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문제 정의
- 따라서 본 연구는 병해충관리용 유기농업자재로 많이 사용되고 있는 원료 중 대표적으로 님 추출물과 고삼 추출물의 토끼 피부에 대한 홍반, 가피 및 부종정도를 판정하는 피부자극성시험과 토끼 눈의 홍채, 각막, 결막의 임상증상을 판정하는 안점막자극성시험을 실시하여 작업자의 안전성을 검토하였다.
제안 방법
- 4시간의 노출시간 종료 후 도포물을 제거하고 1시간, 24시간, 48시간, 72시간 후 홍반과 가피형성, 부종의 정도를 농촌진흥청 ‘인축독성 시험기준과 방법’의 피부반응의 평가에 따라 관찰하여 피부 1차 자극지수(Primary irritation index, P.I.I)를 산출하였고, 농촌진흥청 ‘농약의 인축독성 시험성적서 검토기준’의 피부 1차 자극표(Rural Development Administration, 2012)에 따라 시험물질의 피부 자극정도를 분류하였다(Table 1).
- 병해충 관리용 유기농업자재 허용물질로 지정된 식물추출물 중 님 추출물과 고삼추출물 원제의 독성 평가를 위해 피부자극성과 안점막자극성시험을 수행하였다. 시험결과, 원산지가 다른 님 추출물 2종은 모두 피부자극성과 안점막자극성이 없는 것으로 평가하였고, 고삼 추출물은 피부자극성은 없었고 안점막자극성이 강도로 나타났으나 시간이 경과함에 따라 자극이 경감하는 것으로 평가했다.
- 안점막자극성시험은 농촌진흥청 고시 ‘농약 및 원제의 등록기준’ 중 별표 12 인축독성 시험기준과 방법(Rural Development Administration, 2012)으로 수행하였다. 시험개시 24시간 전에 양쪽 눈에 이상이 없는 개체를 선별하여 시험 당일 토끼 오른쪽 눈 하안검에 시험물질 0.1 ml 처리하고 무 처리한 왼쪽 눈은 대조군으로 사용하였다. 시험물질 처리 1시간, 24시간, 48시간, 72시간 후에 홍채, 각막, 결막의 임상증상을 관찰하여 농촌진흥청 ‘인축독성 시험기준과 방법’ 안반응의 평가표에 따라 급성 안점막 자극지수(Acute ocular irritation index, A.
- 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 10%, 환기횟수 13-18/h, 조명시간 12시간(오전 6시-오후 6시) 및 조도 200-300 Lux로 설정된 ‘농촌진흥청 국립농업과학원 화학물질안전과 동물사육실’에서 사육하였다. 시험기간 중 사료는 실험동물용 고형사료(코아텍, 경기)를, 음용수는 수돗물을 자유급식 시켰다.
- 시험물질 처리 24시간 전 토끼 등 부위의 털을 15 × 15 cm 넓이로 피부가 손상되지 않도록 깎았다.
- 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 10%, 환기횟수 13-18/h, 조명시간 12시간(오전 6시-오후 6시) 및 조도 200-300 Lux로 설정된 ‘농촌진흥청 국립농업과학원 화학물질안전과 동물사육실’에서 사육하였다.
대상 데이터
- 본 시험에서는 님 추출물 2종(미얀마산, 주성분 1.84%, 인도산, 주성분 0.75%), 고삼 추출물 1종(중국산, 주성분 0.26%)을 시험물질로 사용하였으며, ㈜그린포커스와 ㈜고려바이오에서 구입하여 사용하였다.
- 5 kg의 New Zealand White Rabbit(코아텍, 경기)를 각 시험 당 3마리씩 사용하였다. 실험동물은 1주일간의 검역 및 순화를 거친 뒤 건강한 개체를 선발하였다.
- 모든 시험은 ‘국립농업과학원 동물실험윤리위원회’의 운영지침(훈령제66호)에 따라 수행하였다(승인번호: NAAS1304). 피부자극성 및 안점막자극성 시험에 체중 2.0~2.5 kg의 New Zealand White Rabbit(코아텍, 경기)를 각 시험 당 3마리씩 사용하였다. 실험동물은 1주일간의 검역 및 순화를 거친 뒤 건강한 개체를 선발하였다.
이론/모형
- 시험물질 처리 1시간, 24시간, 48시간, 72시간 후에 홍채, 각막, 결막의 임상증상을 관찰하여 농촌진흥청 ‘인축독성 시험기준과 방법’ 안반응의 평가표에 따라 급성 안점막 자극지수(Acute ocular irritation index, A.O.I.)를 산출하였고, 농촌진흥청 ‘농약의 인축독성 시험성적서 검토기준’의 안점막자극표(Rural Development Administration, 2012)에 따라 실험물질의 안점막 자극정도를 분류하였다(Table 1).
- 안점막자극성시험은 농촌진흥청 고시 ‘농약 및 원제의 등록기준’ 중 별표 12 인축독성 시험기준과 방법(Rural Development Administration, 2012)으로 수행하였다.
- 피부자극성시험은 농촌진흥청 고시 ‘농약 및 원제의 등록기준’ 중 별표 12 인축독성 시험기준과 방법(Rural Development Administration, 2012)으로 수행하였다.
성능/효과
- 고삼 추출물(중국산)은 노출 후 1시간째부터 각막 혼탁, 결막 발적 등의 증상과 눈을 뜨기 힘든 상태였고, 노출 24시간째에는 심한 각막 혼탁 증상과 홍채의 반응이 약하고 결막이 충혈, 심하게 부풀며 많은 양의 배출물을 분비하는 등 극심한 독성증상이 관찰되었다. 각막, 홍채, 결막의 독성 증상은 노출 72시간째부터 회복되었으며 노출 8일차인 192시간째에는 M.O.I.가 6으로 거의 정상적인 상태로 호전되었다. 관찰기간동안 체중은 8.
- 고삼 추출물(중국산)은 노출 후 1시간째부터 각막 혼탁, 결막 발적 등의 증상과 눈을 뜨기 힘든 상태였고, 노출 24시간째에는 심한 각막 혼탁 증상과 홍채의 반응이 약하고 결막이 충혈, 심하게 부풀며 많은 양의 배출물을 분비하는 등 극심한 독성증상이 관찰되었다. 각막, 홍채, 결막의 독성 증상은 노출 72시간째부터 회복되었으며 노출 8일차인 192시간째에는 M.
- 가 6으로 거의 정상적인 상태로 호전되었다. 관찰기간동안 체중은 8.3% 증가하였으며 급작스런 체중변화 및 기타 이상증상은 관찰되지 않았다. 급성안점막자극지수는 80.
- 님 추출물(미얀마산)은 노출 1시간 후부터 결막에 발적이 관찰되었으나 노출 48시간째부터 회복되었고 기타 각막이나 홍채는 이상이 없었다. 관찰기간동안 체중은 8.9% 증가하였으며 급작스런 체중변화 및 기타 이상증상은 관찰되지 않았다. 급성안점막자극지수는 2.
- 님과 고삼 추출물 등 시험약제 3가지에 대하여 홍반, 가피 및 부종을 기준으로 피부자극을 평가한 결과는 Table 2와 같았다. 님 추출물(미얀마산), 님 추출물(인도산) 및 고삼 추출물(중국산) 모두 관찰기간 동안 홍반, 가피, 부종이 관찰되지 않았고 체중은 각각 11.6%, 11.5%, 10.9% 증가하였으며 급작스런 체중변화 및 기타 이상증상은 관찰되지 않았다. 피부자극 1차 지수(P.
- 본 시험결과 님 추출물(미얀마산)의 급성안점막자극지수는 2.67, 님 추출물(인도산)의 급성안점막자극지수는 0으로 안점막에 대한 자극성이 없는 것으로 평가했고, 고삼 추출물(중국산)의 급성안점막자극지수는 80.67로 강도의 자극성이 있는 것으로 평가했다.
- 병해충 관리용 유기농업자재 허용물질로 지정된 식물추출물 중 님 추출물과 고삼추출물 원제의 독성 평가를 위해 피부자극성과 안점막자극성시험을 수행하였다. 시험결과, 원산지가 다른 님 추출물 2종은 모두 피부자극성과 안점막자극성이 없는 것으로 평가하였고, 고삼 추출물은 피부자극성은 없었고 안점막자극성이 강도로 나타났으나 시간이 경과함에 따라 자극이 경감하는 것으로 평가했다. 제충국, 고삼 및 님 추출물을 일정 비율로 혼합한 약제 2종의 자극성 시험결과 피부자극성은 경도 및 중도, 안점막자극성은 무자극성으로 평가(Kang, 2012)한 결과와는 일치하지 않지만 원제의 원산지 및 추출법에 따라 독성반응이 달라질 수 있고, 단일 원제에 대한 안점막자극성이 강한 것으로 평가된 고삼 추출물은 유기농업자재로 사용할 때 농작업자에 대한 표시문구 및 그림문자 표시가 필요한 것으로 판단된다.
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