한국산 고지질 미세조류 Botryococcus의 분포 및 생장 특성 Physiological and Ecological Characteristics of Lipid-Producing Botryococcus Isolated from the Korean Freshwaters원문보기
한국산 고지질 Botryococcus를 확보하기 위해 시료채취를 하였고, 실험실에서 Botryococcus sp.를 분리하였다. 분리된 Botryococcus sp.는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B. sudeticus J2의 생리적 특성 분석을 위해 배양실험을 수행하였고, 생장률과 바이오매스 생산성 그리고 광합성효율을 측정하였다. 또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질함유량과 지방산 조성을 분석하였다. B. sudeticus J2의 생태적, 생리적 연구 후 2배의 광량과 2% $CO_2$ 조건에서 배양을 수행함으로써 최적 배양조건을 탐색하고자 하였다. 분리된 B. sudeticus J2는 비교를 위한 B. braunii UTEX 572보다 높은 바이오매스 생산성과 지질생산성을 보였으나 바이오매스 생산을 위한 다른 후보 미세조류에 비해서는 낮은 생장률을 보였다. 따라서 바이오디젤 생산을 위한 조류로 B. sudeticus J2를 활용하기 위해서는 본 연구에서 밝혀진 광저해에 대한 내성에 초점을 맞추어 최적 배양을 위한 광조건을 탐색하는 연구가 필요하다.
한국산 고지질 Botryococcus를 확보하기 위해 시료채취를 하였고, 실험실에서 Botryococcus sp.를 분리하였다. 분리된 Botryococcus sp.는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B. sudeticus J2의 생리적 특성 분석을 위해 배양실험을 수행하였고, 생장률과 바이오매스 생산성 그리고 광합성효율을 측정하였다. 또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질함유량과 지방산 조성을 분석하였다. B. sudeticus J2의 생태적, 생리적 연구 후 2배의 광량과 2% $CO_2$ 조건에서 배양을 수행함으로써 최적 배양조건을 탐색하고자 하였다. 분리된 B. sudeticus J2는 비교를 위한 B. braunii UTEX 572보다 높은 바이오매스 생산성과 지질생산성을 보였으나 바이오매스 생산을 위한 다른 후보 미세조류에 비해서는 낮은 생장률을 보였다. 따라서 바이오디젤 생산을 위한 조류로 B. sudeticus J2를 활용하기 위해서는 본 연구에서 밝혀진 광저해에 대한 내성에 초점을 맞추어 최적 배양을 위한 광조건을 탐색하는 연구가 필요하다.
Recently, sustainable production of biofuel using algal biomass is being pursued because of its enormous potential. First and foremost, securing superior strains to develop an efficient production system for algal biodiesel through screening or genetic improvement of microalgae is necessary. The gen...
Recently, sustainable production of biofuel using algal biomass is being pursued because of its enormous potential. First and foremost, securing superior strains to develop an efficient production system for algal biodiesel through screening or genetic improvement of microalgae is necessary. The genus of Botryococcus is regarded as one of the superior microalgae for biodiesel production due to its ability to accumulate high amounts of lipids and hydrocarbons. However, its low growth rate is a bottleneck for large-scale production and commercialization. The purpose of this study is to obtain indigenous Botryococcus strains which possess high lipid content and biomass productivity. The Botryococcus sp. was isolated from the Seobu Reservoir in Jeju Island and identified as Botryococcus sudeticus J2 by comparative analysis of 18s rRNA gene and ITS regions. The biomass productivity and lipid content of B. sudeticus J2 were 0.116 g $L^{-1}day^{-1}$ and 40.1% of dry wt., respectively. This was higher than the value of B. braunii UTEX 572, which is widely regarded as a superior strain among Botryococcus species. The relatively high growth rate of B. sudeticus J2 was achieved under a light intensity of 240 ${\mu}mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$ with ambient air spargingwhen compared to 120 ${\mu}mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$ with 2% $CO_2$ supply. In summary, it is likely that the isolated B. sudeticus J2 can be used for the mass cultivation and biodiesel production.
Recently, sustainable production of biofuel using algal biomass is being pursued because of its enormous potential. First and foremost, securing superior strains to develop an efficient production system for algal biodiesel through screening or genetic improvement of microalgae is necessary. The genus of Botryococcus is regarded as one of the superior microalgae for biodiesel production due to its ability to accumulate high amounts of lipids and hydrocarbons. However, its low growth rate is a bottleneck for large-scale production and commercialization. The purpose of this study is to obtain indigenous Botryococcus strains which possess high lipid content and biomass productivity. The Botryococcus sp. was isolated from the Seobu Reservoir in Jeju Island and identified as Botryococcus sudeticus J2 by comparative analysis of 18s rRNA gene and ITS regions. The biomass productivity and lipid content of B. sudeticus J2 were 0.116 g $L^{-1}day^{-1}$ and 40.1% of dry wt., respectively. This was higher than the value of B. braunii UTEX 572, which is widely regarded as a superior strain among Botryococcus species. The relatively high growth rate of B. sudeticus J2 was achieved under a light intensity of 240 ${\mu}mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$ with ambient air spargingwhen compared to 120 ${\mu}mol$ photons $m^{-2}s^{-1}$ with 2% $CO_2$ supply. In summary, it is likely that the isolated B. sudeticus J2 can be used for the mass cultivation and biodiesel production.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질 함유량과 지방산 조성을 분석하였다. B. sudeticus J2의 생태적, 생리적 연구 후 2배의 광량과 2% CO2 조건에서 배양을 수행함으로써 최적 배양조건을 탐색하고자 하였다. 분리된 B.
본 연구에서는 미세조류 유래의 바이오디젤을 생산하는데 있어 후보 미세조류로서 Botryococcus를 활용하기 위하여 다음과 같은 연구를 수행하였다. 첫째, 육수학, 조류학 등 관련 전문학술지 문헌조사를 통하여 토착 Botryococcus의 국내 분포를 조사하였다.
제안 방법
B. sudeticus J2 최적 생장조건을 구하기 대조구(외기, 120 μmol photons m-2 s-1), 2% CO2 처리구, 광도 2배 처리구(240 μmol photons m-2 s-1)에서 19일간 배양하면서 생장을 조사하였다(Fig. 4).
B. sudeticus J2와 B. braunii UTEX 572의 지질함량(Lipid content) 및 지질생산성(Lipid productivity)을 비교 분석하였다 (Table 4). 9일 배양된 B.
B. sudeticus J2의 광합성효율 측정을 위해 9일간 배양된 시료를 0, 35, 70, 100, 140, 235, 350, 410 μmol photons m-2 s-1의 8개의 광도에서 광합성에 의한 산소 발생량을 측정하였고, 이를 바탕으로 P-I (photosynthesis-irradiance) curve를 작성하였다(Fig. 2).
B. sudeticus J2의 광합성효율을 측정하기 위해 0, 35, 70, 100, 140, 235, 350, 410 μmol photons m-2 s-1의 광도에서 광합성의 결과로 발생하는 산소량을 Oxygraph (Hansatech, England)로 측정하였다.
B. sudeticus J2의 최적 배양을 시도하기 위해 앞서 실험했던 배양 조건을 대조구로 하였고, 대조구에서 각각 2%의 CO2를 넣어준 처리구와 대조구에서 광량을 240μmol photons m-2 s-1로 조사하는 처리구를 대조구와 함께 배양하였다.
25 mL 첨가하여 organic phase 에 fatty acid methyl ester (FAME)를 추출하였다. Organic phase는 reagent 4 (10.8 g sodium hydroxide, 900 mL 증류수)로 세척한 후 C8~C24까지의 FAME 표준물질(18918-1AMP, Supelco, Sigma-Aldrich Co. LLC., St. Louis, MO, USA)과 함께 gas chromatography 전개를 수행하여 각각의 지방산을 동정하였다.
분리된 Botryococcus sp.는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B.
sudeticus J2의 최적 배양을 시도하기 위해 앞서 실험했던 배양 조건을 대조구로 하였고, 대조구에서 각각 2%의 CO2를 넣어준 처리구와 대조구에서 광량을 240μmol photons m-2 s-1로 조사하는 처리구를 대조구와 함께 배양하였다. 대조구와 처리구는 19일간 배양하였으며, 각 시료의 생장률과 총 지질 함량을 측정하였다.
는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B. sudeticus J2의 생리적 특성 분석을 위해 배양실험을 수행하였고, 생장률과 바이오매스 생산성 그리고 광합성효율을 측정하였다. 또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질 함유량과 지방산 조성을 분석하였다.
첫째, 육수학, 조류학 등 관련 전문학술지 문헌조사를 통하여 토착 Botryococcus의 국내 분포를 조사하였다. 둘째, 담수수계로부터 토착 Botryococcus를 순수 분리하였다. 셋째, 분리된 B.
sudeticus J2의 생리적 특성 분석을 위해 배양실험을 수행하였고, 생장률과 바이오매스 생산성 그리고 광합성효율을 측정하였다. 또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질 함유량과 지방산 조성을 분석하였다. B.
배양 기간 중 3일마다 각각의 처리구에서 시료를 분취하여 GF/C filter (Whatman, England)를 통해 여과하였고, 이를 105°C의 고온건조기에 4시간 이상 건조시킨 후 건조중량을 측정하였다.
배양은 BG-11배지 (Allen and Stanier 1968)를 이용해 120 μmol photons m-2 s-1의 광도에서 분당 0.25 v v-1 m-1의 외기를 주입하고, 25±1°C의 항온∙항습실에서 9일간 이루어졌다.
분리된 Botryococcus의 genomic DNA는 QIAGEN DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Germany)를 이용해 추출하였다. 추출된 genomic DNA는 녹조류에 특이적인 18S rRNA gene과 Internal Transcribed Spacer (ITS) region을 각각의 primer set (18s rRNA gene forward primer 5′-CGA CTT CTG GAA GGG ACG TA-3′, 18s rRNA gene reverse primer 5′-GAA TCA ACC TGA CAA GGC AAC-3′, ITS1 primer 5′-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3′, ITS4 primer 5′-TCC TCC GCT TAT TGA TAT G-3′)을 이용해 증폭하였으며, 증폭된 DNA는 automatic DNA sequencer를 이용해 sequencing 하였다.
둘째, 담수수계로부터 토착 Botryococcus를 순수 분리하였다. 셋째, 분리된 B. sudeticus의 생리적, 생태적 특성을 조사하였다.
채집지의 수질 정보는 pH multimeter (WTW® Multi 3420, Germany)로 현장에서 측정하였으며, 총 질소 및 총 인 함량은 실험실에서 Standard Method를 이용하여 분석하였다(APHA 1998). 채취한 시료는 실험실에서 연속희석 후 평판도말하였고, 형성된 colony를 선별함으로써 단일 조류주를 분리하였다. 단일 종으로 분리된 조류주들은 중성지질을 특이적으로 염색시키는 Nile-Red (Sigma, USA)로 염색 후 형광현미경 (Nikon Eclipse 80i, Japan)으로 Botryococcus 의 형태학적 근거 하에 세포 내 지질 함량이 높은 미세조류를 선별하였다(Lee et al.
본 연구에서는 미세조류 유래의 바이오디젤을 생산하는데 있어 후보 미세조류로서 Botryococcus를 활용하기 위하여 다음과 같은 연구를 수행하였다. 첫째, 육수학, 조류학 등 관련 전문학술지 문헌조사를 통하여 토착 Botryococcus의 국내 분포를 조사하였다. 둘째, 담수수계로부터 토착 Botryococcus를 순수 분리하였다.
추출된 genomic DNA는 녹조류에 특이적인 18S rRNA gene과 Internal Transcribed Spacer (ITS) region을 각각의 primer set (18s rRNA gene forward primer 5′-CGA CTT CTG GAA GGG ACG TA-3′, 18s rRNA gene reverse primer 5′-GAA TCA ACC TGA CAA GGC AAC-3′, ITS1 primer 5′-TCC GTA GGT GAA CCT GCG G-3′, ITS4 primer 5′-TCC TCC GCT TAT TGA TAT G-3′)을 이용해 증폭하였으며, 증폭된 DNA는 automatic DNA sequencer를 이용해 sequencing 하였다.
대상 데이터
국내 담수에서 채취한 시료를 대상으로 Botryococcus의 분포를 광범위하게 조사하였으며, 2011년 가을 제주도 서부에 위치한 서부저수지(한경면 용수리)에서 Botryococcus의 존재를 확인하였다. 시료채취 수역의 pH는 8.
동정된 B. sudeticus J2는 비교를 위해 UTEX The Culture Collection of Algae 에서 분양 받은 고 지질 함량 미세조류인 B. braunii UTEX 572와 함께 1000 mL의 media bottle에 800 mL의 부피로 배양하였다. 배양은 BG-11배지 (Allen and Stanier 1968)를 이용해 120 μmol photons m-2 s-1의 광도에서 분당 0.
제주도의 담수환경에 서식하는 Botryococcus를 분리하기 위해 제주도 서부저수지에서 pore size 0.119 mm 의 플랑크톤 네트를 이용해 시료를 채취하였다. 채집지의 수질 정보는 pH multimeter (WTW® Multi 3420, Germany)로 현장에서 측정하였으며, 총 질소 및 총 인 함량은 실험실에서 Standard Method를 이용하여 분석하였다(APHA 1998).
이론/모형
최대광합성률(Pmax), 광합성효율(α) 그리고 광포화시의 광도(Ik)는 Ahn et al.(2002)의 P-I 곡선식을 이용하여 산출하였다.
배양 기간 중 3일마다 각각의 처리구에서 시료를 분취하여 GF/C filter (Whatman, England)를 통해 여과하였고, 이를 105°C의 고온건조기에 4시간 이상 건조시킨 후 건조중량을 측정하였다. 배양된 시료는 원심분리기(Combi-514R, Hanil, Korea)로 4000 rpm으로 10분간 수확 후 동결건조하였고, Bligh and Dyer (1959)의 방법을 이용해 총 지질 함량을 측정하였다.
지방산 조성 분석은 MIDI Inc. (Newark, Del.)의 protocol과 gas chromatography (GC-2010, Shimadzu, Koyto, Japan)를 이용해 분석하였다. Saponification을 위해 동결건조된 0.
채집지의 수질 정보는 pH multimeter (WTW® Multi 3420, Germany)로 현장에서 측정하였으며, 총 질소 및 총 인 함량은 실험실에서 Standard Method를 이용하여 분석하였다(APHA 1998).
성능/효과
B. sudeticus J2와 B. braunii UTEX 572의 생장률을 측정한 결과, 비생장률(Specific growth rate, μ)은 각각 0.29, 0.17 day-1, 배가시간(Doubling time)은 2.39, 4.08 day로서 B. sudeticus J2의 생장률이 B. braunii UTEX 572에 비하여 매우 우수한 것을 확인하였고, B. sudeticus J2의 바이오매스 생산성(Biomass productivity)은 0.116 g L-1 day-1을 보였다(Table 3).
B. sudeticus J2의 지방산의 종류와 함량을 분석한 결과 FAME 형태의 Myristate (C14:0)는 3.9%, Palmitate (C16:0)는 11.4%, Palmitoleate (C16:1)는 5.7%, Stearate (C18:0)는 3.8%, Oleate (C18:1)는 13.0%, Linoleate (C18:2)는 10.2%, Linolenate (C18:3)는 33.0%, 그리고 Arachidate (C20:0)는 1.8% 로 조사되었다(Fig. 3). 즉, B.
4). 건조중량은 배양 19일 동안 대조구와 처리구 모두 지속적으로 증가하는 경향을 보였으며, 광도 2배 처리구에서 생장이 가장 높았고, CO2 처리구에서는 생장이 일부 저해되었다. 즉, 배양 19일에 B.
11 g L-1였다. 대조구, 2% CO2 처리구, 광도 2배 처리구에서 B. sudeticus J2의 바이오매스 생산성은 각각 0.129, 0.107, 0.211 g L-1 d-1였고, 지질생산성은 33.6 24.6 52.1 mg L-1 d-1였다(Table5). 즉, 광도가 2배 증가함에 따라 B.
미세조류의 지질생산성은 바이오매스 생산성과 지질함량에 의하여 결정된다. 따라서 B. sudeticus J2의 지질생산성은 46.5 mg L-1 day-1로서, B. braunii UTEX 572의 지질생산성 17.6 mg L-1 day-1보다 약 2.5배 이상 높은 것으로 조사되었다. 최근 보고에 의하면 담수조류의 경우 CO2의 공급하에 30.
국내에서 Botryococcus 속은 그 보고가 드물었으며, 보고된 Botryococcus 속 또한 모두 braunii 종이었다. 따라서 이번 연구에서 분리된 B. sudeticus J2는 국내에서는 처음 보고되는 종으로 그 희소성과 생물학적 자원으로써의 가치가 있다고 판단된다.
1인 것을 고려했을 때, CO2의 지속적인 주입으로 배지 내의 pH가 낮아져 그 영향이 생장에 저해요소가 되었다고 사료된다. 반면 2배의 광량을 준 처리구에서는 대조구보다 생장률이 높았으며 이는 Botryococcus 속이 대부분 일사량이 높은 지역이나 시기에 보고되는 것으로 보아 높은 광량에서도 안정적인 생장이 가능한 것이라 사료된다. 이러한 특징은 광도가 높은 자연광에서 미세조류의 옥외배양을 시도할 때 발생할 수 있는 광저해(photoinhibition)를 회피할 수 있는 좋은 특징(Tredici et al.
sudeticus J2의 생태적, 생리적 연구 후 2배의 광량과 2% CO2 조건에서 배양을 수행함으로써 최적 배양조건을 탐색하고자 하였다. 분리된 B. sudeticus J2는 비교를 위한 B. braunii UTEX 572보다 높은 바이오매스 생산성과 지질생산성을 보였으나 바이오매스 생산을 위한 다른 후보 미세조류에 비해서는 낮은 생장률을 보였다. 따라서 바이오디젤 생산을 위한 조류로 B.
braunii는 세계각지의 호수, 못 등에 분포하는 것으로 보고되었다(Jeong 1993). 이러한 사실을 종합하여 볼 때 Botryococcus 속은 수계에 광범위하게 분포하지만, 많은 일사량, 높은 수온, 풍부한 염양염류의 조건에서 더욱 번성하는 미세조류 종으로 사료된다.
1 mg L-1 d-1였다(Table5). 즉, 광도가 2배 증가함에 따라 B. sudeticus J2의 바이오매스 생산성은 약 1.5배 증가되었다.
후속연구
braunii UTEX 572보다 높은 바이오매스 생산성과 지질생산성을 보였으나 바이오매스 생산을 위한 다른 후보 미세조류에 비해서는 낮은 생장률을 보였다. 따라서 바이오디젤 생산을 위한 조류로 B. sudeticus J2를 활용하기 위해서는 본 연구에서 밝혀진 광저해에 대한 내성에 초점을 맞추어 최적 배양을 위한 광조건을 탐색하는 연구가 필요하다.
반면 2배의 광량을 준 처리구에서는 대조구보다 생장률이 높았으며 이는 Botryococcus 속이 대부분 일사량이 높은 지역이나 시기에 보고되는 것으로 보아 높은 광량에서도 안정적인 생장이 가능한 것이라 사료된다. 이러한 특징은 광도가 높은 자연광에서 미세조류의 옥외배양을 시도할 때 발생할 수 있는 광저해(photoinhibition)를 회피할 수 있는 좋은 특징(Tredici et al. 1991)이 될 수 있으므로 다양한 광 조건에서의 Botryococcus 속의 생장과 관련된 연구가 수행되어야 한다.
그러나 이는 미세조류가 가지는 평균 생장률에 비해 낮은 편이고, 이러한 문제는 바이오디젤의 안정적인 생산에 영향을 줄 수 있다. 이를 극복하기 위해서는 추후에 배양 조건 최적화나 분자생물학적 육종을 통해 생산성을 증가시킬 필요성이 있다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
한국산 고 지질 Botryococcus를 확보하기 위해 제주도 서부 저수지에서 분리한 Botryococcus sp.의 분자적 동정을 위해 분석한 것은 무엇인가?
분리된 Botryococcus sp.는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B.
본 논문에서 한국산 고지질 Botryococcus를 확보하기 위해 Botryococcus 속 균을 제주도 서부저수지에서 분리 동정하여 무엇으로 명명하였는가?
분리된 Botryococcus sp.는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B.
B. sudeticus J2의 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 무엇을 분석하였는가?
sudeticus J2의 생리적 특성 분석을 위해 배양실험을 수행하였고, 생장률과 바이오매스 생산성 그리고 광합성효율을 측정하였다. 또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질함유량과 지방산 조성을 분석하였다. B.
참고문헌 (21)
Ahn CY, HS Kim, BD Yoon and HM Oh. 2002. Photosynthetic characteristics and cell quota of nitrogen and phosphorus in Scenedesmus quadricauda under P limitation. Algae 17:83-87.
APHA (American Public Health Association). 1998. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.
Baillez C, C Largeau, C Berkaloff and E Casadevall. 1986. Immobilization of Botryococcus braunii in alginate: influence on chlorophyll content, photosynthetic activity and degeneration during batch cultures. Appl. Microbiol. Biotechnol. 23:361-366.
Kim YJ, JS Kim and J Chung. 1991. Seasonal variation of phytoplankton in Tokdong and Pomun Lakes. Korean J. Limnol. 24:251-263.
Lee SH, CH Lee, BH Jo, CY Ahn, HS Kim and HM Oh. 2012. Isolation and phylogenetic analysis of Botryococcus braunii (Trebouxiophyceae) from Korean freshwaters. Korean J. Environ. Biol. 30:31-38.
Lee SJ, BD Yoon and HM Oh. 1998. Rapid method for the determination of lipid from the green alga Botryococcus braunii. Biotechnol. Tech. 12:553-556.
Mata TM, AA Martins and NS Caetano. 2010. Microalgae for biodiesel production and other applications: A review. Renew. Sust. Energ. Rev. 14:217-232.
Rao R, R Sarada and GA Ravishankar. 2007. Influence of $CO_2$ on growth and hydrocarbon production in Botryococcus braunii. J. Microbiol. Biotechnol. 17:414-419.
Rodolfi L, CZ Graziella, B Niccolo, P Giulia, B Natascia, B Gimena and RT Mario. 2009. Microalgae for oil: Strain selection, induction of lipid synthesis and outdoor mass cultivation in a low cost photobioreactor. Biotechnol. Bioeng. 102:100-112.
Senousy HH, WB Gordon and H Ethan. 2004. Phylogenetic placement of Botryococcus braunii (Trebouxiophyceae) and Botryococcus sudeticus isolated UTEX 2629 (Chlorophyceae). J. Phycol. 40:412-423.
Sheehan J, T Dunahay, J Benemann and P Roessler. 1998. A Look Back at the US Department of Energy's Aquatic Species Program: Biodiesel from Algae. Golden: National Renewable Energy Laboratory.
Tredici MR, P Carlozzi, GC Zittelli and R Materassi. 1991. A vertical alveolar panel (VAP) for outdoor mass cultivation of microalgae and cyanobacteria. Bioresour. Technol. 38:153-159.
Wake LV and LW Hillen. 1980. Study of a "bloom" of the oil rich alga Botryococcus braunii in the Darwin River Reservoir. Biotechnol. Bioeng. 22:1637-1656.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.