[논문]땅콩나물 추출물의 신경세포 보호 효과

김현정; 강점순; 박해룡; 황용일

doi:10.5352/jls.2010.20.2.253

땅콩나물 추출물의 신경세포 보호 효과
Neuroprotective Effects of Methanolic Extracts from Peanut Sprouts 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.20 no.2 = no.118, 2010년, pp.253 - 259

김현정 (경남대학교 식품생명학과) , 강점순 (부산대학교 원예생명과학과) , 박해룡 (경남대학교 식품생명학과) , 황용일 (경남대학교 식품생명학과)

초록
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본 연구는 땅콩나물 추출물이 glutamate가 유도하는 세포독성으로부터 신경세포를 보호하는 효과를 확인하였다. 땅콩나물을 부위별로 전체, 머리, 줄기 부분으로 나누어 methanol로 처리하여 얻어진 각각의 추출물 WME, HME 그리고 SME를 이용하여 glutamate에 의하여 유도된 세포독성에 대한 신경세포보호효과를 관찰하였다. 기지의 신경세포 N18-RE-105 세포주를 이용하여 MTT reduction assay, LDH release assay, 형태학적인 변화 및 apoptosis를 관찰한 결과로부터 HME에서 효율적인 신경세포보호효과를 보였다. 다음으로 HME를 이용하여 hexane, diethyl ether, ethyl acetate, water 층으로 분획하여 신경세포 보호 효과를 확인한 결과, diethyl ether 층에서 가장 높은 활성을 확인할 수 있었다. 그리고 HME의 apoptosis 억제 효과를 확인하기 위하여 flow cytometric analysis를 실시한 결과에서 glutamate 만을 처리하였을 경우 sub-G1기 세포가 58.5%의 확인되었으나 HME를 100 mg/ml 동시 처리하였을 때에는 sub-G1 세포가 9.1%로 감소하여 높은 apoptosis 억제 효과를 확인할 수 있었다. 이상의 결과로부터 땅콩나물 머리 부분 methanol 추출물에는 glutamate에 의한 세포독성으로부터 신경세포를 보호하는 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.

Abstract ▼ AI-Helper

The neuroprotective effects of extracts from various parts of peanut sprouts on glutamate-induced neurotoxicity in N18-RE-105 cells were investigated. This study was performed to evaluate the neuroprotective activity of methanolic extracts from the whole (WME), heads (HME), and stems (SME) of peanut sprouts. The neuroprotective effects of these extracts were measured by MTT reduction assay, LDH release assay, phase-contrast microscopy, and flow cytometric analysis on the N18-RE-105 cells. Among these extracts, the HME showed the greatest neuroprotective effects, and was further fractionated with hexane, diethyl ether, ethyl acetate, and water, according to degree of polarity. Out of the fractionated extracts, the diethyl ether layer showed the highest activity on glutamate-induced cytotoxicity in N18-RE-105 cells. The sub-G1 DNA contents of the glutamate-induced severely apoptotic N18-RE-105s were measured by flow cytometric analysis to confirm the HME's anti-apoptotic activity. Interestingly, after incubation with 100 mg/ml of the HME, the proportion of sub-G1 cells of the glutamate-stressed N18-RE-105s had been greatly reduced, from 58.5% to 9.1%. These results imply that HME may have strong potential as a chemotherapeutic agent against neuronal diseases.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구에서는 퇴행성 신경질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있는 물질을 탐색하기 위한 목적으로 땅콩나물을 이용하여 glutamate에 의해 유도되는 산화적 스트레스로 부터 신경세포를 보호하는 효과를 밝히고자 하였다.

제안 방법

세포를 24시간 배양시키고, 부유 세포 및 trypsin 처리한 세포들을 모아서 4℃, 2,000 rpm으로 5분간 원심분리를 한 후, ethanol 1 ml을 넣고 4℃에서세포를 고정시켰다. 4℃에서 2,000 rpm으로 2분간 원심분리하고 PBS 용액으로 수세한 후, propidium iodide/RNase staining buffer (BD pharmingen^TM)을 500 mg/ml 첨가하고, 암소에서 30분간 staining 한 후, flow cytometry caliber (Beckman coulter epics XL)를 이용하여 세포주기를 분석하였다.
Apoptotic cell을 측정하기 위하여 flow cytometer로 세포 주기를 측정하였다. N18-RE-105 세포주를 6 cm dish에 5⨉10⁴ cell/dish로 세포를 분주하여 24시간 배양한 후, HME를 50, 100 mg/ml의 농도로 처리하였다.
이렇게 생성된 peroxinitrie는 세포내 손상, DNA 손상, PARP-1 활성화를 초래하게 되고 특히, PARP-1의 활성화는 NAD를 기질로 하여 poly (ADP-ribosyl) ation을 촉매하여 세포내 NAD와 APT의 고갈과 AIF 활성화로 인한 핵으로의 이동을 유도함으로써 DNA 절단, nuclear condensation을 유도하여 apoptosis를 일으키게 된다[8,17]. Glutamate에 의해 유도된 apoptosis를 알아보기 위해 sub-G1기의 세포수를 측정할 수 있는 flow cytometric 분석을 실시하였다. 여러 추출물 중에서 가장 높은 신경세포 보호 효과를 나타내는 HME를 N18-RE-105 세포주에 처리하여 glutamate가 유도하는 세포독성으로부터 apoptosis 억제 효과를 확인하였다.
반응이 끝나면 반응 정지액을 넣은 뒤, 각각을 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. LDH에 의한 세포독성의 백분율은 배양액과 살아있는 세포에서 유리된 총 LDH에 대한 배양액으로부터 유리된 LDH의 값으로 계산하여 무처리 대조구와 비교한 값을 나타내었다.
Apoptotic cell을 측정하기 위하여 flow cytometer로 세포 주기를 측정하였다. N18-RE-105 세포주를 6 cm dish에 5⨉10⁴ cell/dish로 세포를 분주하여 24시간 배양한 후, HME를 50, 100 mg/ml의 농도로 처리하였다. 세포를 24시간 배양시키고, 부유 세포 및 trypsin 처리한 세포들을 모아서 4℃, 2,000 rpm으로 5분간 원심분리를 한 후, ethanol 1 ml을 넣고 4℃에서세포를 고정시켰다.
그리고 HME의 신경세포 보호 효과를 나타내는 물질의 특성을 확인하기 위하여 극성도에 따라 Fig. 3와 같이 hexane, diethyl ether, ethyl acetate 및 water 순으로 용매 분획하여 그 분획물을 얻었다. 단계 별로 회수된 각 분획물의 신경세포 보호 효과에 대한 결과는 Fig.
따라서 glutamate의 독성에 의한 세포막 손상으로 방출되는 LDH 양을 측정한 결과 농도 의존적으로 방출되는 LDH양이 감소하고 있음을 확인함을 통해 땅콩나물 head 추출물이 신경세포 손상을 강력하게 억제하여 방출되는 LDH 양을 효율적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다. 다음으로 HME가 신경세포의 형태학적 변화에 미치는 영향을 광학현미경을 이용하여 관찰하였다(Fig. 2B). 세포주의 정상군에서는 건강하게 뻗은 신경돌기의 모습을 관찰할 수 있었지만 glutamate가 처리된 대조군은 산화적 스트레스로 인하여 신경돌기가 거의 소멸된 양상을 보임으로써 신경세포가 형태학적으로 큰 변화가 유도된 것을 확인할 수 있었다.
땅콩나물 각 부위별 추출물에 대한 N18-RE-105 세포주의 형태학적 변화를 관찰하기 위해 6-well plate에 2×105 cells/ ml로 2 ml씩 첨가하여 24시간 동안 배양하고 50, 100 mg/ml의 농도로 추출물을 처리한 후, 20 mM의 glutamate에 24시간 노출시켜 phase-contrast microscope (Nikon, Japan)를 이용하여 변화된 N18-RE-105 세포주의 형태학적 특징을 촬영하였다.
땅콩나물 성분 중에서 glutamate로 유도된 세포독성으로부터의 신경세포 보호 효과를 확인하기 위하여 methanol을 이용하여 땅콩나물 전체(WME), 머리(HME), 줄기부분(SME) 추출물을 조제하고 이를 각각 10, 50, 100 mg/ml의 농도로 뇌신경계 세포주 hybridoma N18-RE-105에 처리하고 MTT reduction assay 방법을 통하여 미처리 정상군과 glutamate를 처리한 대조군을 비교하였다. Fig.
땅콩나물 추출물 중에서 HME의 신경세포 보호 효과를 측정하기 위한 방법으로 LDH release assay kit를 이용하여 실험을 실시하였다. 각 세포주를 1×10⁵ cells/ml로 맞춘 후, 100 ml씩 96-well plate에 분주하여 CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양하였다.
땅콩나물의 각 부위별 추출물의 신경세포 보호 효과를 측정하기 위해 MTT reduction assay를 실시하였다. 세포주를 96-well plate에 1×10⁵ cells/ml의 농도로 100 ml씩 분주하여 24시간 동안 37℃, 5% CO₂ incubator에서 배양한 후, DMSO에 녹인 땅콩나물 추출물을 각각 10, 50, 100 mg/ml의 농도로 제조하여 N18-RE-105 세포주에 처리하였다.
머리 부분 추출물인 HME에서 보다 세분화된 분획을 위하여 단계별 분획물을 얻기 위하여 용매의 극성을 달리하여 순차적으로 용매분획을 얻었다. 먼저, hexane과 물을 동량의 비율로 분획 추출하여 hexane 층을 분리하였고, 동일한 방법으로 diethyl ether, ethyl acetate 및 water 층으로 분획하여 얻어진 각각의 용매 분획물을 감압 농축시켜 분획물을 얻었다(Fig.
머리 부분 추출물인 HME에서 보다 세분화된 분획을 위하여 단계별 분획물을 얻기 위하여 용매의 극성을 달리하여 순차적으로 용매분획을 얻었다. 먼저, hexane과 물을 동량의 비율로 분획 추출하여 hexane 층을 분리하였고, 동일한 방법으로 diethyl ether, ethyl acetate 및 water 층으로 분획하여 얻어진 각각의 용매 분획물을 감압 농축시켜 분획물을 얻었다(Fig. 3). 각 추출물 및 분획물은 10 mg/ml로 DMSO (dimethyl sulfoxide)에 녹여 적당한 농도로 희석하였고, 1% DMSO가 되도록 처리하였다.
시료의 부위별 추출물을 조제하기 위하여 땅콩나물을 전체(whole), 머리(head) 및 줄기(stem)부분으로 나누어 실험에 사용하였다. 불순물 제거를 위하여 증류수로 세정 후에 부위별로 분리하여 준비된 시료 5 g에 methanol 100 ml을 가하여 상온에서 3일 동안 정치시켜 추출을 실시하였다. 충분하게 추출단계를 거친 후에 여과지 (Advantee, Tokyo, Japan)로 여과를 실시하였다.
세포배양을 위해 DMEM medium에 10% FBS, 5% HS 및 1× HAT supplement를 첨가하여 사용하였고, 95%의 습도가 유지되는 37℃, 5% CO2 incubator (MCO-18AIC, Sanyo, Osaka, Japan)에서 배양하였다.
세포주를 96-well plate에 1×105 cells/ml의 농도로 100 ml씩 분주하여 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양한 후, DMSO에 녹인 땅콩나물 추출물을 각각 10, 50, 100 mg/ml의 농도로 제조하여 N18-RE-105 세포주에 처리하였다.
시료의 부위별 추출물을 조제하기 위하여 땅콩나물을 전체(whole), 머리(head) 및 줄기(stem)부분으로 나누어 실험에 사용하였다. 불순물 제거를 위하여 증류수로 세정 후에 부위별로 분리하여 준비된 시료 5 g에 methanol 100 ml을 가하여 상온에서 3일 동안 정치시켜 추출을 실시하였다.
Glutamate에 의해 유도된 apoptosis를 알아보기 위해 sub-G1기의 세포수를 측정할 수 있는 flow cytometric 분석을 실시하였다. 여러 추출물 중에서 가장 높은 신경세포 보호 효과를 나타내는 HME를 N18-RE-105 세포주에 처리하여 glutamate가 유도하는 세포독성으로부터 apoptosis 억제 효과를 확인하였다. Fig.
각 세포주를 1×10⁵ cells/ml로 맞춘 후, 100 ml씩 96-well plate에 분주하여 CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 이후 HME를 각각 10, 50, 100 mg/ml의 농도로 세포주에 처리하여 30분 배양하고, 다시 20 mM glutamate를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양액을 새로운 96-well plate에 50 ml 분주하고 LDH reagent를 50 ml 첨가하여 반응 시킨 후, 반응이 완료되면 1 N HCl을 100 ml 첨가하여 반응을 중지시켰다.

대상 데이터

땅콩나물의 신경세포 보호 효과를 시험하기 위해 한국생명공학연구원으로부터 세포주 hybridoma N18-RE-105 세포주를 분양받아 본 실험에 사용하였다. 세포배양을 위해 DMEM medium에 10% FBS, 5% HS 및 1× HAT supplement를 첨가하여 사용하였고, 95%의 습도가 유지되는 37℃, 5% CO2 incubator (MCO-18AIC, Sanyo, Osaka, Japan)에서 배양하였다.
본 실험에서 사용된 땅콩나물은 부산대학교 원예생명과학과로부터 제공받아 추출, 분획하여 실험에 사용하였다. 신경세포주 배양을 위해 필요한 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), fatal bovine serum (FBS), horse serum (HS) 및 HAT supplement 등은 Gibco-BRL (Grand Island, NT, USA)에서 구입하였다.
본 연구에서는 항산화 활성과 신경세포 보호 효과를 가지는 물질을 탐색하기로 하고 여러 식물자원 중에서 땅콩나물을 선정하였다. 유기용매처리에 의하여 얻어진 부위별 추출물을 신경세포주 N18-RE-105에 처리하여 땅콩나물이 가지는 신경 세포 보호 효과를 확인할 수 있었다.
신경세포주 배양을 위해 필요한 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), fatal bovine serum (FBS), horse serum (HS) 및 HAT supplement 등은 Gibco-BRL (Grand Island, NT, USA)에서 구입하였다. 신경세포 보호효과 실험에 사용된 시약으로 L-glutamic acid (Monosodium salt hydrate), 3-[4,5- dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT), dimethyl sulfoxide (DMSO)는 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)제품을 구입하여 사용하였으며, LDH (Lactate dehydrogenase) release assay kit는 Wako Pure Chemical Industries, Ltd. (Osaka, Japan)으로부터 구입하였다. 그 외 실험에 사용된 용매 및 시약은 모두 일급 이상의 등급을 사용하였다.
신경세포주 배양을 위해 필요한 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), fatal bovine serum (FBS), horse serum (HS) 및 HAT supplement 등은 Gibco-BRL (Grand Island, NT, USA)에서 구입하였다.

데이터처리

각 항목에 따라 백분율과 평균치±표준편차(SD)를 구하고 각 추출물의 세포독성 정도를 비교하기 위해 oneway 분산분석(ANOVA)을 시행하여 F값을 구하고 Scheff's test를 이용하여 대조군과 각 구간의 유의성 차이를 검증하였다.
각 항목에 따라 백분율과 평균치±표준편차(SD)를 구하고 각 추출물의 세포독성 정도를 비교하기 위해 oneway 분산분석(ANOVA)을 시행하여 F값을 구하고 Scheff's test를 이용하여 대조군과 각 구간의 유의성 차이를 검증하였다. 통계적 유의성은 5% 수준에서 평가하였다.

성능/효과

땅콩나물 성분 중에서 glutamate로 유도된 세포독성으로부터의 신경세포 보호 효과를 확인하기 위하여 methanol을 이용하여 땅콩나물 전체(WME), 머리(HME), 줄기부분(SME) 추출물을 조제하고 이를 각각 10, 50, 100 mg/ml의 농도로 뇌신경계 세포주 hybridoma N18-RE-105에 처리하고 MTT reduction assay 방법을 통하여 미처리 정상군과 glutamate를 처리한 대조군을 비교하였다. Fig. 1에서의 결과로부터, glutamate 대조군의 세포 생존율은 29.8%로 나타났으나, 이 때 땅콩나물 부위별 추출물을 10, 50, 100 mg/ml의 농도로 각 세포주에 처리했을 때 N18-RE-105 세포주의 생존율은 WME에서 37.2, 39.3, 47.7%였고, HME에서 38.3, 48.1, 62.9%였으며, SME에서 38.9, 42.2, 43.2%로 HME에서 가장 높은 신경세포 보호 효과를 확인할 수 있었다(Fig. 1).
여러 추출물 중에서 가장 높은 신경세포 보호 효과를 나타내는 HME를 N18-RE-105 세포주에 처리하여 glutamate가 유도하는 세포독성으로부터 apoptosis 억제 효과를 확인하였다. Fig. 5의 결과로부터 glutamate 단독 처리 시 58.5%의 sub-G1기 세포가 확인된 반면에 glutamate와 HME 50, 100 mg/ml에서의 sub-G1세포는 각각 23.1, 9.1%로 감소하였다. Glutamate에 의한 신경 세포 손상에 따른 apoptosis는 AIF 활성화를 저해시킴으로 인해서 신경세포 손상을 막을 수 있다고 보고되어져 있다.
30분 동안 배양한 후, 20 mM glutamate를 처리하여 24시간 배양하고 각 well 에 PBS 완충액에 녹인 MTT (5 mg/ml) 용액을 10 ml씩 첨가하여 1시간 동안 다시 반응시켰다. Formazan 형성을 확인한 후, 배지를 완전히 제거하고, well 바닥에 형성된 formazan을 녹이기 위해 100 ml의 DMSO를 첨가한 후, ELISA reader (Model 680, BioRad, USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하여 땅콩나물 부위별 추출물을 처리하지 않고 배양시킨 대조군 세포를 100%로 하였을 때의 상대적인 세포성장 억제율로 나타냈다.
4와 같다. N18-RE-105 세포주에 각 분획물을 각각 10, 50, 100 mg/ml을 처리하였을 때, 여러 용매 분획물 중에서 diethyl ether 분획물에서 가장 높은 활성이 보였다. 즉, diethyl ether 분획물 10, 50, 100 mg/ml을 처리하였을 때 40.
세포주의 정상군에서는 건강하게 뻗은 신경돌기의 모습을 관찰할 수 있었지만 glutamate가 처리된 대조군은 산화적 스트레스로 인하여 신경돌기가 거의 소멸된 양상을 보임으로써 신경세포가 형태학적으로 큰 변화가 유도된 것을 확인할 수 있었다. 그렇지만 HME를 각각 50, 100 mg/ml를 처리했을 때 농도 의존적으로 신경세포 손상정도가 회복되어 있음을 확인 할 수 있었으며 이러한 결과로부터 땅콩나물의 HME에는 glutamate에 의한 신경세포 손상을 억제하거나 혹은 신경세포를 보호하는 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.
3%로 세포사가 감소함을 보였다. 따라서 glutamate의 독성에 의한 세포막 손상으로 방출되는 LDH 양을 측정한 결과 농도 의존적으로 방출되는 LDH양이 감소하고 있음을 확인함을 통해 땅콩나물 head 추출물이 신경세포 손상을 강력하게 억제하여 방출되는 LDH 양을 효율적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다. 다음으로 HME가 신경세포의 형태학적 변화에 미치는 영향을 광학현미경을 이용하여 관찰하였다(Fig.
여과된 추출액은 회전감압농축기(EYELA N-1000, Tokyo, Japan)를 이용하여 40℃에서 감압 농축하여 추출물을 얻었다. 땅콩나물 전체 추출물을 WME, 머리 부분 추출물을 HME, 줄기부분 추출물을 SME라고 명명하였다.
2B). 세포주의 정상군에서는 건강하게 뻗은 신경돌기의 모습을 관찰할 수 있었지만 glutamate가 처리된 대조군은 산화적 스트레스로 인하여 신경돌기가 거의 소멸된 양상을 보임으로써 신경세포가 형태학적으로 큰 변화가 유도된 것을 확인할 수 있었다. 그렇지만 HME를 각각 50, 100 mg/ml를 처리했을 때 농도 의존적으로 신경세포 손상정도가 회복되어 있음을 확인 할 수 있었으며 이러한 결과로부터 땅콩나물의 HME에는 glutamate에 의한 신경세포 손상을 억제하거나 혹은 신경세포를 보호하는 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.
본 연구에서는 항산화 활성과 신경세포 보호 효과를 가지는 물질을 탐색하기로 하고 여러 식물자원 중에서 땅콩나물을 선정하였다. 유기용매처리에 의하여 얻어진 부위별 추출물을 신경세포주 N18-RE-105에 처리하여 땅콩나물이 가지는 신경 세포 보호 효과를 확인할 수 있었다. 땅콩나물은 땅콩을 콩나물처럼 싹을 띄운 것으로 항산화 효과가 있는 레스베라트롤과 숙취해소에 좋다는 asparagine이 많이 함유되어 있다.
5%로 높은 활성을 나타냈으며, hexane, ethyl acetate, water 층에서도 활성을 보이긴 했으나 diethyl ether 분획물과 비교하였을 때 활성이 약한 것을 확인할 수 있었다. 이 결과를 바탕으로 극성도가 높은 ethyl acetate, water 층보다 비극성도가 높은 diethyl ether에서 활성이 확인됨에 따라 땅콩나물에 함유되어 있는 신경세포를 보호하는 물질의 특성은 대체로 비극성의 성질을 가지는 것을 확인할 수 있었다.
이상의 결과로부터 glutamate의 처리는 N18-RE-105 세포 주에 세포독성과 apoptosis를 유도하고 있으며, 땅콩나물의 head 추출물은 glutamate의 산화적 스트레스를 감소시켜 신경세포를 보호하고 있는 것으로 생각된다.
2A와 같다. 정상군에 비해 20 mM glutamate를 처리한 N18-RE-105 세포주는 69.1% 정도의 LDH 방출을 확인 할 수 있는데 반해 20 mM glutamate와 HME 10, 50, 100 mg/ml를 처리한 결과 첨가량에 따라 순차적으로 51.0, 48.1, 47.3%로 세포사가 감소함을 보였다. 따라서 glutamate의 독성에 의한 세포막 손상으로 방출되는 LDH 양을 측정한 결과 농도 의존적으로 방출되는 LDH양이 감소하고 있음을 확인함을 통해 땅콩나물 head 추출물이 신경세포 손상을 강력하게 억제하여 방출되는 LDH 양을 효율적으로 감소시킴을 확인할 수 있었다.
N18-RE-105 세포주에 각 분획물을 각각 10, 50, 100 mg/ml을 처리하였을 때, 여러 용매 분획물 중에서 diethyl ether 분획물에서 가장 높은 활성이 보였다. 즉, diethyl ether 분획물 10, 50, 100 mg/ml을 처리하였을 때 40.6, 46.5, 52.5%로 높은 활성을 나타냈으며, hexane, ethyl acetate, water 층에서도 활성을 보이긴 했으나 diethyl ether 분획물과 비교하였을 때 활성이 약한 것을 확인할 수 있었다. 이 결과를 바탕으로 극성도가 높은 ethyl acetate, water 층보다 비극성도가 높은 diethyl ether에서 활성이 확인됨에 따라 땅콩나물에 함유되어 있는 신경세포를 보호하는 물질의 특성은 대체로 비극성의 성질을 가지는 것을 확인할 수 있었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	땅콩의 영양학적 특징은?	예로부터 우리 조상들은 비교적 손쉽게 재배 가능한 두채류 콩나물과 숙주나물을 식용하였으며, 두채류는 가격의 변동이 적고 계절적 공급 제한이 거의 없어 오늘날까지 꾸준히 애용되고 있다. 땅콩(낙화생)은 풍부한 영양소와 비타민 등 유용한 무기물질을 다량 함유되어 있어, 우리 건강에 유익한 보양식 물이며, 중국에서는 예로부터 장수과로 알려져 있다. 땅콩은 종자(0.
	GSH를 이루고 있는 아미노산 중, glutamate가 야기하는 흥분 독성의 위험성은?	이런 GSH를 이루고 있는 아미노산 중에서 glutamate [5,25]는 중추신경계 시냅스의 15～20%를 차지하는 중심적인 흥분성 신경전달물질로 작용하지만 뇌 속의 과다한 축적은 체내의 항산화 시스템의 기능을 저하시킴으로 인해 산화계와 항산화계의 불균형을 초래하여[13] 신경을 과도하게 흥분시킴으로 흥분독성(excitotoxicity)을 야기하게 된다[4,21]. 이 흥분독성은 세포의 사멸을 일으키게 되어 알츠하이머병, 파킨슨병과 같은 여러 퇴행성 신경질환[2,16]을 유발하게 된다. 이러한 퇴행성 신경질환을 치료하기 위해서 항산화물 처리, 세포 이식, 외과적 수술 등 다양한 치료법이 제시되고 있지만 대부분이 위험요소와 부작용을 가지고 있어 각종 천연자원으로부터 보다 안전하고 신경세포 보호 효과가 뛰어난 치료제의 개발이 요구된다.
	산화적 스트레스의 위험성은?	활성산소는 미토콘드리아내의 전자전달계 및 백혈구 세포의 활성화 등 정상적인 세포기능을 유지하는데 중요한 역할을 담당하는 세포내 신호전달 물질로 작용한다. 그러나 활성산소들은 불안정하고 산화력이 높아 생체물질과 쉽게 반응하기 때문에 인체 내에서 제거되지 못하면 산화적 스트레스(oxidative stress) [10,22]를 유발하게 되며 이러한 산화적 스트레스는 지질과산화를 유도하고 단백질, 세포막 및 DNA 등을 손상시켜 세포의 노화와 변형을 유도함으로써 뇌졸중, 알츠하이머병, 파킨슨병 등 다양한 퇴행성 신경질환을 유발하게 된다[6,28].

참고문헌 (29)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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