[논문]상수리나무 잎 추출물의 항균 및 항산화 활성과 활성 물질 분리

박수남; 김소이; 안유진; 김은희

상수리나무 잎 추출물의 항균 및 항산화 활성과 활성 물질 분리
Antibacterial and Antioxidative Activities of Quercus acutissima Carruth Leaf Extracts and Isolation of Active Ingredients 원문보기

大韓化粧品學會誌 = Journal of the society of cosmetic scientists of Korea, v.35 no.2, 2009년, pp.159 - 169

박수남 (서울산업대학교 자연생명과학대학 정밀화학과) , 김소이 (서울산업대학교 자연생명과학대학 정밀화학과) , 안유진 (서울산업대학교 자연생명과학대학 정밀화학과) , 김은희 (서울산업대학교 자연생명과학대학 정밀화학과)

초록
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본 연구에서는 상수리나무 잎 추출물의 피부 상재균에 대한 항균작용과 항산화, 성분 분석 및 tyrosinase, elastase 저해 효과에 관한 조사를 수행하였다. 피부 상재균에 대한 항균활성 측정결과, S. aureus, P. acnes, P. ovale, E. coli에 대한 ethyl acetate 분획의 MIC는 각각 0.13 %, 0.25 %, 0.13 %, 0.25 %로 나타났으며, S. aureus, P. acnes, P. ovale에서 큰 항균활성을 나타내었다. 추출물의 free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성($FSC_{50}$) 은 50 % ethanol 추출물(12.13 ${\mu}g/mL$) < ethyl acetate 분획(7.07) < 당을 제거시킨 플라보노이드 aglycone 분획(6.20) 순으로 증가하였다. Luminol-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ 계에서 생성된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 상수리나무 잎 추출물의 총항산화능은 50 % ethanol 추출물($OSC_50$, 1.81 ${\mu}g/mL$) < ethyl acetate 분획(1.70) < aglycone 분획(0.70)순으로, aglycone 분획에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 상수리나무 잎 추출물 에 대하여 rose-bengal로 증감된 사람 적혈구의 광용혈에 대한 억제 효과를 측정하였다. 상수리나무 잎 추출물의 경우 농도 의존적(1 ${\sim}$ 25 ${\mu}g/mL$)으로 광용혈을 억제하였다. 특히 당을 제거시킨 aglycone 분획은 25 ${\mu}g/mL$ 농도에서 $[\tau}50$ 이 220.00 min으로 매우 큰 세포보호 효과를 나타내었다. 상수리나무 잎 추출물 중 ethyl acetate 분획의 당 제거 반응 후 얻어진 aglycone 분획은 TLC에서 3개의 띠로 분리되었고 상수리나무 잎 추출물의 ethyl acetate 분획의 TLC 크로마토그램은 4개의 띠(QA 1 ${\sim}$ QA 4)로 분리되었으며, 그 중 QA 1은 kaempferol, QA 2는 quercetin, 그리고 QA 3는 gallic acid로 확인되었다. Aglycone 분획의 tyrosinase 저해활성(IC50)은 65.67 ${\mu}g/mL$이었고, elastase 저해활성($IC_{50}$)은 24.50 ${\mu}g/mL$이었다. 이상의 결과들은 상수리나무 잎 추출물이 $^1O_2$ 혹은 다른 ROS를 소광시키거나 소거함으로써 그리고 ROS에 대항하여 세포막을 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리키며, 상수리나무 잎 성분 분석, aglycone 분획의 tyrosinase, elastase 저해활성 그리고 피부 상재균에 대한 항균작용으로부터 항산화, 항노화 및 항균성 화장품 소재로서의 응용 가능성을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, the antibacterial activity, antioxidative effects, inhibitory effects on tyrosinase, inhibitory effects on elastase, and components of Quercus acutissima Carruth leaf extracts were investigated. MIC values of ethyl acetate fraction from Q. acutissima Carruth leaf on P. acnes, S. aureus, P. ovale, and E. coli were 0.13 %, 0.25 %, 0.13 % and 0.25 %, respectively. The results showed that the antibacterial activity of the ethyl acetate fraction was the highest in the S. aureus, P. acnes, and P. ovale. The free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity ($FSC_{50}$) of extract/fractions of Q. acutissima Carruth. leaf was in the order: 50 % ethanol extract (12.13 ${\mu}g/mL$) < ethyl acetate fraction (7.07 ${\mu}g/mL$) < deglycosylated flavonoid aglycone fraction (6.20 ${\mu}g/mL$). Reactive oxygen species (ROS) scavenging activities ($OSC_{50}$) of some Q. acutissima Carruth leaf extracts on ROS generated in $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ system were investigated using the luminol-dependent chemiluminescence assay. The order of ROS scavenging activity was 50 % ethanol extract ($OSC_{50}$, 1.81 ${\mu}g/mL$) < ethyl acetate fraction (1.70 ${\mu}g/mL$) < deglycosylated flavonoid aglycone fraction (0.70 ${\mu}g/mL$). Deglycosylated flavonoid aglycone fraction showed the most prominent scavenging activity. The protective effects of extract/fractions of Q. acutissima Carruth leaf on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The Q. acutissima Carruth leaf extracts suppressed photohemolysis in a concentration dependent manner, particularly deglycosylated flavonoid aglycone fraction exhibited the most prominent celluar protective effect (${\tau}50$, 220.00 min at 25 ${\mu}g/mL$). Aglycone fractions obtained from the deglycosylation reaction of ethyl acetate fraction among the Q. acutissima Carruth leaf extracts, showed 3 bands (QA 1, QA2 and QA3) on TLC. TLC chromatogram of ethyl acetate fraction of Q. Carruth. leaf extract revealed 4 bands (QA 1 ${\sim}$ QA 4), Among them, kaempferol (QA 1), quercetin (QA 2), and gallic acid (QA 3) were identified. The inhibitory effect ($IC_{50}$) of aglycone fraction on tyrosinase was 65.7 ${\mu}g/mL$. The inhibitory effect ($IC_{50}$) of aglycone fraction on elastase was 24.50 ${\mu}g/mL$. These results indicate that extract/fractions of Q. acutissima Carruth. can functionized as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by scavenging $^1O_2$ and other ROS, and protect cellular membranes against ROS. Extract/fractions of Q. acutissima Corruth can be applicable to new functional cosmetics for antioxidant, antiaging, antibacterial activity.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

, ⋅OH 등)가 생성되는 계에서의 이들 ROS에 대한 총항산화능에 관한 연구는 아직 되어 있지 않다. 따라서 본 연구에서는 화장품 원료로서 사용 가능한 상수리나무 잎 추출물을 제조하여 이들 추출물(혹은 분획)의 항균 활성과 ¹O₂으로 유도된 세포손상에 대한 보호활성과 free radical 소거활성, Fe³⁺-EDTA/H₂O₂계에서 생성된 활성산소에 대한 총항산화능, 미백에서 중요한 역할을 하는 tyrosinase 활성 저해 효과를 측정함으로써 항산화, 항노화 및 항균성 화장품 소재로서의 개발 가능성이 있는지를 검토하였다.

제안 방법

성분 확인은 이미 보고된 분광학적 자료, 플라보노이드 표준물질의 R_f 값과 자외선 및 발색법을 이용한 분리된 띠의 색상 등으로 확인하였다. HPLC 분석은 2% acetic acid 수용액과 0.5 % acetic acid를 함유한 50% acetonitrile 수용액을 기울기 용리법으로 분리하였고, 이 때 HPLC 분리조건은 Table 1에 나타내었다.
1 mL 접종하였다. P. acnes는 37 ℃에서 72 h 후에, S. aureus와 E. coli는 37 ℃에서 24 h 후에, P. ovale는 30 ℃에서 48 h 후에 육안으로 관찰하였을 때, 각각의 균들이 증식되지 않는 농도를 MIC로 결정하였다.
45 µm)를 이용하여 여과하고 이 여액을 TLC 및 HPLC 분석을 위한 시료로 이용하였다. TLC 분석에서 전개용매는 ethyl acetate 분획의 경우 ethyl acetate : acetic acid : formic acid : water = 100 : 11 :11 : 10 (v/v)을, aglycone 분획은 chloroform : acetone : formic acid = 50 : 16.5 : 8.5 (v/v)를 사용하여 분석하였다. 성분 확인은 이미 보고된 분광학적 자료, 플라보노이드 표준물질의 R_f 값과 자외선 및 발색법을 이용한 분리된 띠의 색상 등으로 확인하였다.
건조된 상수리나무 잎 500 g을 잘게 자른 후 50 % ethanol 5 L를 이용하여 일주일 동안 침적시킨 후 여과하였다. 이 여액을 감압 건조하여 파우더를 얻고 이를 실험에 사용하였다.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm ×20 cm × 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적혈구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한 후 15 min 동안 광조사 하였다.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm ×20 cm × 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적혈구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한 후 15 min 동안 광조사 하였다. 광조사가 끝난 후 암반응 (post-incubation) 시간에 따른 적혈구의 파괴정도를 15 min 간격으로 700 nm에서 투광도(transmittance, %)로부터 구하였다. 이 파장에서 적혈구 현탁액의 투광도의 증가는 적혈구의 용혈정도에 비례한다.
2 mM DPPH 용액 1 mL에 ethanol 1 mL를 첨가하고 여러 농도의 추출물 1 mL을 첨가하여 섞은 다음 실온에서 10 min 동안 방치 후 spectrophotometer로 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 활성의 크기는 시료를 넣지 않은 경우를 대조군(control)으로 하고 시료를 넣은 것을 실험군(experiment)으로 하여 다음 식에 의해 DPPH의 활성 저해율을 나타내었다. 소거 활성은 DPPH의 농도가 50 % 감소되는데 필요한 시료의 농도(free radical scavenging activity, FSC₅₀, µg/mL)로서 표기하였다.
대조군(control)은 시료대신 시료용액으로 사용된 용매를 100 µL 첨가하였다.
대조군(control)은 시료용액 대신에 증류수를 넣고, 공시험(blank)은 시료군과 조건이 동일하나 H2O2와 FeCl3⋅6H2O를 첨가하지 않은 것으로 하였다.
라벤더 추출물의 광용혈에 미치는 효과는 post-incubation 시간과 용혈정도로 구성된 그래프로부터 적혈구의 50 %가 용혈되는 시간인 τ50을 구하여 비교하였다.
멜라닌은 L-tyrosine을 기질로 하여 tyrosinase가 핵심 효소로 작용하여 생성되기 때문에 tyrosinase의 활성을 저해하는 능력을 측정하였다. L-tyrosine (0.
Ethyl acetate 분획은 플라보노이드를 많이 함유하고 있으며, aglycone 분획에는 ethyl acetate 분획 플라보노이드에서 당을 제거한 플라보노이드가 존재한다. 본 연구에서는 50 % ethanol 추출물, ethyl acetate 분획, aglycone 분획을 실험에 사용하였다.
상수리나무 잎 추출물 중 ethyl acetate 분획과 aglycone 분획을 100 % ethanol에 녹인 후, syringe filter (Milopore 0.45 µm)를 이용하여 여과하고 이 여액을 TLC 및 HPLC 분석을 위한 시료로 이용하였다.
5 (v/v)를 사용하여 분석하였다. 성분 확인은 이미 보고된 분광학적 자료, 플라보노이드 표준물질의 R_f 값과 자외선 및 발색법을 이용한 분리된 띠의 색상 등으로 확인하였다. HPLC 분석은 2% acetic acid 수용액과 0.
최소억제농도(MIC)는 한천배지 확산법을 이용하여 다음과 같이 측정하였다. 즉, 각각의 분획물들을 2 mL씩 함유한 배지 20 mL를 petri dish에 주입하였고, 시험균을 평판 배지 위에 0.1 mL 접종하였다. P.
추출물을 농도별로 각각 50 µL씩 첨가하고 암소에서 30 min 동안 pre-incubation 시킨 후, 광증감제 rose-bengal (12 µM) 0.5 mL를 가하고 파라필름(Whatman laboratory sealing film, UK)으로 입구를 막은 후 15 min 동안 광조사 하였다.

대상 데이터

(+)-α-Tocopherol (1,000 IU vitamin E/g), L-as-corbic acid, EDTA, luminol, heparin, 증감제로 사용된 rose-bengal, free radical 소거활성에 사용한 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical은 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용하였다.
Ethyl acetate 분획으로부터 aglycone 제조: ethyl acetate 분획에서 얻은 파우더 일부는 산 가수분해 반응을 이용하여 당을 제거시킨 후 얻은 aglycone 파우더를 실험에 사용하였다. 실험 방법은 ethyl acetate 가용분 일정량에 H₂SO₄ 및 acetone 용액을 넣고, 4 h 동안 중탕 가열하면서 환류⋅냉각시킨다.
UV-visible spectrophotometer는 Varian (Australia) 의 Cary 50, 적혈구 광용혈에 사용한 Spectronic 20D는 Milton Roy Co. (USA) 제품, 화학발광기는 Berthold (Germany)의 6-channel LB9505 LT를, pH meter는 Istek (Korea) 제품을 사용하였다.
완충용액제조에 사용된 Na₂HPO₄⋅ 12H₂O, NaH₂PO₄⋅2H₂O, NaCl, trizma base, HCl 그리고 ethanol (EtOH), methanol (MeOH), ethyl acetate (EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다. 기질로 사용된 L-tyrosine, N-succinyl-(Ala)₃-p-nitroanilide, 효소로 사용된 tyroinase (12.7 mg solid, 3,960 units/mg solid), elastase (0.35 mg protein/mL, 7.8 units/mg protein)는 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용하였다. 플라보노이드의 분석에 사용한 thin layer chromatography (TLC)는 aluminum sheet silica gel 60 F₂₅₄ (0.
기타 FeCl3⋅6H2O는 Junsei Chemical Co. (Japan) 제품을, H2O2는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea) 제품을 사용하였다.
coli는 Mueller- Hinton 배지(Merck, Germany)를 사용하였으며 균을 접종한 후 37 ℃ incubator에서 24 h 배양하면서 사용하였다. 또한 비듬균인 P. ovale는 Pityrosporum 배지(Malt extract agar: 6 %, ox-bile: 2 %, tween 40: 1 %, glycerol mono-oleate: 0.25 %)를 사용하였으며 균을 접종한 뒤 30 ℃에서 24 h 동안 배양하여 사용하였다.
본 실험에 사용된 균주는 여드름의 원인균인 Propionibacterium acnes (P. acnes) ATCC6919와 비듬균인 Pityrosporum ovale (P. ovale) ATCC12078, 호기성 그람 양성 균주인 Staphylococcus aureus (S. aureus) ATCC6538, 호기성 그람 음성 균주인 Escherichia coli (E. coli) ATCC23736 는 한국 미생물 보존센터에서 분양 받아 사용하였다.
본 실험에서 사용한 Fe3+-EDTA/H2O2계는 각종 ROS (O2⋅- , ⋅ OH 그리고 H2O2)를 생성시킨다.
2 mm)로 Merck (USA)에서 구입하였다. 비교물질로 사용한 quercetin, kaempferol, gallic acid, caffeic acid는 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하였다. 실험에 사용한 상수리나무 잎은 2008년 8월 서울산업대학교 뒷산에서 채취하여 이물질을 제거하고 건조 후 사용하였다.
실험에 사용된 적혈구 현탁액은 700 nm에서 O.D.가 0.6이었으며 이때 적혈구 수는 1.5 × 107 cells/mL이었다.
(USA)에서 구입하였다. 실험에 사용한 상수리나무 잎은 2008년 8월 서울산업대학교 뒷산에서 채취하여 이물질을 제거하고 건조 후 사용하였다.
완충용액제조에 사용된 Na2HPO4 ⋅ 12H2O, NaH2PO4⋅2H2O, NaCl, trizma base, HCl 그리고 ethanol (EtOH), methanol (MeOH), ethyl acetate (EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
적혈구는 건강한 성인 남녀로부터 얻었다. 채혈 즉시 heparin이 첨가된 시험관에 넣은 후, 3,000 rpm으로 5 min 동안 원심분리하여 적혈구와 혈장을 분리하고, 분리한 적혈구는 0.
acnes는 4 ℃에서 보관하면서 실험 72 h 전에 활성화 시켰으며, 균을 배양 배지에 접종한 후 anaerobic jar에서 Gaspack system (Merck Anaerocult^Ⓡ Gaspack system, Germany)을 이용하여 밀봉하여 37 ℃에서 72 h 동안 혐기성 배양하였다. 호기성 균주인 S. aureus와 E. coli는 Mueller- Hinton 배지(Merck, Germany)를 사용하였으며 균을 접종한 후 37 ℃ incubator에서 24 h 배양하면서 사용하였다. 또한 비듬균인 P.

데이터처리

모든 실험은 3회 반복하였고 통계분석은 5 % 유의수준에서 Student’s t-test를 행하였다.
Rose-bengal을 첨가하고 광조사를 안 했을 경우와 rose-bengal을 첨가하지 않고 광조사만 했을 경우는 모두 암반응 120 min까지는 용혈이 거의 일어나지 않았다. 모든 실험은 4회 반복하여 평균하였다. 상대적인 광용혈 보호 효과는 아래와 같이 나타내었다.

이론/모형

Free radical은 노화, 특히 피부노화의 원인 물질로 간주되고 있다. 상수리나무 잎 추출물에 대한 이러한 free radical 소거활성 측정은 DPPH를 이용하였다. 실험방법은 methanol에 용해시킨 0.
최소억제농도(MIC)는 한천배지 확산법을 이용하여 다음과 같이 측정하였다. 즉, 각각의 분획물들을 2 mL씩 함유한 배지 20 mL를 petri dish에 주입하였고, 시험균을 평판 배지 위에 0.

성능/효과

1) 상수리나무 잎 각각 추출 수율은 50 % ethanol 추출물은 24.50 %, ethyl acetate 분획의 경우 1.20 %, ethyl acetate 분획에서 당 제거시킨 aglycone 분획은 0.08% 이였다.
2) 상수리나무 잎의 항균활성 측정결과, P. ovale, S. aureus, P. acnes, E. coli에 대한 ethyl acetate 분획의 MIC는 각각 0.13 %, 0.13 %, 0.25 %, 0.25 %로 나타났으며, P. ovale, S. aureus, P. acnes에서 큰 황균활성을 나타내었으며, 천연 방부제, 항균제로서 역할이 충분히 기대된다.
3) 상수리나무 잎 추출물의 free radical 소거능력 (FSC50)은 50 % ethanol 추출물 12.13 µg/mL, ethyl acetate 분획 7.07 µg/mL, ethyl acetate 분획에서 당 제거시킨 aglycone 분획은 6.20 µg/mL로 나타났다.
4) 상수리나무 잎 추출물의 활성산소 소거활성(OSC50) 은 50 % ethanol 추출물 1.81 µg/mL, ethyl acetate 분획 1.70 µg/mL, ethyl acetate 분획의 당 제거한 aglycone 분획은 0.70 µg/mL로 aglycone 추출물이 가장 큰 활성을 나타냈다.
5) 1O2으로 유도된 적혈구의 광용혈 현상에 있어서, 상수리나무 잎 추출물은 농도 범위(1 ∼ 25 µg/mL)에서 농도-의존적으로 광용혈을 억제하였다.
6) Tyrosinase 저해활성(IC50)은 상수리나무 잎 추출물 중 aglycone 분획은 65.67 µg/mL로 기준 물질인 arbutin (226.88 µg/mL) 보다 큰 활성을 나타내었고, elastase 저해활성(IC50)은 aglycone 분획은 52.00 µg/mL로 나타났다.
7) Elastase 저해활성(IC50)은 ethyl acetate 분획과 aglycone 분획에서 각각 22.25 µg/mL, 24.50 µg/mL로나타났으며, 피부 탈력 및 주름생성에 관여하는 elastase 를 충분히 저해하는 것으로 확인되었다.
8) 상수리나무 잎 추출물 중 ethyl acetate 분획의 TLC는 4개의 띠(QA 1 ∼ QA 4)로 분리되었고, 그 중에서 Rf 0.69인 QA 2 (quercetin)의 농도가 가장 진한 것으로 나타났다.
9) Aglycone 분획에 대한 HPLC 크로마토그램은 3개의 피이크를 나타냈고, 그 용리 순서는 gallic acid, quercetin, kaempferol이었으며 조성비는 gallic acid 32.27 %, quercetin 45.15 %, kaempferol 22.58 %로 quercetin의 함량이 가장 많았다.
Ethyl acetate 분획은 50 % ethanol로 추출한 것을 n-hexane으로 비극성 물질을 제거한 뒤 ethyl acetate 분획을 추출하여 감압⋅농축하였고 수득률이 약 1.20 %이었으며, ethyl acetate 분획을 산 가수분해 시켜서 당을 제거한 aglycone의 수득률은 0.08 %였다.
coli에 대해서는 비교물질에 비하여 낮은 활성을 나타내었다. 그러나 S. aureus에 대한 상수리나무 잎 분획물 중 50 % extract 추출물의 MIC는 0.25 %로 MP (MIC: 0.25 %)와 비교하여 동일한 항균활성을 나타내었고, ethyl acetate 분획의 경우 MIC가 0.13 %로 MP (MIC: 0.25 %), quercetin (0.15 %)과 비교하여 큰 항균활성을 나타내고 있음을 알 수 있다. 현재 사용되고 있는 방부제나 항균제가 평균적으로 0.
대조군(control)은 τ50이 31 min으로 오차범위 ± 1 min 이내로 모든 경우의 실험에서 재현성이 양호하게 나타났다.
따라서 세포보호 효과는 25 µg/mL에서 50 % ethanol 추출물(99.52) < ethyl acetate 분획(101.00) < aglycone 분획(220.00) 순으로 나타났고, 이는 지용성 항산화제이며 비타민 E 성분인 (+)-α-tocopherol과 수용성 항산화제인 L-ascorbic acid에 비해 매우 큰 세포보호 활성을 보여주었다.
70 µg/mL로 나타났다. 따라서 총항산화능은 당을 제거시킨 aglycone 분획이 50% ethanol 추출물 및 ethyl acetate 추출물보다 활성산소 소거활성이 큼을 알 수 있다. 당을 제거시킨 aglycone 분획은 비교물질로 사용한 L-ascorbic acid (1.
비듬균인 P. ovale에 대한 상수리나무 잎 분획물 중 50% extract 추출물의 MIC는 0.25 %이고, ethyl acetate분획의 MIC는 0.13 %로 나타났다. ethyl acetate 분획은 화장품에서 방부제로 사용하고 있는 methyl paraben (MP, 0.
69인 QA 2 (quercetin)의 농도가 가장 진한 것으로 나타났다. 상수리나무 잎 추출물 중 ethyl acetate 분획에 대하여 당 제거 실험 후 얻어진 aglycone 분획의 TLC는 3개의 띠를 나타내었고, 이는 ethyl acetate 분획의 QA 1, QA 2, QA 3과 동일하였다. 각 띠는 kaempferol, quercetin, gallic acid로 확인되었다.
상수리나무 잎 추출물 중 ethyl acetate 분획에서 당을 제거한 aglycone 분획은 tyrosinase 저해활성(IC50)이 65.67 µg/mL, ethyl acetate 층은 117.67 µg/mL로 aglycone 분획이 ethyl acetate 층에 비해 훨씬 큰 저해활성을 보였다.
15%)과 비교하였을 때 비슷한 항균활성을 나타내었다. 여드름균인 P. acnes에 대한 상수리나무 잎 분획물 중 50% extract 추출물의 MIC는 0.5 %, ethyl acetate 분획은 0.25 %로 나타났다. ethyl acetate 분획의 경우 MP (0.
이와 함께 UV/Vis 흡수 스펙트럼과 플라보노이드 발색법 등의 분광학적 데이터 들과 표준물질을 이용하여 확인하여 확인한 결과 QA 1는 kaempferol, QA 2는 quercetin, QA 3는 gallic acid로 확인되었다. 이 중 QA 1 (R_f 0.85)과 QA 2 (R_f 0.69)가 자외선 및 플라보노이드 발색법으로 확인한 결과 농도가 가장 진한 것으로 나타났다.
일반적으로 세균의 세포막을 파괴하여 세균을 사멸시키는 기작을 응용하여 화장품에 응용되고 있는 방부제나 항균제들은 직접적으로 인체 피부와 접촉하여 반응하게 되므로 인체 피부에 영향을 주지 않는 가능한 한 최소량을 사용하여 최대의 효과를 얻을 수 있는 물질을 선택 사용하는 것이 중요하다. 이런 관점에서 살펴보면 본 실험에 대조군으로 사용된 호기성 균주인 E. coli와 S. aureus에 대한 상수리나무 잎의 항균활성 측정 결과, E. coli에 대해서는 비교물질에 비하여 낮은 활성을 나타내었다. 그러나 S.
Figure 6에 있는 TLC 크로마토그램에서 분리된 띠를 각각 긁어서 추출⋅여과하고 용매를 감압⋅건조시켜 얻은 띠별 파우더를 당 제거반응 시킨 후 ethanol 용액으로 만들고 이들을 HPLC 분석에 사용함으로써 Figure 6에 있는 각 띠들이 어떤 플라보노이드인가를 알아보고자 하였다. 이와 함께 UV/Vis 흡수 스펙트럼과 플라보노이드 발색법 등의 분광학적 데이터 들과 표준물질을 이용하여 확인하여 확인한 결과 QA 1는 kaempferol, QA 2는 quercetin, QA 3는 gallic acid로 확인되었다. 이 중 QA 1 (R_f 0.
현재 사용되고 있는 방부제나 항균제가 평균적으로 0.2 ∼ 0.4 % 정도의 농도 범위 내에서 사용하고 있는 것을 감안하면 상수리나무 잎 분획물은 훨씬 낮은 농도에서도 천연 방부제, 항균제로서 역할이 충분히 기대된다.

후속연구

3 %)과 비교하였을 경우 큰 항여드름균 활성을 나타내었다. 이러한 결과는 상수리나무 잎 분획물이 여드름에 유효한 소재 및 화장품 개발에 응용가능성이 높음을 시사한다(Table 2). 여드름 균처럼 특정 세균의 기능이나 생리활동을 약화 또는 억제시키거나 세균자체를 사멸시키기 위한 목적의 항균제 이외에도, 화장품에서는 제품의 변질이나 오염을 막기 위해 다양한 종류의 방부제나 항균제가 사용되고 있다.
이상의 결과들로부터 상수리나무 잎 추출물의 피부 상재균에 대한 항균활성과 항산화 작용 및 성분 분석 그리고 ethyl acetate 분획의 당 제거 실험 후 얻어진 aglycone 분획의 tyrosinase, elastase의 저해활성으로부터 항균성, 항산화 및 항노화 화장품 소재로서의 응용 가능성을 시사한다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	피부의 대표적인 피부질환이 무엇인가?	한편, 피부는 피부 상재균에 의해서 많은 피부질환이 발생되며, 여드름균, 비듬균 등이 대표적이다[7]. 여드름균은 일반적으로 호르몬과 외부적 영향에 의해 피지가 모낭관 밖으로 배출되지 못하여 모공이 막힌 경우 증식하게 되며, 이는 여드름의 원인이 된다[8].
	활성산소종은 무엇을 포함하는가?	많은 양의 자외선에 노출되면 피부에는 높은 농도의 활성산소종(ROS)이 생성되며 이어서 항산화 방어계는 붕괴되고, 결과적으로 피부에 산화적 스트레스에 의한 세포 손상을 야기시키며, 노화를 가속화시킨다[1-4]. 이러한 활성산소종은 반응성이 매우 큰 1O2 및 ⋅ OH를 비롯하여 O2⋅- , H2O2, ROO⋅, RO⋅, ROOH 및 HOCl 등을 포함한다[5,6].
	상수리나무의 주요성분으로는 무엇이 보고되어 있는가?	또한 상수리나무는 염증, 황달, 염증에도 사용되어 왔고, 항균작용이 있다고 보고되어 있다[18-20]. 주요 성분으로는 tannin, gallic acid, (+)-catechin, (+)-gallocatechin, 3-friedelanon, β-sitosterol, β-carotene 등이 보고되어 있다[18,21,22].

참고문헌 (22)

S. N. Park, Skin aging and antioxidants, J. Soc. Cosmet. Scientists Korea, 29(1), 75 (2003)
B. A. Jukiewicz, D. L. Bissett, and G. R. Buettner, Effect of topically applied tocopherol on ultraviolet radiation-mediated free radical damage in skin, J. Invest. Dermatol., 104, 484 (1995)

상세보기
D. L. Black, R. Chatterjee, and D. P. Hannon, Chronic ultraviolet radiation-induced increase in skin iron and the photoprotective effect of topically applied iron chelators, Photochemistry and Photobiology, 54(2), 215 (2008)

상세보기
M. Kubo and H. Matsuda, Development studies of cuticle and medicinal drugs from natural sources on melanin biosynthesis, Fragrance J., 8, 48 (1995)
S. N. Park, Protective effect of isoflavone, genistein from soybean on singlet oxygen induced photohemolysis of human erythrocytes, Korean J. Food Sci. Technol., 35(3), 510 (2003)
S. N. Park, Antioxidative properties of baicalein, component from Scutellaria baicalensis Georgi and its application to cosmetics (I), J. Korean ind. Eng. Chem., 14(5), 657 (2003)

상세보기
Y. M. Ha, B. B. Lee, H. J. Bae, K. M. Je, S. R. Kim, J. S. Choi, and I. S. Choi, Anti-microbial activity of grapefruit seed extract and processed sulfur solution against human skin pathogens, J. Life Science, 19(1), 94 (2009)

원문보기 상세보기
R. R. Marples, The microflora of the face and acne lesions, J. Invest. Dermatol., 62, 326 (1974)

상세보기
C. M. Gemmer, Y. M. DeAngelis, B. Theelen, T. Boekhout, and T. L. Dawson, Fast, non-invasive method for molecular detection and differentiation of Malassezia yeast species on human skin and application of the method to dandruff microbiology, J. Clin. Microbiol., 40, 3350 (2002)

상세보기
C. K. Zhoh, B. N. Kim, S. H. Hong, and C. G. Han, The antimicrobial effects of natural aromas for substitution of parabens, J. Soc. Cosmet. Scientists Korea, 28(1), 166 (2002)
Korea Dermatological Association, Dermatological Science, 325, Yeomungak, Seoul (2001)
S. S. Ham, D. H. Oh, J. K. Hong, and J. H. Lee, Antimutagenic effects of juices from edible Korean wild herbs, J. Food Sci. Nutr., 2, 155 (1997)

원문보기 상세보기
S. Jun, K. Goto, F. Nanjo, S. Kawai, and K. Murata, Antifungal activity of plant extract against Arthrinium sacchari and Chaetomium funicola, J. Biosci Bioeng., 90, 442 (2000)

상세보기
S. T. Kim, K. T. Lee, and T. J. Min, Caracteristics of antimicrobial activities for the human pathogenic microorganism by extracts from Korean mushrooms, Kor. J. Mycol., 31, 67 (2003)

원문보기 상세보기
K. S. Lee, J. C. Lee, K. H. Han, and M. J. Oh, Antimicrobial acivities of extract of Perilla frutescens Briton var. acuta Kudo on food spoilage or foodborne disease microorganism, Kor. Soc. Food Preserv., 6, 239 (1999)
M. H. Oh and H. J. Whang, Chemical composition of server herb plant, Kor. J. Food Sci. Techol., 35, 1 (2003)
D. H. Shin, J. S. Cho, and S. T. Jung, Study on antioxidant effects of acorn (Quercus acutissima Carruth) components, Korean J. Oil Chemists' Society, 10(1), 93 (1993)
J. Y. Moon and S. H. Cho, Studies on the distribution of polyphenols in the parts of Quercus acutissima, Analytical science & technology, 11(6), 478 (1998)

원문보기 상세보기
K. W. Kim, J. K. Baek, Y. W. Tang, E. J. Kum, Y. S. Kwon, H. J. Kim, and H. Y. Sohn, Screening of antibacterial agent against Streptococcus mutans from natural and medicinal plants, J. Life Science, 15(5), 72 (2005)

원문보기 상세보기
J. W. Yoon, M. Y. Yoo, B. G. Park, M. G. Lee, and D. H. Oh, Antimicrobial effect of ethanol extracts of Quercus spp. against foodbome pathogens, J. Korean Soc. Food Sci. Nutrition, 33(3), 463 (2004)

원문보기 상세보기
J. K. Kim, S. G. Lee, Y. H. Ham, and Y. S. Bae, Extractives from the barks of Quercus acutissima and Quercus variabills, J. Korea Forestry Energy, 21(1), 41 (2002)
S. M. Guo, Studies on extraction process of $\beta$ -carotene in leaves of Quercus acutissima, Food and machinery, 22(4), 42 (2006)

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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