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문제 정의
- 그리고 꽃송이버섯의 재배방법이 확립되어있지 않다. 본 연구는 꽃송이버섯의 봉지 단목 재배방법개발하기위해 균사배양 및 원기형성 조건을 조사하였다. 단목 재배에 사용한 수종으로는 낙엽송, 해송, 리기다소나무, 상수리나무 단목을 사용 하였고, 리기다소나무 단목에서 자실체 수량이 가장 양호 하였다.
제안 방법
- 꽃송이버섯 배양실 조건은 25℃, 습도는 70%정도를 유지할 수 있는 배양실에서 실시하였다. 배양실의 관리는 배양 중 발생될 수 있는 오염균을 신속하게 제거 해주어 배양실 내의 오염원의 밀도를 낮추고 또한 배양 중 발생 된 배양목은 신속히 제거 하였다.
- 꽃송이버섯의 배양을 보다 빨리 진전시키기 위한 조건을 구명하고자 수용액(영양액)을 조제하여 단목을 침수시켰다. 수용액의 처리는 지하수를 대조구로하고, 생이스트 수용액 5%, 생이스트 수용액10%, 설탕 5%, 생이스트 5%+설탕 5%를 준비하여 준비된 단목을 8시간동안 침수하였고, 처리별로 꽃송이버섯의 균사 배양일과 자실체발생일을 조사하였다.
- 수용액의 처리는 지하수를 대조구로하고, 생이스트 수용액 5%, 생이스트 수용액10%, 설탕 5%, 생이스트 5%+설탕 5%를 준비하여 준비된 단목을 8시간동안 침수하였고, 처리별로 꽃송이버섯의 균사 배양일과 자실체발생일을 조사하였다. 단목을 침수 할 때 침수액의 온도상승을 억제하기위해 외기온도가 25℃이상 상승되지 않게 조절하여 시험을 수행하였다.
- 단목의 입봉은 꽃송이버섯을 배양하는데 가장 중요한 작업으로 입봉작업시 봉지가 상처가 나지 않도록 주의하여 입봉을 하였다. 또한 입봉작업시 봉지의 밑바닥에 상처를 방치하기 위해 부직포를 단목크기의 1/5정도 여유있게 절단하여 봉지의 밑면에 깔고 단목을 입봉하였으며 입봉 후 봉지의 상단을 영지 단목재배에 주로 사용하는 마개로 밀봉하였다.
- 꽃송이버섯 액체종균의 기본배지는 감자추출배지를 사용하였다. 물 10ℓ에 감자껍질을 제거한 생감자 1㎏을 잘게 썰어 열수추출하고 가는 망사로 걸러서 설탕 200g과 옥수수가루함량을 15%로 조제 한 후 121℃, 60분간 살균 후 원균으로 준비된 꽃송이버섯 균을 접종하였다. 접종한 균은 25℃ 생육온도조건과 빛을 조사하지 않은 상태에서 공기 주입구에 필터(0.
- 꽃송이버섯의 배양을 보다 빨리 진전시키기 위한 조건을 구명하고자 수용액(영양액)을 조제하여 단목을 침수시켰다. 수용액의 처리는 지하수를 대조구로하고, 생이스트 수용액 5%, 생이스트 수용액10%, 설탕 5%, 생이스트 5%+설탕 5%를 준비하여 준비된 단목을 8시간동안 침수하였고, 처리별로 꽃송이버섯의 균사 배양일과 자실체발생일을 조사하였다. 단목을 침수 할 때 침수액의 온도상승을 억제하기위해 외기온도가 25℃이상 상승되지 않게 조절하여 시험을 수행하였다.
- 본 실험에 사용한 꽃송이버섯균주는 표 1과 같이 농촌진흥청응용미생물과에서 분양받은균주와 미국 ATCC(American Type Culture Collection)에서 구입한 균주 및 국내 자생 꽃송이버섯균주 등 총 12개 균주를 본 시험에 사용하였다(표 1). 수집균주는 다음시험을 위하여 PDA(potato dextrose agar, Difco) 평판배지에 접종한 후 25℃ 배양기에서 20일간 암 배양한 후 사용하였다.
- 단목의 살균이 끝나면 단목을 하온실로 이동하여 꽃송이버섯의 적정온도가 유지 될 때 까지 유지하였다. 이때 단목이 들어있는 봉지는 열에 의해 약해져있기 때문에 각별히 조심하고 외기온도와 온도 편차가 너무 차이가나지 않도록 주의하였고, 품종의 적정 품온까지 하온시킨 후 다음 작업을 수행 하였다.
- 접종 완료 후 내열성이 강한 봉지인 HDPE(high-density polyethylene)의 상단 부분을 기존의 영지마개(스크류식)로 잘 밀봉하고 봉지의 용적은 단목대비 1/2정도 여유 공간을 확보해주었다.
대상 데이터
- 꽃송이버섯 단목재배는 야산에 자란 리기다나무를 벌채하여 꽃송이버섯 봉지재배에 적합하도록 나무를 절단하여 사용하였다. 단목을 준비하기위한 나무의 벌채기는 나무전체에 70% 정도 잎이 단풍이 든 시기로 10월 중순~11월 상순이 적합하여, 벌채 후 1~2개월 정도 잎 말리기 작업을 하였고 보통은 낙엽이 지면서부터 이듬해 1월 하순까지 나무에 물이 오르기 전에 벌채한 나무를 사용하였다.
- 꽃송이버섯 단목재배의 주재료인 수종은 리기다소나무와 낙엽송의 단목을 사용하였으며 단목의 크기는 나무의 직경이 15㎝~20㎝ 내외, 높이는 20~25㎝로 절단한 후, 내열성 HDPE(high-density polyethylene)봉투에 준비된 단목을 담고 121℃, 90분간 고압살균 하고 1일 지난 후 미리 준비된 액체종균을 사용한다.
- 꽃송이버섯 액체종균의 기본배지는 감자추출배지를 사용하였다. 물 10ℓ에 감자껍질을 제거한 생감자 1㎏을 잘게 썰어 열수추출하고 가는 망사로 걸러서 설탕 200g과 옥수수가루함량을 15%로 조제 한 후 121℃, 60분간 살균 후 원균으로 준비된 꽃송이버섯 균을 접종하였다.
- 꽃송이버섯의 균을 접종하기위해 접종실의 환경은 무균 시설이 구비된 장소에서 접종하는 것이 2차 오염을 방지할 수 있으며 접종 하루 전 접종실의 내부에 UV등을 켜주어 오염을 방지하였다. 꽃송이버섯의 종균접종은 준비된 균주(Sc12)의 액체종균을 사용하였다. 종균접종방법은 일반 액체종균을 접종하는 방식인 분사식은 지향하고 액체종균을 흘러내리는 방식으로 접종하였다.
- 단목을 입봉 하기 위해 봉지를 준비하는데 내열성이 강한 봉지인 HDPE(high-density polyethylene)를 사용하였다. 단목의 입봉은 꽃송이버섯을 배양하는데 가장 중요한 작업으로 입봉작업시 봉지가 상처가 나지 않도록 주의하여 입봉을 하였다.
- 꽃송이버섯 단목재배는 야산에 자란 리기다나무를 벌채하여 꽃송이버섯 봉지재배에 적합하도록 나무를 절단하여 사용하였다. 단목을 준비하기위한 나무의 벌채기는 나무전체에 70% 정도 잎이 단풍이 든 시기로 10월 중순~11월 상순이 적합하여, 벌채 후 1~2개월 정도 잎 말리기 작업을 하였고 보통은 낙엽이 지면서부터 이듬해 1월 하순까지 나무에 물이 오르기 전에 벌채한 나무를 사용하였다.
- 단목을 놓은 바닥은 단목을 생육실로 이동하기 전 미리 물 빠짐이 좋은 유공 비닐을 균상바닥에 설치하였다. 또한 균상에 단목을 배치 후 초기 자실체를 유도하기위해 멀칭을 실시하는데 멀칭 소재는 균상 바닥에 설치한 유공 비닐을 준비하였다. 멀칭을 하기위한 활대는 ⌒의 모양 보다는 ㄷ의 모양으로 균상의 폭에 알맞게 활대를 만들고 단목을 균상에 배치 후 준비된 활대를 균상에 설치한 다음 준비된 유공 비닐을 피복하였다.
- 본 실험에 사용한 꽃송이버섯균주는 표 1과 같이 농촌진흥청응용미생물과에서 분양받은균주와 미국 ATCC(American Type Culture Collection)에서 구입한 균주 및 국내 자생 꽃송이버섯균주 등 총 12개 균주를 본 시험에 사용하였다(표 1). 수집균주는 다음시험을 위하여 PDA(potato dextrose agar, Difco) 평판배지에 접종한 후 25℃ 배양기에서 20일간 암 배양한 후 사용하였다.
성능/효과
- 단목 재배에 사용한 수종으로는 낙엽송, 해송, 리기다소나무, 상수리나무 단목을 사용 하였고, 리기다소나무 단목에서 자실체 수량이 가장 양호 하였다. 그리고 리기다소나무 단목을 생이스트 5%에 8시간 동안 침지하고 생육조건은 온도 및 습도를 각각 90~95%, 23~25℃처리에서 자실체발생이 가장 양호하였다.
- 하지만 균밀도는 낙엽송과 동일한 경향이었고 꽃송이버섯을 접종하여 자실체 발생의 초기 단계인 초발이 소요일은 낙엽송 단목이 103일로 리기다소나무 단목보다 6일정도 늦은 것으로 조사되었다. 그리고 적송 단목과 상수리나무 단목은 113일, 117일 정도 소요되어 단목재배용으로 적합하지 않은 것으로 판단되었고, 발이율은 리기다소나무 단목이 98.1%로 가장 양호하였 지만 상수리나무 단목이 50%로 가장 낮았고 낙엽송단목과 적송단목은 비슷한 경향을 보였다. 꽃송이버섯의 야생에서는 일반적으로 낙엽송의 그루터기(석 등 2008)에서 발생되고 있은 것으로 보고되었는데 본 연구에서는 리기다소나무 단목에서 초발이 소요일과 발이율이 제일 양호한 것으로 조사되어 꽃송이버섯 단목재배에 적함 한 수종이었다.
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단목살균
단목입봉이 완료되면 살균을 실시하는데 살균온도는 121℃에서 90분간 유지하였으며 살균기에 입식할 때 바구니에 6개정도를 담고 봉지가 손상되지 않도록 주의하였으며, 단목과 단목이 눌리지 않도록 충분한 공간을 확보해 주었다.
- 본 연구에는 리기다소나무 단목재배 영양원의 수용액선발은 그림2에서 와 같이 수량이 가장 양호하고 꽃송이버섯을 재배하는데 가장 적합한 영양원은 생이스트5%처리를 하였을 때 자실체 발생량이 양호한 것으로 판단되었다. 또한 자실체 내 수분 함량은 89%정도 함유되어 있는 것으로 조사되어 다른 버섯에 비해 자실체가 보유하고 있는 수분이 많은 것으로 생각되어 자실체 발생에 많은 수분이 요구됨을 알 수 있었다.
- 꽃송이버섯의 생육기간을 단축하기위한 연구로 영양원 처리 결과는 표 6과 같다. 리기다소나무단목을 지하수로 침지한 처리의 초발이소요일은 107일로 제일 긴 시간이 필요하였고, 생이스트 5, 10%를 처리한 리기다소나무단목이 초발이소요일이 91, 100일로 조사되어 자실체를 발생하기 위한 영양원은 생이스트 5%를 처리한 것에서 자실체를 발생 시키는데 가장 양호한 조건으로 판단되었다.
- 리기다소나무단목의 수용액처리별 꽃송이버섯 자실체 수량은 표7 에서와 같이 생이스트 5%처리와 생이스트 10%에서 발이율은 동일하였지만 단목당 수량은 192.1g, 188.3g정 도로 조사되어 이를 Duncan's multiple range test 한 결과 유이성이 없는 것으로 조사되어 생이스트 5%가(그림 2) 침수용액으로 적합한 것으로 생각되었다.
- 본시험에 사용된 수종의 이화학적 특성은 (표2) 와 같다. 먼저 리그닌함량은 적송에서 29.3%로 가장 많았으며, 상수리나무는 21.4%로 가장 낮았고 낙엽송톱밥과 리기다소나무 톱밥은 비슷한 경향으로 조사되었다. 섬유질은 상수리나무에서 85.
- 3g정도 수확량을 보여 처리에 대한 영향이 인정되나 경제적인 측면에서는 적합하지 않는 것으로 판단되었다. 본 연구에는 리기다소나무 단목재배 영양원의 수용액선발은 그림2에서 와 같이 수량이 가장 양호하고 꽃송이버섯을 재배하는데 가장 적합한 영양원은 생이스트5%처리를 하였을 때 자실체 발생량이 양호한 것으로 판단되었다. 또한 자실체 내 수분 함량은 89%정도 함유되어 있는 것으로 조사되어 다른 버섯에 비해 자실체가 보유하고 있는 수분이 많은 것으로 생각되어 자실체 발생에 많은 수분이 요구됨을 알 수 있었다.
- 13℃(day)/28℃(night)의 조건에서는 6%의 가장 낮은 발이율의 결과를 얻었다. 본 연구에서의 꽃송이버섯 단목재배의 자실체 발생조건은 25℃, 200Lux조건에서 가장 양호한 결과를 얻어 꽃송이버섯의 단목재배의 자실체 발생조건을 제시 할 수 있었다.
- 4%로 가장 낮았고 낙엽송톱밥과 리기다소나무 톱밥은 비슷한 경향으로 조사되었다. 섬유질은 상수리나무에서 85.0%로 가장 많은 것으로 조사되었으며 리기다소나무는 73.7%로 가장 낮은 경양이었다. C/N비는 상수리나무 413.
- 1g으로 조사되어 본 연구에는 리기다소나무단목이 꽃송이버섯을 재배하는데 가장 적합한 수종으로 생각되었다(그림1). 이들의 자실체에 대한 수분 함량은 85~89%로 수종과는 큰 차이가 없는 것으로 조사되었으며, 자실체 건중량 또한 생체중에 큰 영향이 없는 것으로 조사되었다.
- 3g정 도로 조사되어 이를 Duncan's multiple range test 한 결과 유이성이 없는 것으로 조사되어 생이스트 5%가(그림 2) 침수용액으로 적합한 것으로 생각되었다. 지하수와 설탕5% 처리는 단목당 수량이 140.3g, 159.1g로 처리간 차이가 없었으며, 생이스트5%+설탕5%의 처리는 185.3g정도 수확량을 보여 처리에 대한 영향이 인정되나 경제적인 측면에서는 적합하지 않는 것으로 판단되었다. 본 연구에는 리기다소나무 단목재배 영양원의 수용액선발은 그림2에서 와 같이 수량이 가장 양호하고 꽃송이버섯을 재배하는데 가장 적합한 영양원은 생이스트5%처리를 하였을 때 자실체 발생량이 양호한 것으로 판단되었다.
- 수종에 따른 자실체 발생 정도는 표 4와 같이 리기다소나무단목에서 생육이 제일 양호하였다. 하지만 균밀도는 낙엽송과 동일한 경향이었고 꽃송이버섯을 접종하여 자실체 발생의 초기 단계인 초발이 소요일은 낙엽송 단목이 103일로 리기다소나무 단목보다 6일정도 늦은 것으로 조사되었다. 그리고 적송 단목과 상수리나무 단목은 113일, 117일 정도 소요되어 단목재배용으로 적합하지 않은 것으로 판단되었고, 발이율은 리기다소나무 단목이 98.
- 8g이 생산되는 것으로 조사되었다. 하지만 침엽수종류의 동일한 단목인 낙엽송, 적송, 상수리나무 단목의 처리구에서 적송과 상수리나무 단목은 자실체 수량이 각각 45.2g, 45.5g으로 수량이 낮고, 원래 기주 식물인 낙엽송에서는 126.1g으로 조사되어 본 연구에는 리기다소나무단목이 꽃송이버섯을 재배하는데 가장 적합한 수종으로 생각되었다(그림1). 이들의 자실체에 대한 수분 함량은 85~89%로 수종과는 큰 차이가 없는 것으로 조사되었으며, 자실체 건중량 또한 생체중에 큰 영향이 없는 것으로 조사되었다.
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