[논문]Glucose와 Yeast Extract를 이용하여 배양된 유산균을 이용한 하수 일차 슬러지의 가용화

이상민; 최한나; 신정훈; 이은영

doi:10.4014/kjmb.1210.10010

Glucose와 Yeast Extract를 이용하여 배양된 유산균을 이용한 하수 일차 슬러지의 가용화
An Investigation of the Solubilization of Primary Sewage Sludge using Lactic Acid Bacteria Cultured in a Glucose and Yeast Extract Medium 원문보기

한국미생물·생명공학회지 = Korean journal of microbiology and biotechnology, v.40 no.4, 2012년, pp.424 - 429

이상민 (수원대학교 환경에너지공학과) , 최한나 ((주)태영건설 기술연구소) , 신정훈 ((주)태영건설 기술연구소) , 이은영 (수원대학교 환경에너지공학과)

Abstract ▼ AI-Helper

The intention of this research was to investigate the solubilization of primary sewage sludge using lactic acid bacteria cultured in a glucose and yeast extract medium. Glucose as the carbon source and yeast extract as the source of nitrogen were chosen as an economic medium with the potential for the mass production of lactic acid bacteria. The optimal concentrations of the medium were 3% (w/v) glucose and 2% (w/v) yeast extract. In this study, in order to improve field applications for the solubilization of sludge at sewage treatment plants, a powdered form of lactic acid bacteria was produced. The optimal inoculum of the powder for the maximum efficiency of solubilization was 1% (w/v). In that condition, the SCOD value increased from 8600 (mg/L) at the beginning of experiment to 10290 (mg/L) at 96 h, with the highest solubilization rate (20.6% DDCOD) and 11.2% (SCOD). Also, the TVFAs of the lactic acid bacteria inoculation group were produced more than that of the control group. In particular, acetic acid was produced 5 times more in the experimental group than in the control group. In this research, the potential of lactic acid bacteria in the pretreatment of primary sewage sludge as a solubilizer, and as an energy source producer for microbial fuel cells was revealed.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 탄소원과 질소원의 첨가량이 유산균의 성장 및 생성물에 미치는 영향을 알아보았다.
유산균을 이용한 슬러지 가용화가 효과적인 전처리 방법이라 하더라도 실제 하수 슬러지 소화공정에 사용하기 어려울 것이다. 따라서 이러한 문제점을 해결하기 위해서 상용화 되어있는 배지를 대신할 수 있는 방법을 연구하게 되었다.
이러한 결과는 무기염류를 첨가하지 않은 상태에서 최소한의 영양성분을 공급하여도 균체를 배양할 수 있다는 것을 나타낼 수 있으며, 하수 슬러지에 적용하였을 때 전체 공정의 경제성 확보가 가능하다는 것을 의미한다. 따라서, 이와 같은 방법으로 배양된 미생물을 이용한 가용화 및 유기산의 생산에 대한 검토도 수행하였다. 하지만 무기염류 또한 미생물 생육에 있어 중요한 요소이기 때문에 경제성에 따른 무기염류의 선택을 위한 추가적 연구가 필요하다고 사료된다.
이러한 어려움을 해결하고자 생물학적 전처리 방법에 대해 연구를 하게 되었다. 본 연구에서는 유산균을 이용한 생물학적 전처리 방법에 대해 연구를 진행하였다.
본 연구에서는 잉여 슬러지가 아닌 일차 슬러지를 대상으로 가용화를 수행하고, 이를 후단 공정에 적용하기 위한 기초 실험을 진행하였다. 유산균 가용화 공정을 하수처리장에 적용할 때에는 배양을 위한 경제적인 배지의 선정이 필요하다.
따라서, 초음파 전처리와 오존 전처리 방법은 혐기성 소화공정에 사용한다 하더라도 소화 효율을 보장할 수 없고 또한 운영하는데 있어 조작이 많이 필요하고 관리하는데 어려움이 발생하고 있다. 이러한 어려움을 해결하고자 생물학적 전처리 방법에 대해 연구를 하게 되었다. 본 연구에서는 유산균을 이용한 생물학적 전처리 방법에 대해 연구를 진행하였다.
본 연구에서는 탄소원과 질소원의 첨가량이 유산균의 성장 및 생성물에 미치는 영향을 알아보았다. 탄소원의 과다첨가가 균의 생육에 저해하는 영향을 주는 연구 결과[23]가 보고된 바 있는데 본 실험에서는 탄소원의 첨가량에 따른 실험을 진행하였다. 탄소원은 15%(w/v)으로 첨가하고 일정농도(1.

제안 방법

다양한 접종량의 유산균이 접종된 슬러지 시료를 96 시간 배양한 후 시료를 채취하여 TCOD, SCOD, TSS, pH를 측정하였다. 슬러지의 pH의 값은 유산균의 접종량 3%에서 가장 낮은 값(4.
따라서 위의 연구 결과를 바탕으로 유산균을 glucose 3%, yeast extract 2%를 넣어 제조한 배지에서 전 배양하였고 이를 30 L 발효기(KS B 6231, KOREA), 연속 원심분리기(HC-105, KOREA), 동결건조기(Freeze dryer, PVTFD30RSS, KOREA)를 이용하여 분말형태로 만들었다.
250 mL 혈청병에 슬러지 200 mL와 양을 다르게 한 유산균을 넣어주고 질소 가스로 공기를 치환한 후, 고무마개와 알루미늄 캡을 이용하여 밀봉하였다. 슬러지는 37℃, 180 rpm shaking incubator에서 보관하였고 4일 후 시료를 채취하여 SCOD(Soluble chemical oxygen demand), TCOD(Total chemical oxygen demand), TSS(Total Suspended solids), pH meter(Thermo Benchtop, USA)로 pH 측정하여 슬러지 가용화 정도를 측정하였다. COD분석은 COD분석용 Kit(HACH, COD_cr/HR kit)을 이용하여 분광광도계(Hach, DR/5000)로 분석하였고 TSS, VSS 분석은 standard methods에 준하여 분석하였다[2].
실험은 250 mL 혈청병에 슬러지 200 mL을 넣어 준 후 유산균을 넣어 준 것과 넣어주지 않은 것으로 나누어 질소가스로 공기를 치환한 후, 고무마개와 알루미늄 캡을 이용하여 밀봉하였다. 슬러지는 37℃, 180 rpm shaking incubator에서 보관하였고 초기시료와 96시간 후의 시료를 채취하여 TVFAs 분석을 하였다(Fig. 3). Fig.
최적의 접종량을 이용한 유산균의 유기산 생성을 확인하기 위해 TVFAs(acetic acid, propionic acid, i-butyric acid, n-butyric acid, i-valeric acid, n-valeric acid) 분석을 하였다. 유기산은 불꽃 이온화 검출기(FID)가 장착된 gas chromatography (Hewlett Packerd, HP 5890 SeriesⅡ)를 이용하여 분석하였다. 이 때 gas chromatography의 분석조건은 glass packed column (ID:3.
유산균에 의한 가용화 효율은 이전 연구[3, 14, 19]를 바탕으로 NaOH를 이용한 가용화 효율은 DD_COD(Disintegration Degree of the COD), TCOD를 이용한 가용화 효율은 S_COD(Solubilization of the COD)로 하여 다음과 같이 구하였다.
유산균의 접종량에 따른 슬러지 가용화를 평가하기 위해서 유산균 접종량을 1%(w/v), 1.5%, 2%, 2.5%, 3%로 다르게 설정하여 실험을 하였다. 본 연구에서 가용화 실험에 사용된 슬러지는 S시 환경사업소에서 채취한 일차 슬러지이며 0.
유기산은 불꽃 이온화 검출기(FID)가 장착된 gas chromatography (Hewlett Packerd, HP 5890 SeriesⅡ)를 이용하여 분석하였다. 이 때 gas chromatography의 분석조건은 glass packed column (ID:3.2 mm, L:1.5 m)과 불꽃 이온화 검출기(FID)를 사용하였다. Oven 온도는 230℃, injector 온도는 230℃, detector 온도는 250℃로 설정하였다.
최적의 접종량을 이용한 유산균의 유기산 생성을 확인하기 위해 TVFAs(acetic acid, propionic acid, i-butyric acid, n-butyric acid, i-valeric acid, n-valeric acid) 분석을 하였다. 유기산은 불꽃 이온화 검출기(FID)가 장착된 gas chromatography (Hewlett Packerd, HP 5890 SeriesⅡ)를 이용하여 분석하였다.
탄소원의 과다첨가가 균의 생육에 저해하는 영향을 주는 연구 결과[23]가 보고된 바 있는데 본 실험에서는 탄소원의 첨가량에 따른 실험을 진행하였다. 탄소원은 15%(w/v)으로 첨가하고 일정농도(1.2%)의 질소원(yeast extract)을 넣은 것을 실험군으로 하였으며, 대조군으로 MRS 배지에서 배양한 유산균을 이용하여 비교실험을 하여 탄소원의 최적의 농도 값을 구하였고 질소원 최적의 농도 값 또한 같은 방법으로 진행하였다. 배양은 500ml의 혈청병을 이용하였으며 배지 100ml을 넣고 121℃에서 15분 동안 멸균 한 후 유산균을 접종하고 질소 가스로 내부의 공기를 치환한 후, 고무마개로 밀봉하였다.
16로 변화가 크지 않았으며 접종량의 증가함에 따라 저하된 pH의 값은 96시간이 지난 후 조금씩 증가하는데 이는 시간이 지남에 따라 유산균의 유기산 생성이 감소하였을 것이라 사료된다. 하지만 보다 정확한 결과를 확인하기 위해서는 TVFAs(Total Volatile Fatty Acids)의 분석이 필요하다고 판단하여 유산균 접종량 실험에서 추가 분석하였다(Fig. 3). 각각의 시료의 초기값과 96시간이 지난 후의 TCOD, SCOD, 가용화 효율을 Fig.

대상 데이터

5%, 3%로 다르게 설정하여 실험을 하였다. 본 연구에서 가용화 실험에 사용된 슬러지는 S시 환경사업소에서 채취한 일차 슬러지이며 0.85 mm 체로 걸러 협잡물을 제거하였다. 슬러지 기초성상은 Table 1에 정리하였다.
유산균은 포도당을 lactic acid로 전환하는 동형 유산균과 포도당이나 기타 당을 이용하여 lactic acid, CO₂, ethanol 또는 acetic acid로 생성시키는 이형 유산균이 있으며, 본 실험에서는 이형 유산균으로서 국립농업과학원에서 분양 받은 KACC 10553 Lactobacillus brevis를 사용하였다. 양 등(2008)의 연구에 따르면 동형 유산균 3종(Lactobacillus amylophilus, L.

이론/모형

슬러지는 37℃, 180 rpm shaking incubator에서 보관하였고 4일 후 시료를 채취하여 SCOD(Soluble chemical oxygen demand), TCOD(Total chemical oxygen demand), TSS(Total Suspended solids), pH meter(Thermo Benchtop, USA)로 pH 측정하여 슬러지 가용화 정도를 측정하였다. COD분석은 COD분석용 Kit(HACH, COD_cr/HR kit)을 이용하여 분광광도계(Hach, DR/5000)로 분석하였고 TSS, VSS 분석은 standard methods에 준하여 분석하였다[2].

성능/효과

1.2%의 yeast extract에 다양한 농도의 glucose를 첨가한 배지와 MRS 배지 각각에 유산균을 접종한 후 생장곡선을 비교한 결과, MRS 배지에서의 미생물농도(cell density)가 600 nm에서 1.86으로 가장 높은 값을 나타내었으나 특히, glucose 3%에서의 유산균의 배양이 1.73으로 다른 실험군인 1%(1.72), 2%(1.72), 4%(1.68), 5%(1.67)와 비교하여 미생물농도(cell density)가 높은 것을 확인할 수 있었다. 이는 탄소원의 과다 첨가가 균의 생육에 저해하는 영향을 주는 결과[18]와 유사하다고 할 수 있다.
3). Fig. 3에서 TVFAs 농도는 acetic acid, propionic acid, i-butyric acid, n-butyric acid, i-valeric acid, n-valeric acid를 나타내는데 처리하지 않은 대조군(control)에 비해 L. brevis를 첨가한실험군에서 높은 것을 확인할 수 있었다. 이는 유산균이 슬러지의 유기물을 섭취하고 유기산을 생성한다는 것을 나타내는 결과이다.
1에서 각 조건에서의 SCOD의 농도는 96시간이 지난 후 증가됨을 확인하였다. 그 중 1%(w/v) 접종하였을 때의 조건에서 SCOD값이 8,600(mg/L)에서 10,290(mg/L)으로 가장 많이 가용화 되어졌으며, 20.6%(DD_COD), 11.2%(S_COD)로 가용화율이 가장 높아 최적의 유산균 접종량 조건을 찾을 수 있었다. 이전 연구에서는 반송 슬러지를 대상으로 한 연구가 많기 때문에 일차 침전지의 슬러지를 대상으로 실험한 이번 연구 결과는 흥미로울 수 있을 것이다.
또한, 유산균에 의해 TSS 농도는 96시간이 지나고 감소하였고, TSS 제거율은 0.5% 접종량시에 가장 좋은 결과를 나타내었는데 이는 유산균의 접종량이 늘어남에 따라 TSS 농도에 영향을 미쳤을 것이라 판단된다. 실험결과를 바탕으로 슬러지 가용화를 위한 최적의 접종량은 1% 조건이 우수한 것을 확인할 수 있었다(Fig.
유산균은 탄수화물, 단백질 등을 섭취하는 속도가 빨라 혐기성 소화공정에 소요되는 체류시간을 줄일 수 있고 통성 혐기성균이기 때문에 공기의 유무에 관계없이 운영할 수 있어 슬러지 가용화 공정에 적합한 균이라고 할 수 있지만, 유산균을 이용한 하수 슬러지 가용화에 대한 연구는 부족한 상황이다. 본 연구진은 이전 연구에서 12종의 동형 유산균과 이형 유산균을 이용하여 잉여 슬러지를 대상으로 가용화를 시도한 바 있으며, 이형 유산균이 동형에 비하여 우수한 가용화 효율을 보이며 가용화를 위한 최적 접종 비율은 10%(v/v)라는 결과를 도출하였다[25].
5% 접종량시에 가장 좋은 결과를 나타내었는데 이는 유산균의 접종량이 늘어남에 따라 TSS 농도에 영향을 미쳤을 것이라 판단된다. 실험결과를 바탕으로 슬러지 가용화를 위한 최적의 접종량은 1% 조건이 우수한 것을 확인할 수 있었다(Fig. 2).
유산균을 접종하였을 시 SCOD 및 TCOD가 매우 높은 값을 나타내었는데 이는 유산균의 의한 슬러지 가용화가 진행됨을 보여주는 결과이다.
13)으로 2% 이상에서는 비슷한 값을 유지하여 최적의 농도 값을 2%로 정하였다. 이러한 결과는 무기염류를 첨가하지 않은 상태에서 최소한의 영양성분을 공급하여도 균체를 배양할 수 있다는 것을 나타낼 수 있으며, 하수 슬러지에 적용하였을 때 전체 공정의 경제성 확보가 가능하다는 것을 의미한다. 따라서, 이와 같은 방법으로 배양된 미생물을 이용한 가용화 및 유기산의 생산에 대한 검토도 수행하였다.

후속연구

특히, 혐기성 소화 및 미생물연료전지에서 주로 이용되는 acetic acid의 경우 96시간이 경과한 후의 실험군은 10,725 ppm, 대조군(control) 2,012 ppm으로 비해 약 5배의 발생량을 보였다. 이러한 결과는 하수 슬러지의 전처리 과정으로서의 역할과 미생물연료전지의 에너지원으로서의 활용가능성을 보여주는 것으로 판단된다.
2%(S_COD)로 가용화율이 가장 높아 최적의 유산균 접종량 조건을 찾을 수 있었다. 이전 연구에서는 반송 슬러지를 대상으로 한 연구가 많기 때문에 일차 침전지의 슬러지를 대상으로 실험한 이번 연구 결과는 흥미로울 수 있을 것이다.
따라서, 이와 같은 방법으로 배양된 미생물을 이용한 가용화 및 유기산의 생산에 대한 검토도 수행하였다. 하지만 무기염류 또한 미생물 생육에 있어 중요한 요소이기 때문에 경제성에 따른 무기염류의 선택을 위한 추가적 연구가 필요하다고 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	슬러지의 용해성을 증가시키기 위한 전처리 방법은 어떤 것들이 있는가?	슬러지의 용해성을 증가시키기 위한 전처리 방법으로 열처리, 산처리, 알칼리처리, 초음파처리 및 오존처리 등이 있다[1, 5-7, 11, 21, 23, 24]. 이러한 가용화 기술은 세포체내 물질을 용출시켜 후단의 혐기성세균의 기질 이용성 및 탈수성을 증가시키는 방법이다[8].
	하수 슬러지의 유효 이용 방법 중 혐기성 소화법의 장점은 무엇인가?	하수 슬러지의 유효 이용 방법 중 혐기성 소화법은 공정이 간단하여 에너지 소비가 적고 소화슬러지 생성량이 적으며 에너지 회수(메탄가스 생산)가 가능하다는 장점이 있다. 반면 고형 유기물의 액화(용해) 단계가 전체 반응의 공정속도를 제한하여 긴 처리시간이 소요되며 그에 다른 소화조의 부피증가 등의 문제점도 있다[8].
	하수 슬러지의 유효 이용 방법 중 혐기성 소화법의 문제점은 무엇인가?	하수 슬러지의 유효 이용 방법 중 혐기성 소화법은 공정이 간단하여 에너지 소비가 적고 소화슬러지 생성량이 적으며 에너지 회수(메탄가스 생산)가 가능하다는 장점이 있다. 반면 고형 유기물의 액화(용해) 단계가 전체 반응의 공정속도를 제한하여 긴 처리시간이 소요되며 그에 다른 소화조의 부피증가 등의 문제점도 있다[8]. 따라서, 혐기성 소화공정의 전처리를 통한 유기물 액화단계가 최적화될 필요가 있다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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