Objectives : This study was performed to investigate effect of evodiae fructus on acute reflux esophigitis rat induced by pylorus and forestomach ligation operation. Methods : Twenty-four laboratory rats were divided four groups and each group had six rats ; normal intact group, acute reflux esophag...
Objectives : This study was performed to investigate effect of evodiae fructus on acute reflux esophigitis rat induced by pylorus and forestomach ligation operation. Methods : Twenty-four laboratory rats were divided four groups and each group had six rats ; normal intact group, acute reflux esophagitis (RE) control group, two experiment RE group treated extract of evodiae fructus 600 mg/kg (EEF600) and 300 mg/kg (EEF300). All rats was fasted for 18 hr but free water, we induced RE by pylorus and forestomach ligation operation. Intact group and RE control group rats were orally administered a distilled water and two experiment groups were orally administed with EEF 600 mg/5ml/kg and 300 mg/5ml/kg. One hour after, rats were anesthetized, intact group was cut the abdomen open and sutured with 2.0 silk thread. RE control group and EEF group were cut the abdomen open, ligated pyloric canal and forestomach with 2.0 silk thread and sutured. Six hour after the operation, rats were sacrified, collected bloods in the abdominal vein, disectted a esophagus and stomach. The stomach was washed a 1 ml PBS and the esophagus was cut longitudinally and pictured a innter mucosa area to research damages in esophagus. Results : The esophagic tissue damage percentage of reflux esophagitis rat was increased compared to that of normal intact group. But esophagic damage percentage of EEF 600 were significantly decreased compared to that of RE control group. But there was no difference on gastric juice pH between control RE, alpha-tocopherol administration rat group and EEF administration rat group. In esophagus of RE control rat, gastric damage occurred severely and injury percentage of mucosa were increased, but EEF 600 mucous inflammatory damage percentage was significantly compared to that of RE control group. Proinflammatory cytokines such as TNF-alpha, IL-1beta and IL-6 in serum on RE control group were markedly grew than those of intact rat, those of vechicle group treated with EEF 600 and EEF 300 were remarkably decreased compared to production of proinflammatory cytokine of RE control group. In microscopic observation, intact group rat had no hyperemia, mucous injury and exclusion, ulcer and edema. But it could showed mucosa damages, submucosa edema and ulcer in RE control. However, administration of EEF 600 and EEF 300 made esophagus have less inflammation and injury by gastric acid. Conclusions : The results suggest that antiinflammatory Effect of EEF could attenuate the severity of reflux esophagitis and prevent the esophageal mucosal damage, and validate its therapeutic use in esophageal reflux disease.
Objectives : This study was performed to investigate effect of evodiae fructus on acute reflux esophigitis rat induced by pylorus and forestomach ligation operation. Methods : Twenty-four laboratory rats were divided four groups and each group had six rats ; normal intact group, acute reflux esophagitis (RE) control group, two experiment RE group treated extract of evodiae fructus 600 mg/kg (EEF600) and 300 mg/kg (EEF300). All rats was fasted for 18 hr but free water, we induced RE by pylorus and forestomach ligation operation. Intact group and RE control group rats were orally administered a distilled water and two experiment groups were orally administed with EEF 600 mg/5ml/kg and 300 mg/5ml/kg. One hour after, rats were anesthetized, intact group was cut the abdomen open and sutured with 2.0 silk thread. RE control group and EEF group were cut the abdomen open, ligated pyloric canal and forestomach with 2.0 silk thread and sutured. Six hour after the operation, rats were sacrified, collected bloods in the abdominal vein, disectted a esophagus and stomach. The stomach was washed a 1 ml PBS and the esophagus was cut longitudinally and pictured a innter mucosa area to research damages in esophagus. Results : The esophagic tissue damage percentage of reflux esophagitis rat was increased compared to that of normal intact group. But esophagic damage percentage of EEF 600 were significantly decreased compared to that of RE control group. But there was no difference on gastric juice pH between control RE, alpha-tocopherol administration rat group and EEF administration rat group. In esophagus of RE control rat, gastric damage occurred severely and injury percentage of mucosa were increased, but EEF 600 mucous inflammatory damage percentage was significantly compared to that of RE control group. Proinflammatory cytokines such as TNF-alpha, IL-1beta and IL-6 in serum on RE control group were markedly grew than those of intact rat, those of vechicle group treated with EEF 600 and EEF 300 were remarkably decreased compared to production of proinflammatory cytokine of RE control group. In microscopic observation, intact group rat had no hyperemia, mucous injury and exclusion, ulcer and edema. But it could showed mucosa damages, submucosa edema and ulcer in RE control. However, administration of EEF 600 and EEF 300 made esophagus have less inflammation and injury by gastric acid. Conclusions : The results suggest that antiinflammatory Effect of EEF could attenuate the severity of reflux esophagitis and prevent the esophageal mucosal damage, and validate its therapeutic use in esophageal reflux disease.
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문제 정의
그러나 아직까지 급성 역류성 식도염에 미치는 영향에 대한 연구 결과는 보이지 않으며, 위산 역류로 인한 식도점막의 보호기작으로 항산화 효과가 보고되었는데, 吳茱萸의 항산화 효능과 본초학적 효능인 呑酸 증상에 응용되는 측면에서 유효할 것으로 판단되었다. 이에 날문과 대만 부위를 결찰시켜 역류성 식도염을 유발시킨 랫트에 미치는 영향을 알아보고자 위분비량, 위산 pH, 위와 식도의 점막 손상여부, 혈청 내 염증성 싸이토카인의 분석결과 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
이에 저자는 항산화 효능과 항염증 작용이 있는 吳茱萸가 급성 역류성 식도염에 미치는 약리효능을 알아보기 위해, 동물 모델을 이용하여 그 영향을 알아보고자 하였다.
가설 설정
1：Normal intact rats. 2：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with distiled water (30 mg/kg).
1：Normal intact rats. 2：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with distiled water (30 mg/kg). 3：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with α-tocopherol (30 mg/kg).
3：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with α-tocopherol (30 mg/kg).
3：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with α-tocopherol (30 mg/kg). 4：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (600 mg/kg). 5：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (300 mg/kg).
4：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (600 mg/kg). 5：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (300 mg/kg).
T：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with α-tocopherol (30 mg/kg). A：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (600 mg/kg). B：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (300 mg/kg).
A：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (600 mg/kg). B：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with extract of evodiae fructus (300 mg/kg).
N：Normal intact rats. CT：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with distiled water (30 mg/kg). Toco： Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with α-tocopherol (30 mg/kg).
N：Normal intact rats. C：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with distiled water. T：Control rat operated pylorus and forestomach ligation reated with α-tocopherol (30 mg/kg).
제안 방법
랫트에서 위, 식도를 분리하였으며 이를 10% phosphate-buffered formalin에서 하루 이상 고정하였다. 12시간 이상 흐르는 물에서 formalin을 세척한 후 70% ethanol에서 1시간, 80% ethanol에서 1시간, 90% ethanol에서 1시간, 100% ethanol에서 1시간씩 단계적으로 탈수시켰다. Xylen에 1시간씩 3번의 투명과정 후 paraffin에 1시간씩 2번 침투과정을 실시한다.
포매과정(embedding)을 거쳐 약 3 ㎛의 두께로 박절 (paraffin-section)하여 slide 위에 조직을 얹고 건조시킨 후 hematoxylin-eosin 염색을 하였다. Slide의 물기를 없애고 mounting medium (Sigma, MO, USA)을 떨어뜨린 후 조직과 cover glass 주위에 공기가 생기지 않도록 주의하면서 cover glass를 덮어 영구보존할 수 있도록 하였다. 조직의 사진촬영과 위 식도 점막의 손상 분석은 I-Solution lite 프로그램 (Innerview Co.
동물 사육실의 조건은 conventional system으로 22±2℃, 1일 중 12시간은 200～300 Lux로 조명하고, 12시간은 모든 빛을 차단하였다.
랫트는 6마리씩을 한 군으로 하여 개복수술만 하고 봉합한 정상군 (Intact), 치료제를 처리하지 않은 대조군 (reflux esophagitis control； RE), α-tocopherol (30 ㎎/㎏) 처리군 (PC), 吳茱萸 추출물 투여군 (Extract of evodiae fructus；EEF 600 ㎎/㎏, 300 ㎎/㎏)으로 나누어 약물 투여를 시작하였다.
수술 전 24시간 절식한 후, Zoletile mixture (Vibrac, France)을 25 mg/kg 복강주사하여 마취하였다. 마취한 뒤, 2센티 정도 개복을 하였고, 대만부위를 실크실로 묶었으며, 인접한 날문부위를 다른 실크실로 묶었다. 수술 후 봉합을 하고 회복 챔버에 머무르게 한 후 케이지로 이동시켰다.
부검 후 식도와 위를 적출하고, 식도는 세로로 수술용 가위를 이용하여 절단하였다. 절개한 식도를 적당량의 생리식염수로 세척하고 깨끗한 부직포위에 전개한 다음 식도 내면을 펼치고 광학디지털카메라로 촬영하였다.
부검시 복부 정맥에서 혈액을 채취하여 원심 분리 후 혈청을 분리하였다. 분리된 혈청을 이용하여 TNF-alpha ELISA 실험 분석 결과, 정상군의 혈청 내 TNF-alpha 분비량은 0.
촬영된 사진은 이미지분석 프로그램을 이용하여 식도의 전체 면적(mm2)과 염증, 발적, 충혈이 일어난 부위 (mm2)를 측정하였다. 분석은 전체 식도면적 중 병변부위의 면적에 대한 비율을 백분율로 분석하였다.
동물 사육실의 조건은 conventional system으로 22±2℃, 1일 중 12시간은 200～300 Lux로 조명하고, 12시간은 모든 빛을 차단하였다. 사료는 고형사료 (조단백질 22.1% 이상, 조지방 8.0% 이하, 조섬유 5.0% 이하, 조회분 8.0% 이하, 칼슘 0.6% 이상, 인 0.4% 이상, 삼양사, 항생제 무첨가)와 물을 충분히 공급하였다.
, korea)와 물을 충분히 공급하고 온도 22 ± 2℃, 습도 40 ± 5%, 12시간-12시간 (light-dark cycle)의 환경에서 1주간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 수술 전 24시간 절식한 후, Zoletile mixture (Vibrac, France)을 25 mg/kg 복강주사하여 마취하였다. 마취한 뒤, 2센티 정도 개복을 하였고, 대만부위를 실크실로 묶었으며, 인접한 날문부위를 다른 실크실로 묶었다.
수집된 위 내용물은 pH paper (MFRS Toshniwal, instrument manufacturing limited, Ajmer, India)를 이용하여 측정하였다. 측정지를 뽑아서 위 내용물이 담긴 튜브에 살짝 담근 다음 빼내어 측정색상표와 대조하여 pH값을 측정하였다.
역류에 대한 진단검사는 식도내압측정과 24hrs ambulatory pH monitoring 검사가 있다. 식도내압측정으로 LES 압력의 저하를 확인하고, 24hrs ambulatory pH monitoring으로 위 내용물이 역류하는지 알 수 있다. 식도내시경으로 식도점막에 발적, 미란, 궤양이 관찰되면 역류성식도염을 의심할 수 있다19).
吳茱萸 (Evodiae Fructus) 200 g에 증류수 1,000 ㎖를 가하여 열탕 추출기에서 3시간 추출하여 얻은 액을 흡입 여과하고, 이를 감압 추출장치로 농축하였다. 위 과정을 3회 반복하였고, 3회 농축한 것을 모아서 다시 동결 건조기를 이용하여 완전 건조시켜 吳茱萸 추출물 (38 g, extract of Evodiae Fructus)을 제조하였으며 수율은 19%였다. 이를 냉동 (-84℃) 보관하면서 적당한 농도로 증류수에 희석하여 실험시에 사용하였다.
이는 위산이 대조군과 약물 투여군의 pH가 같음에도 불구하고 EEF 투여로 인해 식도의 점막 손상 감소되었음을 보여준다. 위산에 의한 식도 염증 보호 효과는 항산화, 항염증으로 유추할 수 있으며, 이를 알아보기 위해 혈청 내 염증성 싸이토카인을 측정하였다.
유문 및 전위부 결찰 수술 6시간 후, 식도를 분리하였고 수술용 가위를 이용하여 식도를 세로로 절단하였다. 절단된 식도 내부는 적당량의 PBS로 세척한 후 깨끗한 부직포 위에 전개했으며 이를 광학 디지털 카메라 (Canon, Japan)를 이용하여 촬영하였다.
유문 및 전위부 결찰 수술 6시간 후, 정상 대조군을 제외한 모든 실험동물에서 결찰한 위부분을 적출한 다음 PBS 1 ml로 위내부를 세척하였으며, 이를 수집하여 5분간 2000 g에서 원심분리한 다음, 부피를 측정하였다.
부검 후 식도와 위를 적출하고, 식도는 세로로 수술용 가위를 이용하여 절단하였다. 절개한 식도를 적당량의 생리식염수로 세척하고 깨끗한 부직포위에 전개한 다음 식도 내면을 펼치고 광학디지털카메라로 촬영하였다. 촬영된 사진은 이미지분석 프로그램을 이용하여 식도의 전체 면적(mm2)과 염증, 발적, 충혈이 일어난 부위 (mm2)를 측정하였다.
유문 및 전위부 결찰 수술 6시간 후, 식도를 분리하였고 수술용 가위를 이용하여 식도를 세로로 절단하였다. 절단된 식도 내부는 적당량의 PBS로 세척한 후 깨끗한 부직포 위에 전개했으며 이를 광학 디지털 카메라 (Canon, Japan)를 이용하여 촬영하였다. 손상된 식도점막 측정은 I-Solution lite(Innerview Co.
랫트는 6마리씩을 한 군으로 하여 개복수술만 하고 봉합한 정상군 (Intact), 치료제를 처리하지 않은 대조군 (reflux esophagitis control； RE), α-tocopherol (30 ㎎/㎏) 처리군 (PC), 吳茱萸 추출물 투여군 (Extract of evodiae fructus；EEF 600 ㎎/㎏, 300 ㎎/㎏)으로 나누어 약물 투여를 시작하였다. 정상군과 대조군은 생리식염수를 수술 전 1회 각각 매일 경구 투여하였고, alpha-tocopherol군은 alpha-tocopherol을 30mg/kg농도로 corn oil(Sigma, USA), EEF 처리군은 수술 1시간 전 5 ml/kg 용량으로 구강 투여하였다.
절개한 식도를 적당량의 생리식염수로 세척하고 깨끗한 부직포위에 전개한 다음 식도 내면을 펼치고 광학디지털카메라로 촬영하였다. 촬영된 사진은 이미지분석 프로그램을 이용하여 식도의 전체 면적(mm2)과 염증, 발적, 충혈이 일어난 부위 (mm2)를 측정하였다. 분석은 전체 식도면적 중 병변부위의 면적에 대한 비율을 백분율로 분석하였다.
수집된 위 내용물은 pH paper (MFRS Toshniwal, instrument manufacturing limited, Ajmer, India)를 이용하여 측정하였다. 측정지를 뽑아서 위 내용물이 담긴 튜브에 살짝 담근 다음 빼내어 측정색상표와 대조하여 pH값을 측정하였다.
대상 데이터
吳茱萸 (Evodiae Fructus) 200 g에 증류수 1,000 ㎖를 가하여 열탕 추출기에서 3시간 추출하여 얻은 액을 흡입 여과하고, 이를 감압 추출장치로 농축하였다. 위 과정을 3회 반복하였고, 3회 농축한 것을 모아서 다시 동결 건조기를 이용하여 완전 건조시켜 吳茱萸 추출물 (38 g, extract of Evodiae Fructus)을 제조하였으며 수율은 19%였다.
본 실험에 사용한 吳茱萸 (Evodiae Fructus)는 옴니허브(영천) 제약회사에서 구입한 것을 대구한의대학교 한의과대학 본초학교실에서 관능검사상 약전에 합격한 것만을 정선하여 사용하였다.
실험 동물은 SLC (Japan)에서 분양받은 7주령의 랫트를 2주일 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 동물 사육실의 조건은 conventional system으로 22±2℃, 1일 중 12시간은 200～300 Lux로 조명하고, 12시간은 모든 빛을 차단하였다.
실험동물인 7주령의 랫트는 일본 SLC에서 공급 받아 실험 당일까지 고형사료 (항생제 무첨가, 삼양사료 Co., korea)와 물을 충분히 공급하고 온도 22 ± 2℃, 습도 40 ± 5%, 12시간-12시간 (light-dark cycle)의 환경에서 1주간 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
데이터처리
모든 수치는 평균 ± 표준편차로 표시하였으며, 다중비교 검증을 이용하여 통계처리를 실시하였고, 분산동질성을 Levene test를 실시하여 검증 하였다. 등분산일 경우, one way ANOVA test를 실시한 다음 least-significant differences (LSD) test로 사후 검증을 실시하여 실험군 간의 유의성을 측정하였다. 비등분산일 경우에는 비모수 검증인 Kruskal-Wallis H test를 실시하여 유의성이 인정된 경우에는, Mann-Whitney U test 를 실시하여 실험군 간의 유의성을 검증하였다.
모든 수치는 평균 ± 표준편차로 표시하였으며, 다중비교 검증을 이용하여 통계처리를 실시하였고, 분산동질성을 Levene test를 실시하여 검증 하였다.
등분산일 경우, one way ANOVA test를 실시한 다음 least-significant differences (LSD) test로 사후 검증을 실시하여 실험군 간의 유의성을 측정하였다. 비등분산일 경우에는 비모수 검증인 Kruskal-Wallis H test를 실시하여 유의성이 인정된 경우에는, Mann-Whitney U test 를 실시하여 실험군 간의 유의성을 검증하였다. 모든 통계처리는 SPSS for Windows (Release 14.
측정된 싸이토카인은 TNF-alpha, IL-1beta로, 분석은 Multi-Analyte ELISArray® Kit (Milipore (Rockford, IL, USA)를 이용하여 실험메뉴얼에 따라 수행하였으며, 분석 기기는 luminex (Awareness Technology Inc., Pal City, FL, USA)를 이용하여 490 nm 파장으로 측정하였다.
이론/모형
둘째로 약물요법이며 위산분비를 억제하기 위해 H2-수용체 차단제, 양성자펌프 억제제 (Proton pump inhibitor； PPI)를 복용하며 항콜린제는 위산분비를 억제시키나 LES압력을 저하시키므로 사용하지 않는다. 셋째 외과요법으로 Nissen fundoplication 수술을 실시한다. 이것은 식도 하부 주변에 위바닥 부위를 전체적으로 휘감아 붙여 봉합하는 방법이다19).
절단된 식도 내부는 적당량의 PBS로 세척한 후 깨끗한 부직포 위에 전개했으며 이를 광학 디지털 카메라 (Canon, Japan)를 이용하여 촬영하였다. 손상된 식도점막 측정은 I-Solution lite(Innerview Co., 한국) 프로그램을 이용하여 실제 손상 부위의 면적을 측정하였다.
Slide의 물기를 없애고 mounting medium (Sigma, MO, USA)을 떨어뜨린 후 조직과 cover glass 주위에 공기가 생기지 않도록 주의하면서 cover glass를 덮어 영구보존할 수 있도록 하였다. 조직의 사진촬영과 위 식도 점막의 손상 분석은 I-Solution lite 프로그램 (Innerview Co., 한국)을 이용하였다.
성능/효과
Gastric volumn 측정 결과, intact 랫트군의 gastric volumn은 1.3±0.3 ml이고, RE 대조군의 gastric volumn은 3±0.3 ml로 유의성 있게 증가되었으며, alpha-tocopherol 투여군의 gastric volumn은 2.2±0.3 ml로 RE 대조군의 gastric volumn에 비해 유의성 있게 감소되었다.
6). 그러나 alpha-tocopherol약물을 구강투여한 실험군과 EEF를 구강 투여한 실험군의 위점막의 출혈 정도가 약해진 것을 볼 수 있었다. 이는 대조군의 위산 pH와 약물투여군의 pH 차이가 없었기 때문에 (Fig.
35 ml/kg 으로 각각 감소되었다. 따라서 항산화제인 alpha-tocopherol 투여군의 위 내용물 양은 증류수만 투여한 대조군에 비해 유의성 있게 감소되었고, EEF 투여군은 유의성 있는 차이가 없었다(Fig. 1).
8 pg/ml로 유의성있게 증가되었다. 반면에 alpha-tocopherol약물 투여군과 EEF를 구강투여한 실험군은 각각 대조군에 비해 유의성 있게 감소되었다 (Fig. 7).
반면에 alpha-tocopherol약물 투여군은 IL-1beta 분비량은 37.1±3 pg/ml로 유의성있게 대조군보다 감소되었으며, EEF를 600 mg/kg과 300 mg/kg 농도로 구강투여한 실험군은 각각 43.5±3.3 pg/ml, 47.3±3.4 pg/ml로 600 mg/kg 투약군에서 대조군에 비해 유의성 있게 감소되었다 (Fig. 8).
반면에 alpha-tocopherol약물 투여군은 IL-6 분비량은 36.3±4.1 pg/ml로 유의성있게 대조군보다 감소되었으며, EEF를 600 mg/kg과 300 mg/kg 농도로 구강투여한 실험군의 IL-6 분비량은 각각 37.2±3.8 pg/ml, 39.0±3.4 pg/ml로 600 mg/kg 투약군에서 대조군에 비해 유의성 있게 감소되었다 (Fig. 9).
반면에 alpha-tocopherol약물 투여군의 IL-1beta 분비량은 36.3±1.6 pg/ml로 유의성있게 대조군보다 감소되었으며, EEF를 600 mg/kg과 300 mg/kg 농도로 구강투여한 실험군은 각각 37.2±1.6 pg/ml, 39±3.4 pg/ml로 600 mg/kg 투약군에서 대조군에 비해 유의성 있게 감소되었다 (Fig. 9).
분리된 혈청을 이용하여 TNF-alpha ELISA 실험 분석 결과, 정상군의 혈청 내 TNF-alpha 분비량은 0.4±0.2 pg/ml이였으며, RE 대조군의 TNF-alpha 발현량은 13.4±0.8 pg/ml로 유의성있게 증가되었다.
식도 조직슬라이드를 현미경으로 분석한 결과, 정상군의 식도조직은 점막층, 점막하층, 근육층의 손상이 발생되지 않았으나 RE대조군의 식도점막층은 거의 탈락이 되어 있었고, 점막하층의 출혈과 부종이 발견되었다. 그러나 alpha-tocopherol약물투여군과 EEF 구강투여군에서는 대조군에 비해 점막층의 탈락률이 현저히 감소되었다 (Fig.
역류성 식도염 수술을 시행 한 후, 증류수만 투여한 대조군은 2.83±1.51 ml/kg이었고, alpha-tocopherol 투여군은 2.04±0.42 ml/kg, EEF 600 mg/kg 투여군은 2.96±0.61 ml/kg, EEF 300 mg/kg 투여군은 2.55±0.35 ml/kg 으로 각각 감소되었다.
역류성 식도염 수술을 시행 한 후, 증류수만 투여한 대조군의 위산 pH는 3.13±0.35이었고, alpha-tocopherol 투여군은 3.29±0.49, EEF 600 mg/kg 투여군은 3.33±0.38, EEF 300 mg/kg 투여군은 3.83±0.35로 유의성 있는 변화가 없었다 (Fig. 2).
역류성 식도염 수술을 시행하지 않는 정상랫트의 식도에 대한 육안적 손상 검사결과 점막의 손상이 발견되지 않았으나, 수술 후 증류수를 구강투여한 대조군은 식도 점막이 위산에 의해 손상을 받아 발적, 충혈, 염증이 발생되었으며 손상부위 비율이 54.6±11.4% 로 분석되었으며, alpha-tocopherol을 구강투여한 실험군은 35.2±9.5%로 유의성있게 감소되었으며, EEF를 600 mg/kg과 300 mg/kg으로 구강투여한 실험군은 각각 39.2±9.8, 37.3±13.9로 600 mg/kg 투약군에서 유의성있게 손상정도가 감소되었다 (Fig. 3, Fig. 4).
위 실험 결과 약물투여군과 대조군의 gastric volumn과 gastric acid pH가 별다른 차이점이 보이지 않았다. 이는 약물 투여로 인해 위 분비가 저해되지 않는다는 것을 의미하며 아울러 위산의 pH 변화가 없기 때문에 위산이 역류하여 위와 식도 자극에 약물투여군과 대조군이 별다른 차이가 없다는 것을 의미한다.
위 조직 슬라이드를 이미지로 캡쳐한 다음 분석할 결과, 정상군의 위 점막 손상은 보이지 않았고, 대조군의 위 점막에는 출혈이 진행된 것을 확인하였다. 그러나 alpha-tocopherol 약물과 EEF를 투여한 실험군의 출혈 정도는 대조군에 현저히 감소되었다 (Fig.
위 조직의 손상 여부를 알아보고자 현미경 이미지 분석을 실시한 결과, 정상군의 위점막 손상은 전혀 보이지 않았으나, 급성적으로 역류성 식도염을 유발시킨 대조군은 점막층의 출혈을 볼 수 있었다. 이는 위산에 의한 위보호가 약해져서 손상을 가져온 것으로 판단된다(Fig.
위산 pH 측정 결과, intact 랫트군의 gastric acid의 pH는 6.5±0.9이고, RE 대조군의 gastric acid의 pH는 3.1±0.3로 유의성있게 증가되었으며, alpha-tocopherol 투여군의 gastric acid pH는 3.3±0.5로 RE 대조군과 유의성있는 차이는 없었다.
혈청 내 IL-1beta 분비량 측정 결과, 정상군의 혈청 내 IL-1beta 분비량은 26±2.4 pg/ml이였으며, RE 대조군의 IL-1beta 발현량은 53.8±4.6 pg/ml로 유의성있게 증가되 었다.
혈청 내 IL-1beta 분비량 측정 결과, 정상군의 혈청 내 IL-1beta 분비량은 26±2.4 pg/ml이였으며, RE 대조군의 IL-1beta 발현량은 53.8±4.6 pg/ml로 유의성있게 증가되었다.
혈청 내 IL-6 분비량 측정 결과, 정상군의 혈청 내 IL-6 분비량은 14.9±0.7 pg/ml이였으며, RE 대조군의 IL-6 발현량은 40.2±1.9 pg/ml로 유의성있게 증가되었다.
혈청 내 IL-6 분비량 측정 결과, 정상군의 혈청 내 IL-6 분비량은 14.9±1.9 pg/ml이였으며, RE 대조군의 IL-6 발현량은 40.2±3.2 pg/ml로 유의성있게 증가되었다.
혈청 내 TNF-alpha 분비량 측정 결과, 정상군의 혈청 내 TNF-alpha 분비량은 0.4±0.2 pg/ml이였으며, RE 대조군의 TNF-alpha 발현량은 13.4±0.8 pg/ml로 유의성있게 증가되었다.
후속연구
그러나 alpha-tocopherol약물을 구강투여한 실험군과 EEF를 구강 투여한 실험군의 위점막의 출혈 정도가 약해진 것을 볼 수 있었다. 이는 대조군의 위산 pH와 약물투여군의 pH 차이가 없었기 때문에 (Fig. 2), 약물에 의한 위보호 효과가 증진되었다고 판단되며 mucin의 분비량, hexose 발현량, sialic acid 분석을 통해 이에 대한 연구는 차후에 진행될 필요가 있다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
吳茱萸는 무엇인가?
吳茱萸는 운향과에 속한 낙엽관목 혹은 소교목인 吳茱萸 Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth., 石虎 E. rutaecarpa Benth var. officinalis Hunang 혹은 毛脈吳茱萸 E. rutaecarpa Benth var. bodinieri Huang의 미성숙 과실로 8~10월에 녹갈색이 되고 심皮가 갈라지기 전에 채취하여 微火로 焙乾한다1).
吳茱萸의 성미 등 특징은 무엇이며, 어떤 증상의 치료에 응용되는가?
性味는 熱하고 辛苦하며 有毒하여 肝·脾·胃·腎經에 귀경하여 散寒止痛, 降逆止嘔, 助陽止瀉의 效能으로 厥陰頭痛, 寒疝腹痛, 寒濕脚氣, 經行腹痛, 脘腹脹痛, 嘔吐炭酸, 五更泄瀉, 外治口瘡, 高血壓에 응용되고 있다1). 특히 肝胃不和로 인한 嘔吐炭酸에 사용되는데, 呑酸 증상은 바로 위산이 역류되는 현상에 가까운 증상으로 판단된다.
吳茱萸은 어떤 화학 성분을 함유하는가?
吳茱萸의 화학성분으로 항암효능이 있는 evodimine2), 항염작용이 있는 dehydroevodiamine, evodiamine, rutaecarpine, synephrine3), 8종의 quinolone alkaloids4) (1-methyl-2-nonyl- 4(1H)-quinolone, 1-methyl-2-[(Z)-6-undecenyl]-4(1H)-quinolone,1-methyl-2-undecyl-4(1H)-quinolone, evocarpine, 1-methyl-2-[(6Z,9Z)-6,9-pentadecadienyl]-4(1H)-qui nolone, dihydroevocarpine, 1-methyl-2-[(Z)-10- pentadecenyl]-4(1H)-quinolone and 1-methyl-2-[(Z)-6-pentadecenyl]-4(1H)-quinolone), wuzhuyuamide-I, 5-hydroxyrutaecarpine, 14-formyldihydrorutaecarpine5) 등이 분석되어 보고되었다.
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