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문제 정의
- 따라서 본 연구는 조기에 제거하는 지상부의 이용 가능성을 검토하기 위하여 인삼의 개엽 초기부터 잎, 줄기 및 꽃을 채취하여 ginsenoside 함량변화를 조사하였다.
제안 방법
- 2mL/min, column temperature는 35℃에서 실시하였다. HPLC 분석조건은 acetonitrile 19% (0분), 19% (10분), 20% (15분), 23% (40분), 30% (42분), 35% (75분), 70% (80분), 90% (90분), 90% (100분), 19% (105분)로 실시하였다.
- SPE 전처리 방법은 Kim et al. (2008)의 방법을 약간 변형하여 사용하였다. 즉 Sep-Pak C18 cartridge을 먼저 5 mL MeOH로 서서히 용출시켜 1차 conditioning를 하고 다시 5 mL dd-H2O로 2차 conditioning 시켰다.
- 각 시기별로 채취한 지상부를 깨끗한 물로 씻어내고 티슈로 물기를 제거한 후 잎, 줄기, 꽃봉오리로 구분하여 생육특성을 조사한 후 −83℃에서 3일간 동결 건조하여 사포닌 분석용 시료로 사용하였다.
- 사포닌 추출은 Shi et al. (2007)의 방법을 변형하여 사용하였다. 각 시료 1.
- 인삼 지상부의 채취시기인 4~5월의 광량 및 기온의 변화를 LI-1400 data logger를 이용하여 매 30분에 한번씩 하루에 48번 기록하고 4월 상순으로부터 5월 하순까지 10일간격의 평균값은 Fig. 1과 같다. 4월과 5월의 상순, 중순, 하순의 평균 광량은 82.
- 이 cartridge에 10 mL 90% MeOH를 처리하여 서서히 ginsenoside 성분을 용출시켰다. 인삼추출 현탁액이 Sep-Pak C18 cartridge에 통과한 용출액을 모두 받아 0.5 ㎛ membrane filter로 여과하여 HPLC [Hewlett Packard HPLC series 1100 (Agilent Technologies, Little Falls, DE, USA)]로 분석하였다. Column은 Phenomenex C18 column(250 × 4.
- 추출물을 냉각시켜 여과한 후 잔사에 70% ethanol을 넣고 앞의 방법으로 2회 반복 추출하였다. 총 3회에 걸쳐 추출된 성분을 모아 rotary evaporator를 이용하여 감압 농축시킨 후 건조된 물질에HPLC용 증류수 25 mL를 가해 현탁하였다.
대상 데이터
- 2008년 4~5월의 광량 (Quantum)과 기온은 LI-1400 data logger (LI-COR, USA)를 이용하여 지상 40 ㎝ 부위에서 측정하였다.
- Column은 Phenomenex C18 column(250 × 4.6 ㎜, 4 ㎛, Phenomenex Co., Torrance, CA, USA)을 사용하였으며, UV wavelength는 203 ㎚, flow rate는 1.2mL/min, column temperature는 35℃에서 실시하였다.
- 충남대학교 부설 농장에 20 × 12 ㎝로 이식 재배한 5년생 연풍을 사용하였다.
이론/모형
- 충남대학교 부설 농장에 20 × 12 ㎝로 이식 재배한 5년생 연풍을 사용하였다. 해가림 설치 구조는 후주연결식으로 전주 높이 180 ㎝, 후주높이 100 ㎝, 해가림 피복자재는 폴리에틸렌차광망 4중직 (청색 3중직 + 흑색 1중직)을 사용하였으며, 일반관리는 농촌진흥청 표준인삼경작법에 준하였다. 인삼의 지상부는 중행에 재식되어 있는 개체의 지상부를 2008년 4월 15일, 25일, 5월 5일, 25일에 각각 15, 9, 7, 5주, 꽃은 25개체에서 3반복으로 채취하였다.
성능/효과
- 채취시기별 5년생 연풍의 지상부 부위별 진세노사이드 함량은 Table 2와 같다. 4월 15일, 25일, 5월 5일, 25일에 채취한 잎의 Rb2 함량은 각각 6.32, 4.22, 3.30, 3.04 ㎎/g, Rc 4.22, 2.64, 2.03, 1.97 ㎎/g, Rd 14.07, 9.56, 7.42, 4.70 ㎎/g로 어린잎에서 함량이 가장 많았고, 5월 25일에 채취한 것은 최초 잎의 33%~48%로 감소하였다. Rb1 함량은 각각 18.
- 2와 같다. 4월 15일, 25일, 5월 5일, 25일에 채취한 잎의 총사포닌 함량은 각각 19.46, 28.56, 58.82, 169.24 ㎎/plant, 줄기의 총 사포닌 함량 2.53, 2.76, 5.20, 12.32 ㎎/plant, 꽃의 총 사포닌 함량 14.11, 30.21, 37.60, 73.41 ㎎/plant로 지상부 부위별 총 사포닌은 잎 > 꽃 > 줄기 순이었으며 채취시기가 늦을수록 부위별 총 사포닌 함량은 증가하였다.
- 02 ㎎/g로 총 사포닌의 51%를 차지하여 두 부위에서 비슷한 경향이었으나 Re의 함량은 잎이 줄기보다 8배 많았다고 하였다. 본 연구결과에 의하면 잎에서는 Re가 11.98~43.61 ㎎/g로 총 사포닌의 33%~45%를 차지하였고 줄기에서는 2.72~7.72 ㎎/g로 총 사포닌의 58%를 차지하였으며 잎이 줄기보다 4.4~5.6배 많아 함량의 차이는 있었으나 경향은 유사하였다.
- 이상과 같이 잎의 Re 함량은 채취시기와 관계없이 가장 함량이 많았다. An et al.
- 이상과 같이 지상부의 사포닌 함량은 Rb1은 잎에서 많았고, Rb2, Rc, Rd, Re, Rg1 및 총 사포닌은 꽃에서 많았으며, 사포닌의 종류에 따라 뿌리보다 4배 이상 많은 경우도 있었다. 특히 꽃에서의 Re 함량은 채취시기와 관계없이 월등히 많았는데 잎과 줄기와는 달리 채취시기별 함량변이도 거의 없었다.
- 줄기의 총사포닌 함량은 각각 13.32, 9.85, 8.00, 4.65 ㎎/g로 어린 줄기에서 함량이 가장 많았고, 5월 25일에 채취한 것은 최초 줄기의 35%로 감소하였다. Kim et al.
- 채취시기별 줄기의 Rd 함량은 각각 0.38, 0.29, 0.17, 0.11 ㎎/g, Re 7.72, 6.46, 4.78, 2.72 ㎎/g, Rg1 5.07, 2.98, 2.98, 1.82 ㎎/g로 어린 줄기에서 함량이 가장 많았고, 5월 25일에 채취한 것은 최초 줄기의 29%~36%로 감소하였다. 그러나 Rb1, Rb2, Rc의 함량은 극소량이거나 검출되지 않았다.
후속연구
- 특히 이러한 현상은 연풍에서 많이 볼 수 있다. 또한 인삼의 뿌리의 생장을 돕기 위하여 꽃봉오리를 제거하고 있으므로 이 들의 이용방법도 검토할 필요가 있다고 생각된다.
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