[논문]케피어그레인으로 제조한 요쿠르트로부터 Enterococcus faecalis OA18 균주의 분리 및 특성규명

유진주; 김수곤; 서경원; 오석흥

케피어그레인으로 제조한 요쿠르트로부터 Enterococcus faecalis OA18 균주의 분리 및 특성규명
Isolation, Identification, and Characterization of Ornithine-Producing Enterococcus faecalis OA18 from Kefir Grain 원문보기

Korean journal of microbiology = 미생물학회지, v.47 no.3, 2011년, pp.218 - 224

유진주 (우석대학교 대학원 생명공학과) , 김수곤 (우석대학교 대학원 생명공학과) , 서경원 (우석대학교 대학원 생명공학과) , 오석흥 (우석대학교 대학원 생명공학과)

초록
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케피어그레인을 이용하여 제조한 요쿠르트로부터 젖산균 OA18을 분리하여 그 특성을 조사하였다. 분리된 균주는 그람양성, 구균이었으며, 혐기적 조건에서 이산화탄소를 생성하였다. 균주는 MRS 배지에서 $30-37^{\circ}C$ 온도 범위와 pH 7.0-9.0범위에서 잘 자랐으며, 성장을 위한 최적 온도와 pH는 각각 $37^{\circ}C$와 pH 7.0이었다. 분리된 젖산균은 리보오스, D-글루코오스, cellobiose, D-trehalose 등을 분해하여 산을 생성하였고, L-xylose, D-melibiose, inositol은 분해하지 못하였다. 16S rRNA gene 염기서열 분석을 통해 OA18 균주는 유전자은행(NCBI)에 등재되어 있는 Enterococcus faecalis (AB012212)의 염기서열과 99.8% 동질성이 있음을 확인하였다. 이와 같은 생화학적 특성과 염기서열 분석 결과를 토대로 분리된 균주를 Enterococcus faecalis OA18로 명명하였다. E. faecalis OA18균주는 오르니틴 생성능력과 Streptomyces coelicolor subsp. Flavus, S. coeruleorubidus, S. coeruleoaurantiacus, S. coelicolor, S. coeruleoprunus 대한 항균 활성을 보유하고 있었으며, 0-7% NaCl을 함유하는 MRS 배지에서 증식이 가능한 것으로 조사되었다.

Abstract ▼ AI-Helper

Lactic acid bacteria (LAB) OA18 was isolated from yogurt prepared by using Kefir Grain as a starter. The OA18 strain was a Gram-positive, cocci-type bacterium, and able to grow anaerobically with $CO_2$ production. The OA18 strain grew well on MRS broth supplemented with 50 mM arginine at $30-37^{\circ}C$ and pH of 7.0-9.0. The optimum temperature and pH for growth are $37^{\circ}C$ and pH 7.0. The isolate fermented ribose, D-glucose, cellobiose, D-trehalose, but not L-xylose, D-melibiose, and inositol. The 16S rRNA gene sequence of the isolate showed 99.8% homology with the Enterococcus faecalis 16S rRNA gene (Access no. AB012212). Based on the biochemical characteristics and 16S rRNA gene sequence analysis data, it was identified and named as E. faecalis OA18. The E. faecalis OA18 strain showed a high ornithine-producing capacity in the presence of arginine and also showed an antimicrobial activity against Streptomyces strains such as Streptomyces coelicolor subsp. Flavus, S. coeruleorubidus, S. coeruleoaurantiacus, S. coelicolor, S. coeruleoprunus. The cell growth of E. faecalis OA18 strain was maintained in MRS broth with a NaCl concentration of 0-7%.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서, 본 연구는 식용 식품자원인 티벳버섯으로부터 오르니틴 생성능력이 있는 젖산균 Enterococcus faecalis OA18를 분리하여 특성을 조사함으로써 티벳버섯 유래 젖산균의 정보를 파악하고, 그 활용 가능성을 제안하고자 한다.
faecalis strain의 투여가 diarrhea를 경감시키는 것으로 알려지면서 chicken/pig/cattle의 설사를 줄이기 위한 probiotics로 사용되기도 하였다(10). 본 연구에서는 케피어그레인으로 제조한 요쿠르트로부터 E. faecalis OA18를 분리하여 동정하고 ornithine 생산능, 항균능 등의 특성을 조사하였다. E.

제안 방법

16S rRNA gene의 클로닝을 위한 Primer는 5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'(Forward)와 5'-ACGGGCGGGTGTGTRC-3' (Reverse)를 이용하였다. 1% 아가로스 겔 전기영동으로 확인 된 PCR 산물을 PCR purification kit (Bioneer, Korea)를 이용하여 정제한 후, T4 ligase를 이용하여 pGEM T-easy vector (Promega, USA)에 ligation하였으며, 16S rRNA gene sequencing을 통해 OA18의 염기서열 정보를 얻었다. 16S rRNA gene의 염기 서열 정보는 NCBI (www.
16S rRNA gene 염기서열 분석을 통해 OA18 균주와 유전자은행에 등재되어 있는 균주와 유사성을 NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov)에서 DNA의 상동성으로 조사하였다. CLUSTALX 프로그램을 통해 공시균주 Enterococcus faecalis (AB012212)의 염기서열과 OA18 균주의 염기서열이 99.
16S rRNA gene의 염기 서열 정보는 NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov)에 등록하고, DNA의 상동성 조사에 활용하였으며, CLUSTAL X 프로그램을 통해 공시균주의 염기서열과의 상동성을 비교·분석하였다.
0, 37°C) 균주를 48시간 동안 배양하였다. E. faecalis OA18 균주의 오르니틴 생성 정도는 TLC와 HPLC를 이용하여 분석하였다. E.
E. faecalis OA18의 오르니틴 생성능을 조사하기 위하여 50 mM 아르기닌이 첨가된 MRS 배지에서(pH 7.0, 37°C) 균주를 48시간 동안 배양하였다.
E. faecalis OA18의 항균능을 조사하기 위해 항균능 측정 대상 균주의 평판배지 disc에 OA18 균주로부터 얻은 세가지 시료 cell, spent culture, cultured medium을 흡수시켜 투명환의 크기로 대상 균주에 대한 항균능을 측정하였다.
HPLC (Waters, Milford, USA) 분석을 위해 시료는 6-aminoquioly-N-hydroxysuccinimidyl carbonate (AQC)로 유도체화 하였고, 3.9×150 mm AccQ·TagTM (Nova-PakTM C18, Waters) 컬럼으로 유도체들을 분리하였다.
TLC는 ‘Enterococcus 속 균주의 분리’에서와 같이 실시하였다.
0)에 균주를 접종(1%, v/v)하고 37℃에서 48시간 배양한 후 TLC를 이용하여 조사하였다. TLC는 silica gel F₂₅₄ (Merck, Germany)과 표준 오르니틴(Merck)을 이용하여 실시하였다(32).
균주가 생성한 오르니틴 함량은 TLC와 HPLC 분석을 통하여 측정하였다. TLC는 ‘Enterococcus 속 균주의 분리’에서와 같이 실시하였다.
균주의 성장에 대한 pH의 영향을 측정하기 위해 100 mM sodium acetate/100 mM acetate 완충액(pH 4.0, 5.0, 6.0), 100 mM Na2HPO4/100 mM HCl 완충액(pH 7.0, 8.0, 9.0) 및 100 mM Na2HPO4/100 mM NaOH 완충액(pH 10)으로 MRS 배지를 조제하였고, 균주를 37℃에서 12시간 배양 한 후 600 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
0)를 이용하여 4, 10, 25, 30, 37, 40℃ 범위에서 12시간 동안 균주를 배양 한 후 600 nm에서 흡광도를 측정하였다. 내염성을 측정하기 위하여 0, 1, 3, 5, 6, 7, 8%(w/v)의 NaCl이 첨가된 MRS 배지(pH 7.0)에서 균주를 배양한 후(37℃, 24시간) 600 nm에서의 흡광도를 측정하였다(31, 32). 선발된 균주의 오르니틴 생성능을 측정하기 위하여 50 mM 아르기닌이 첨가된 MRS 배지(pH 7.
Flavus (KCCM 41303), Streptomyces coeruleorubidus (KCCM 40535), Streptomyces coeruleoaurantiacus (KCCM 12609), Streptomyces coelicolor (KCCM 11394), Streptomyces coeruleoprunus(KCCM 41264)은 한국미생물보존센터(KCCM)에서 분양 받아 사용하였다(Table 2). 대상 균주는 5 ml의 액체배지에서 24시간(30℃ 또는 37℃) 배양하였으며, 배양된 대상 균주를 0.1 ml씩 1.5% agar가 첨가된 고체 배지에 도말하여 항균성 시험용 평판배지를 조제하였다. 이어 멸균된 paper disc(Advantec^®, 10 mm, Toyo Roshi Kaisha, Japan)를 대상 균주가 도말 된 평판배지 표면에 놓아 밀착 시킨 후 OA18 균주시료를 50 μl를 천천히 흡수시켜 30℃ 또는 37℃에 24-48시간 배양 후 disc 주변에 생성된 생육저해환(clear zone, mm)의 크기를 측정하여 항균 활성을 비교·분석하였다(17).
분리된 균주의 당 발효패턴과 생화학적인 특성은 API 50 CHL kit (bioMérieux, France)를 이용하여 조사하였고 제조사의 지침에 따라 사용하였다.
선발된 균주의 오르니틴 생성능을 측정하기 위하여 50 mM 아르기닌이 첨가된 MRS 배지(pH 7.0)에 균주를 접종하고 37℃에서 48시간 배양하였고, 5,000×g에서 20분간 원심분리 한 후 세포와 배양액을 분리하여 각각 오르니틴을 분석하였다.
E. faecalis OA18의 항균능을 조사하기 위해 항균능 측정 대상 균주의 평판배지 disc에 OA18 균주로부터 얻은 세가지 시료 cell, spent culture, cultured medium을 흡수시켜 투명환의 크기로 대상 균주에 대한 항균능을 측정하였다. Enterococcus 균주는 enterocin A, B, P, Q 등 다양한 박테리오신을 생산하여 Clostridium perfrigens, Vibrio cholera 및 Listeria monocytogenes 등의 식중독균에 대한 항균 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다(20).
콜로니 중에서 단일 콜로니를 형성하면서 노랑색을 띄는 것을 후보 균주로 분리하였고, 이들 후보 균주의 오르니틴 생성능을 확인하였다. 오르니틴 생성능은 50 mM 아르기닌이 첨가된 MRS 배지(pH 7.0)에 균주를 접종(1%, v/v)하고 37℃에서 48시간 배양한 후 TLC를 이용하여 조사하였다. TLC는 silica gel F₂₅₄ (Merck, Germany)과 표준 오르니틴(Merck)을 이용하여 실시하였다(32).
오르니틴 생성능을 갖는 후보 균주로부터 genomic DNA를 분리 정제하여 PCR 증폭을 시행하였다.
9×150 mm AccQ·Tag^TM (Nova-Pak^TM C₁₈, Waters) 컬럼으로 유도체들을 분리하였다. 오르니틴 함량은 표준 오르니틴의 분석결과를 토대로 작성한 표준곡선을 이용하여 산출하였다(31, 32).
0) 및 100 mM Na2HPO4/100 mM NaOH 완충액(pH 10)으로 MRS 배지를 조제하였고, 균주를 37℃에서 12시간 배양 한 후 600 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 온도의 영향을 조사하기 위하여 MRS 배지(pH 7.0)를 이용하여 4, 10, 25, 30, 37, 40℃ 범위에서 12시간 동안 균주를 배양 한 후 600 nm에서 흡광도를 측정하였다. 내염성을 측정하기 위하여 0, 1, 3, 5, 6, 7, 8%(w/v)의 NaCl이 첨가된 MRS 배지(pH 7.
요쿠르트의 제조는 티벳버섯 스타터 1스푼(약 5 g)을 우유 100 ml에 넣고 통성 혐기적인 조건의 37℃ 배양기에서 24-36시간 동안 정치 발효 하여 제조하였다. 요쿠르트 시료는 펩톤수로 10^-1-10^-8 범위로 희석하였고, 젖산균을 선택적으로 분리하기 위해 희석액을 0.002% bromocresol purple (BCP) (Sigma Chemical Co., USA)가 첨가된 DE MAN, ROGOSA and SHARPE (MRS) 한천 배지(Difco, USA)에 1 ml씩 분주하여 37℃에서 48시간 동안 배양하였다(25, 32). 콜로니 중에서 단일 콜로니를 형성하면서 노랑색을 띄는 것을 후보 균주로 분리하였고, 이들 후보 균주의 오르니틴 생성능을 확인하였다.
구매한 티벳버섯을 요구르트 제조를 위한 스타터로 사용하였고, 제조한 요쿠르트는 오르니틴 생산능이 있는 젖산균을 분리하는데 시료로 사용하였다. 요쿠르트의 제조는 티벳버섯 스타터 1스푼(약 5 g)을 우유 100 ml에 넣고 통성 혐기적인 조건의 37℃ 배양기에서 24-36시간 동안 정치 발효 하여 제조하였다. 요쿠르트 시료는 펩톤수로 10^-1-10^-8 범위로 희석하였고, 젖산균을 선택적으로 분리하기 위해 희석액을 0.
이어 멸균된 paper disc(Advantec®, 10 mm, Toyo Roshi Kaisha, Japan)를 대상 균주가 도말 된 평판배지 표면에 놓아 밀착 시킨 후 OA18 균주시료를 50 μl를 천천히 흡수시켜 30℃ 또는 37℃에 24-48시간 배양 후 disc 주변에 생성된 생육저해환(clear zone, mm)의 크기를 측정하여 항균 활성을 비교·분석하였다(17).
분리된 균주의 당 발효패턴과 생화학적인 특성은 API 50 CHL kit (bioMérieux, France)를 이용하여 조사하였고 제조사의 지침에 따라 사용하였다. 카탈라아제 활성은 3%(v/v) 과산화 수소를 이용한 기포생성 여부로 판단하였고, 이산화탄소 생성 여부는 Durham 관을 이용하여 판단하였다(19). 균주의 성장에 대한 pH의 영향을 측정하기 위해 100 mM sodium acetate/100 mM acetate 완충액(pH 4.
케피어그레인을 이용하여 제조한 요쿠르트로부터 젖산균 OA18을 분리하여 그 특성을 조사하였다.
케피어그레인을 이용하여 제조한 요쿠르트로부터 젖산균을 분리하기 위해 bromocresol purple이 첨가된 MRS 한천 배지에서 노랑색을 띄는 25개의 단일 콜로니를 젖산균 후보 균주로 선발하여 OA1-OA25 균주로 각각 표기하였다. 후보 균주들 중에서 오르니틴 생성 가능성을 갖는 균주를 선발하기 위해 TLC를 이용하여 조사하였으며, TLC 상에서 표준 오르니틴 spot과 비교했을 때 뚜렷하게 오르니틴 spot을 나타낸 OA18 균주를 선발하여(Fig.
, USA)가 첨가된 DE MAN, ROGOSA and SHARPE (MRS) 한천 배지(Difco, USA)에 1 ml씩 분주하여 37℃에서 48시간 동안 배양하였다(25, 32). 콜로니 중에서 단일 콜로니를 형성하면서 노랑색을 띄는 것을 후보 균주로 분리하였고, 이들 후보 균주의 오르니틴 생성능을 확인하였다. 오르니틴 생성능은 50 mM 아르기닌이 첨가된 MRS 배지(pH 7.
faecalis OA18 균주의 항균능력은 paper disc법(4)으로 측정하였다. 항균능 측정에 사용한 OA18 균주 시료는 MRS 배지에 배양(37℃, 48 h)한 OA18 균주 배양액(cultured medium), 배양액을 원심분리 하여 얻은 세포(cell), 세포를 제거한 배양 상등액(spent culture)으로 하였다. 항균능 측정 대상 균주 Vibrio parahaemolyticus(KCCM 11965), Bacillus cereus (KCCM 11204), Clostridium perfringens (KCCM 12098), Staphylococcus aureus subsp.
후보 균주들 중에서 오르니틴 생성 가능성을 갖는 균주를 선발하기 위해 TLC를 이용하여 조사하였으며, TLC 상에서 표준 오르니틴 spot과 비교했을 때 뚜렷하게 오르니틴 spot을 나타낸 OA18 균주를 선발하여(Fig. 1) Enterococcus 속 후보 균주로 삼았고, 이 균주의 동정과 생화학적 특성을 조사하였다.

대상 데이터

16S rRNA gene의 클로닝을 위한 Primer는 5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'(Forward)와 5'-ACGGGCGGGTGTGTRC-3' (Reverse)를 이용하였다.
Flavus (KCCM 41303), Streptomyces coeruleorubidus (KCCM 40535), Streptomyces coeruleoaurantiacus (KCCM 12609), Streptomyces coelicolor (KCCM 11394), Streptomyces coeruleoprunus(KCCM 41264)은 한국미생물보존센터(KCCM)에서 분양 받아 사용하였다(Table 2).
균주 분리에 사용한 티벳버섯은 경북 경산시 진량읍 소재 가정에서 배양된 것을 인터넷을 통해 구매하여 사용하였다. 구매한 티벳버섯을 요구르트 제조를 위한 스타터로 사용하였고, 제조한 요쿠르트는 오르니틴 생산능이 있는 젖산균을 분리하는데 시료로 사용하였다. 요쿠르트의 제조는 티벳버섯 스타터 1스푼(약 5 g)을 우유 100 ml에 넣고 통성 혐기적인 조건의 37℃ 배양기에서 24-36시간 동안 정치 발효 하여 제조하였다.
균주 분리에 사용한 티벳버섯은 경북 경산시 진량읍 소재 가정에서 배양된 것을 인터넷을 통해 구매하여 사용하였다.

이론/모형

DNA의 분리는 DNeasy® Blood ＆ Tissue kit (QIAGEN, Germany)를 이용하였고, 정제는 제조사의 지침을 따랐다.
TLC는 ‘Enterococcus 속 균주의 분리’에서와 같이 실시하였다. HPLC는 Baum 등(2)이 사용한 아미노산 분석방법을 기본으로 하고 Park과 Oh(25)의 분석방법을 약간 수정하여 사용한 Yu 등의 방법(32)에 따라서 실시하였다. HPLC (Waters, Milford, USA) 분석을 위해 시료는 6-aminoquioly-N-hydroxysuccinimidyl carbonate (AQC)로 유도체화 하였고, 3.
항균능 측정 대상 균주에 대한 E. faecalis OA18 균주의 항균능력은 paper disc법(4)으로 측정하였다.

성능/효과

Flavus, S. coeruleorubidus, S. coeruleoaurantiacus, S. coelicolor, S. coeruleoprunus 대한 항균 활성을 보유하고 있었으며, 0-7% NaCl을 함유하는 MRS 배지에서 증식이 가능한 것으로 조사되었다.
분리된 젖산균은 리보오스, D-글루코오스, cellobiose, D-trehalose 등을 분해하여 산을 생성하였고, L-xylose, D-melibiose, inositol은 분해하지 못하였다. 16S rRNA gene 염기서열 분석을 통해 OA18 균주는 유전자은행(NCBI)에 등재되어 있는 Enterococcus faecalis (AB012212)의 염기서열과 99.8% 동질성이 있음을 확인하였다. 이와 같은 생화학적 특성과 염기서열 분석 결과를 토대로 분리된 균주를 Enterococcus faecalis OA18로 명명하였다.
gov)에서 DNA의 상동성으로 조사하였다. CLUSTALX 프로그램을 통해 공시균주 Enterococcus faecalis (AB012212)의 염기서열과 OA18 균주의 염기서열이 99.8% 유사함을 확인 하였다. 형태학적 및 생화학적 특성과 염기서열 분석 결과를 종합하고, Sharpe 등(27)의 젖산균 동정방법을 참고로 균주를 E.
E. faecalis OA18 균주는 50 mM 아르기닌이 첨가된 MRS 배지에서 오르니틴을 생성하였고, 생성된 오르니틴의 함량은 49.99 mM로 첨가한 아르기닌을 모두 오르니틴으로 전환하는 것으로 조사되었다(Fig. 3).
E. faecalis OA18 균주는 Streptomyces 균주에 대한 항균능도 우수한 것으로 조사 되었다(Table 3). Streptomyces 균주는 bleomycin, clorobiocin 등 다양한 항생물질을 생성하는 균주로 알려져 있는 바(5, 30) E.
faecalis OA18를 분리하여 동정하고 ornithine 생산능, 항균능 등의 특성을 조사하였다. E. faecalis OA18 균주는 arginine이 50 mM 첨가된 배지에서 arginine을 ornithine으로 전환하는 능력이 우수하였다(Fig. 3). 젖산균 중에는 arginine deiminase (ADI) pathway를 가지고 있어서 arginine를 분해하여 ornithine을 생성하는 능력을 보유하고 있는 것들이 있다.
Flavus(KCCM 41303), Streptomyces coeruleorubidus (KCCM 40535), Streptomyces coeruleoaurantiacus (KCCM 12609), Streptomyces coelicolor (KCCM 11394), Streptomyces coeruleoprunus (KCCM 41264) 균주들에서는 Enterococcus faecalis OA18 균주가 강한 항균 활성을 보였다(Table 3).
OA18 균주의 형태학적 및 생화학적 특성을 조사한 결과 그람 양성의 구균이었으며, 혐기적 조건에서 이산화탄소를 생성하였다.
균주는 MRS 배지에서 30-37°C 온도 범위와 pH 7.0-9.0 범위에서 잘 자랐으며, 성장을 위한 최적 온도와 pH는 각각 37°C와 pH 7.0이었다.
2). 또한 비교적 높은 염 농도(7.0%)에서도 증식이 가능한 것으로 조사되었다(Table 1). 이러한 특성은 Eguchi 등 (7)과 Du Toit 등(6)이 분리한 E.
Enterococcus 균주는 enterocin A, B, P, Q 등 다양한 박테리오신을 생산하여 Clostridium perfrigens, Vibrio cholera 및 Listeria monocytogenes 등의 식중독균에 대한 항균 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다(20). 본 연구에서 분리한 오르니틴을 생성하는 E. faecalis OA18 균주에서는 이들 식중독 균에 대한 항균능이 나타나지 않았다. 또한 Staphylococcus aureus subsp.
본 연구에서 분리한 오르니틴을 생성하는 E. faecalis OA18 균주에서는 이들 식중독 균에 대한 항균능이 나타나지 않았다.
분리된 균주는 MRS 배지에서 30-37°C 범위와 pH 7.0-9.0 범위에서 자랐으며 성장을 위한 최적 온도와 pH는 각각 37°C와 pH 7.0이였다(Fig. 2).
8% 동질성이 있음을 확인하였다. 이와 같은 생화학적 특성과 염기서열 분석 결과를 토대로 분리된 균주를 Enterococcus faecalis OA18로 명명하였다. E.
특히 Streptomyces coelicolor (KCCM 11394)에 대한 투명환의 크기는 cell, spent culture, cultured medium에서 각각 18.31±0.18 mm, 20.20±0.18 mm, 21.70±0.19 mm로 나타났고, Streptomyces coeruleoprunus (KCCM 41264) 균주에 대한 투명환의 크기는 cell, spent culture, cultured medium에서 각각 20.08±0.13 mm, 16.80±0.13 mm, 22.00±0.11 mm로 항균력이 높게 나타났다(Table 3).
8% 유사함을 확인 하였다. 형태학적 및 생화학적 특성과 염기서열 분석 결과를 종합하고, Sharpe 등(27)의 젖산균 동정방법을 참고로 균주를 E. faecalis 균주로 동정하고, E. faecalis OA18로 명명하였으며, 분리된 균주의 16S rRNA gene 서열을 NCBI에 등록을 하였다(등록번호: JN628990).

후속연구

pylori가 결합하는 것을 방해하는 것으로 조사 되었다(24). E. faecalis OA18 균주가 어떤 작용 메커니즘에 의해서 Streptomyces 균주에 대한 항균능을 보이는지에 대한 연구와 박테리오신의 종류 등에 대한 심도 있는 연구가 향 후에 이루어 진다면 E. faecalis OA18 균주의 활용폭을 넓힐 수 있을 것이다. 박테리오신 생산 능력이 있는 Enterococcus 균주는 비교적 높은 염 농도 에서도 증식이 가능한 것으로 알려져 있어 외국에서는 발효소시지의 리스테리아 균의 제어에 활용되고 있다(20, 26).
또한 arginine의 분해에 의한 ornithine의 생성은 ATP의 형성을 수반하기 때문에 arginine은 세포의 성장을 위한 에너지원으로 간주되기도 한다(1). 따라서 본 연구를 통해 분리된 E. faecalis OA18 균주가 티벳버섯 사용 요쿠르트에서 ornithine을 생성하고 요쿠르트의 발효와 기능성뿐만 아니라 안전성에 영향을 주는 젖산균일 가능성이 있을 것으로 판단되어 이에 대한 심도 있는 연구가 필요하다.
우리나라에서도 김치 유산균이 생산하는 박테리오신을 이용하여 훈제연어 등의 리스테리아 균을 제어하려는 시도가 진행되고 있다(11). 따라서, 본 연구를 통해 분리한 E. faecalis OA18 균주가 비교적 높은 염 농도에서도 증식이 가능한 것으로 확인되어(Table 1) 염도가 높은 식품에도 활용될 수 있을 것으로 판단되므로 이에 대한 심도 있는 연구도 향후 과제이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	전자현미경으로 관찰하면 티벳버섯은 어떤 형태로 되어 있는가?	티벳버섯은 일명 케피어그레인(Kefir Grain)이라고도 하며, 전자현미경으로 살펴보면 원형의 다당류 집락에 골이 파여 있고, 이곳에 주요 종균들이 분포되어 있는 형태를 하고 있다. Kefir Grain에 함유되어 있는 미생물로는 Lactobacillus caucasium, Lactococcus lactis ssp.
	케피어는 어디서 유래되었는가?	코카시안(Caucasian) 산악지대에서 유래된 것으로 알려진 케피어(Kefir)는 Kefir Grain으로 발효를 시켜서 만드는데 산과 알코올 발효가 함께 일어나서 발효가 끝나면 0.6-0.
	케피어그레인에 함유되어 있는 미생물로는 무엇이 있는가?	티벳버섯은 일명 케피어그레인(Kefir Grain)이라고도 하며, 전자현미경으로 살펴보면 원형의 다당류 집락에 골이 파여 있고, 이곳에 주요 종균들이 분포되어 있는 형태를 하고 있다. Kefir Grain에 함유되어 있는 미생물로는 Lactobacillus caucasium, Lactococcus lactis ssp. lactis, Streptococcus salivarius subsp. thermophilus 등의 젖산균과 Torula keffir와 Saccharomyces kefi 등의 효모가 주를 이루고 있는 것으로 알려져 있다(13, 14, 15, 21).

참고문헌 (32)

Arena, M.E., F.M. Saguir, M.C. Manca, and M. Nadra. 1999. Arginine, citrulline and ornithine metabolism by lactic acid bacteria from wine. Int'l. J. Food Microbiol. 52, 155-161.
Baum, G., L.Y. Simcha, Y. Fridmann, T. Arazi, H. Katsnelson, and M. Zik. 1996. Calmodulin binding to glutamate decarboxylase is required for regulation and GABA metabolism and normal development in plants. EMBO J. 15, 2988-2996.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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