[논문]미니돼지에서 자가 피부유래 전구세포와 탈회골 및 피브린 스케폴드를 이용한 하악골 골결손부의 골재생에 대한 연구

변준호; 최문정; 최영진; 심경목; 김욱규; 김종렬; 박봉욱

미니돼지에서 자가 피부유래 전구세포와 탈회골 및 피브린 스케폴드를 이용한 하악골 골결손부의 골재생에 대한 연구
MANDIBULAR BONE REGENERATION USING AUTOGENOUS SKIN-DERIVED PRECURSOR CELLS WITH A MIXED DEMINERALIZED BONE AND FIBRIN GLUE SCAFFOLD IN MINIATURE PIGS 원문보기

大韓顎顔面成形再建外科學會誌 = Journal of Korean association of maxillofacial plastic and reconstructive surgeons, v.31 no.3, 2009년, pp.198 - 206

변준호 (경상대학교 의학전문대학원 치과학교실 구강악안면외과, 경상대학교 건강과학연구원) , 최문정 (경상대학교 의학전문대학원 치과학교실 구강악안면외과, 경상대학교 건강과학연구원) , 최영진 (경상대학교 의학전문대학원 치과학교실 구강악안면외과, 경상대학교 건강과학연구원) , 심경목 (경상대학교 의학전문대학원 치과학교실 구강악안면외과, 경상대학교 건강과학연구원) , 김욱규 (부산대학교 치의학전문대학원 구강악안면외과학교실) , 김종렬 (부산대학교 치의학전문대학원 구강악안면외과학교실) , 박봉욱 (경상대학교 의학전문대학원 치과학교실 구강악안면외과, 경상대학교 건강과학연구원)

Abstract ▼ AI-Helper

Purpose: The aims of this study were to assess the in vitro co-culturing pattern of isolated skin-derived precursor cells (SKPs) with a mixed demineralized bone (DMB) and fibrin glue scaffold and to evaluate in vivo osteogenesis after transplantation of autogenous SKPs with a these mixed scaffold in the animal's mandibular defects. Materials and Methods: We isolated SKPs from the ears of adult 4 miniature pigs. The isolated SKPs were co-cultured with a mixed DMB and fibrin glue scaffold in a non-osteogenic medium for 1, 2, and 4 weeks. Histological characteristics of in vitro co-cultured cells and scaffold were evaluated. $1{\times}10^7\;cells/100\;{\mu}l$ of autogenous porcine SKPs were grafted into the mandibular defects with a DMB and fibrin glue scaffold. In the control sites, only a scaffold was grafted, without SKPs. After two animals each were euthanized at 2 and 4 weeks after grafting, the in vivo osteogenesis was evaluated with histolomorphometric and osteocalcin immunohistochemical studies. Results: Homogeneously shaped skin-derived cells were isolated from porcine ear skin after 3 or 4 weeks of primary culture. In vitro osteogenic differentiation of SKPs was observed after co-culturing with a DMB and fibrin glue scaffold in a non-osteogenic medium. Von Kossa-positive bone minerals were also noted in the co-cultured medium at 4 weeks. As the culture time progressed, the number of observable cells increased. Trabecular new bone formation and osteocalcin expression were more pronounced in the SKP-grafted group compared to the control group. Conclusion: These findings suggest that autogenous SKP grafting with a DMB and fibrin glue scaffold can serve as a useful alternative to bone grafting technique.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

또한, 이들 피부유래세포를 골세포, 지방세포, 그리고 신경세포로의 유도분화가 모두 성공적으로 일어남을 관찰하였으며, 이러한 결과는 이들 피부유래 전구세포가 다배엽 세포로 분화(multilineage differentiation)할 수 있는 능력을 갖추고 있다는 의미였다³⁾ . 본 연구에서는 이러한 선행된 연구를 바탕으로 미니돼지의 이부 피부에서 분리 추출한 피부유래 전구세포와 탈회골(demineralized bone, DMB) 및 fibrin glue 혼합 스케폴드와의 반응을 관찰하기 위하여 in vitro 상에서 약 4주간 혼합 스케폴드와 피부유래 전구세포를 공동배양(co-culture)하여 세포 성장양태를 관찰 하였으며, 또한 자가 피부유래 전구세포의 생체내 골형 성(in vivo osteogenesis) 정도를 관찰하기 위하여 4두의 미니돼지 하악골에 골 결손부를 형성한 후 자가피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 스케폴드를 이식하여 2주 및 4주 후 각각의 골형성 정도를 관찰하였다.
이러한 스케폴드에 대한 가설을 증명하기 위하여 본 연구 에서는 DMB와 fibrin glue 혼합 스케폴드와 실험동물의 이부에서 추출한 SKPs를 공동 배양하였으며, 약 4주간의 배양기간 동안 세포가 잘 생존해 있으면서 그 수가 증가함을 관찰 하였다. 또한, 공동 배양한 배지가 골화유도배지가 아님에도 불구하고, 배양 2주 후부터 갈색의 골기질을 관찰할 수 있었고, 배양 4주 후에는 von Kossa에 흑색으로 염색되는 골기질을 관찰 할 수 있었다.

가설 설정

However, it was rarely observed in the grafted defect (arrowhead) (x 12 magnification). B, Osteocalcin was not detected in grafted tissues in control specimen (x 100 magnification). C, In autogenous SKPs grafted group, abundant newly-generated trabecular bones were observed from underlying basal bone (arrow) (x 40 magnification).
C, Dark brown matrix formation (arrow) and an increased number of cultivated cells were observed at 2 weeks after co-culture (x 40). D, Enhanced positive von Kossa staining was detected at 4 weeks after in vitro coculture (x 40).

제안 방법

2 mg/kg의 소염진통제 (Meloxicam , Boehringer Ingerlheim, Germany)를 12 시간 간격으로 1일 간 근육주사로 투여 하였으며, 1세대 항생제(Cefazolin Ⓡ , Yuhan Corp., Korea)을 12시간 간격으로 술후 5일간 근육주사로 투여 하였다.
이후 paraffin에 함입 후 조직학적 평가를 위해 블록을 제작한 후 4 μm 절편으로 절단 후 glass slide에 놓고 탈파라핀과 함수과정을 거친 후 hematoxylin and eosin 염색을 실시 하였다. 4주간 배양한 세포와 스케폴드에서 in vitro 상의 골화정도를 평가하기 위해 von Kossa 염색을 실시하였다.
7×10 5 의 SKPs를 0.3 ml의 fibrin glue (Greenplast Ⓡ kit, Green Cross, Korea)와 0.25 cc의 DMB (Grafton Ⓡ , Osteotech TM , NJ, USA)를 주입하여 배양판에서 38.5 ℃, 5 % CO 2와 humidity 조건에서 조직배양 하였고, 1주에 2 번씩 배지를 교체하였다(Fig. 2. A).
내인성 peroxidase를 차단하기 위해 과산화수소수(hydrogen peroxide)를 실온에서 10분간 반응시킨 후 TBS에 3분간 2회 세척 하였다. Osteocalcin에 대한 일차항체는 1:200으로 희석한 mouse monoclonal anti-osteocalcin (Abcam, UK)를 사용 하였으며, 면역염색은 자동면역염색기(Lab Vision Autostainer TM , Lab Vision, CA, USA)를 사용하여 37℃에서 32분간 일차항체를 반응 시켰으며, 이 후 슬라이드글라스를 biotin을 부착한 이차항체인 biotinylated polyvalent secondary antibody 용액으로 처리하였다. 이후 horseradish peroxidase-conjugated avidin-biotin complx로 반응시킨 후 3,3-diaminobenzidine과 hydrogen peroxide를 사용하여 발색하였으며, hematoxylin으로 핵을 대조염색 하였다.
Osteocalcin에 대한 면역조직화학 염색의 평과는 광학 현미경하에서 실험에 대한 사전 지식이 없는 두 명의 병리학 자에 의해서 실시 되었다. 대조군 및 실험군에서 최소 3개 이상의 조직표본을 제작하였고, 신생골조직의 주변을 감싸는 골모세포(osteoblast) 및 신생골조직 내부에 위치한 골세포(osteocyte)에서 각각 면역염색의 발현을 조사하였다.
또한, 본 연구에서는 피부유래 전구세포의 생체내 골화정도를 연구하기 위하여 자가 피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 혼합 스케폴드를 실험동물의 하악골 결손부에 이식 후 2주와 4주 후 골형성 정도를 관찰 하였다.
면역조직화학염색은 4 μm 두께의 절편이 부착한 슬라이드글라스를 실온에서 12시간 보관한 후 탈파라핀과 함수 과정을 거쳤다.
배양시작 1, 2, 4 주후 각각 배양된 스케폴드와 세포를 Dulbecco’ s Phosphate Buffered Saline (DPBS; Invitrogen, MD, USA)에 세척한 후 3.7% (w/v) formaldehyde액에 고정하였다.
본 연구자들은 선행된 연구에서 미니돼지의 이부피부 (porcine ear skin)를 약 3-4주 동안 배양하여 균일한 모양의 피부유래세포를 추출하였으며, 이들 추출된 피부유래세 포에서 전사인자인 Oct-4, Nanog, 그리고 Sox-2의 발현을 관찰함으로써 이들 세포들이 다능성(pluripotency)을 가진 원시적인 전구세포(primitive precursor cells)임을 관찰하였다³⁾ . 또한, 이들 피부유래세포를 골세포, 지방세포, 그리고 신경세포로의 유도분화가 모두 성공적으로 일어남을 관찰하였으며, 이러한 결과는 이들 피부유래 전구세포가 다배엽 세포로 분화(multilineage differentiation)할 수 있는 능력을 갖추고 있다는 의미였다³⁾ .
분리된 전층 피부를 약 1-2 mm 2 의 조각으로 분리하여 10 % fetal bovine serum (FBS; Invitrogen), 10 ng/ml endothelial growth factor (EGF; Sigma, MO, USA), 10 ng/ml basic fibroblast growth factor (bFGF; Sigma), 100 U/ml penicillin (Sigma), 그리고 100 μg/ml streptomycin (Sigma)을 참가한 2 ml Dulbecco’ s Modified Eagle Medium (DMEM)/F12 (Invitrogen) 배지가 함유된 조직배양판 (tissue culture plates, Nunc, Denmark) 에 넣고 38.5℃, 5 % CO 2와 humidity 조건에서 조직배양 하였다.
실험동물에서 SKPs를 추출하는 과정도 선행된 연구에서 소개한 방법과 동일한 방법으로 3) , 간략히 요약하면, 실험동물을 전신마취 후 한쪽 이첨부를 절제하였고, 채취한 이첨부 조직을 세척 후 표피(epidermis) 및 진피(dermis)와 모낭, 피지샘 및 땀샘 등이 포함된 전층의 피부를 분리하였다.
이 후 일반적인 조직처리 과정을 거쳐 파라핀 블록을 제작 하였고, 4 μm 두께로 절편을 만들었고, 이는 염색과정 동안 조직탈락을 최소화하기 위하여 silane을 코팅한 슬라이드글라스에 부착하였다.
이부의 피부 채취 후 실험실에서 약 4주간 배양하여 자가 피부유래 전구세포를 형성한 4두의 미니돼지에서 azaperone과 tiletamine-zolazapam을 이용하여 같은 방법으로 진정과 전신마취 후 구강내 접근법으로 하악골 골체부를 노출시켰다. 외과용 bur을 이용하여 노출된 골체부에 가로 1.
일차배양 2일 후 피부조직에서 탈락된 세포가 배지에 부착된 것을 확인하고 남은 조직절편은 forceps으로 제거하였다. 이시기에는 배지를 하루에 한번씩 교체하였고, 피부절편을 제거한 후에는 1주에 2번씩 배지를 교체하였으 며, confluent cells은 0.25% trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA; Invitrogen)으로 처리 후계대배양(subculture) 하였다.
이식 수술 2주와 4주 후 각각 2두의 실험동물을 전신마취 후 혈관내로 KCl을 주입하여 희생하였으며, 희생 후 이식 실험한 하악골을 en bloc으로 절제하였고, 10% 중성 포르말린에 24시간 고정 후 5% 질산에 약 3일간 탈회하였다.
Osteocalcin에 대한 일차항체는 1:200으로 희석한 mouse monoclonal anti-osteocalcin (Abcam, UK)를 사용 하였으며, 면역염색은 자동면역염색기(Lab Vision Autostainer TM , Lab Vision, CA, USA)를 사용하여 37℃에서 32분간 일차항체를 반응 시켰으며, 이 후 슬라이드글라스를 biotin을 부착한 이차항체인 biotinylated polyvalent secondary antibody 용액으로 처리하였다. 이후 horseradish peroxidase-conjugated avidin-biotin complx로 반응시킨 후 3,3-diaminobenzidine과 hydrogen peroxide를 사용하여 발색하였으며, hematoxylin으로 핵을 대조염색 하였다.
이후 paraffin에 함입 후 조직학적 평가를 위해 블록을 제작한 후 4 μm 절편으로 절단 후 glass slide에 놓고 탈파라핀과 함수과정을 거친 후 hematoxylin and eosin 염색을 실시 하였다.
저자는 본 연구에서 미니돼지 이부의 피부를 채취해 약 2-3주간 배양 후 균일한 모양의 줄기세포로 추정되는 세포를 추출하였으며, 이러한 피부유래 전구세포(SKPs)에 대한 DBM 및 fibrin glue 혼합 스케폴드의 유해성을 검사하기 위하여 약 4주간 비골화유도 배지에서 공동 배양하였다.
피부유래 전구세포의 생체내(in vivo) 골형성 정도를 관찰하기 위하여, 미니돼지의 하악골골체부에 가로 1.5 cm ×세로 1.5 cm × 깊이 1 cm의 골결손부를 형성한 후 자가 피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 스케폴드와 함께 이식하였으며, 대조군에는 피부유래 전구세포 없이 스케폴드만 이식하였다.

대상 데이터

Osteocalcin에 대한 면역조직화학 염색의 평과는 광학 현미경하에서 실험에 대한 사전 지식이 없는 두 명의 병리학 자에 의해서 실시 되었다. 대조군 및 실험군에서 최소 3개 이상의 조직표본을 제작하였고, 신생골조직의 주변을 감싸는 골모세포(osteoblast) 및 신생골조직 내부에 위치한 골세포(osteocyte)에서 각각 면역염색의 발현을 조사하였다.
본 실험에 사용한 동물모델은 선행된 연구와 동일한 것으로 체중 25 kg 내외의 생후 6개월에서 1년 사이의 미니돼지 4 두를 이용하며³⁾ , 모든 실험연구는 경상대학교 동물실험 윤리기준을 준수하면서 이루어 졌다. 실험동물에서 SKPs를 추출하는 과정도 선행된 연구에서 소개한 방법과 동일한 방법으로³⁾ , 간략히 요약하면, 실험동물을 전신마취 후 한쪽 이첨부를 절제하였고, 채취한 이첨부 조직을 세척 후 표피(epidermis) 및 진피(dermis)와 모낭, 피지샘 및 땀샘 등이 포함된 전층의 피부를 분리하였다.

성능/효과

B & C). 2주간 배양 후 스케폴드 주변의 배양되는 세포내에서 갈색의 골기질들이 관찰 되었고(Fig. 2. C), 4주 동안 배양된 판을 von Kossa 염색하였을 경우 흑색으로 관찰되는 골기질들을 관찰 할 수 있었다(Fig. 2. D).
4주의 공동 배양기간 동안 DMB 및 fibrin glue 혼합 스케폴드 사이에서 잘 유지되는 SKPs를 관찰 할 수 있었고, 그수도 시간이 지날수록 증가되어 관찰 되었다. 또한, 공동 배양 배지가 비골화유도 배지임에도 불구하고, 약 4주간의 배양 후 von Kossa에 염색되는 골기질을 관찰 하였으며, 이는 DMB 내에 있는 BMP 때문인 것으로 추정된다.
(A & B) Control specimen. A, Slightly increased new bone generation (arrow) and osteocalcin activity were observed compared with control group of 2 weeks after graft (A and B; x 40 magnifications). (C & D) Newly-generated trabecular bones were more enhanced and matured than the specimen of 2 weeks after graft (C: *, basal bone; arrow, borderline of basal bone and new bone) (C; x 40 and D; x 100 magnifications).
또한, 본 연구에서는 피부유래 전구세포의 생체내 골화정도를 연구하기 위하여 자가 피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 혼합 스케폴드를 실험동물의 하악골 결손부에 이식 후 2주와 4주 후 골형성 정도를 관찰 하였다. 그 결과 자가 피부유래 줄기세포를 이식한 군이 전구세포 없이 스케폴드만 이식한 대조군에 비해 월등히 많은 신생골 형성과 골형성 단백질인 osteocalcin의 강한 발현을 관찰 할 수 있었다. 향후 장기적인 경과 관찰이 필요할 수 있지만, 상기의 결과는 자가 피부유래 전구세포의 이식이 골이식의 대체방법으로 사용될 수 있음을 보여준다.
이러한 스케폴드에 대한 가설을 증명하기 위하여 본 연구 에서는 DMB와 fibrin glue 혼합 스케폴드와 실험동물의 이부에서 추출한 SKPs를 공동 배양하였으며, 약 4주간의 배양기간 동안 세포가 잘 생존해 있으면서 그 수가 증가함을 관찰 하였다. 또한, 공동 배양한 배지가 골화유도배지가 아님에도 불구하고, 배양 2주 후부터 갈색의 골기질을 관찰할 수 있었고, 배양 4주 후에는 von Kossa에 흑색으로 염색되는 골기질을 관찰 할 수 있었다. 이는 혼합 스케폴드 중 DMB내에 있는 골유도 단백질(bone morphogenic proteins, BMP)들이 유리되어 미성숙 SKPs가 골화세포로 분화한 것이라고 추측할 수 있다.
1). 또한, 모든 실험동물에서도 하악골 결손부내 이식 수술 후 감염이나 심각한 부종 등의 특이소견의 관찰 없이 희생시점까지 잘 유지되었다.
C & D). 또한, 이 시기 실험군 조직에서의 osteocalcin은 신생골 주변의 골모세포에서는 비교적 강하게 발현되고, 골세포에서는 약하게 발현되는 것이 관찰되었다(Fig. 6. E). 이식술 2주 및 4주 후 신생골 주변의 골모세포 및 신생골 내부의 골세포에서 osteocalcin의 발현정도는 Table 1에 나타나 있다.
. 또한, 이들 피부유래세포를 골세포, 지방세포, 그리고 신경세포로의 유도분화가 모두 성공적으로 일어남을 관찰하였으며, 이러한 결과는 이들 피부유래 전구세포가 다배엽 세포로 분화(multilineage differentiation)할 수 있는 능력을 갖추고 있다는 의미였다³⁾ . 본 연구에서는 이러한 선행된 연구를 바탕으로 미니돼지의 이부 피부에서 분리 추출한 피부유래 전구세포와 탈회골(demineralized bone, DMB) 및 fibrin glue 혼합 스케폴드와의 반응을 관찰하기 위하여 in vitro 상에서 약 4주간 혼합 스케폴드와 피부유래 전구세포를 공동배양(co-culture)하여 세포 성장양태를 관찰 하였으며, 또한 자가 피부유래 전구세포의 생체내 골형 성(in vivo osteogenesis) 정도를 관찰하기 위하여 4두의 미니돼지 하악골에 골 결손부를 형성한 후 자가피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 스케폴드를 이식하여 2주 및 4주 후 각각의 골형성 정도를 관찰하였다.
스케폴드와 SKPs를 공동배양한지 각각 1주, 2주, 그리고 4주 후에 배양된 기질의 조직소견을 관찰할 때, 모든 시간 에서 잘 보존되고 생존된 세포들을 DMB와 fibrin 기질 사이에서 관찰 할 수 있었고, 관찰되는 세포 수도 시간이 증가함에 따라 약간 증가함을 알 수 있었다(Fig. 3).
5 cm × 깊이 1 cm의 골결손부를 형성한 후 자가 피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 스케폴드와 함께 이식하였으며, 대조군에는 피부유래 전구세포 없이 스케폴드만 이식하였다. 이식 2주와 4주 후 대조군 보다 SKPs 를 이식한 실험군에서 월등히 높은 osteocalcin의 발현이 관찰 되었고, 대조군 보다 많은 양의 신생골소주의 형성이 관찰 되었다.
이식술 시행 4주 후, 대조군의 조직에서는 이식술 2주 후보다 신생 골소주의 형성이 증가되어 관찰 되었으며, 이 시기 대조군 조직에서의 osteocalcin은 신생골 주변의 골모세포에서 약하게 발현되었다(Fig. 6. A & B).
자가 피부유래 전구세포를 이식한 4주 후에는 2주 후 보다 증가된 신생골 형성을 관찰 할 수 있었고, 신생 골소주도 2주 후의 것보다 치밀해지고, 두꺼워져 관찰 되었다(Fig. 6. C & D).
이는 혼합 스케폴드 중 DMB내에 있는 골유도 단백질(bone morphogenic proteins, BMP)들이 유리되어 미성숙 SKPs가 골화세포로 분화한 것이라고 추측할 수 있다. 즉, 본 실험을 통하여 DMB 및 fibrin glue 혼합 스케폴드는 피부유래 전구세포의 성장이나 분화를 방해하지 않고, 오히려 골세포 분화에 유리한 조건을 제공한다고 주장 할 수 있을 것이다.

후속연구

또한, 선행된 연구들에서 fibrin glue는 조직공학적 골형성을 위해 DMB ²⁹⁾ , β -tricalcium phosphate ²⁸⁾ , 그리고 biosorbable materials ²⁷⁾등과 같이 사용되었는데, 이들은 모두 스케폴드의 물리적 강도를 증가시키는 역할을 하였다. 본 연구에서의 스케폴드 조합에 서도, fibrin glue는 이식되는 세포의 초기 안정성에 기여하고, DMB는 이식조직의 물성을 향상시키는 데 도움이 될 것으로 기대하였다.
그 결과 자가 피부유래 줄기세포를 이식한 군이 전구세포 없이 스케폴드만 이식한 대조군에 비해 월등히 많은 신생골 형성과 골형성 단백질인 osteocalcin의 강한 발현을 관찰 할 수 있었다. 향후 장기적인 경과 관찰이 필요할 수 있지만, 상기의 결과는 자가 피부유래 전구세포의 이식이 골이식의 대체방법으로 사용될 수 있음을 보여준다.
향후 추가적인 연구가 진행되어야 하겠지만, 본 연구 결과로 다양한 분야의 재생의학에 보다 채취가 간단하면서 다능성의 특징을 갖춘 피부유래 전구세포를 이용할 수 있을 것이며, 특히 안면골 재생에 자가피부유래 전구세포를 이용함으로써 자가골 이식에 따른 공여부 합병증과 합성골 이식에 따른 면역반응 등을 줄일 수 있으리라 기대된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	조직공학적 골의 장점은?	이에 최근에는 조직공학적 방법을 이용하여 결손된 골을 재생하는 방법에 대한 연구들이 활발히 이루어 지고 있으며, 이러한 조직공학적 골은 적절한 스케폴드만 선택된다면 필요한 양과 모양에 제한 받지 않고 골을 형성할 수 있는 큰장점이 있으며, 특히 자가조직을 이용한 조직공학적 골은 면역반응을 해결할 수 있고, 종교 및 윤리적 문제에 제한을 받지 않기에 미래의 조직재생을 위하여 활발히 연구되어야할 분야이다 3,4) . 이러한 조직공학을 이용한 재생의학을 위해서는 다양한 줄기세포 또는 미분화 전구세포가 필수적이며, 최근의 연구들은 주로 성체(adult) 줄기세포를 이용하고 있다 4) .
	자가 피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 혼합 스케폴드를 실험동물의 하악골 결손부에 이식 후 2주와 4주 후 골형성 정도를 관찰한 결과는 무엇인가?	또한, 본 연구에서는 피부유래 전구세포의 생체내 골화정도를 연구하기 위하여 자가 피부유래 전구세포와 DMB 및 fibrin glue 혼합 스케폴드를 실험동물의 하악골 결손부에 이식 후 2주와 4주 후 골형성 정도를 관찰 하였다. 그 결과 자가 피부유래 줄기세포를 이식한 군이 전구세포 없이 스케폴드만 이식한 대조군에 비해 월등히 많은 신생골 형성과 골형성 단백질인 osteocalcin의 강한 발현을 관찰 할 수 있었다. 향후 장기적인 경과 관찰이 필요할 수 있지만, 상기의 결과는 자가 피부유래 전구세포의 이식이 골이식의 대체방법으로 사용될 수 있음을 보여준다.
	피부조직을 이용한 성체줄기세포의 추출이 각광받는 이유는?	피부조직을 이용한 성체줄기세포의 추출은 비교적 최근에 연구되어진 분야이지만, 피부가 인체에서 가장 넓은 부위에 걸쳐 있고, 특별한 공여부 합병증 없이 쉽게 채취할 수 있으 며, 면역반응에 제한을 거의 받지 않는 자가 줄기세포의 가장 강력한 공여부라는 점에서 최근에 각광받고 있다 6) .

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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