선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 또한 주로 알로에의 껍질을 제거한 알로에 젤 성분을 중심으로 연구가 이루어져 있어 껍질에 대한 약리효과에 대한 연구가 미비한 상황이다. 이에 본 연구에서는 이미 효능이 입증된 단일 물질이 아닌 알로에 베라 껍질과 젤의 추출물이 갖는 생리활성을 확인하고자 하였다.
- 또한 주로 알로에의 껍질을 제거한 알로에 젤 성분을 중심으로 연구가 이루어져 있어 껍질에 대한 약리효과에 대한 연구가 미비한 상황이다. 이에 본 연구에서는 이미 효능이 입증된 단일 물질이 아닌 알로에 베라 껍질과 젤의 추출물이 갖는 생리활성을 확인하고자 하였다.
제안 방법
- 1 M Tris-HCl 완충용액 (pH 8.0) 100 µL에 20 mM β-NAD를 20 µL씩 혼합한 후 100 mM acetaldehyde 10 µL, 3 M KCl 20 µL, 1 M 2-mercaptoethanol 10 µL 및 농도별 시료 20 µL를 모두 첨가하였다.
- ALDH의 활성 측정은 Tottmar의 방법 [20]을 변형하여 측정하였다. 즉, 기질인 acetaldehyde에서 acetate를 생성하는 조효소 NAD의 존재 하에서 대사되면서 생성되는 NADH 양을 340 nm에서 흡광도를 측정하여 ALDH의 활성을 측정하였다.
- Elastase 저해능 측정은 Hong 등의 방법 [17]을 응용하여 TrisHCl 완충용액 (pH 8) 140 µL에 20 µL의 시료와 2 mM SANA 20 µL를 가하여 25에서 10분간 정치시킨 후 20 µL의 elastase (0.18 unit)을 가하여 다시 37°C에서 15분간 반응시킨 다음 410 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- Tyrosianse 저해활성은 L-tyrosine으로부터 멜라닌 생성과정에 tyrosinase 효소 작용에 의해 생성되는 dihydroxyphenylalanine (DOPA) 생성물을 측정하는 방법으로 측정하였다 [18]. Tyrosinase 저해활성은 0.
- 기질인 에탄올이 조효소 β-nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)의 존재 하에서 대사되면서 생성 되는 NADH 양을 340 nm에서 흡광도를 측정하여 ADH 활성을 측정하였다.
- 5 unit/mL) 20 µL을 신속하게 혼합한 다음 분광광도계로 340 nm에서 5분간 흡광도를 측정하였다. 대조군에는 ALDH 대신 0.02% BSA을 첨가하여 흡광도를 측정하였다.
- 1 mL를 신속하게 혼합한 다음 분광광도계로 340 nm에서 5분간 흡광도를 측정 하였다. 대조군에서 ADH 대신 0.1% bovine serum albumin을 첨가하여 흡광도를 측정하였다.
- 알로에 젤과 껍질을 진탕 항온수조에서 각각 증류수 (distilled water, DW)와 70%(v/v) 에탄올을 추출용매로 70°C의 온도와 110 rpm의 속도로 진탕교반하면서 4시간 동안 추출한 후 종이 여과지 (Whatman No. 2, Whatman, Piscataway, New jersey, USA)를 이용하여 여제를 분리하였다.
- 알로에 추출물이 SOD와 유사한 산화억제작용을 갖는지 알아보기 위해 superoxide와 반응하여 갈변물질을 나타내는 pyrogallol 자동산화반응을 측정하여 SOD 유사활성을 측정 하였다 [28,29]. Fig.
- 이 반응액을 37°C로 예열된 배양기에 넣어 2분간 온도를 유지시켜 주고 0.02% BSA (pH 8.0)에 녹인 ALDH 용액(ALDH, 0.5 unit/mL) 20 µL을 신속하게 혼합한 다음 분광광도계로 340 nm에서 5분간 흡광도를 측정하였다.
- ALDH의 활성 측정은 Tottmar의 방법 [20]을 변형하여 측정하였다. 즉, 기질인 acetaldehyde에서 acetate를 생성하는 조효소 NAD의 존재 하에서 대사되면서 생성되는 NADH 양을 340 nm에서 흡광도를 측정하여 ALDH의 활성을 측정하였다. 1 M Tris-HCl 완충용액 (pH 8.
- 추출용매에 따른 알로에 베라 추출물로서 껍질 추출물 (aloe skin extract)과 젤 추출물 (aloe gel extract)의 항산화능을 조사하기 위하여, 증류수와 70% 에탄올로 추출한 알로에 베라 추출물 (껍질, 젤)의 총 폴리페놀 함량을 분석하여 Table 1에 나타내었다. 천연 항산화제의 대부분은 식물체의 줄기, 잎, 꽃 등에 존재하며 주로 폴리페놀류의 물질인 것으로 알려져 있다 [21].
- 5 mL를 첨가하여 1시간 실온에서 반응시킨 다음 725 nm에서 흡광도를 측정하였다. 탄닌 함량은 gallic acid를 이용하여 작성한표준곡선으로부터 산출하였다.
대상 데이터
- 본 연구에서 사용한 알로에는 국내에서 식용으로 사용되고 있는 거제산 알로에 베라이다. 알로에 베라 (거제영농조합법인, 거제, 한국)를 추출하기 위하여 증류수, 70% 에탄올 (한국알콜, 울산, 한국)을 사용하였다.
- 생리활성 분석을 위해 사용된 Folin-Ciocalteu's phenol reagent와 ursolic acid, ascorbic acid, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), N-succinyl-AlaAla-Ala-p-nitroanilide (SANA), elastase, collagenase, 4-phenylazobenzyl-oxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-d-ar는 Sigma사(Louis, MO, USA)의 제품을 구입하여 사용하였다.
- 본 연구에서 사용한 알로에는 국내에서 식용으로 사용되고 있는 거제산 알로에 베라이다. 알로에 베라 (거제영농조합법인, 거제, 한국)를 추출하기 위하여 증류수, 70% 에탄올 (한국알콜, 울산, 한국)을 사용하였다. 생리활성 분석을 위해 사용된 Folin-Ciocalteu's phenol reagent와 ursolic acid, ascorbic acid, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), N-succinyl-AlaAla-Ala-p-nitroanilide (SANA), elastase, collagenase, 4-phenylazobenzyl-oxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-d-ar는 Sigma사(Louis, MO, USA)의 제품을 구입하여 사용하였다.
- 2, Whatman, Piscataway, New jersey, USA)를 이용하여 여제를 분리하였다. 여과한 추출액을 동결 건조하여 분말화한 후 기능성 평가의 재료로 사용하였다.
데이터처리
- 각 실험군 간의 비교분석은 SPSS 14.01 프로그램(Version 14.01, SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA)을 이용하여 ANOVA 분석을 실시한 후 α=0.05에서 Duncan's multiple range test로유의성을 검증하였다.
이론/모형
- DPPH radical 소거능은 Heo 등의 방법 [15]에 따라 메탄올 0.4 mM의 농도로 용해한 DPPH 용액 160 µL와 시료 40 µL를 첨가하여 암소에서 30분간 방치하고 반응시킨 다음 microplate reader를 이용하여 515 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- SOD 유사활성 측정은 Lee 등의 방법 [16]에 따라 Tris-HCl 완충용액 (pH 8.5) 120 µL에 40 µL의 시료와 7.2 mM pyrogallol 40 µL를 가하여 25에서 10분간 반응시킨 후 420 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- 알콜대사 활성을 측정하기 위해서 alcohol dehydrogenase법 [19]을 이용하였다. 기질인 에탄올이 조효소 β-nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)의 존재 하에서 대사되면서 생성 되는 NADH 양을 340 nm에서 흡광도를 측정하여 ADH 활성을 측정하였다.
- 총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법 [14]으로 측정하였다. 추출하여 건조된 알로에 베라 추출물을 농도별로 희석하여 시료 희석액 0.
- 탄닌 함량은 Folin-Denis법 [14]을 응용하여 시료 1 mL에 95% ethanol 1 mL와 증류수 5 mL을 혼합한 후, 5% sodium carbonate 무수 포화용액 1 mL와 folin-ciocalteu's 0.5 mL를 첨가하여 1시간 실온에서 반응시킨 다음 725 nm에서 흡광도를 측정하였다.
성능/효과
- 14 mg/g로 나타났다. 70% 에탄올 추출물의 경우에서도 알로에 베라 젤, 알로에 베라 껍질의 순으로 측정되었으며, 각각의 함량은 3.91 mg/g과 1.11 mg/g로 나타나 알로에 베라 껍질보다 알로에 베라 젤이 3.5~4배 높은 탄닌 함량을 갖는 것을 확인할 수 있었다. 이는 tyrosinase 저해활성 결과와 유사한 경향을 나타내는 것으로 알로에의 미백활성은 탄닌 함량에 기인된 것으로 판단된다.
- 실험결과 알로에 베라 껍질 4,000 µg/mL의 70% 에탄올 추출물에서 가장 높은 55%의 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, 알로에 베라 껍질의물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의 순으로 높았으며 각각 38%, 11% 및 10%의 DPPH radical 소거능을 나타내었다. 70% 에탄올을 추출용매로 사용하는 것이 물을 사용하는 것보다 높은 DPPH 활성의 추출물을 확보하는데 유리한 것으로 나타났다. 또한 알로에 베라 젤보다 껍질에서 높은 DPPH 활성을 나타냈다.
- 또한 알로에 베라 껍질의 물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의 순으로 SOD 유사활성이 높았으며 그 값은 각각 44%, 27% 및 16%이었다. DPPH 소거 능과 마찬가지로 70% 에탄올로 추출하는 것이 물로 추출하는 것보다 높은 SOD 유사활성을 보였고, 젤보다 껍질이 더높은 활성을 보였다.
- Tyrosinase 저해활성 실험 결과, Fig. 3에서와 같이 알로에 베라 젤의 물 추출물의 경우 2,000 µg/mL의 농도에서 28%의 tyrosinase 저해활성을 보였으며 대조군인 kojic acid와 비교하여 62.5 µg/mL의 농도에서 비슷한 활성을 나타내었다.
- 또한 ALDH 효소활성도 알로에 베라 젤의 물 추출물 600 µg/mL의 농도에서 216% 정도의 알콜대사 효과가 있었으나 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물, 알로에 베라 껍질의 물 추출물 및 알로에 베라 껍질의 70% 에탄올 추출물에서는 ALDH 효소활성이 없는 것으로 나타났다.
- 본 연구에 서의 시험결과에 의하면 알로에 베라 젤 추출물에서 알로에 베라 껍질 추출물보다 ADH 활성이 높은 것으로 나타났다. 또한 물 추출물이 에탄올 추추물보다 높은 ADH 활성을 보인 것으로 나타났다. Cheong 등 [34]은 알로에 베라가 에탄올 대사에 있어서 크게 영향을 주지 않는다고 보고하였다.
- 2에서 보는 바와 같이 알로에 베라 껍질의 70% 에탄올 추출물은 4,000 µg/mL의 농도에서 50%의 활성으로 나타냈으며 이 값은 대조군인 ascorbic acid 값은 농도가 120 µg/mL일 때와 유사한 활성이었다. 또한 알로에 베라 껍질의 물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의 순으로 SOD 유사활성이 높았으며 그 값은 각각 44%, 27% 및 16%이었다. DPPH 소거 능과 마찬가지로 70% 에탄올로 추출하는 것이 물로 추출하는 것보다 높은 SOD 유사활성을 보였고, 젤보다 껍질이 더높은 활성을 보였다.
- 5 µg/mL의 농도에서 비슷한 활성을 나타내었다. 또한 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물, 알로에 베라 껍질의 물 추출물 및 알로에 베라 껍질의 70% 에탄올 추출물의 순으로 각각 17%, 10% 및 4%의 tyrosinase 저해활성을 나타내었다. 알로에 베라 추출물의 tyrosinase 저해능은 알로에 베라 껍질추출물보다 알로에베라 젤에서 더 높은 미백활성이 있음을 확인할 수 있었다.
- 항산화 활성은 알로에 베라 껍질 70% 에탄올 추출물에서 가장 높은 55%의 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, 알로에 베라 껍질의 물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의순으로 각각 38%, 11% 및 10%의 DPPH radical 소거능을 나타내었다. 또한, SOD 유사활성의 경우도 마찬가지로 70% 에탄올로 추출하는 것이 물로 추출하는 것보다 높은 활성을 나타내었다. 알로에 베라 추출물의 tyrosinase 저해능은 알로에 베라 껍질추출물보다 알로에 베라 젤 부분에 더 효과적인 활성이 있음을 확인할 수 있었다.
- 또한 ALDH 효소활성도 알로에 베라 젤의 물 추출물 600 µg/mL의 농도에서 216% 정도의 알콜대사 효과가 있었으나 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물, 알로에 베라 껍질의 물 추출물 및 알로에 베라 껍질의 70% 에탄올 추출물에서는 ALDH 효소활성이 없는 것으로 나타났다. 본 연구에 서의 시험결과에 의하면 알로에 베라 젤 추출물에서 알로에 베라 껍질 추출물보다 ADH 활성이 높은 것으로 나타났다. 또한 물 추출물이 에탄올 추추물보다 높은 ADH 활성을 보인 것으로 나타났다.
- 실험결과 알로에 베라 껍질 4,000 µg/mL의 70% 에탄올 추출물에서 가장 높은 55%의 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, 알로에 베라 껍질의물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의 순으로 높았으며 각각 38%, 11% 및 10%의 DPPH radical 소거능을 나타내었다.
- 알로에의 폴리페놀 화합물은 활성산소나 히드록시 라디칼 (hydroxyl radical) 에 대한 소거작용을 한다고 보고 [25]된 바 있다. 알로에 베라 젤 뿐만 아니라 껍질에서도 폴리페놀류에 의한 항산화 활성을 기대할 수 있음을 확인하였다.
- 알로에 베라 추출물의 tyrosinase 저해능은 알로에 베라 껍질추출물보다 알로에 베라 젤 부분에 더 효과적인 활성이 있음을 확인할 수 있었다. 알로에 베라 젤의 물 추출물에서 ADH 활성은 126%, ALDH 활성은 216%으로 효과적이었다. 이상의 결과로부터 알로에 베라 껍질과 젤 추출물의 항산화 활성, 미백 활성 및 알콜대사 활성을 확인할 수 있었으며 소재에 대한 활용 가능성을 확인할 수 있었다.
- 또한, SOD 유사활성의 경우도 마찬가지로 70% 에탄올로 추출하는 것이 물로 추출하는 것보다 높은 활성을 나타내었다. 알로에 베라 추출물의 tyrosinase 저해능은 알로에 베라 껍질추출물보다 알로에 베라 젤 부분에 더 효과적인 활성이 있음을 확인할 수 있었다. 알로에 베라 젤의 물 추출물에서 ADH 활성은 126%, ALDH 활성은 216%으로 효과적이었다.
- 또한 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물, 알로에 베라 껍질의 물 추출물 및 알로에 베라 껍질의 70% 에탄올 추출물의 순으로 각각 17%, 10% 및 4%의 tyrosinase 저해활성을 나타내었다. 알로에 베라 추출물의 tyrosinase 저해능은 알로에 베라 껍질추출물보다 알로에베라 젤에서 더 높은 미백활성이 있음을 확인할 수 있었다. Choi [27]의 연구에 따르면 알로에 젤 추출물 100 µg/mL 농도에서 28%의 멜라닌 저해활성을 나타냈다고 보고하였다.
- 알콜대사 효과는 100% 이상일 때 시료의 활성이 있다고 판단할 수 있는데 Fig. 4에서 보는 바와 같이 알로에 베라 젤의 물 추출물은 600 µg/mL의 농도에서 126% 정도의 알콜대사 효과가 있었으나 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물, 알로에 베라 껍질의 물 추출물 및 알로에 베라 껍질의 70% 에탄올 추출물에서 ADH 효소활성이 없는 것으로 나타났다.
- 알로에 베라 젤의 물 추출물에서 ADH 활성은 126%, ALDH 활성은 216%으로 효과적이었다. 이상의 결과로부터 알로에 베라 껍질과 젤 추출물의 항산화 활성, 미백 활성 및 알콜대사 활성을 확인할 수 있었으며 소재에 대한 활용 가능성을 확인할 수 있었다.
- 38 mg/g로 나타났다. 이와 같이 알로에 베라 젤보다 알로에 베라 껍질이 2.5~3배 높은 총 폴리페놀 함량을 갖는 것으로 나타났다. 알로에의 생리적 활성을 나타내는 화합물 중 폴리페놀류의 화합물들이 대개 hydroxyl group을 갖고 있으며 이에 의한 항산화효과에 대한 연구 [22]가 보고된 바 있다.
- 본 연구에서는 이미 효능이 입증된 단일 물질이 아닌 알로에 베라 껍질과 젤의 추출물이 갖는 생리활성을 확인하였다. 총 폴리페놀 함량은 알로에 베라 껍질에서 41.12 mg/g으로 가장 높게 나타났다. 항산화 활성은 알로에 베라 껍질 70% 에탄올 추출물에서 가장 높은 55%의 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, 알로에 베라 껍질의 물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의순으로 각각 38%, 11% 및 10%의 DPPH radical 소거능을 나타내었다.
- 12 mg/g으로 가장 높게 나타났다. 항산화 활성은 알로에 베라 껍질 70% 에탄올 추출물에서 가장 높은 55%의 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, 알로에 베라 껍질의 물 추출물, 알로에 베라 젤의 70% 에탄올 추출물 및 알로에 베라 젤의 물 추출물의순으로 각각 38%, 11% 및 10%의 DPPH radical 소거능을 나타내었다. 또한, SOD 유사활성의 경우도 마찬가지로 70% 에탄올로 추출하는 것이 물로 추출하는 것보다 높은 활성을 나타내었다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.