선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 따라서, 본 연구에서는 생리 활성 연구가 거의 이루어지지 않은 패모로부터 메탄올 추출물을 조제하고, 이로부터 다양한 유기용매 분획물을 조제하여 이들의 항균, 항혈전 및 항산화 활성을 평가하였다. 그 결과, 패모 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획에서 우수한 항세균활성, DPPH 소거능, SOD 유사활성 및 강력한 항혈전 활성을 확인하였으며, 에틸아세테이트와 헥산 분획에서 우수한 환원력을 확인하였다.
- 그러나, 오랫동안 진행되어 온 기내배양, 휴면타파, 성분분석에 대한 연구와 달리 생리활성에 대한 연구는 거의 없는실정이다. 본 연구에서는 패모로부터 메탄올 추출물을 조제하고, 이로부터 다양한 유기용매 분획물을 조제하여 이들의 항균, 항혈전 및 항산화 활성을 평가하였다. 패모의 메탄올 추출물은 다량의 수용성 당을 포함하고 있으며(물 잔류물 58.
제안 방법
- 트롬빈 저해 활성은 기존의 보고한 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)를 이용하여 혈액 응고시간을 측정하여 평가하였다[4, 14, 17, 22]. 37℃에서 0.5 U 트롬빈(Sigma Co., USA) 50 μl와 20 mM CaCl2 50 ul, 다양한 농도의 시료 추출액 10 ul를 coagulometer의 튜브에 혼합하여 2분간 반응시킨 후, 혈장 100l를 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였으며, 시료 대조군으로는 아스피린(Sigma Co.)을, 용매 대조군으로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 평균 33.
- 5 mm)에가하여, 생육저지환의 크기를 측정하여 평가하였다[14, 17]. 대조구로는 항세균제인 ampicillin과 항진균제인 miconazole (Sigma Co., USA)을 각각 5 gg/disc 농도로 사용하였으며, 생육저지환의 크기는 육안으로 생육이 나타나지 않는 부분의지름을 mm 단위로 측정하였고, 3회 이상 평가 후 대표 결과로 나타내었다.
- 14% (w/w)를 나타내었다. 메탄올 추출물은 물에 현탁한 후 헥산, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 순차적으로 분획하였으며, 분획물과 물 잔류물은 동일한 방법으로 감압건조하여 분말화 하였다. 각각의 시료 분말은 DMSO에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 항균 활성, 항혈전 활성 및 항산화 활성에 사용하였다.
- 평가하였다. 트롬빈 저해 활성은 기존의 보고한 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)를 이용하여 혈액 응고시간을 측정하여 평가하였다[4, 14, 17, 22]. 37℃에서 0.
- SOD 유사활성은 시료 첨가군과 무첨가군과의 흡광도비로 나타내 었다. 한편 환원력 평가는 Oyaizu 등의 방법을 변형하여측정하였다[9]. 에탄올에 용해한 시료 2.
- 한편 항진균 활성 평가를 위해서는 Saccharomyces cerevisiae IFO 0233 및 캔디 다증 진균감염증 원인균 Candida albicans KCTC 1940를 사용하였으며, 항곰팡이 활성 을 위해서는 Botrytis cinerea KACC 40574, Pyricularia gri- sea KACC 40414, Rhizoctonia solani KACC 40101, Glomerella cingulata KCTC 6075, CoUectotrichum gloeosporioides KCTC 6169, Phytophthora capsid KACC 40157와 Botryosphaeria dothi-dea (겹무늬 썩음병 분리균)을 사용하였다. 항세균, 항진균 및항곰팡이 활성 평가는 기존의 보고한 방법과 동일하게 사용하였으며, 각각 Nutrient agar (Difco Co., USA), Sabouraud dextrose 및 Potato dextrose agar (Difco Co. USA) 배지를 이용하여 각각의 시료 5 ul를 멸균 disc-paper (지름 6.5 mm)에가하여, 생육저지환의 크기를 측정하여 평가하였다[14, 17]. 대조구로는 항세균제인 ampicillin과 항진균제인 miconazole (Sigma Co.
- 각각의 시료 분말은 DMSO에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 항균 활성, 항혈전 활성 및 항산화 활성에 사용하였다. 항혈전 활성 평가를 위한 트롬빈 타임 측정시, 혈장은 최근 1개월 동안 약물투여를 받지 않은 지원자의 전혈로부터 조제하였다. 채혈 후 즉시 4℃에서 5, 000x g로 5분 동안 원심분리하여 혈장을 분리하고 냉동한 상태로보관하였으며(신선동결혈장), 필요시 상온에서 해동하여 사용하였다.
- 항혈전 활성은 시료의 트롬빈 타임을 측정하여 평가하였다. 트롬빈 저해 활성은 기존의 보고한 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)를 이용하여 혈액 응고시간을 측정하여 평가하였다[4, 14, 17, 22].
- 5 ml를 첨가하여 반응을 종료하고 4, 000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수한상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5:1 (v/v) 비율로 혼합하고 700 nm에서흡광도를 측정하여 평가하였으며, 대조구로는 BHT를 사용하였다.
대상 데이터
- 메탄올 추출물은 물에 현탁한 후 헥산, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 순차적으로 분획하였으며, 분획물과 물 잔류물은 동일한 방법으로 감압건조하여 분말화 하였다. 각각의 시료 분말은 DMSO에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 항균 활성, 항혈전 활성 및 항산화 활성에 사용하였다. 항혈전 활성 평가를 위한 트롬빈 타임 측정시, 혈장은 최근 1개월 동안 약물투여를 받지 않은 지원자의 전혈로부터 조제하였다.
- 2에 나타내었다. 대조구로는 BHT를 사용하였으며, 0.05 mg/ml 농도에서 0.84의 흡광도를 나타내어 강력한 환원력을 나타내었다. 패모 메탄올 추출물 및 물 분획물은 농도 증가에 따른 환원력 증가가 미미하였으나, 다른 분획물들은 농도 증가에 따라 환원력이 비 례적으로 증가하였다.
- 실험에 사용한 패모 시료는 2007년 11월 경북 안동에서 구입한 중국산 패모를 사용하였다. 구입 직후 80℃에서 항량 건조시켜 수분함량을 측정한 결과 12.
- 패모의 메탄올 추출물 및 이들의 분획물의 항균 활성을 평가하기 위해 그람 음성균으로 Escherichia coli KCTC 1682, Proteus vulgaris KCTC 2433, Salmonella typhimurium KCTC 1926을, 그람 양성 균으로는 Staphylococcus aureus KCTC 1916, Listeria monocytogenes KACC 10550, Bacillus subtilis KCTC1924를 사용하였다. 한편 항진균 활성 평가를 위해서는 Saccharomyces cerevisiae IFO 0233 및 캔디 다증 진균감염증 원인균 Candida albicans KCTC 1940를 사용하였으며, 항곰팡이 활성 을 위해서는 Botrytis cinerea KACC 40574, Pyricularia gri- sea KACC 40414, Rhizoctonia solani KACC 40101, Glomerella cingulata KCTC 6075, CoUectotrichum gloeosporioides KCTC 6169, Phytophthora capsid KACC 40157와 Botryosphaeria dothi-dea (겹무늬 썩음병 분리균)을 사용하였다.
- 총 polyphenol 함량은 추출검액 400 ul에 50 ul의 Folin-ciocalteau, 100 ul의 Na2COs 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725 nm에서 흡광도를 측정하였다μ7]. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총당 정량의 경우에는 phenol-sulfuric acid법을, 환원당 정 량의 경우에는 DNS 변법을 이용하였다μ7].
- monocytogenes KACC 10550, Bacillus subtilis KCTC1924를 사용하였다. 한편 항진균 활성 평가를 위해서는 Saccharomyces cerevisiae IFO 0233 및 캔디 다증 진균감염증 원인균 Candida albicans KCTC 1940를 사용하였으며, 항곰팡이 활성 을 위해서는 Botrytis cinerea KACC 40574, Pyricularia gri- sea KACC 40414, Rhizoctonia solani KACC 40101, Glomerella cingulata KCTC 6075, CoUectotrichum gloeosporioides KCTC 6169, Phytophthora capsid KACC 40157와 Botryosphaeria dothi-dea (겹무늬 썩음병 분리균)을 사용하였다. 항세균, 항진균 및항곰팡이 활성 평가는 기존의 보고한 방법과 동일하게 사용하였으며, 각각 Nutrient agar (Difco Co.
이론/모형
- 총 flavonoid의 함량 측정은 기존의 보고한 방법 [21]에 따라 측정하였으며, 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고 여과한 추출검 액 400 ul에 90% diethylene glycol 4 ml를 첨가하고 다시 1 N NaOH 40 ul를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutirr을 사용하였다.
- 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총당 정량의 경우에는 phenol-sulfuric acid법을, 환원당 정 량의 경우에는 DNS 변법을 이용하였다μ7].
성능/효과
- 4 mg/ml 농도에서도 모두 300 초 이상의 연장된 트롬빈 타임을 나타내었다. 1.2 mg/ml 농도에서도 에틸아세테이트 분획은 95.4초를 나타내어 가장 강력한 트롬빈 저해 활성을 나타내었으며, 이는 아스피린과 유사한 활성이었다. 이러한 결과는 항혈전 활성이 강력한 메밀의 메탄올 추출물이 0.
- )을, 용매 대조군으로는 시료 대신 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 평균 33.0초의 응고시간을 나타내었으며, 트롬빈 저해 활성은 3회 이상 반복한 실험의 평균치를 나타내었다.
- miconazole의 경우 C. gloeo얘)。rioides을 제외한 C. albicans, S. cerevisiae 및 식물 병원성 곰팡이에 대해 강력한 활성을 나타내었다(Table 2). 패모 메탄올 추출물 및 물 잔류물에서는 500 μg/disc 농도에서 항균 활성이 나타나지 않았다.
- 중국산 패모를 사용하였다. 구입 직후 80℃에서 항량 건조시켜 수분함량을 측정한 결과 12.0% (w/w)로 나타났으며, 이후 건조 패모 무게의 3배 부피의 메탄올을 가하여 상온에서 24시간씩 3회 반복 추출하였다. 이후 추출액은 filter paper 로 거른 후 60℃에서 감압 건조하여 조제하였다.
- 활성을 평가하였다. 그 결과, 패모 메탄올 추출물의 에틸아세테이트 및 부탄올 분획에서 우수한 항세균활성, DPPH 소거능, SOD 유사활성 및 강력한 항혈전 활성을 확인하였으며, 에틸아세테이트와 헥산 분획에서 우수한 환원력을 확인하였다.
- 패모 메탄올 추출물 및 물 잔류물에서는 500 μg/disc 농도에서 항균 활성이 나타나지 않았다. 그러나 헥산분획에서는 S. typhimurium 및 L. momq/tog咖s에서 미약한 활성이 나타났으며, 에틸아세테이트 분획 및 부탄올 분획에서는 E. coli를 제외한 모든 균에 우수한 활성을 나타내었다. 반면 어떠한 분획물도 항진균 활성은 나타나지 않았다.
- 1%의 SOD 유사 활성을 나타내었다. 대조구로 사용된 vitamin C가 0.18 mg/ml 농도에서 58%의 활성을 나타낸 것과 비교하면 에틸아세테이트 및 부탄올 분획은 vitamin C의 20~25% 정도의 활성을 나타내는 것으로 판단된다. 한편 패모 메탄올 추출물 및 각각의 분획물을 대상으로 환원력을 평가한 경우는 Fig.
- 평가한 결과는 Table 4에 나타내었다. 먼저 vitamin C, BHT 및 vitamin E의 IC50들은 각각 15.2, 18.6, 및 35.6 略 /ml를 나타내어 강력한 DPPH 소거능이 나타났으며, 반면패모의 메탄올 추출물은 567.5 μg/ml의 1(&를 나타내어 기존의 우수한 항산화 활성이 보고된 토사자, 목향, 당귀, 목통, 골담초, 호이초[3, 17] 등에 비해서는 미약한 활성을 보였다. 분획물 중에서는 물 잔류물 및 헥산 분획에서 774.
- 14% w/w). 메탄올 주줄물의 순차적 분획 결과는 Table 1에 나타내었으며, 물 잔류물이 58.98%로 가장 많았으며, 헥산 분획물이 14.85%, 부탄올 분획물은 12.97%, 에틸아세테이트 분획물은 9.78%를 차지하여 패모가 상당량의 지용성오일 성분과 수용성 성분을 함유함을 알 수 있었다. 물 잔류물의 대부분은 당 성분으로 판단되며, 상대적으로 에틸아세테이트 및 부탄올 분획은 총당 함량이 낮게 나타났다.
- 1). 메탄올 추출물 및 물 잔류물에서는 거의 활성이 나타나지 않았으며, 0.83 mg/ml 농도에서 에틸아세테이트 분획이 54.8%, 부탄올 분획이 63.1%의 SOD 유사 활성을 나타내었다. 대조구로 사용된 vitamin C가 0.
- 4초를 나타내어 항혈전제인 아스피린 활성과 유사하였다. 메탄올 추출물 및 분획물의 항산화 활성 평가 결과, 에틸아세테이트 분획 및 부탄올분획 이 368.2 및 344.0 μg/ml의 ICs 나타내 어 우수한 DPPH 소거능을 나타내었으며, SOD 유사활성은 55~63%로, vitamin C의 20~25%, 환원력의 경우 BHT의 51~54%를 나타내어 우수한 항산화 활성을 가짐을 확인하였다.
- 78%를 차지하여 패모가 상당량의 지용성오일 성분과 수용성 성분을 함유함을 알 수 있었다. 물 잔류물의 대부분은 당 성분으로 판단되며, 상대적으로 에틸아세테이트 및 부탄올 분획은 총당 함량이 낮게 나타났다. 총 폴리페놀은 부탄올 및 에틸아세테이트 분획물에서 높게 나타났고, 총플라보노이드 함량은 전반적으로 낮게 나타났으나, 헥산 및에틸아세테이트 분획물에서 상대적으로 높게 나타났다.
- 이러한 결과는 패모의 메탄올 추출물의 에틸아세테이트및 부탄올 분획 이 우수한 항산화 물질을 포함하고 있음을 나타내고 있다. 본 연구결과는 생리 활성 연구가 거의 이루어지지 않은 패모의 경우, 기존의 진해 거담 활성 이외에, 강력한항혈전 활성을 가지고 있으며, 특히 에틸아세테이트 및 부탄올 분획은 우수한 항산화 및 항세균 활성을 가짐을 나타내며, 전통 한방제인 패모의 새로운 적용성을 제시하고 있다.
- 0 略 /ml의 1(&로 항산화능이 인정되 었다(Table 4). 분획물의 성분분석 결과를 고려할 때 (Table 1), DPPH 소거능은 패모의 폴리페놀 성분에 기 인한다고 추측된다. 한편 메탄올 추출물 및 각각의 분획물을 대상으로 SOD 유사활성을 측정한 결과, 부탄올 및 에틸아세테이트 분획에서는 농도 의존적으로 활성의 증가가 나타났다(Fig.
- 반면 어떠한 분획물도 항진균 활성은 나타나지 않았다. 이러한 결과는 패모의 항세균 활성성분이 다양함을 추측케 하며, 메탄올 추출물 역시 고농도(예, 1,000 μg/disc)에서는 항세균 활성이 나타날 것으로 예측되었다.
- 총 폴리페놀은 부탄올 및 에틸아세테이트 분획물에서 높게 나타났고, 총플라보노이드 함량은 전반적으로 낮게 나타났으나, 헥산 및에틸아세테이트 분획물에서 상대적으로 높게 나타났다. 이러한 구성성분 분석결과로 볼 때, 패모의 분획물은 에틸아세테이트 및 부탄올 분획에서 다양한 생리활성을 나타낼 것으로추측되었다.
- 물 잔류물의 대부분은 당 성분으로 판단되며, 상대적으로 에틸아세테이트 및 부탄올 분획은 총당 함량이 낮게 나타났다. 총 폴리페놀은 부탄올 및 에틸아세테이트 분획물에서 높게 나타났고, 총플라보노이드 함량은 전반적으로 낮게 나타났으나, 헥산 및에틸아세테이트 분획물에서 상대적으로 높게 나타났다. 이러한 구성성분 분석결과로 볼 때, 패모의 분획물은 에틸아세테이트 및 부탄올 분획에서 다양한 생리활성을 나타낼 것으로추측되었다.
- 환원력은 에틸아세테이트 분획에서 가장 강력하였으며, 헥산, 부탄올 분획 순으로 나타나 DPPH 소거능과는 다른 양상을 나타내었다. 특히, 0.05 ®v6d mg/ml 범위의 농도 비례적 활성증가 조건에서, 에틸아세테 罗으이 트, 헥산, 부탄올 분획물의 환원력을 BHT의 환원력과 비교p ①K하면, 각각 53.8%, 51.4%, 18.1%의 환원력을 나타내었다(Fig. 2). 이러한 결과는 패모의 메탄올 추출물의 에틸아세테이트및 부탄올 분획 이 우수한 항산화 물질을 포함하고 있음을 나타내고 있다.
- 분획물의 성분분석 결과를 고려할 때 (Table 1), DPPH 소거능은 패모의 폴리페놀 성분에 기 인한다고 추측된다. 한편 메탄올 추출물 및 각각의 분획물을 대상으로 SOD 유사활성을 측정한 결과, 부탄올 및 에틸아세테이트 분획에서는 농도 의존적으로 활성의 증가가 나타났다(Fig. 1). 메탄올 추출물 및 물 잔류물에서는 거의 활성이 나타나지 않았으며, 0.
- c湖를 제외한 실험세균 모두에서 우수한 항세균 활성이나타났으며, 항진균 활성은 모든 시료에서 나타나지 않았다. 항혈전 활성은 메탄올 추출물에서 우수하였으며, 헥산, 에틸아세테 이트 및 부탄올 분획물은 2.4 mg/ml 농도에서 모두 300 초 이상의 연장된 트롬빈 타임을 나타내었고, 특히 에틸아세테이트 분획은 1.2 mg/ml 농도에서 95.4초를 나타내어 항혈전제인 아스피린 활성과 유사하였다. 메탄올 추출물 및 분획물의 항산화 활성 평가 결과, 에틸아세테이트 분획 및 부탄올분획 이 368.
- 패모 메탄올 추출물 및 물 분획물은 농도 증가에 따른 환원력 증가가 미미하였으나, 다른 분획물들은 농도 증가에 따라 환원력이 비 례적으로 증가하였다. 환원력은 에틸아세테이트 분획에서 가장 강력하였으며, 헥산, 부탄올 분획 순으로 나타나 DPPH 소거능과는 다른 양상을 나타내었다. 특히, 0.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.