[논문]방광(膀胱)과 위중(委中)의 중추신경로와의 연계성에 관한 연구

이창현; 김호; 이광규; 정한솔

방광(膀胱)과 위중(委中)의 중추신경로와의 연계성에 관한 연구
Studies on the Relationship of the Central Neural Pathways to the Urinary Bladder and Wijung($BL_{40}$) 원문보기

동의생리병리학회지 = Journal of physiology & pathology in Korean Medicine, v.23 no.4, 2009년, pp.805 - 817

이창현 (우석대학교 한의과대학 해부학교실) , 김호 (우석대학교 한의과대학 병리학교실) , 이광규 (우석대학교 한의과대학 병리학교실) , 정한솔 (우석대학교 한의과대학 병리학교실)

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This study was to investigate central localization of neurons projecting to the urinary bladder and urinary bladder-related acupoints(Wijung, $BL_{40}$) and neurons of immunoreactive to hormones and hormone receptors regulating urinary bladder function by using peudorabies virus(PRV). In this experiment, Bartha's strain of pseudorabies virus was used in rats to trace central localization of urinary bladder-related neurons and urinary bladder-related acupoints($BL_{40}$) which can regulate urinary system. PRV was injected into the urinary bladder and acupoints($BL_{40}$) related urinary system. After six days survival of rats, mainly common labeled neurons projecting to the urinary bladder and urinary bladder-related acupoints were identified in spinal cord, medulla, pons and diencephalon by PRV immunohistochemical staining method. First-order PRV labeled neurons projecting to urinary bladder and urinary bladder-related acupoints were found in the cervical, thoracic, lumbar and sacral spinal cord. Commonly labeled preganglionic neurons were labeled in the lumbosacral spinal cord and thoracic spinal cord. They were found in the lateral horn area(sacral parasympathetic nucleus and intermediolateral nucleus), lamina V-X, intermediomedial nucleus and dorsal column area. The area of sensory neurons projecting to urinary bladder and Wijung($BL_{40}$) was L5-S2 spinal ganglia and T12-L1 spinal ganglia, respectively. In the brainstem, the neurons were labeled most evidently and consistently in the nucleus of tractus solitarius, area postrema, dorsal motor nucleus of vagus nerve, reticular nucleus, raphe nuclei(obscurus, magnus and pallidus), C3 adrenalin cells, parapyramidal area(lateral paragigantocellular nucleus), locus coeruleus, subcoeruleus nucleus, A5 cell group, Barrington's nucleus and periaqueductal gray matter. In the diencephalon, PRV labeled neurons were marked mostly in the paraventricular nucleus and a few ones were in the lateral hypothalamic nucleus, posterior hypothalamic nucleus, ventromedial hypothalamic nucleus, arcuate nucleus, median eminence, perifornical nucleus, periventricular nucleus and suprachiasmatic nucleus. In cerebral cortex, PRV labeled neurons were marked mostly in the frontal cortex, 1,2 area, hind limb area, agranular insular cortex. Immunoreactive neurons to Corticotropin releasiing factor(CRF), Corticotropin releasiing factor-receptor(CRF-R), c-fos and serotonin were a part of labeled areas among the virus-labeled neurons of urinary bladder and Wijung($BL_{40}$). The commonly labeled areas were nucleus tractus solitarius, area postrema, reticular nucleus, raphe nuclei(obscurus, magnus and pallidus), locus coeruleus, A5 cell group, Barrington,s nucleus, arcuate nucleus, paraventricular nucleus, frontal cortex 1, 2 area, hind limb, and perirhinal(agranular insular) cortex. These results suggest that overlapped CNS locations are related with autonomic nuclei which regulate the functions of urinary bladder-relate organs and it was revealed by tracing PRV labeled neurons projecting urinary bladder and urinary bladder-related acupoints. These commonly labeled areas often overlap with the neurons connected with hormones and hormone receptors related to urination.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

그래서 본 연구에서는 신경추적자를 이용하여 내장(膀胱)-경혈(委中)-신경(中樞神經系 영역)과의 관계를 신경해부학적으로 밝혀 종래의 불확실했던 경혈을 서양의학의 개념인 신경로로 재구성하고, 경혈의 신경로가 뇌척수내 자율신경중추와 일치하는지를 관찰하고자 하였으며, 또한 표지영역내 방광의 기능과 관련된 호르몬의 수용체와 일치하는지를 관찰함으로써 한의학의 침구 치료기전이 신경 또는 호르몬 수용체와 유관한지를 신경해부학적으로 밝히고자 하였다.
그래서 본 연구에서는 연접을 통과하는 PRV를 신경추적자로서 膀胱과 膀胱經의 合穴인 委中에 주입한 후 膀胱의 기능을 조절하는 中樞神經系의 영역을 관찰하고 영역을 비교하여, 배뇨와 관련된 호르몬 및 그 수용체의 발현을 관찰함으로써 한의학 핵심이론인 경락이론(내장(膀胱)-경혈(委中))과 중추신경로의 신경전달현상과의 관련성이 있는지 관찰하였다. 또한 경혈의 신경로가 뇌척수내 자율신경중추와 일치하는지를 관찰하였고, 아울러 표지영역내 방광의 기능과 관련된 호르몬의 수용체와 일치하는지 관찰함으로써 한의학의 침구 치료기전이 자율신경과 신경계 호르몬 발현과 연관이 있는지를 신경해부학적으로 밝히고자 연구한 바 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
따라서 방광을 지배하는 신경로 내에서 신경전달물질중의 하나인 corticotropin releasing factor(CRF), CRF-receptor의 존재를 확인하고, 위중의 신경로 내에서도 신경전달물질중의 하나인 corticotropin releasing fator와 CRF-binding protein의 존재를 확인하여 스트레스로 인한 배뇨장애와 委中의 침술치료와의 상호 관련성을 살펴보았다.
그래서 본 연구에서는 연접을 통과하는 PRV를 신경추적자로서 膀胱과 膀胱經의 合穴인 委中에 주입한 후 膀胱의 기능을 조절하는 中樞神經系의 영역을 관찰하고 영역을 비교하여, 배뇨와 관련된 호르몬 및 그 수용체의 발현을 관찰함으로써 한의학 핵심이론인 경락이론(내장(膀胱)-경혈(委中))과 중추신경로의 신경전달현상과의 관련성이 있는지 관찰하였다. 또한 경혈의 신경로가 뇌척수내 자율신경중추와 일치하는지를 관찰하였고, 아울러 표지영역내 방광의 기능과 관련된 호르몬의 수용체와 일치하는지 관찰함으로써 한의학의 침구 치료기전이 자율신경과 신경계 호르몬 발현과 연관이 있는지를 신경해부학적으로 밝히고자 연구한 바 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

제안 방법

PRV-Ba 염색이 끝난 조직들은 현미경을 이용하여 염색부위를 조사하여 Paxinos & Watson의 atlas12)를 참조하여 지도화 하였고, 일부 호르몬 또는 수용체에 대한 면역 염색 결과는 지도화한 결과를 참조하여 비교 관찰하였다.
PRV-Ba 주입 후 약 96시간의 생존시간을 준 다음 각각의 흰쥐들은 다시 동일 마취액으로 마취시킨 후 흉강을 열고 심장을 통하여 관류고정을 실시하였다. 관류고정은 먼저 0.
PRV-Ba로 면역염색한 상태의 일부 절편을 0.1 M PB로 수세한 후 배뇨와 관련된 호르몬 또는 수용체에 대한 1차 항체를 이용하여 면역염색을 시행하였다. 1차항체는 rabbit polyclonal antibody인 CRF(Santa cruz Biotec.
PRV-Ba에 대한 일차 항체는 이 virus strain을 acetone으로 불활성화 시킨 것을 각각 토끼 또는 생쥐에 주사하여 얻은 rabbit anti-PRV-Ba 또는 mouse anti-PRV-Ba를 이용하여 면역조직화학 염색법을 시행하였다. 뇌척수 절편들의 염색은 1 :10,000(rabbit antibody) 또는 1 : 2,000(mouse antibody)으로 희석한 1차 항체에 조직절편들을 담가 실온에서 24시간 반응시켰다.
그 후 다시 0.1 M PB로 水洗하고 나서 30 ㎎의 3-3' diaminobenzidine을 150 ㎖의 0.1 M PB에 녹인 용액에 nikel chloride를 200 ㎎을 첨가하여 5분간 반응시킨후 과산화수소를 0.005% 농도로 첨가하여 청색의 발색반응을 약 5분간 시행하였다.
3% Triton X-100(Sigma, USA)이 섞여 있는 것을 사용하였다. 그 후 조직절편들은 실온에서 15분간 2회 0.1 M PB로 세척하였고 그 후 2차 항체인 1:200으로 희석된 biotinylated anti-rabbit IgG(Vector Laboratories, Inc. 제)에 실온에서 1시간 가량 반응 시킨 후 PRV-Ba염색과 동일하게 시행한 후 광학현미경으로 관찰하였다.
1 M PB로 여러 차례 수세하고 gelatin이 입혀진 슬라이드위에 차례대로 얹어 건조시켰다. 그 후 통상적인 방법에 따라 탈수와 투명화를 거친 후 permount로 봉입하여 광학현미경으로 관찰하였다.
PRV-Ba에 대한 일차 항체는 이 virus strain을 acetone으로 불활성화 시킨 것을 각각 토끼 또는 생쥐에 주사하여 얻은 rabbit anti-PRV-Ba 또는 mouse anti-PRV-Ba를 이용하여 면역조직화학 염색법을 시행하였다. 뇌척수 절편들의 염색은 1 :10,000(rabbit antibody) 또는 1 : 2,000(mouse antibody)으로 희석한 1차 항체에 조직절편들을 담가 실온에서 24시간 반응시켰다. 이때 1차 항체의 희석은 0.
1 M PB로 세척하고 20% phosphate buffered sucrose 용액에 12시간 담가 보관하였다. 보관된 뇌척수 조직들은 동결절편기 (Leica, Jung CM3000, Germany)를 이용하여 약 35 ㎛ 두께의 관상연속절편을 만들어 6-well plate에 순서대로 보관하였고, 척수는 횡단연속절편을 만들어 역시 6-well plate에 순서대로 보관한 후 free floating method로 면역조직화학 염색을 시행하였다.
본 실험의 공통된 척수 표지영역인 중간외측핵은 일차 감각 신경섬유를 받아들여 대측의 층판 II영역의 사이신경세포 (internuncial neuron)를 경유하여 중간외측핵, 중심관 주위 및천층의 등쪽뿔 층판에 투사하며⁵⁰⁾, 흰쥐에서 이 핵이 위치한 층판 VII의 내측영역은 흰쥐의 근육에서 투사하는 일차감각신경섬유가 종지하는 부위이다⁵¹⁾. 또한 척수의 층판 X에 있는 신경세포는 PRV에 매우 민감하며, T10-S2의 척수분절에서 관찰되는데 이 영역은 내장⁵²⁾과 체벽⁵³⁾에서 온 감각신경을 받는다고 하여 본 실험의 내장인 膀胱과, 膀胱과 관련된 체벽의 經穴인 委中에서 투사되어 공통적으로 표지된 층판 X와 일치하였다.
INC, USA), c-fos(Sigma, USA), serotonin(Chemicon, USA) 항체를 이용하였다. 염색은 각각의 항체를 1:500, 1:500, 1:4000, 1:5,000으로 희석한 1차 항체에 조직 절편들을 담가 실온에서 24시간 반응시켰다. 이때 1차 항체의 희석은 0.
척수(spinal cord) : 방광에서 척수에 투사된 영역을 관찰하기 위하여 경수, 흉수, 요수, 천수를 절취하여 PRV-Ba에 대한 항체를 이용하여 면역조직화학염색법에 의하여 표지된 영역을 관찰한 결과는 다음과 같다.
흰쥐에서 膀胱 및 膀胱經의 合穴인 委中(BL40)에 PRV-Ba를 주입한 후 중추신경계내 표지영역과 표지된 영역에서의 膀胱의 기능을 조절하는 여러 가지 호르몬 또는 그 수용체들의 발현부위를 면역조직화학 염색법에 의하여 관찰한 바 다음과 같은 결과를 얻었다.

대상 데이터

1 M PB로 수세한 후 배뇨와 관련된 호르몬 또는 수용체에 대한 1차 항체를 이용하여 면역염색을 시행하였다. 1차항체는 rabbit polyclonal antibody인 CRF(Santa cruz Biotec. INC, USA), CRF-Receptor (Santa cruz Biotec. INC, USA), c-fos(Sigma, USA), serotonin(Chemicon, USA) 항체를 이용하였다. 염색은 각각의 항체를 1:500, 1:500, 1:4000, 1:5,000으로 희석한 1차 항체에 조직 절편들을 담가 실온에서 24시간 반응시켰다.
Virus는 pseudorabies virus 중 가장 병원성이 적고, 선택적인 이동 및 염색성을 보인 Bartha strain(PRV-Ba라 함)을 사용하였다. 이 바이러스들은 전북대학교에서 분양받아 사용하였다.
Virus는 pseudorabies virus 중 가장 병원성이 적고, 선택적인 이동 및 염색성을 보인 Bartha strain(PRV-Ba라 함)을 사용하였다. 이 바이러스들은 전북대학교에서 분양받아 사용하였다. 이 virus는 porcine kidney fibroblast (PK15-cell)에서 키운 것으로 사용시 plaque fodning unit는 평균 1 x 10⁸pfu/㎖였으며 -70℃이하에서 냉동 보관하였고, 주사 직전에 녹여 sonicanir라 함)하여 virus의 벽을 파쇄한 후 신선한 것을 사용하였다.
체중 250 g 내외의 건강하고 성숙한 Sprague-Dawley계 숫컷 흰쥐 20마리를 실험군에 따라 5-6마리씩 배정하여 관찰하였다.

이론/모형

3% Triton X-100이 섞여 있는 것을 사용하였다. 그 후 조직 절편들은 실온에서 15분간 2회 0.1 M PB로 세척하였으며, Hsu 등의¹¹⁾ 방법에 따라 2차 항체인 biotinylated goat anti-rabbit IgG(Vector Laboratories, Inc.) 또는 biotinylated goat anti-mouse IgG(Vector Laboratories, Inc.)를 1 : 200으로 희석하여 실온에서 2시간 가량 반응 시켰다. 다시 15분간 2회 0.

성능/효과

Corticotropin releasing factor-receptors(CRF-R)에 대한 면역반응은 맨아래구역과 고립로핵의 신경섬유, 솔기핵, 가쪽그물핵, 거대세포그물핵, 가쪽거대세포옆그물핵, 청색반점, Barrington's nucleus, A5영역, 흑질, 뇌실곁핵, 궁상핵에서 양성반응을 나타내었다.
Serotonin에 대한 면역반응은 맨아래구역과 고립로핵의 신경섬유, 솔기핵, 가쪽그물핵, 거대세포그물핵, 가쪽거대세포옆그 물핵, 청색반점, A5영역, Barrington,s nucleus, 등쪽솔기핵, 적색핵, 궁상핵에서 양성반응을 나타내었다. 대뇌피질에서는 뒷다리 영역, 이마엽 1, 2 영역, 후각주위피질(perirhinal cortex)영역에서 양성 반응을 나타내었다(Fig.
膀胱과 膀胱經의 合穴인 委中에서 투사되는 공통된 영역과 corticotropin releasing factor(CRF), corticotropin releasing factor-receptors(CRF-R), C-fos 및 serotonin에 대한 면역반응을 나타낸 공통된 부위는 맨아래구역과 고립로핵의 신경섬유, 솔기핵, 가쪽그물핵, 거대세포그물핵, 가쪽거대세포옆그물핵, 청색반점, A5영역, Barrington,s nucleus, 흑질, 뇌실곁핵, 궁상핵에서 양성반응을 나타내었다. 대뇌피질에서는 뒷다리영역, 이마엽 1, 2영역, 후각주위피질(perirhinal cortex)영역에서 양성 반응을 나타내었다.
膀胱과 膀胱經의 合穴인 委中에서 투사되는 교와 중뇌에서의 공통된 영역은 교에서는 A5 noradrenalin 세포, 청색반점, 청색밑핵, 다리뇌그물핵, Barrington,s nucleus, 창백솔기핵 및 큰솔기핵에 표지되었고 중뇌에서는 중심회백질, 흑질, 적색핵 및 등쪽솔기핵에 표지되었다.
솔기핵의 경우 아핵인 불명솔기핵, 창백솔기핵 및 큰솔기핵에 표지되었다. 교와 중뇌에서의 공통된 영역은 교에서는 A5 noradrenalin 세포, 청색반점, 청색밑핵, 다리뇌그 물핵, Barrington,s nucleus, 창백솔기핵 및 큰솔기핵에 표지되었고 중뇌에서는 중심회백질, 흑질, 적색핵 및 등쪽솔기핵에 표지되었다. 시상하부에서의 공통된 영역은 뇌실곁시상하부핵, 가쪽 시상하부핵, 뇌실주위핵, 궁상핵, 뇌궁주위핵, 시각교차위핵, 정중융기에 표지되었고, 대뇌피질에서의 공통된 영역은 대뇌피질의 이마엽 1,2 영역, 뒷다리영역, 무과립섬피질에 표지되었다.
방광과 委中에서 투사한 영역에서의 CRF에 대한 공통된 면역반응이 관찰된 영역은 맨아래구역과 고립로핵의 신경섬유, 솔기핵, 가쪽그물핵, 거대세포그물핵, 가쪽거대세포옆그물핵, 청색 반점, A5영역, Barrington,s nucleus, 적색핵, 궁상핵 및 뇌실곁핵에서 양성반응을 나타내었다. 대뇌피질에서는 뒷다리영역, 이마엽 1, 2 영역, 무과립섬피질(agranular insular cortex) 및 과립섬 피질(granular insular cortex)영역에서 양성 반응을 나타내었다 (Fig.
본 실험에서 膀胱 그리고 膀胱과 관련된 經穴에서 투사되는 연수에서의 공통된 영역은 맨아래구역, 고립로핵, 미주신경등쪽핵, 뒤배가쪽그물핵, 배쪽그물핵, 가쪽그물핵 및 C3 아드레날린 세포에 표지되었다. 솔기핵의 경우 아핵인 불명솔기핵, 창백솔기핵 및 큰솔기핵에 표지되었다.
본 실험에서 膀胱 및 膀胱과 관련된 經穴인 委中에서 투사되는 공통된 영역에서 호르몬 또는 호르몬 수용체(corticotropin releasing factor, corticotropin releasing factor-receptor, C-fos serotonin)에 대한 면역반응을 나타낸 공통된 부위는 맨아래구역과 고립로핵의 신경섬유, 솔기핵, 가쪽그물핵, 거대세포그물핵, 가쪽거대세포옆그물핵, 청색반점, A5영역, Barrington,s nucleus, 흑질, 뇌실곁핵, 궁상핵에서 양성반응을 나타내었다. 대뇌피질에서는 뒷다리영역, 이마엽 1, 2 영역, 후각주위피질(perirhinal cortex)영역에서 양성 반응을 나타내었다.
委中穴은 膀胱經의 合穴이며, 四彎穴의 하나이자 四總穴의 하나로써 淸血泄熱, 祛風濕, 利腰膝, 止吐瀉의穴性을 가지며, 背腰股腿膝脚의 급만성 동통질환을 치료한다⁴³⁾. 본 실험에서 膀胱에서 투사하는 감각신경은 T8-L4의 영역의 감각신경절에서는 2-10개 정도의 감각신경세포체가 표지되었으나, L5-L6 감각신경절에서는 절편당 35-120개 정도의 감각신경세포체가 표지되었고, S1 감각신경절에서는 단면당 120-140개 정도 그리고 S2 감각신경절에서는 단면당 55-65개 정도의 감각신경세포체가 표지되었으나 S3 감각신경절에서는 절편당 4-8개로 급격하게 감소하였다. 委中에서 투사하는 감각신경은 T8-9영역의 감각신경절에서는 7-8개 정도가 표지되었으나 T12-L1 영역에서는 16-24개 정도로 다른 영역에 비하여 많이 표지되었다.
. 본 실험에서는 CRF, CRF-R 및 c-fos에 대한 면역반응을 나타낸 공통된 부위이외에도 serotonin에 대한 면역반응을 나타낸 부위는 등쪽솔기핵과 적색 핵이었다.
본 실험의 膀胱 그리고 膀胱과 관련된 經穴인 委中에서 투사되는 공통된 영역은 경수에서는 층판 VII, IX, X 영역, 중심경 신경핵 및 외측경신경핵이었고, 흉수에서는 T8-13 영역의 층판 VII, X 영역, 가슴기둥 및 교감신경의 절전신경세포체가 모여 있는 중간외측핵과 중간내측핵이었다. 요수에서는 층판 I, IV, V, VII, X 영역 및 층판 VII의 중간외측핵, 중간내측핵 및 가슴기둥에 강하게 표지되었고, 천수에서는 층판 V, VI, VII, IX, X 영역및 천수부교감신경핵(sacral parasympathetic nucleus, SPN)에 강하게 표지되었다.
교와 중뇌에서의 공통된 영역은 교에서는 A5 noradrenalin 세포, 청색반점, 청색밑핵, 다리뇌그 물핵, Barrington,s nucleus, 창백솔기핵 및 큰솔기핵에 표지되었고 중뇌에서는 중심회백질, 흑질, 적색핵 및 등쪽솔기핵에 표지되었다. 시상하부에서의 공통된 영역은 뇌실곁시상하부핵, 가쪽 시상하부핵, 뇌실주위핵, 궁상핵, 뇌궁주위핵, 시각교차위핵, 정중융기에 표지되었고, 대뇌피질에서의 공통된 영역은 대뇌피질의 이마엽 1,2 영역, 뒷다리영역, 무과립섬피질에 표지되었다.
본 실험의 膀胱 그리고 膀胱과 관련된 經穴인 委中에서 투사되는 공통된 영역은 경수에서는 층판 VII, IX, X 영역, 중심경 신경핵 및 외측경신경핵이었고, 흉수에서는 T8-13 영역의 층판 VII, X 영역, 가슴기둥 및 교감신경의 절전신경세포체가 모여 있는 중간외측핵과 중간내측핵이었다. 요수에서는 층판 I, IV, V, VII, X 영역 및 층판 VII의 중간외측핵, 중간내측핵 및 가슴기둥에 강하게 표지되었고, 천수에서는 층판 V, VI, VII, IX, X 영역및 천수부교감신경핵(sacral parasympathetic nucleus, SPN)에 강하게 표지되었다. Nadelhaft 등²¹⁾은 방광에서 척수에 투사되는 영역은 L6-S1 척수의 사이신경핵(interneuron)과 intermediate gray neuron 및 천층의 등쪽뿔에 표지된다고 하여 본 실험에서 내장과 경혈부위에서 공통적으로 표지된 층판영역, 중간외측핵및 중간내측핵의 표지부위와 일치하였고, 골반신경(pelvic nerve) 이나 골반신경절(pelvic ganglia)에 역방향추적자를 주입하면 방광과 관련된 L5와 S1의 천수부교감신경핵에 표지된다는 Nadelhaft²⁰⁾와 Burstein R⁴⁴⁾의 보고와 일치하였다.
이상의 결과를 종합하면 膀胱과 膀胱經의 合穴인 委中에서 투사된 공통된 표지영역들은 膀胱과 관련된 내장의 기능을 조절 하는 자율신경핵과 관련된 것임을 알 수 있었으며 이러한 표지 영역들은 배뇨기능과 관련된 호르몬 또는 그 수용체에 공통적으로 표지됨을 알 수 있었다.
이상의 실험결과로 膀胱 및 膀胱經의 合穴인 委中에서 투사 되는 연수, 교, 중뇌 및 시상하부에서의 공통된 표지영역들은 배뇨기능과 관련된 중추신경계 영역으로서 척수와 뇌를 연결하는 다연접회로를 구성하여 膀胱의 기능을 조절하고 있으며, 이러한 공통된 영역은 한의학에서 내장-경혈-신경로와의 관계를 설명하는데 그 의의가 있다고 생각된다. 또한 공통된 표지영역 내 corticotropin releasing factor, corticotropin releasing factor-receptor, c-fos, serotonin에 대한 면역반응을 나타낸 공통된 표지영역들은 호르몬과 그 수용체가 자율신경관련 핵들과 일치한다는 것은 한의학의 침치료 기전이 서양의학의 자율신경로를 통하여 이어지고 또 그 기능을 발휘한다는 것을 신경해부학적으로 뒷받침하고 있어 한의학을 서양의학적 접근방법으로 해석하는데 기여하리라 생각된다.
경수에서는 층판 V, VII, IX, X, 중심경신경핵(central cervical nucleus) 및 외측경신경핵(lateral cervical nucleus)에 1-2개정도 의 신경세포체가 표지되었다. 흉수에서는 T8-9영역의 척수 등쪽뿔에서는 층판 I, V, VII, X, 가슴기둥(dorsal nucleus, D), 중간내측핵 및 중간외측핵(intermediolateral nucleus, IML)에 3-5개 정도 표지되었고(Fig. 2a), T10-11영역에서는 특히 층판 VII 과 IML(intermediolateral nucleus)에 많은 수의 신경세포체가 강하게 표지되었다. 또한 T12-13영역에서는 특히 층판 I, VII, IX 및 중간외측핵(intermediolateral nucleus, IML)에 많은 수의 신경세포체가 강하게 표지되었다(Fig.
1a). 흉수의 T11-13 영역에서는 척수의 등쪽뿔 층판 IV, Ⅴ, VII, X영역, 가슴기둥 (dorsal nucleus)에 표지되었고, 특히 흉수의 층판 VII영역에 있는 중간외측핵(intermediolateral nucleus)과 중간내측핵 (intermediomedial nucleus)에 강하게 4-5개 정도 표지되었다 (Fig. 1b). 요수에서는 L1-4영역의 층판 I, II, IV, V 영역에 산재하여 신경세포체가 표지되었으나 층판 VII, X영역, 중간외측핵 (intermediolateral nucleus), 가슴기둥(dorsal nucleus) 및 중간내 측핵(intermediomedial nucleus)에서는 강하게 표지되었다(Fig.

후속연구

이상의 실험결과로 膀胱 및 膀胱經의 合穴인 委中에서 투사 되는 연수, 교, 중뇌 및 시상하부에서의 공통된 표지영역들은 배뇨기능과 관련된 중추신경계 영역으로서 척수와 뇌를 연결하는 다연접회로를 구성하여 膀胱의 기능을 조절하고 있으며, 이러한 공통된 영역은 한의학에서 내장-경혈-신경로와의 관계를 설명하는데 그 의의가 있다고 생각된다. 또한 공통된 표지영역 내 corticotropin releasing factor, corticotropin releasing factor-receptor, c-fos, serotonin에 대한 면역반응을 나타낸 공통된 표지영역들은 호르몬과 그 수용체가 자율신경관련 핵들과 일치한다는 것은 한의학의 침치료 기전이 서양의학의 자율신경로를 통하여 이어지고 또 그 기능을 발휘한다는 것을 신경해부학적으로 뒷받침하고 있어 한의학을 서양의학적 접근방법으로 해석하는데 기여하리라 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	pseudorabies virus들은 어디에서 분양받아 사용하였는가?	Virus는 pseudorabies virus 중 가장 병원성이 적고, 선택적인 이동 및 염색성을 보인 Bartha strain(PRV-Ba라 함)을 사용하였다. 이 바이러스들은 전북대학교에서 분양받아 사용하였다. 이 virus는 porcine kidney fibroblast (PK15-cell)에서 키운 것으로 사용시 plaque fodning unit는 평균 1 x 108pfu/㎖였으며 -70℃이하에서 냉동 보관하였고, 주사 직전에 녹여 sonicanir라 함)하여 virus의 벽을 파쇄한 후 신선한 것을 사용하였다.
	經絡은 인체에서 어떤 역할을 하는가?	經絡은 氣血의 운행통로로, 인체의 上下 및 內外를 교통시키는 역할을 하여 生理, 病理, 診斷, 治療의 전 방면에서 핵심적인 위치에 놓여 있다. 이러한 이유로 經絡에 대한 연구가 꾸준히 진행되고 있다1).
	다양한 추적자를 이용한 연구가 이루어져온 이유는?	최근에는 中樞神經系統의 신경로와 그 기능적 연결을 이해 하기 위하여 다양한 추적자를 이용한 연구가 이루어져 왔는데, 이러한 신경로를 밝히기 위한 신경해부학적 추적자로 과거에는 Wheat germ agglutinin-horseradish peroxidase(WGA-HRP)6)와 cholera toxin B subunit(CTB)7) 등이 이용되었으나, 최근에는 비특이적으로 인접된 신경원에 퍼지지 않고 선택적으로 축삭을 따라 이동하면서 상위의 신경핵까지 전달되는 특성이 있는 신경친화성 바이러스인 pseudorabies virus(PRV)와 herpes simplex virus(HSV)가 이용되고 있다8,9).

참고문헌 (78)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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