[논문]유산균 발효 마늘 추출물의 oleic acid로 유도된 비알코올성 지방간에 대한 개선 효과

이희섭; 임원철; 최지휘; 유희종; 김기호; 이승현; 조홍연

doi:10.9721/kjfst.2014.46.6.762

유산균 발효 마늘 추출물의 oleic acid로 유도된 비알코올성 지방간에 대한 개선 효과
Ameliorating Effects of Lactic Acid-fermented Garlic Extracts on Oleic Acid-induced Hepatic Steatosis 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.46 no.6, 2014년, pp.762 - 768

이희섭 (고려대학교 식품생명공학과) , 임원철 (고려대학교 식품생명공학과) , 최지휘 ((주)바이오랜드 생명공학연구소) , 유희종 ((주)바이오랜드 생명공학연구소) , 김기호 ((주)바이오랜드 생명공학연구소) , 이승현 ((주)바이오랜드 생명공학연구소) , 조홍연 (고려대학교 식품생명공학과)

초록
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본 연구에서는 oleic acid로 유도시킨 비알코올성 지방간 HepG2 세포 모델을 활용하여 LAFGE의 비알코올성 지방간 개선 효과를 검토하고 RT-PCR과 Western blot으로 메카니즘을 해석하였다. LAFGE는 1 mg/mL 농도에서 NFGE보다 세포 내 지방축적을 약 1.5배 저해하였다. Fig. 5에 나타낸 바와 같이 LAFGE는 FAT/CD36 mRNA 발현을 감소시켜 세포 내로 유입되는 지방산의 양을 감소시켰으며, $PPAR{\alpha}$와 CPT-1의 mRNA 발현을 증강시킴으로써 지방산의 베타-산화를 촉진시켰다. 또한 LAFGE는 지방합성을 촉진하는 전사인자인 SREBP-1c와 그의 조절을 받는 FAS의 mRNA 발현 수준을 oleic acid 처리시보다 각각 51%와 35%까지 크게 감소시켰다. 뿐만 아니라 LAFGE는 농도의존적으로 SREBP-1c와 FAS의 단백질 발현도 감소시켰다. 이 결과들은 LAFGE가 oleic acid처리에 의해 유도된 HepG2 세포 내의 지방축적을 개선할 수 있음을 시사하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, the ameliorating effects of lactic acid-fermented garlic extract (LAFGE) on non-alcoholic fatty liver were investigated using oleic acid-induced steatotic HepG2 cells. The ameliorating mechanism was analyzed by RT-PCR and Western blot. Treatment with 1 mg/mL LAFGE decreased intracellular lipid accumulation approximately 1.5-fold, compared to that achieved with non-fermented garlic extract. LAFGE reduced fatty acid influx into hepatocytes through down-regulation of FAT/CD36 mRNA expression in the steatotic HepG2 cells. $PPAR{\alpha}$ and CPT-1 mRNA expression was significantly up-regulated by LAFGE treatment of HepG2 cells as a consequence of activation of beta oxidation. Additionally, the treatment with 1 mg/mL LAFGE highly down-regulated mRNA expression of SREBP-1c and FAS to 51% and 35%, respectively. LAFGE showed concentration-dependent down-regulation patterns in protein expression of SREBP-1c and FAS, as determined by Western blot. These results suggest that LAFGE treatment improves hepatic steatosis triggered by the imbalance of hepatic lipid metabolism owing to oleic acid treatment.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

Nile Red 염색을 통해 확인한 LAFGE의 지방 축적 개선 효과를 간 세포 내 지방대사 관련 인자들의 mRNA 발현 변화를 RTPCR로 검토함으로써 LAFGE의 비알코올성 지방간 억제 활성 기전을 규명하고자 하였다.
본 연구는 비알코올성 지방간 HepG2 모델에서 LAFGE의 간 세포 내 지방대사에 미치는 영향을 일부 규명하였다. LAFGE는 향후 동물 모델에서의 효능 평가 및 nutrigenomic analysis 등 추가적인 연구를 통해 비알코올성 지방간의 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품용 식품신소재로 개발될 수 있는 가능성을 시사 하였다.
본 연구는 우리나라 고유의 원료인 마늘로부터 글로벌 건강기능식품소재의 개발을 위한 기초연구의 일환으로, oleic acid로 유도한 비알코올성 지방간 in vitro HepG2 세포주 모델에서 LAFGE의 지방간 개선 활성을 평가하고 그 기전을 규명하고자 하였다.
Araya 등(24)에 의하면 NAFLD 환자들은 혈액 중 단순불포화지방산 함량이 높고, 그 중에서 oleic acid가 가장 높은 분포를 나타내고 있으며, 이를 바탕으로 Gomez-Lechon 등(25)은 HepG2 세포에 oleic acid를 처리하여 지방간 유도 모델을 확립하였다. 본 연구에서는 oleic acid 유도 모델에서 지방 축적 저해 활성을 평가하기에 앞서 NFGE와 LAFGE의 세포 독성 여부를 확인하기 위해 세포 생존율을 측정하였다. Fig.
대표적 마늘 가공품인 흑마늘(aged black garlic)은 생마늘에 비해 항산화 활성, 고콜레스테롤 혈증 개선, 이상 지질 혈증 개선, 간 보호 효과 등 생리, 약리활성의 증강이 보고되었지만(15,16), 흑마늘의 제조기간이 20-30일로 장기간 소요되는 단점과 기호성에서 한계를 나타내고 있다. 이에 본 연구그룹은 생마늘의 생리, 약리 활성을 보다 증진시키면서 흑마늘의 제조 공정상의 단점을 극복하기 위해 유산균 발효를 접목하여 유산균 발효 마늘 추출물(lactic acid fermented garlic extract, LAFGE)을 제조하였다. LAFGE는 마늘의 주요 생리활성 성분인 S-allyl cysteine (SAC)과 cycloallin의 함량이 크게 증가되었을 뿐만 아니라 항산화 활성 및 CYP2E1 매개 알코올성 간 손상에 대한 보호 효과가 상승함을 확인한 바 있다(17).

제안 방법

HepG2 세포를 1×104 cells/well의 농도로 96 well plate에 접종하여 세포 밀도가 80%에 도달할 때까지 배양한 다음, 세포의 추가적인 성장이 억제된 상태에서 지방축적을 유도하기 위해 FBS를 포함하지 않은 DMEM 배지로 교체하고 24시간 배양하였다.
RNA 추출은 easy-BLUE^TM Total RNA extraction kit (iNtRoN Biotechnology Inc., Gyeonggi-do, Korea)를 사용하여 total RNA를 추출하고, NanoDrop 2000 UV-Vis spectrophotometer (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA)를 이용하여 RNA 함량을 측정하였다. cDNA합성은 RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit (Thermo Fisher Scientific Inc.
)를 이용하여 총 20 µL의 표준반응액과 RNA 2 µg를 사용하여 실시하였다. Table 1에 나타낸 primer를 사용하여 합성된 cDNA를 증폭하였고, 증폭된 cDNA는 1.8% agarose gel에서 전기영동하고 ethidium bromide로 염색한 다음, 타깃 mRNA의 발현 정도를 Image J Software (NIH, Framingham, MA, USA)를 사용하여 수치화하였다. Control은 β-actin을 사용하였다.
Tris-buffered saline & tween 20 (TBS-T)로 2회 세척한 후 horseradish peroxidase (HRP)가 결합되어 있는 2차 항체와 1시간 반응시킨 후 PierceTM ECL Western blotting substrate (Thermo Fisher Scientific Inc.)을 처리하여 X-ray film에 감광시키고 Image J Software (NIH)를 사용하여 타깃 단백질의 발현량을 분석하였다.
cDNA합성은 RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit (Thermo Fisher Scientific Inc.)를 이용하여 총 20 µL의 표준반응액과 RNA 2 µg를 사용하여 실시하였다.
간 내 지방 축적 요인 중 지방 합성에 연관된 주요 인자들 (SREBP-1c와 FAS)에 대한 LAFGE의 영향을 mRNA와 protein level에서 해석하고자 RT-PCR과 Western blotting을 실시하였다.
또한 HepG2 세포 내 SREBP-1c와 FAS의 protein 발현에 미치는 LAFGE의 영향을 Western blotting으로 검토하였다(Fig. 4C-E). 그 결과 SREBP-1c는 oleic acid 처리에 의해 164%로 증가하였고, LAFGE를 oleic acid와 함께 처리하였을 때 oleic acid를 처리하지 않은 대조군과 유사하거나 보다 낮은 단백질 발현량을 나타내었다.
마늘 5 kg과 증류수 10 kg을 발효조(MJS U3, Marubishi, Tokyo, Japan)에서 혼합, 교반하면서 100oC에서 3시간 동안 추출하고, 37oC로 냉각한 후 L. plantarum BL2 종균 배양액을 2% 접종하고 36시간 동안 배양하였다.
마늘 추출물과 유산균 발효 마늘 추출물의 총 페놀 함량 비교 발효 전/후 총 페놀성 화합물의 함량 변화를 검토하기 위해 gallic acid를 표준물질로 하여 마늘 추출물(NFGE)과 유산균 발효 마늘 추출물(LAFGE)의 총 페놀 함량을 측정하였다. 그 결과, Table 2에서와 같이 NFGE에는 29.
배양 종료 후 121oC에서 1시간 동안 멸균한 다음 여과, 농축하여 LAFGE를 조제하였다.
배양이 끝난 HepG2 세포를 PBS로 2회 세척한 후, Nile Red solution 100 µL씩 가하고 1시간 후 485 nm excitation, 535 nm emission 조건에서 형광도(VICTOR3, Perkin Elmer)를 측정하였다.
본 연구에서는 oleic acid로 유도시킨 비알코올성 지방간 HepG2세포 모델을 활용하여 LAFGE의 비알코올성 지방간 개선 효과를 검토하고 RT-PCR과 Western blot으로 메카니즘을 해석하였다. LAFGE는 1 mg/mL 농도에서 NFGE보다 세포 내 지방축적을 약 1.
총 폴리페놀 화합물 함량은 Ainsworth 등(18)의 방법을 변형하여 측정하였다. 마늘 추출물과 유산균 발효 마늘 추출물 0.

대상 데이터

Dimethyl sulfoxide (DMSO), Nile red, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), oleic acid, bovine serum albumin (BSA), Pluronic® F-127 등의 시약은 Sigma (St. Louis, MO, USA), SREBP-1c, FAS 항체는 Cell Signaling (Danvers, MA, USA)사로부터 구입하였다.
Dulbecco’s modified eagle’s medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS) 등은 Gibco (Grand Island, NY, USA)사로부터 구입하였다.
HepG2 세포는 ATCC (American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA)에서 분양 받았으며, 배지는 10% FBS를 포함하는 DMEM 배지에 100 U/mL penicillin과 100 µg/mL streptomycin을 첨가하여 조제하였고, 배양은 37oC, 5% CO2 조건에서 실시하였다.
Nile Red solution은 1% (w/v) Pluronic® F-127을 포함하는 DMSO를 용매로 1 mM Nile Red stock solution을 조제한 후 실험 직전 1 µM 농도로 PBS에 희석하여 사용하였다.
본 실험에서 사용한 유산균 발효 마늘 추출물은 경남 가월영농조합에서 생산한 창녕산 마늘을 구입하여 다음과 같이 조제하였다. 마늘 5 kg과 증류수 10 kg을 발효조(MJS U3, Marubishi, Tokyo, Japan)에서 혼합, 교반하면서 100℃에서 3시간 동안 추출하고, 37℃로 냉각한 후 L.

데이터처리

1)Means with the same letter in the same row are not significantly different by Duncan's range test (p<0.05).
통계처리는 statistical analysis system (SAS) program (SAS 8.2, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA)를 이용하여 one way anaylsis of variance (ANOVA) test와 duncan’s multiple range test를 실시하여 p<0.05에서 통계학적 유의성을 검정하였다.

이론/모형

Cui 등(20)의 방법에 따라 하기와 같이 oleic acid를 이용하여 지방간을 유도하였고, 세포 내 축적된 지방은 McMillian 등(21)의 방법에 따라 triglyceride에 특이성이 높은 Nile Red 염색법을 이용하여 측정하였다. HepG2 세포를 1×10⁴cells/well의 농도로 96 well plate에 접종하여 세포 밀도가 80%에 도달할 때까지 배양한 다음, 세포의 추가적인 성장이 억제된 상태에서 지방축적을 유도하기 위해 FBS를 포함하지 않은 DMEM 배지로 교체하고 24시간 배양하였다.
본 연구에서는 oleic acid 유도 모델에서 지방 축적 저해 활성을 평가하기에 앞서 NFGE와 LAFGE의 세포 독성 여부를 확인하기 위해 세포 생존율을 측정하였다. Fig. 1에 나타낸 바와 같이 시료들은 0.1, 0.5, 1 mg/mL의 농도 범위에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 따라서 상기 농도 범위에서 NFGE와 LAFGE의 간 세포 내 지방 축적에 미치는 영향을 확인하기 위해 Nile Red 염색법을 사용하여 지방 축적도를 측정하였다. 그 결과, Fig.
세포 생존율은 MTT법을 사용하여 다음과 같이 측정하였다(19). 배양이 끝난 배양액의 배지를 제거하고, phosphate buffered saline(PBS, pH 7.

성능/효과

그 결과 SREBP-1c는 oleic acid 처리에 의해 164%로 증가하였고, LAFGE를 oleic acid와 함께 처리하였을 때 oleic acid를 처리하지 않은 대조군과 유사하거나 보다 낮은 단백질 발현량을 나타내었다. FAS는 oleic acid 처리시 대조군 대비 230%의 단백질 발현량을 보였으며, oleic acid와 LAFGE를 함께 처리시, 0.1, 0.5, 1 mg/mL 농도 범위에서 각각 183, 158, 51%로 농도의존적인 단백질 발현량 감소를 나타냄으로써 세포 내 지방 축적이 감소되었음을 알 수 있었다.
Fatty acid translocase (FAT/CD36)은 간 세포막에서 지방산의 원형질 내 유입을 담당하고 있으며(27), FAT/CD36에 의한 지방산의 세포 내 과량 유입은 간 세포 내 지방축적의 주요 요인 중 하나로 알려져 있다(28). Fig. 3A 는 FAT/CD36의 mRNA 발현량 변화를 검토한 결과로, oleic acid 처리시 대조군 대비 437%로 크게 증가하였고, LAFGE 처리시 0.1, 0.5, 1 mg/mL 농도에서 각각 215, 229, 187%로 FAT/CD36의 mRNA 발현량이 현저히 감소되었으나 농도 간의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 이는 LAFGE가 FAT/CD36의 mRNA 발현을 억제하여 유리지방산의 세포 내 유입을 감소시킴으로써 지방 축적 개선 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
Fig. 4A는 지방산의 합성에 있어 FAS, ACC 등의 지방 합성 효소의 발현을 조절하는 전사인자인 SREBP-1c mRNA 발현에 미치는 LAFGE의 영향을 검토한 결과로, oleic acid 처리시 대조군 대비 167%로 크게 증가하였고, LAFGE 처리시 1 mg/mL 농도에서 57%로 SREBP-1c mRNA 발현량이 유의적으로 현저히 감소되었다. 또한 LAFGE와 FAS mRNA 발현 간의 연관성을 검토한 결과, Fig.
3C는 CPT-1의 mRNA 발현에 미치는 LAFGE 의 영향을 검토한 결과이다. 그 결과 CPT-1은 oleic acid 처리시 대조군 대비 약 200%의 발현 수준을 나타내었으며, LAFGE 0.1, 0.5 mg/mL 농도에서는 oleic acid 단독처리군과 유의적 차이를 보이지 않았고, 1 mg/mL 농도에서 321% 발현 수준을 보이면서 oleic acid 단독처리군에 비해 약 1.6배 증가시켰다. 이로부터 LAFGE는 CPT-1의 mRNA 발현을 증가시킴으로써 지방산의 베타산화를 촉진하여 지방 축적을 감소시켰음을 알 수 있었다.
4C-E). 그 결과 SREBP-1c는 oleic acid 처리에 의해 164%로 증가하였고, LAFGE를 oleic acid와 함께 처리하였을 때 oleic acid를 처리하지 않은 대조군과 유사하거나 보다 낮은 단백질 발현량을 나타내었다. FAS는 oleic acid 처리시 대조군 대비 230%의 단백질 발현량을 보였으며, oleic acid와 LAFGE를 함께 처리시, 0.
그 결과 oleic acid 처리시 PPARα는 대조군 대비 약 24%로 mRNA 발현 수준이 1/5로 감소하였으며, LAFGE 1 mg/mL 농도에서 70%로 PPARα의 mRNA 발현량을 유의적으로 증가시켰다.
5, 1 mg/mL의 농도 범위에서 세포 독성을 나타내지 않았으며, 따라서 상기 농도 범위에서 NFGE와 LAFGE의 간 세포 내 지방 축적에 미치는 영향을 확인하기 위해 Nile Red 염색법을 사용하여 지방 축적도를 측정하였다. 그 결과, Fig. 2에서와 같이 oleic acid를 처리한 경우, 처리하지 않은 대조군에 비해 지방 축적도가 244%까지 증가하였으며, NFGE는 0.1, 0.5, 1 mg/mL 농도에서 oleic acid 단독처리군과 유의적 차이를 나타내지 않은 반면, LAFGE는 0.5, 1 mg/mL 농도에서 각각 73, 87% 지방 축적을 감소시켰으며, 두 농도간의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 이 결과로부터 LAFGE는 유산균 발효에 의해 비알코올성 지방간 억제 활성이 크게 증가하였음을 알 수 있었다.
그 결과, Table 2에서와 같이 NFGE에는 29.07 µg GAE/mg, LAFGE에는 52.22 µg GAE/mg의 페놀성 화합물이 함유되어 있는 것을 나타냄으로써 발효에 의해 그 함량이 약 1.9배 증가되었음을 알 수 있었다.
Han 등(32)은 고지방식이 유도 지방간 동물모델에서 마늘 성분 중 하나인 ajoene이 SREBP-1c의 발현을 양성 조절하는 핵수용체인 liver X receptor-α (LXRα)의 발현을 억제함으로써 SREBP-1c 및 그의 조절을 받는 FAS 등의 단백질 발현을 억제하여 지방간 개선활성을 나타내었음을 보고한 바 있다. 따라서 SREBP-1c와 FAS의 mRNA 및 protein 발현에 대한 LAFGE의 억제 효과는 간세포 내 지방 축적을 감소시키는 주요 조절 경로 중 하나임을 알 수 있었다.
5에 나타낸 바와 같이 LAFGE는 FAT/CD36 mRNA 발현을 감소시켜 세포 내로 유입되는 지방산의 양을 감소시켰으며, PPARα와 CPT-1의 mRNA 발현을 증강시킴으로써 지방산의 베타-산화를 촉진시켰다. 또한 LAFGE는 지방합성을 촉진하는 전사인자인 SREBP-1c와 그의 조절을 받는 FAS의 mRNA 발현 수준을 oleic acid 처리시보다 각각 51%와 35%까지 크게 감소시켰다. 뿐만 아니라 LAFGE는 농도의존적으로 SREBP-1c와 FAS의 단백질 발현도 감소시켰다.
4A는 지방산의 합성에 있어 FAS, ACC 등의 지방 합성 효소의 발현을 조절하는 전사인자인 SREBP-1c mRNA 발현에 미치는 LAFGE의 영향을 검토한 결과로, oleic acid 처리시 대조군 대비 167%로 크게 증가하였고, LAFGE 처리시 1 mg/mL 농도에서 57%로 SREBP-1c mRNA 발현량이 유의적으로 현저히 감소되었다. 또한 LAFGE와 FAS mRNA 발현 간의 연관성을 검토한 결과, Fig. 4B와 같이 oleic acid 처리에 의해 대조군 대비 약 311% 발현되었고, LAFGE 0.5, 1 mg/mL 농도에서 각각 289, 35%로 FAS mRNA 발현량이 유의적으로 대폭 감소하였다. 이 결과들로부터 LAFGE가 지방산 합성에 있어 핵심인자들인 SREBP1c 및 FAS의 mRNA 발현을 크게 억제함을 알 수 있었다.
5, 1 mg/mL 농도에서 각각 289, 35%로 FAS mRNA 발현량이 유의적으로 대폭 감소하였다. 이 결과들로부터 LAFGE가 지방산 합성에 있어 핵심인자들인 SREBP1c 및 FAS의 mRNA 발현을 크게 억제함을 알 수 있었다.
뿐만 아니라 LAFGE는 농도의존적으로 SREBP-1c와 FAS의 단백질 발현도 감소시켰다. 이 결과들은 LAFGE가 oleic acid처리에 의해 유도된 HepG2 세포 내의 지방 축적을 개선할 수 있음을 시사하였다.
5, 1 mg/mL 농도에서 각각 73, 87% 지방 축적을 감소시켰으며, 두 농도간의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 이 결과로부터 LAFGE는 유산균 발효에 의해 비알코올성 지방간 억제 활성이 크게 증가하였음을 알 수 있었다.
한편 Liu 등(23)은 oleic acid 유도 지방간 세포 모델에서 페놀성 화합물인 caffeic acid, chlorogenic acid, ferulic acid, p-coumaric acid, cinnamic acid 등의 지방 축적 억제 효과를 보고하였다. 이 보고들로부터 본 연구 시료인 LAFGE는 발효 후 총 페놀 함량에서 타 연구에 비해 높은 함량을 나타내고 있는 점과 본 연구와 동일한 지방간 세포모델을 사용하고 있는 점에서 LAFGE는 비알코올성 지방간 억제 활성에 기여할 것으로 예측되었다.
5, 1 mg/mL 농도에서 각각 215, 229, 187%로 FAT/CD36의 mRNA 발현량이 현저히 감소되었으나 농도 간의 유의적 차이는 나타나지 않았다. 이는 LAFGE가 FAT/CD36의 mRNA 발현을 억제하여 유리지방산의 세포 내 유입을 감소시킴으로써 지방 축적 개선 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
6배 증가시켰다. 이로부터 LAFGE는 CPT-1의 mRNA 발현을 증가시킴으로써 지방산의 베타산화를 촉진하여 지방 축적을 감소시켰음을 알 수 있었다.
이상의 결과들은 LAFGE가 PPARα mRNA 발현을 증가시켜 지방합성 관련 인자들의 발현을 억제하고, CPT-1의 mRNA 발현을 증가시켜 지방산의 베타산화를 촉진하며, FAT/CD36의 mRNA 발현 억제를 통해 세포 내 지방산의 유입을 감소시켜 HepG2 세포 내 지방 축적 저해에 기여한 것임을 알 수 있었다.
이상의 결과들을 종합하면, LAFGE는 FAT/CD36 mRNA 발현량을 감소시켜 지방산의 간 세포 내 유입을 감소시키고, PPARα와 CPT-1의 mRNA 발현을 증가시켜 지방산의 산화를 촉진하는 동시에 SREBP-1c, FAS 등의 지방 합성 관련 인자의 mRNA 및 단백질 발현량을 감소시킴으로써 간 세포 내 지방이 축적되는 것을 예방 또는 개선 효과를 나타낸 것으로 해석되었다.
6배 증가함을 확인하였다. 페놀성 화합물과 SAC 의 간세포 내 지방 축적 억제 효과에 대한 보고 등을 토대로 LAFGE의 세포 내 지방 축적 감소 효과는 발효에 의해 증가된 SAC와 페놀성 화합물에 기인하는 것으로 해석할 수 있었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	일반 마늘 추출물 대비 유산균 발효 마늘 추출물에서 gallic acid를 표준물질로 측정한 총 페놀 함량의 변화는?	마늘 추출물과 유산균 발효 마늘 추출물의 총 페놀 함량 비교 발효 전/후 총 페놀성 화합물의 함량 변화를 검토하기 위해 gallic acid를 표준물질로 하여 마늘 추출물(NFGE)과 유산균 발효 마늘 추출물(LAFGE)의 총 페놀 함량을 측정하였다. 그 결과, Table 2에서와 같이 NFGE에는 29.07 µg GAE/mg, LAFGE에는 52.22 µg GAE/mg의 페놀성 화합물이 함유되어 있는 것을 나타냄으로써 발효에 의해 그 함량이 약 1.9배 증가되었음을 알 수 있었다.
	마늘의 알려진 생리 및 약리 활성은?	마늘은 백합과에 속하는 1년생 초본 작물로, 우리나라의 대표적인 향신료이며 allicin, scordinine, ajoene 등 마늘 특유의 성분들을 함유하고 있고, 항균, 항암, 항산화, 면역증강, 혈액응고 억제, 간기능 회복, 혈당감소, 고지혈증 개선 등 다양한 생리, 약리 활성이 보고되었다(9-11). 한편, 마늘의 독성과 관련하여 Yoshida 등(12)은 HEp-2 cell에서 마늘 추출물을 1.
	비알코올성 지방간이 야기하는 가역적 단계의 간장애 및 간질환의 종류는?	비알코올성 지방간(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 가역적인 단계인 간지방증(hepatic steatosis), 지방간염(steatohepatitis), 간섬유증(liver fibrosis)과 비가역적인 단계인 간경화(cirrhosis), 간암(hepatocellular carcinoma) 등의 간장애와 간질환들을 야기하는 병인이다(1). 간세포 내 지방 축적은 간세포 내에서 일어나는 지방합성과 지방대사의 불균형으로 인해 초래되어(2), 간질환뿐만이 아니라 비만, 제2형 당뇨 등을 일으키는 원인으로 작용하고 있다(3).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

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용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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