섬유아세포(CCD-986sk)에서 청미래덩굴의 pro-collagen type-1 활성 및 MMP-1의 유전자 발현 저해능 Inhibitory Efficacy of Smilax china L. on Pro-collagen Type-1 Activity and MMP-1 Gene Expression in Fibroblasts (CCD-986sk)원문보기
청미래덩굴 추출물의 주름개선 효과를 확인하기 위해 elastase 저해활성을 측정한 결과 청미래덩굴 에탄올 추출물과 열수 추출물이 $1,000{\mu}g/ml$에서 각각 41.1%, 16.3%의 활성을 나타내었으며, collagenase 저해활성 측정결과 청미래덩굴 에탄올 추출물과 열수 추출물이 $1,000{\mu}g/ml$에서 각각 96.6%, 60.0%의 활성을 나타내었다. 청미래덩굴의 에탄올 추출물의 세포생존율을 확인하기 위하여 섬유아세포(CCD-986sk)로 MTT assay에 의해 확인한 결과 $50{\mu}g/ml$ 농도에서 71.7%의 세포 생존율을 확인할 수 있었다. 섬유아 세포에서 청미래덩굴 에탄올 추출물의 pro-collagen type-1 생합성량을 확인한 결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 139% 이상의 우수한 효과를 나타내었으며, MMP-1 저해활성을 측정한 결과 $50{\mu}g/ml$의 각각의 농도에서 74.9%의 활성을 나타내었다. 청미래덩굴 에탄올 추출물을 처리한 섬유아 세포에서 MMPfamily 중 MMP-1의 단백질 발현 및 mRNA 발현 억제 효과를 확인한 결과 MMP-1 단백질 발현과 mRNA 발현 모두 $50{\mu}g/ml$에서 각각 35%, 45%의 저해율을 나타내었다. 이러한 결과로 미루어 보아 청미래덩굴 에탄올 추출물이 주름개선용 화장품 소재로 응용이 가능할 것으로 판단된다.
청미래덩굴 추출물의 주름개선 효과를 확인하기 위해 elastase 저해활성을 측정한 결과 청미래덩굴 에탄올 추출물과 열수 추출물이 $1,000{\mu}g/ml$에서 각각 41.1%, 16.3%의 활성을 나타내었으며, collagenase 저해활성 측정결과 청미래덩굴 에탄올 추출물과 열수 추출물이 $1,000{\mu}g/ml$에서 각각 96.6%, 60.0%의 활성을 나타내었다. 청미래덩굴의 에탄올 추출물의 세포생존율을 확인하기 위하여 섬유아세포(CCD-986sk)로 MTT assay에 의해 확인한 결과 $50{\mu}g/ml$ 농도에서 71.7%의 세포 생존율을 확인할 수 있었다. 섬유아 세포에서 청미래덩굴 에탄올 추출물의 pro-collagen type-1 생합성량을 확인한 결과 $50{\mu}g/ml$의 농도에서 139% 이상의 우수한 효과를 나타내었으며, MMP-1 저해활성을 측정한 결과 $50{\mu}g/ml$의 각각의 농도에서 74.9%의 활성을 나타내었다. 청미래덩굴 에탄올 추출물을 처리한 섬유아 세포에서 MMP family 중 MMP-1의 단백질 발현 및 mRNA 발현 억제 효과를 확인한 결과 MMP-1 단백질 발현과 mRNA 발현 모두 $50{\mu}g/ml$에서 각각 35%, 45%의 저해율을 나타내었다. 이러한 결과로 미루어 보아 청미래덩굴 에탄올 추출물이 주름개선용 화장품 소재로 응용이 가능할 것으로 판단된다.
The purpose of this study was to research the biological activity of ethanol extract from Smilax china L. which is a vine shrub belonging to the lily family. For antiwrinkle effects, elastase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed 41.1% and 16.3% at $1,000{\mu}g...
The purpose of this study was to research the biological activity of ethanol extract from Smilax china L. which is a vine shrub belonging to the lily family. For antiwrinkle effects, elastase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed 41.1% and 16.3% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. The collagenase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed more than 96.6% and 60.0% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. As a result of having fibroblast measured cell viability on fibroblast cell of ethanol extract from S. china L., it showed 71.7% with cell viability at $100{\mu}g/ml$ concentration. At $50{\mu}g/ml$ concentration, the procollagen biosynthesis effect of ethanol extract from S. china L. was 139.86%. At the same concentration, the matrix metalloprotease (MMP)-1 inhibition effect of the ethanol extract was 74.9%. According to the results of Western blot of ethanol extract from S. china L., the expression of the MMP-1 protein was decreased by 35% at $50{\mu}g/ml$ concentration. Reverse transcription-polymerase chain reaction (PCR) of ethanol extract from S. china L. showed that the expression of MMP-1 mRNA was decreased by 45% at $50{\mu}g/ml$ concentration. The findings suggest that 70% ethanol extract from S. china L. (SC) has great potential as a cosmeceutical ingredient with antiwrinkle effects.
The purpose of this study was to research the biological activity of ethanol extract from Smilax china L. which is a vine shrub belonging to the lily family. For antiwrinkle effects, elastase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed 41.1% and 16.3% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. The collagenase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed more than 96.6% and 60.0% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. As a result of having fibroblast measured cell viability on fibroblast cell of ethanol extract from S. china L., it showed 71.7% with cell viability at $100{\mu}g/ml$ concentration. At $50{\mu}g/ml$ concentration, the procollagen biosynthesis effect of ethanol extract from S. china L. was 139.86%. At the same concentration, the matrix metalloprotease (MMP)-1 inhibition effect of the ethanol extract was 74.9%. According to the results of Western blot of ethanol extract from S. china L., the expression of the MMP-1 protein was decreased by 35% at $50{\mu}g/ml$ concentration. Reverse transcription-polymerase chain reaction (PCR) of ethanol extract from S. china L. showed that the expression of MMP-1 mRNA was decreased by 45% at $50{\mu}g/ml$ concentration. The findings suggest that 70% ethanol extract from S. china L. (SC) has great potential as a cosmeceutical ingredient with antiwrinkle effects.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 청미래덩굴 추출물을 이용하여 elastase, collagenase 저해활성과 섬유아세포에서의 pro-collagen 생합성량, MMP-1 저해활성, MMP-1의 단백질 발현 및 mRNA 발현억제 효과를 확인하여 주름개선용 화장품 소재로서의 가능성을 살펴보고자 한다.
제안 방법
특히 MMPs는 피부의 각질형성세포, 섬유아세포를 비롯한 많은 세포들로부터 분비되어 지지구조체인 세포 외 기질과 기저막을 구성하는 주요단백질 구성요소들을 가수분해함으로써 피부 탄력을 유지하는 결합조직을 파괴하여 주름과 탄력 저하 및 피부 처짐의 원인이 되는 것으로 알려져 있다[20]. 따라서 본 연구에서는 MMP family 중 MMP-1의 단백질 발현과 mRNA 발현을 측정하였다(Fig. 6, 7).
대상 데이터
본 실험에 사용된 청미래덩굴은 충북 괴산에서 2012년 봄에 생산 된 건채를 구입하여 추출시료로 사용하였다. 시료의 에탄올 추출물은 70% 에탄올 10배의 양을 가하여 실온에서 24시간 침지하여 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였고, 열수 추출물은 증류수 10배의 양을 가하여 80℃에서 3시간 가량 환류냉각 추출해 실온에서 24시간 침지하여 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다.
데이터처리
모든 실험은 3회 반복으로 행하여 평균치와 표준편차로 나타내었고, 결과 통계처리는 SPSS10.0 (Evanston, IL, USA) software를 사용하였으며, 유의차 검증은 분산분석 (analysis of variance ANOVA)을 한 후 α=0.05 수준에서 Turkey’s HSD test에 의해 유의성을 분석하였다.
이론/모형
Collagenase 저해활성 측정은 Wűnsch E와 Heindrich HG 의 방법[19]에 따라 측정하였다. 즉 반응군은 0.
Elastase 저해활성 측정은 Cannell 등의 방법[1]에 따라 측정하였다. 기질로서 N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide (Sigma, U.
Matrix metalloproteinase-1 (MMP-1)의 mRNA 발현을 알아보기 위하여 polymerase chain reaction (PCR)을 실시하였다. 실험에 사용한 primer sequences는 Table 1과 같다.
세포 생존율 측정은 Carmichael의 방법[2]에 따라 측정하였다. 섬유아세포(CCD-986sk)을 96 well plate에 5×104 cells/ well이 되게 0.
이때 MMP-1의 활성을 높이기 위하여 TNF-α를 10 ng/ml 의 농도로 첨가하였다. 세포의 배양액을 수거하여 실험에 사용하였으며 Gross B.E 등의 방법[5]에 따라 MMP-1 biotrack activity assay kit (Amersham Bioscience, NJ, USA)을 이용하여 측정하였다.
성능/효과
청미래덩굴 에탄올 및 열수 추출물의 elastase 저해효과를 측정한 결과 Fig. 1과 같이 1,000 µg/ml에서 각각 41.1%, 16.3%로 청미래덩굴 에탄올 추출물의 활성이 우수하였다. 이는 Lim 등[10]의 포공영 에탄올 추출물과 열수 추출물 1,000 µg/ml에서 각각 21.
청미래덩굴 에탄올 추출물을 5, 25, 50 µg/ml의 농도로 첨가하여 MMP-1 저해활성을 측정한 결과 Fig. 5와 같이 각각의 농도에서 91.3%, 81.9%, 74.9%의 활성을 나타내어 청미래덩굴 에탄올 추출물의 MMP-1 저해활성이 우수함을 확인하였고, 이러한 결과 청미래덩굴 에탄올 추출물이 피부 탄력 및 주름개선 효능에 기여할 것으로 판단된다.
청미래덩굴 에탄올 추출물에서 MMP-1의 단백질 발현을 측정한 결과 50 µg/ml의 농도에서 35%의 저해율을 나타내었고, mRNA 발현을 측정한 결과 50 µg/ml의 농도에서 45%의 저해율을 나타내었다. 따라서 청미래덩굴 에탄올 추출물이 주름생성 억제 활성을 보이는 것으로 판단된다.
6, 7). 청미래덩굴 에탄올 추출물에서 MMP-1의 단백질 발현을 측정한 결과 50 µg/ml의 농도에서 35%의 저해율을 나타내었고, mRNA 발현을 측정한 결과 50 µg/ml의 농도에서 45%의 저해율을 나타내었다. 따라서 청미래덩굴 에탄올 추출물이 주름생성 억제 활성을 보이는 것으로 판단된다.
후속연구
이러한 결과로 미루어 보아 청미래덩굴 에탄올 추출물이 elastase 및 collagenase 저해활성, 섬유아세포의 생존율, procollagen type-Ⅰ 생합성량, MMP-1 저해활성 등에서 효능이 있음을 확인할 수 있었으며, 주름개선용 화장품 소재로 응용이 가능할 것으로 판단된다. 차후 화장품 제형에서 청미래덩굴 추출물이 얼마나 안정하게 포집되어 피부에 적용이 되는지에 대한 연구가 계속된다면 우수한 주름개선용 화장품 천연소재가 될 것으로 생각된다.
이러한 결과로 미루어 보아 청미래덩굴 에탄올 추출물이 elastase 및 collagenase 저해활성, 섬유아세포의 생존율, procollagen type-Ⅰ 생합성량, MMP-1 저해활성 등에서 효능이 있음을 확인할 수 있었으며, 주름개선용 화장품 소재로 응용이 가능할 것으로 판단된다. 차후 화장품 제형에서 청미래덩굴 추출물이 얼마나 안정하게 포집되어 피부에 적용이 되는지에 대한 연구가 계속된다면 우수한 주름개선용 화장품 천연소재가 될 것으로 생각된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
청미래덩굴은 무엇입니까?
청미래덩굴(Smilax china L.)은 한국, 일본, 중국, 필리핀 및 인도차이나 등의 지역에 분포하며, 우리나라 대부분의 산야에서 서식하는 백합과(Lilaceae)에 속하는 덩굴성 관목으로 지역에 따라 청미래덩굴, 명감나무, 매발톱가시, 참열매덩굴, 종가시덩굴 등 다양하게 불리고 있으며, 원예 분야에서는 멍개나무 또는 망개나무로 잘 알려져 있다. 잎은 넓은 타원형으로 광택이 있으며 두껍고, 5월에 황록색의 꽃이 피며, 9-10월에 둥근 열매가 빨갛게 익는다.
청미래덩굴의 함유 성분은 무엇이 있습니까?
어린순과 열매는 식용을 하고, 뿌리와 나무는 해열, 해독, 이뇨 등의 증상 완화, 체력증강 및 피부염, 신장염, 방광염, 항균작용, 관절염, 유방암 등에 효과가 있다고 알려져 있다[13, 14, 18]. 청미래덩굴의 함유 성분으로는 pseudoprotodioscin, dioscin, protodioscin, sieboldogenin, glycoside 등이 있다. 또한 청미래덩굴(Smilax china L.
청미래덩굴의 뿌리와 나무의 효능은 무엇이 있습니까?
잎은 넓은 타원형으로 광택이 있으며 두껍고, 5월에 황록색의 꽃이 피며, 9-10월에 둥근 열매가 빨갛게 익는다. 어린순과 열매는 식용을 하고, 뿌리와 나무는 해열, 해독, 이뇨 등의 증상 완화, 체력증강 및 피부염, 신장염, 방광염, 항균작용, 관절염, 유방암 등에 효과가 있다고 알려져 있다[13, 14, 18]. 청미래덩굴의 함유 성분으로는 pseudoprotodioscin, dioscin, protodioscin, sieboldogenin, glycoside 등이 있다.
참고문헌 (20)
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