[논문]발효 청미래덩굴잎 추출물의 혼합에 의한 토복령의 항산화활성 증진효과

이상일; 이예경; 김순동; 심순미; 양승환; 성금화; 서주원

doi:10.3839/jabc.2014.022

발효 청미래덩굴잎 추출물의 혼합에 의한 토복령의 항산화활성 증진효과
Enhanced Anti-oxidant Activity Effects of Smilax china L. Rhizome Water Extracts Added with Its Fermented Leaf Water Extracts 원문보기

Journal of applied biological chemistry, v.57 no.2, 2014년, pp.145 - 152

이상일 (Department. of Food, Nutrition and Cookery, Keimyung College) , 이예경 (Center for Nutraceutical and Pharmaceutical Materials, Myongji University) , 김순동 (Center for Nutraceutical and Pharmaceutical Materials, Myongji University) , 심순미 (Department of Food Science and Technology and Carbohydrate Bioproduct Research Center, Sejong University) , 양승환 (Center for Nutraceutical and Pharmaceutical Materials, Myongji University) , 성금화 (Center for Nutraceutical and Pharmaceutical Materials, Myongji University) , 서주원 (Division of Bioscience and Bioinformatics, College of Natural Science, Myongji University)

초록
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Aspergillus oryzae로 발효시킨 청미래덩굴(Smilax china L) 잎열수추출물(FSCL)의 첨가가 토복령 열수추출물(SCLR)의 항산화능에 미치는 영향을 조사하기 위하여 각 2% 열수추출물을 0:100 (A), 20:80 (B), 40:60 (C), 60:40 (D), 80:20 (E), 100:0 (F) (v/v)의 조건으로 혼합하였을 때 total polypheno l(TP) 및 total flavonoid (TF) 함량, $OD_{475}$, 전자공여능(EDA), 철환원력(FRAP), xanthine oxidase (XO) 및 aldehyde oxidase (AO)에 대한 저해활성과 관능적 품질을 조사하였다. A와 F의 TP 함량은 각각 3.78 및 9.37 mg/100 mL, TF 함량은 각각 0.24 및 1.84 mg/100 mL로 FSCL이 SCLR에 비하여 TP는 2.48배, TF는 7.67배가 높았으며 FSCL의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 높았다($R^2=0.9887$, $R^2=0.9592$). $OD_{475}$는 FSCL의 첨가비율이 높아질수록 거의 비례적으로 높은 흡광도를 나타내었다($R^2=0.9850$). EDA (% at mL)는 A (25.75%)에 비하여 F (54.63%)에서 2.12배가 높았으며 FSCL의 첨가비율이 높을수록 높아지는 경향을 보였다($R^2=0.9668$). FRAP ($Fe^{2+}{\mu}mole/g$ of dry basis)의 경우도 EDA와 마찬가지로 A (1.18)에 비하여 F (4.92)에서 4.17배가 높았으며, FSCL의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 높았다($R^2$=0.9907). A의 XO에 대한 저해활성(mg/mL of $IC_{50}$)은 1.19로 F의 2.96에 비하여 59.80%가 높았으며, FSCL의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 감소하였다($R^2$=0.9490). 그러나 AO에 대한 저해활성(mg/mL of $IC_{50}$)은 XO의 경우와 반대로 A (3.37)에 비하여 F (1.41)에서 58.16%의 높은 저해활성을 나타내었으며, FSCL의 첨가비율이 높아질수록 높아지는 경향을 보였다. 향에 대한 기호도는 A와 F에서는 각각 2.77 및 2.72점으로 비슷한 값을 보였으며 발효청미래덩굴잎 열수추출물을 20-80 비율로 혼합하였을 때는 다소 향상되는 경향을 나타내었으나 상호간의 유의적인 차이는 없었다. 그러나 40% 혼합(C) 하였을 때는 무첨가 경우(A 또는 F)에 비하여 유의적으로 향상되었다. 맛에 대한 기호도는 F에 비하여 A에서 다소 높은 값을 나타내었으며 C에서 가장 높은 값을 나타내었다. 색상에 대한 기호도는 40-80% 첨가한 경우가 A, F 및 B보다 높았다. 입맛과 종합적인 품질에 대한 기호도는 C, D에서 가장 높았다. 이상의 결과 A. oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎의 열수추출물은 보이차 스타일의 적갈색을 나타내며, 토복령 열수추출물과 혼합함으로써 음료로서의 기호성이 높아짐과 동시에 EDA 및 FRAP와 같은 항산화활성이 높아지나, ROS 생성계 효소로 알려져 있는 XO와 AO의 활성 억제현상은 상반된 결과를 나타내고 있어 이와 관련된 기능성 식품 개발에 대한 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 생각한다. 그러나 현재 실험의 결과만으로는 어떠한 성분이 이러한 항산화활성의 변화에 관여하는지는 확인할 수 없으며 추후 계속적인 연구 검토가 필요하다.

Abstract ▼ AI-Helper

To evaluate the improving effects of antioxidant activity, we observed antioxidant capacities such as electron donating ability (EDA), Ferric reducing antioxidant power (FRAP), inhibitory activity of xanthine oxidase (XO) and aldehyde oxidase (AO), and sensory characteristics on mixture of Smilax china L. root water extract added with water extract of fermented S. china L. leaf by Aspergillus oryzae (FSCL). Those contents of mixture with higher ratio of FSCL were proportionally high. And OD475 of mixture with higher ratio of FSCL was almost proportionally high ($R^2=0.9850$). Antioxidant capacities of EDA and FRAP of the mixture was higher than that of non-mixture. In addition, XO inhibitory activity ($IC_{50}$) of A (1.19) was 59.80% higher than that of F (2.96), and the activity of mixture by the higher ratio of FSCL was proportionally low ($R^2=0.9490$). Taste acceptability of A was slightly higher than that of F, whereas that of C was highest. And color acceptability of 40-80% mixture was higher than those of A, F, and B. Overall acceptability of C and D was highest than those of others. Moreover, hot water extract of S. china L. leaf fermented with A. oryzae was maroon color, which looks like Puerh tea style, and mixture of S. china L. root extract added with hot water extract of S. china L. leaf was high acceptability of beverage. These results suggest that mixture of extract of S. china L. root and hot water extract of S. china L. leaf fermented with A. oryzae could improve antioxidant activities.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 토복령의 기능성을 향상시키기 위한 한 방안으로 그 열수추출물에 Aspergillus oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎 열수 추출물을 혼합하였을 때 열수추출액의 최대흡수파장에서의 흡광도, 총 polyphenol 및 총 flavonoid 함량을 비교하는 동시에 항산화활성의 지표로 알려진 전자공여능과 철 환원력을 측정하였으며, 체내 활성산소 생성계효소로 알려진 XO와 AO에 대한 저해활성이 미치는 영향을 조사하였다.

제안 방법

Aspergillus oryzae로 발효시킨 청미래덩굴(Smilax china L) 잎 열수추출물(FSCL)의 첨가가 토복령 열수추출물(SCLR)의 항산화능에 미치는 영향을 조사하기 위하여 각 2% 열수추출물을 0:100 (A), 20:80 (B), 40:60 (C), 60:40 (D), 80:20 (E), 100:0 (F) (v/v)의 조건으로 혼합하였을 때 total polypheno l(TP) 및 total flavonoid (TF) 함량, OD₄₇₅, 전자공여능(EDA), 철환원력(FRAP), xanthine oxidase (XO) 및 aldehyde oxidase (AO)에 대한 저해활성과 관능적 품질을 조사하였다. A와 F의 TP 함량은 각각 3.
관능요원은 차를 연구 교육하는 (사)우리차문화연합회의 40−60세의 여성회원 25명으로 주 1회 4시간씩 4주간 차의 향, 맛, 색상, 밝기, 후미 및 종합적인 기호도에 대한 교육을 행하였다.
다음에 70% ethanol로 제균한 플라스틱 발효상자(가로 40×세로 60×높이 12 cm)에 두께 3−5 cm 정도로 펴 담은 후 polyethylene film으로 밀봉하여 25℃에서 10일간 발효시켰다.
대조구는 추출액 대신에 추출용매를 사용하였으며 활성도는 molar extinction coefficient (21.25 mM−1 cm−1)를 이용하여 건조시료 g당 Fe3+이 Fe2+로 환원된 량을 µmole로 나타내었다.
AO 및 XO 저해활성. 발효 청미래덩굴잎 열수추출액이 토끼 간조직으로부터 부분 정제한 AO 및 XO에 저해활성은 다음과 같이 측정하였다. 실험동물의 사육과 사용 등 실험과정이, 실험이 행하여진 기관(세종대학교)의 윤리위원회 승인을 받았고 해당 연구기관의 윤리위원회 규정에 저촉되지 않게 실시하였다.
의 측정. 발효청미래덩굴잎 물 추출액의 색상은 Chromameter (CR-200, Minolta Co., Japan)를 이용하여 밝기를 나타내는 L* (lightness), 적색도를 나타내는 a*(redness) 및 황색도를 나타내는 b* (yellowness) 값을 측정하였다. 이때 사용한 표준백판의 L*, a* 및 b*값은 각각 94.
TP 및 TF 함량. 발효청미래덩굴잎의 2% 열수추출물과 토복령 2% 열수추출물을 0:100 (A), 20:80 (B), 40:60 (C), 60:40 (D), 80:20 (E) 및 100:0 (F)의 비율(v/v %)로 혼합하였을 때 TP 및 TF 함량의 변화를 조사한 결과는 Fig. 2와 같다. 2% 토복령 열수추출물(A)과 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물(F)의 TP함량은 각각 3.
흡광도의 변화. 발효청미래덩굴잎의 열수추출물의 차류로 활용하기 위하여 관능검사용 추출액을 시료로 하여 흡광도 값을 측정하였다. 발효청미래덩굴잎의 열수추출액은 475 nm에서 maximum peak을 보인다.
발효청미래덩굴잎의 열수추출은 시료 20 g에 90−95℃의 증류수를 가하여 1L가 되게 하여 5분간 추출하였으며 Whatman No. 2 여과지(Whatman International Ltd, England)로 여과하여 2% 발효청미래덩굴잎 추출물(fermented S. china L. leaf: FSCL)을 얻었다.
열수추출액의 갈색도는 Recording Spectrophometer (Cary Winuv, Varian, Korea)를 사용하여 400−700 nm에서의 흡광도를 recording하여 얻어진 최대파장인 475 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
혼합조건. 토복령과 발효청미래덩굴잎 추출물의 혼합은 각 2% 열수추출물을 Chung (1971)의 binary interaction을 조사하기 위한 system에 준하여 Table 1에서와 같이 FSCL : SCLR의 혼합 비율을 0:100 (발효청미래덩굴잎 무첨가), 20:80 (20% 첨가), 40:60 (40% 첨가), 60:40 (60% 첨가), 80:20 (80% 첨가) 및 100:0 (토복령 추출물 무첨가)으로 설계하여 상호 혼합에 의한 영향을 조사하였다(Table 1).
leaf: FSCL)을 얻었다. 토복령의 열수추출(S. china L. rhizome: SCLR)은 통상의 방법(Kapdang Herbs, Korea)에 준하여 시료 20 g에 증류수 2L을 가하여 30분간 가열, 추출한 후 여과하고 그 여액을 1L가 되게 가열, 농축하여 최종농도가 2%로 조정하였다.

대상 데이터

근경(토복령)은 2−3 mm 두께로 엷게 썰어 말린 것을 약재상(Kapdang Herbs, Korea)에서 구입하였다.
발효용 균주는 한국종균협회에서 분양 받은 Aspergillus oryzae KFRI 995를 사용하였으며, malt extract (BactoTM, Becton, Dickinson and Co., USA)에 이식하여 25℃에서 10−15일간 진탕배양한 후 제균한 Food Mixer (NF-1710, Hanil Electric Co. Ltd., Korea)로 30초 동안 분쇄하여 균수를 108 cells/mL로 조정하여 종균으로 사용하였다.
재료, 균주 및 종균배양. 실험에 사용한 청미래덩굴(Smilax china L.) 잎은 2013년 5월에 경북 경산시 남산면의 야산에서 채취하여 이상일 교수(계명문화대학 식품영양조리학부)에 의해 검수된 것을 사용하였고, 40℃에서 충분히 건조시킨 후 Food Mixer (HNF-1710, Hanil Electric Co Ltd, Korea)를 사용하여 40 mesh로 분쇄하였다. 근경(토복령)은 2−3 mm 두께로 엷게 썰어 말린 것을 약재상(Kapdang Herbs, Korea)에서 구입하였다.

데이터처리

통계처리. 분석은 3회 반복으로 실험하여 평균치와 표준편차로 나타내었고, 관능검사는 관능요원 25명의 평균값과 표준편차로 나타내었다. 유의성 검증은 version 12의 SPSS (Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc, Chicago, IL, USA) software package program을 이용하여 Duncan’s multiple range test를 행하였다.
유의성 검증은 version 12의 SPSS (Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc, Chicago, IL, USA) software package program을 이용하여 Duncan’s multiple range test를 행하였다.

이론/모형

Ferric reducing antioxidant power (FRAP). FRAP는 Hayes 등(2011)의 방법에 따라 시료추출액 0.05 mL에 증류수 0.05 mL을 가하여 혼합한 후 0.3 M sodium acetate buffer (pH 3.60), 10 mM 2,4,6-tris(2-pyridyl)-s-triazine을 함유하는 40 mM HCl 용액 및 20 mM FeCl₃ 용액(10:1:1, v/v) 혼합용액 1.90 mL를 가하여 37℃에서 30분간 반응시킨 후 593 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 추출액 대신에 추출용매를 사용하였으며 활성도는 molar extinction coefficient (21.
, USA)의 표준검량선에 의하여 함량을 산출하였다. Total flavonoid (TF) 함량은 Meda 등(2005)의 방법에 따라 물 추출액 1 mL에 2% aluminum chloride 1 mL와 50% 에탄올 1 mL를 혼합하여 실온에서 10분간 반응시킨 다음 415 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 표준품 quracetin(Sigma-Aldrich Co., USA)의 표준검량선에 의하여 함량을 산출하였다.
Total polyphenol(TP) 함량은 Minussi 등(2003)의 방법에 따라 물 추출액 100 µL에 2% sodium carbonate 2 mL와 50% Folin-Ciacalteu reagent 100 µL를 가한 후 720 nm에서 흡광도를 측정하였으며, gallic acid (Sigma-Aldrich Co., USA)의 표준검량선에 의하여 함량을 산출하였다.
얻어진 상등액은 30% 이상 50% 이하의 ammonium sulfate 포화용액에서의 침전물을 원심분리하여 얻은 후 동일 buffer에 현탁시키고 50% acetone 용액에서의 침전물을 얻었으며, 투석막(분자량 2,000 이하를 제거)을 이용하여 12시간 동안 투석한 후 원심분리하여 얻어진 상등액을 −70℃에서 보관하면서 효소원으로 사용하였다. XO 활성도는 Stirpe와 Della Corte(1969)의 방법에 따라 기질 xanthine을 요산으로의 전환율 정도를 %로 나타내었으며, AO 활성도는 Rajagopalan 등(1962)의 방법에 따라 기질 NMN (N¹-methyl nicotinamide)으로부터 산화된 pyridone의 흡광도를 300 nm에서 측정한 다음 시료대신에 증류수를 첨가한 대조구에 대한 %로 나타내었다.
전자공여능(electron donating ability: EDA)은 Blois (1958)의 방법에 따라 물 추출액 0.2 mL에 0.4 mM DPPH (1,1diphenyl-2-picryl-hydrazyl) 용액 0.8 mL를 가하여 10분간 방치한 다음 520 nm에서 흡광도를 측정하였으며 계산식, 전자공여능(%)=[1−(시료흡광도/대조구 흡광도)]×100에 의하여 활성도를 산출하였다.
실험동물의 사육과 사용 등 실험과정이, 실험이 행하여진 기관(세종대학교)의 윤리위원회 승인을 받았고 해당 연구기관의 윤리위원회 규정에 저촉되지 않게 실시하였다. 효소원으로 사용한 AO와 XO는 Rajagopalan 등(1962)의 방법에 따라 토끼의 간 조직에 4배량의 0.1 mM potasium phosphate buffer(pH 7.4)를 가하여 마쇄, 균질화 시킨 후 60℃에서 2분간 열처리하여 생성되는 침전물을 10,000 g에서 원심분리하여 제거하였다. 얻어진 상등액은 30% 이상 50% 이하의 ammonium sulfate 포화용액에서의 침전물을 원심분리하여 얻은 후 동일 buffer에 현탁시키고 50% acetone 용액에서의 침전물을 얻었으며, 투석막(분자량 2,000 이하를 제거)을 이용하여 12시간 동안 투석한 후 원심분리하여 얻어진 상등액을 −70℃에서 보관하면서 효소원으로 사용하였다.

성능/효과

2와 같다. 2% 토복령 열수추출물(A)과 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물(F)의 TP함량은 각각 3.78 및 9.37 mg/100 mL, TF 함량은 0.24 및 1.84 mg/100 mL으로 발효청미래덩굴잎의 경우가 TP는 2.48배, TF는 7.67배가 높았다. 그리고 발효청미래덩굴잎의 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 TP와 TF의 함량이 비례적으로 증가되었으며(R²=0.
, 전자공여능(EDA), 철환원력(FRAP), xanthine oxidase (XO) 및 aldehyde oxidase (AO)에 대한 저해활성과 관능적 품질을 조사하였다. A와 F의 TP 함량은 각각 3.78 및 9.37 mg/100 mL, TF 함량은 각각 0.24 및 1.84 mg/100 mL로 FSCL이 SCLR에 비하여 TP는 2.48배, TF는 7.67배가 높았으며 FSCL의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 높았다(R²=0.9887, R²=0.9592). OD₄₇₅는 FSCL의 첨가비율이 높아질수록 거의 비례적으로 높은 흡광도를 나타내었다(R²=0.
9907). A의 XO에 대한 저해활성(mg/mL of IC₅₀)은 1.19로 F의 2.96에 비하여 59.80%가 높았으며, FSCL의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 감소하였다(R²=0.9490). 그러나 AO에 대한 저해활성(mg/mL of IC₅₀)은 XO의 경우와 반대로 A (3.
9850). EDA (% at mL)는 A (25.75%)에 비하여 F (54.63%)에서 2.12배가 높았으며 FSCL의 첨가비율이 높을수록 높아지는 경향을 보였다(R²=0.9668). FRAP (Fe²⁺ µmole/g of dry basis)의 경우도 EDA와 마찬가지로 A (1.
FRAP (Fe2+ µmole/g of dry basis)의 경우도 EDA와 마찬가지로 2% 토복령 열수추출물에서는 1.18이었으나 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물에서는 4.92로 발효청미래덩굴잎의 경우가 4.17배가 높았으며, 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 높아지는 경향을 나타내었다(R2=0.9907).
FRAP (Fe2+ µmole/g of dry basis)의 경우도 EDA와 마찬가지로 A (1.18)에 비하여 F (4.92)에서 4.17배가 높았으며, FSCL의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 높았다(R2=0.9907).
발효청미래덩굴잎의 열수추출액은 475 nm에서 maximum peak을 보인다. Fig. 3에서는 발효청미래덩굴잎 2% 열수추출물을 0, 20, 40, 60, 80 및 100% 함유하는 토복령 2% 열수추출물의 475 nm에서의 흡광도(OD₄₇₅)를 측정한 결과로 발효청미래덩굴잎 2% 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 거의 비례적으로 높은 흡광도를 나타내었다(R²=0.9850). 혼합액의 색상에서 보는 바와 같이 발효청미래덩굴잎 열수추출물을 첨가하지 않은 2% 토복령의 열수추출물은 연한 자색을 띠었으나 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가율이 높아질수록 토복령 추출물에서 보였던 자색은 점차적으로 나타나지 않는 반면 발효청미래덩굴잎 추출물의 색상이 강하게 나타났으며 60−80% 첨가한 경우는 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 색상과 유사하였다.
9490). 그러나 AO에 대한 저해활성(mg/mL of IC₅₀)은 XO의 경우와 반대로 A (3.37)에 비하여 F (1.41)에서 58.16%의 높은 저해활성을 나타내었으며, FSCL의 첨가비율이 높아질수록 높아지는 경향을 보였다. 향에 대한 기호도는 A와 F에서는 각각 2.
9490). 그러나 AO에 대한 저해활성(mg/mL of IC₅₀)은 XO의 경우와 반대로 A에서는 3.37, F에서는 1.41로 F의 경우가 A에 비하여 58.16%의 높은 저해활성을 나타내었으며, 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 저해활성도 높아지는 경향을 보였다. 즉, 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 XO에 대한 저해활성은 감소되나 AO에 대한 저해활성은 높아지는 형상을 보였다.
67배가 높았다. 그리고 발효청미래덩굴잎의 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 TP와 TF의 함량이 비례적으로 증가되었으며(R²=0.9887, R²=0.9592), 그 증가율은 TF의 경우가 TP에 비하여 높은 경향을 나타내었다. Polyphenol성분은 항산화작용을 비롯한 다양한 생리활성(Holasova 등, 2002)을 나타내나 한편으로는 polyphenol 성분의 함량이 높을수록 hydrogen peroxide의 함량이 높으며(Arakawa 등, 2004), 강한 삽미를 나타낼 뿐만 아니라 단백질 및 소화효소와 결합함으로써 소화성을 떨어트리는 작용이 있다(Lesschaeve와 Noble, 2005).
따라서 이상의 결과는 토복령 열수추출물에 함유하는 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 함량이 높아질수록 항산화능이 높아짐을 나타내며 그 효과는 EDA에 비하여 FRAP에서 더욱 큼을 나타낸다(Fig. 4).
그러나 40% 혼합(C) 하였을 때는 무첨가 경우(A 또는 F)에 비하여 유의적으로 향상되었다. 맛에 대한 기호도는 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물(F)에 비하여 2% 토복령 열수추출물이 다소 높은 값을 나타내었으며 40%를 첨가한 C에서 가장 높은 값을 나타내었다. 색상에 대한 기호도는 40−80% 첨가한 경우가 무첨가(A, F) 또는 20% 첨가(B) 경우보다 높았다.
4와 같다. 발효청미래덩굴잎 2% 열수추출물을 첨가하지 않은 2% 토복령 열수추출물의 EDA (% at mL)는 25.75%이었으나 토복령이 첨가되지 않은 발효청미래덩굴잎 2% 열수추출물의 EDA는 54.63%로 발효청미래덩굴잎의 경우가 2.12배가 높았으며 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 EDA도 높아지는 경향을 보였다(R²=0.9668). FRAP (Fe²⁺ µmole/g of dry basis)의 경우도 EDA와 마찬가지로 2% 토복령 열수추출물에서는 1.
5와 같다. 발효청미래덩굴잎 열수추출물을 첨가하지 않은 2% 토복령 열수추출물(A)의 XO에 대한 저해활성(mg/mL of IC₅₀)은 1.19로 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물(F)의 2.96에 비하여 59.80%가 높았으며, 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 비례적으로 감소하였다(R²=0.9490). 그러나 AO에 대한 저해활성(mg/mL of IC₅₀)은 XO의 경우와 반대로 A에서는 3.
반면에 발효가 원만하게 이루어지게 되면 녹색을 띠는 chlorophyll 이 완전히 분해됨과 동시에 polyphenol성 물질의 산화와 중합체가 생성됨으로서 밝고 아름다운 적색계의 색상을 띠는 새로운 기능성의 물질들이 생성되며 아울어 glycoside 형태의 flavonoid가 분해되어 aglycone화 함으로서 XO 또는 AO에 대한 저해활성이 높아지는 것으로 보고되고 있다(Hamzeh-Mivehroud 등, 2013). 본 연구에서도 Aspergillus oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎의 열수추출물은 보이차 스타일의 적갈색을 나타내었으며(Fig. 3), 토복령 열수추출물과 혼합함으로서 음료로서의 기호성이 높아짐과 동시에 EDA 및 FRAP와 같은 항산화활성이 높아지며, XO에 대한 저해활성은 다소 감소되나 AO에 대한 저해활성은 높아짐으로서 종합적으로 항산화활성이 향상되었다(Table 2).
입맛과 종합적인 품질에 대한 기호도는 40−60% 첨가한 C, D에서 가장 높았다.
색상에 대한 기호도는 40−80% 첨가한 경우가 A, F 및 B보다 높았다. 입맛과 종합적인 품질에 대한 기호도는 C, D에서 가장 높았다.
16%의 높은 저해활성을 나타내었으며, 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 저해활성도 높아지는 경향을 보였다. 즉, 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가비율이 높아질수록 XO에 대한 저해활성은 감소되나 AO에 대한 저해활성은 높아지는 형상을 보였다.
관능검사. 혼합액에 대한 관능검사는 향, 맛, 색상, 후미 및 종합적인 기호도에 대하여 25명의 관능요원에 의하여 아주 나쁘다(1점), 나쁘다(2점), 보통이다(3점), 좋다(4점), 아주 좋다(5점)로 평가하였으며 평균값과 표준편차로 나타내었다. 관능요원은 차를 연구 교육하는 (사)우리차문화연합회의 40−60세의 여성회원 25명으로 주 1회 4시간씩 4주간 차의 향, 맛, 색상, 밝기, 후미 및 종합적인 기호도에 대한 교육을 행하였다.
혼합액의 색상에서 보는 바와 같이 발효청미래덩굴잎 열수추출물을 첨가하지 않은 2% 토복령의 열수추출물은 연한 자색을 띠었으나 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 첨가율이 높아질수록 토복령 추출물에서 보였던 자색은 점차적으로 나타나지 않는 반면 발효청미래덩굴잎 추출물의 색상이 강하게 나타났으며 60−80% 첨가한 경우는 2% 발효청미래덩굴잎 열수추출물의 색상과 유사하였다.

후속연구

oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎의 열수추출물은 보이차 스타일의 적갈색을 나타내며, 토복령 열수추출물과 혼합함으로써 음료로서의 기호성이 높아짐과 동시에 EDA 및 FRAP와 같은 항산화활성이 높아지나, ROS 생성계 효소로 알려져 있는 XO와 AO의 활성 억제현상은 상반된 결과를 나타내고 있어 이와 관련된 기능성 식품 개발에 대한 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 생각한다. 그러나 현재 실험의 결과만으로는 어떠한 성분이 이러한 항산화활성의 변화에 관여하는지는 확인할 수 없으며 추후 계속적인 연구 검토가 필요하다.
따라서 이상의 결과와 문헌적인 지경들을 종합해볼 때 토복령 열수추출물에 발효청미래덩굴잎 열수추출물을 혼합함으로써 비록 XO에 대한 저해활성은 다소 감소되나 XO에 대한 저해 활성의 감소율 이상으로 AO에 대한 저해활성을 증가시킴과 동시에 전자공여능과 환원력과 같은 항산화활성을 증가시키는 효과가 있어 이에 대한 활용이 기대된다(Fig. 5와 6).
이상의 결과 A. oryzae로 발효시킨 청미래덩굴잎의 열수추출물은 보이차 스타일의 적갈색을 나타내며, 토복령 열수추출물과 혼합함으로써 음료로서의 기호성이 높아짐과 동시에 EDA 및 FRAP와 같은 항산화활성이 높아지나, ROS 생성계 효소로 알려져 있는 XO와 AO의 활성 억제현상은 상반된 결과를 나타내고 있어 이와 관련된 기능성 식품 개발에 대한 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 생각한다. 그러나 현재 실험의 결과만으로는 어떠한 성분이 이러한 항산화활성의 변화에 관여하는지는 확인할 수 없으며 추후 계속적인 연구 검토가 필요하다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	통풍은 무엇인가?	)은 우리나라 산야에 널리 분포하는 활엽덩굴성 관목으로 그 근경(rhizome)인 토복령은 고뇨산혈증의 치유 및 신장보호 작용(Chen 등, 2011)이 있어 주로 통풍의 치료제(Shu 등, 2006)로 쓰이나 해독(Cheng과 Hua, 2006), 항염, 항암 및 항산화 효과(Shu 등, 2006; Li 등, 2007)가 알려져 있다. 통풍은 요산의 과잉생성 또는 배설부진으로 오는 고뇨산 혈증으로 요산의 결정체가 관절부위에 축적되어 통증을 유발하는 질환(Chena 등, 2011)이며, 요산은 식이로 섭취된 핵산 또는 de novo합성된 purine 염기의 대사과정에서 hypoxanthine 및 xanthine이 xanthine oxidoreductase (XOR)의 촉매작용에 의하여 생성되며(Parks과 Granger, 1986), 여기에 aldehyde oxidase (AO)도 관여한다는 보고도 있다(Beedham, 1987). AO는 간, 폐 및 신장 등의 세포질에 다량으로 존재하는 효소(Al-Salmy, 2001)로 xanthine oxidase (XO)와 분자량이 유사할 뿐만 아니라 XO와 같이 flavin adenine dinucleotide, molybdenum 및 철-유황과 같은 보결분자단을 가지고 있으며 기질특이성에서 다소 차이는 있으나 작용에 있어서 XO와 밀접한 관련이 있다(Beedham, 1987).
	aldehyde oxidase는 무엇인가?	통풍은 요산의 과잉생성 또는 배설부진으로 오는 고뇨산 혈증으로 요산의 결정체가 관절부위에 축적되어 통증을 유발하는 질환(Chena 등, 2011)이며, 요산은 식이로 섭취된 핵산 또는 de novo합성된 purine 염기의 대사과정에서 hypoxanthine 및 xanthine이 xanthine oxidoreductase (XOR)의 촉매작용에 의하여 생성되며(Parks과 Granger, 1986), 여기에 aldehyde oxidase (AO)도 관여한다는 보고도 있다(Beedham, 1987). AO는 간, 폐 및 신장 등의 세포질에 다량으로 존재하는 효소(Al-Salmy, 2001)로 xanthine oxidase (XO)와 분자량이 유사할 뿐만 아니라 XO와 같이 flavin adenine dinucleotide, molybdenum 및 철-유황과 같은 보결분자단을 가지고 있으며 기질특이성에서 다소 차이는 있으나 작용에 있어서 XO와 밀접한 관련이 있다(Beedham, 1987). 또한 AO는 항암제(methotrexate) 및 항바이러스제(famciclovir)와 같은 약물을 포함한 aldehyde 및 질소를 함유하는 heterocyclic compounds의 산화에 관여하며(Beedham, 1987; Clarke 등, 1995; Jordan 등, 1999; Kawashima 등, 1999; Kitamura 등, 1999), 체내 내외인성 기질들의 산화 과정 중에 superoxide와 같은 Reactive oxygen species (ROS)를 생성(Mira 등, 1995; Kundu 등, 2007)할 뿐만 아니라 알코올성 간 손상의 유도(Shaw와 Jayatilleke, 1990), 고지방 식이에 의한 지방간 생성유도(Conklin 등, 2007; Weigert 등, 2008), 지방세포의 분화(Huang과 Ichikawa 1994; Mercader 등, 2006)에 관여함으로써 비만조절과 간 손상의 예방 및 항암제 개발에 대한 표적효소로 알려져 있다(Pryde 등, 2010; Garattini과 Terao 2011).
	청미래덩굴은 무엇인가?	청미래덩굴(Smilax china L.)은 우리나라 산야에 널리 분포하는 활엽덩굴성 관목으로 그 근경(rhizome)인 토복령은 고뇨산혈증의 치유 및 신장보호 작용(Chen 등, 2011)이 있어 주로 통풍의 치료제(Shu 등, 2006)로 쓰이나 해독(Cheng과 Hua, 2006), 항염, 항암 및 항산화 효과(Shu 등, 2006; Li 등, 2007)가 알려져 있다. 통풍은 요산의 과잉생성 또는 배설부진으로 오는 고뇨산 혈증으로 요산의 결정체가 관절부위에 축적되어 통증을 유발하는 질환(Chena 등, 2011)이며, 요산은 식이로 섭취된 핵산 또는 de novo합성된 purine 염기의 대사과정에서 hypoxanthine 및 xanthine이 xanthine oxidoreductase (XOR)의 촉매작용에 의하여 생성되며(Parks과 Granger, 1986), 여기에 aldehyde oxidase (AO)도 관여한다는 보고도 있다(Beedham, 1987).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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