평균적으로 약 23~25%, 세포독성 T세포의 비율도 평균적으로 약 14~15%로 각 실험군 간의 유의한 차이가 없는 것으로 나타났다.
아니었다. 수컷의 경우에도 흉선, 심징; 오른쪽 신장, 왼쪽 부고환의 무게가 대조군에 비해 모든 실험군에서 약간 감소하였지만 유의한 차이는 아니었고, 왼쪽 신장과 좌우 의 무게가 약간 증가하였지만 역시 유의한 차이는 아니었다. 이러한 결과는 효모 유기게르마늄을 13주간 투여한 rat(0.
시험 시작 전에 측정한 체중은 암컷이 약 17-18 g으로 약 20 g인 수컷에 비해 적은 것으로 나타났으며 14일 간의 실험기간 동안에 유의한 체중 변화는 암컷과 수컷 모두에서 관찰되지 않았다. 그러나 실험 마지막에 측정한 체중은 암컷과 수컷, 그리고 대조군과 실험군 모두에서 약간씩 감소하는 것으로 나타났지만, 이것은 생쥐를 희생시키기 전에 24시간 절식시킨 것 때문이라고 생각된다.
실험 전 기간 동안 사망한 실험동물은 없었으며, 시료의 투여와 관련된 일반증상과 임상증상도 관찰되지 않았고, 부검 결과에서도 시료 투여와 관련한 어떠한 육안적 병변도 관찰되지 않았다. 이와 같은 결과는 합성 유기게르마늄을 이용한 rat(0.
이상의 결과로 GeO₂와 Gei32를 함유한 상추 분말을 식약청 고시에 명시된 최고농도인 2,000 ㎎/㎏을 단회 경구 투여하였을 때, 시료와 관련된 특기할만한 독성증상이 관찰되지 않는 것을 알 수 있었다.
즉 암컷의 경우에 대조군에 비해각 실험군의 장기 무게가 모두 약간 감소하는 경우(흉선, 오른쪽 난소)와 약간 증가하는 경우(왼쪽 난소)가 있었지만 유의한 차이는 아닌 것으로 나타났으며, 나머지 장기에서는 대조군에 비해 각 실험군이 증가하는 경우와 감소하는 경우 두 가지 경우가 나타났지만 이것 역시 유의한 차이는 아니었다. 수컷의 경우에도 흉선, 심징; 오른쪽 신장, 왼쪽 부고환의 무게가 대조군에 비해 모든 실험군에서 약간 감소하였지만 유의한 차이는 아니었고, 왼쪽 신장과 좌우 의 무게가 약간 증가하였지만 역시 유의한 차이는 아니었다.
혈액 생화학적 검사 결과에서 암컷의 경우에는 대조군에 비해 각 실험군의 측정값에 유의한 변화는 없는 것으로 나타났다(Table 6).
혈액학적 검사에서는 암컷과 수컷 모두에서 대조군에 비해 각 실험군의 측정값에 유의한 변화는 없는 것으로 나타났다(Table 7).

후속연구

따라서 게르마늄함유 농자재와 농산물 중 게르마늄 함량을 분석하여 문제점을 파악하고 농작물의 게르마늄 흡수 효율을 높이기 위해 흡수 전이가 쉬운 게르마늄 농자재 개발이 필요하며, 작물에 있어 게르마늄 적정 처리농도 설정과 게르마늄 흡수특성 구명이 필요하다. 또한 생산된 게르마늄함유 농산물이 유기게르마늄화 되었는지에 대한 증명과 기능성 검정에 의한 게르마늄 농산물의 안전성 연구가 절실히 필요하다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

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용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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